白鲢鱼酸/碱等电点沉淀法分离蛋白及其凝胶特性

为制备营养特性和功能特性优良的分离蛋白,采用酸/碱等电点沉淀法制备白鲢鱼分离蛋白,并比较不同工艺(pH3.0-5.5、pH4.0-5.5、pH11.0-5.5、p H12.0-5.5和pH13.0-5.5)制备分离蛋白的差异,结果表明:与酸法提取相比,碱法提取制备的分离蛋白的蛋白质含量高、粗脂肪含量低,溶解性强,且碱法制备(pH12.0-5.5)的分离蛋白的蛋白质含量最高,高达81.96 g/100 g,且水分含量仅为9.76 g/100 g,同时碱法(pH12.0-5.5和pH13.0-5.5)提取的分离蛋白得率高。此外,酸/碱等电点沉淀法制备分离蛋白的氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量占氨基酸总量比值42.27%以上,符合联合国粮农组织/世界卫生组织(Food and Agriculture Organization/World Health Organization,FAO/WHO)的蛋白质理想模式。此外,与酸法提取相比,碱法提取制备分离蛋白,其凝胶三维网络结构致密有序均匀,并具有强的凝胶特性和高的持水性,且碱法(p H12.0-5.5)提取制得的分离蛋白凝胶的凝胶特性最强,持水性最高。因此与酸法提取相比,碱法提取分离蛋白的得率高,且碱法(p H12.0-5.5)制备的分离蛋白的质量最优,且营养特性好。

鲢鱼蛋白水解液脱色效果的研究

以粉末状活性炭为脱色剂,对鲢鱼蛋白水解液在不同条件下(活性炭用量、pH、温度和时间)进行脱色比较。结果表明,1.5%的活性炭用量,pH=4.0,时间为2h,温度为25℃时,鲢鱼蛋白水解液脱色效果明显,氨基酸损失率仅为3.9%。

不同体质量鲢肌肉中主要滋味物质的研究

以1.0～3.0 kg/尾的鲢为材料,通过滋味活性值(taste active value,TAV)和味精当量(equivalent uma-mi concentration,EUC)2种滋味表征方法,研究加热对不同体质量鲢肌肉的游离氨基酸和核苷酸的影响。结果表明:不同体质量鲢肌肉游离氨基酸以牛磺酸(Tau)、组氨酸(His)、甘氨酸(Gly)为主,加热导致鲢肌肉中游离氨基酸含量降低。鲢肌肉中组氨酸(His)贡献的苦味明显,谷氨酸(Glu)对鲜味有所贡献,甘氨酸(Gly)和丙氨酸(Ala)对甜味有所贡献。不同体质量鲢肌肉中的核苷酸类物质以肌苷酸(IMP)和肌苷(HxR)为主,加热对鲢肌肉中核苷酸类物质含量影响显著。加热导致鲢肌肉中肌苷酸(IMP)和一磷酸腺苷(AMP)的TAV均有所下降,而次黄嘌呤(Hx)的TAV有所上升,但对鲜味贡献明显的仍是IMP。熟鲢肌肉的EUC随着体质量的增加,呈现先上升后下降的趋势,在2.0 kg时达到最大为31.57 g MSG/100 g。

中国鲢鱼营养成分的研究

采用气相色谱法测定鲢鱼肉中EPA和DHA含量，并用氨基酸自动分析仪和原子吸收分光光度计分别测定各种氨基酸含量和部分微量元素。结果证实，鲢鱼是一种富含EPA和DHA的淡水鱼，并含有丰富的氨基酸和人体必需微量元素。提示鲢鱼是一种高营养价值的食品。

鱼肉和猪肉的微观结构与基本组成的比较研究

以鲢鱼和猪的背部肌肉为原料,采用扫描电镜和凝胶电泳等方法对两种肌肉的微观结构和基本组成进行比较研究。结果表明:鱼肉的肉质较猪肉的细腻,两种肉的必需氨基酸占总氨基酸的比例都高于40%。鱼肉的盐溶性蛋白高于猪肉的,而水溶性蛋白、不溶性蛋白和脂肪含量均低于猪肉的。凝胶电泳显示,两种肌肉中蛋白质含量最高的都是肌球蛋白,其次是肌动蛋白,差别较大的是56kD和48kD的两条蛋白带。全蛋白中疏水性氨基酸含量显著高于肌球蛋白的,鱼肉肌球蛋白的酸性氨基酸含量低于猪肉肌球蛋白的。

花瓣快餐汤的研究

花卉将成为人类新的可食资源,本文研究了花卉汤菜食品的加工技术与配方,并探讨了花卉的脱水方法与花瓣汤调味料的搭配,为花卉食品的研究及汤菜类食品的生产提供了全新的思路与可行的加工方法。

鲢鱼氨基酸生产工艺优化研究

采用木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、鲢鱼酶进行单因素试验和多因素正交试验,筛选出最佳工艺条件。结果表明:在最佳提取条件下,鲢鱼酶法水解氨基酸百分含量达到27.3%、木瓜蛋白酶15.4%、酸性蛋白酶13.1%、碱性蛋白酶不足1%,其中,鱼酶法最佳工艺为酶用量5%、固液比1:6、酶解时间8h。对氨基酸工业生产具有重要参考价值。

加工方式对微粒化鱼骨泥营养品质的影响

以白鲢(Hypophthalmichthys molitrix)鱼骨为原料,采用湿法粉碎的方法制备微粒化鱼骨泥,研究不同的加工方式(常温加冰、低温冷冻和120℃蒸煮)对鱼骨泥营养品质的影响。结果表明,鱼骨泥中粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和钙的含量分别约为35%、20%、32%和9%,加工方式对微粒化鱼骨泥的粗蛋白、粗灰分和矿物盐的含量无显著性影响(P>0.05),鱼骨泥的第一限制性氨基酸为异亮氨酸(Ile)。采用常温加冰和低温冷冻加工的鱼骨泥的主要氨基酸含量占总氨基酸含量的比例无显著性差异(P>0.05);采用高温蒸煮加工的鱼骨泥的必需氨基酸比例和必需氨基酸指数显著(P<0.05)高于采用常温加冰和低温冷冻组的;采用高温蒸煮加工的鱼骨泥的钙和蛋白质体外消化率显著(P<0.05)高于常温加冰和低温冷冻加工组的。以上结果说明,采用高温蒸煮加工的鱼骨泥的营养价值高于其他2种加工方式的,但采用高温蒸煮加工的鱼骨泥的脂肪含量和过氧化值相对较高(P<0.05)。

白鲢鱼排酶解蛋白的制备及营养成分分析

以白鲢鱼排为实验材料,选用风味蛋白酶酶解制备蛋白水解液。考察起始pH值、酶解温度、料液比、加酶量、酶解时间对水解度的影响,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳工艺条件。结果表明:最佳工艺条件为起始pH7.59、酶解温度44.9℃、料液比30:100(g/mL)、加酶量4.02%、酶解时间5h,此条件下水解度可达26.17%;氨基酸及矿质元素的营养分析结果表明,白鲢鱼排酶解产物具有较高的食用与营养价值。

鲢鱼ACE抑制肽的生化特性及其降压功能

利用高效液相色谱法、基质辅助激光解吸质谱法及氨基酸自动分析系统,测定分析了鲢鱼Hypophthalmichthys molitrix血管紧张素转换酶（ACE）抑制肽的相对分子质量分布及氨基酸的组成,并通过对自发性高血压大鼠（SHR）进行的降血压试验,检测了鲢鱼ACE抑制肽的降压活性,分析了其生化特性与降压功能的关系。结果表明：鲢鱼ACE抑制肽的相对分子质量在1.6×103以下,其中10肽以下短肽所占的比率约为49.66%,这些短肽对ACE抑制肽的降压效果有显著影响;每百克ACE抑制肽样品中含游离氨基酸的量为8.8 g,含水解氨基酸的量为59.6 g,同时含与ACE受体紧密结合、维持其高活性所必需的疏水性氨基酸的量为24.86 g;按照3.0 g/kg剂量给SHR喂饲ACE抑制肽样品后,其血压在2~6 h内平均降幅为2.394~3.724 kPa（18~28 mmHg）（а=0.05）,在喂饲6h时,其降压幅度达到最大值,为3.724 kPa（28 mmHg）。可见,从鲢鱼中提取高活性的ACE抑制肽作为治疗高血压症的药品原料,有望在未来的研究中得到进一步开发。

鲢鱼鳞胶原蛋白饮料的研制

通过鱼鳞胶原蛋白的提取,用提取液制作饮料。对提取的胶原蛋白液分别进行脱腥、纯化处理;进行饮料的调配,经正交试验对提取条件优化。结果表明:最佳提取条件为温度38℃,酶量30mg/g,pH2,时间24h,酵母粉最佳用量2%。调配饮料的最佳工艺配方:果珍4g,胶原蛋白液15mL,白砂糖3g,柠檬酸0.3g。

白鲢鱼骨汤酶解工艺的研究及风味分析

以白鲢鱼骨高压熬制而成的鱼骨汤为原料,选择中性蛋白酶对鱼骨汤进行酶解,以水解度为指标,通过单因素实验和正交设计确定中性蛋白酶水解鱼骨汤的最佳工艺条件;并对酶解前后骨汤中的挥发性成分和游离氨基酸含量进行比较。结果表明:鱼骨汤酶解的最优条件为酶添加量2000U/g,起始pH6.5,酶解温度50℃,酶解时间3h。此条件下酶解的水解度能达到24.04%;酶解前后骨汤中的腥味挥发性成分含量降低,呈鲜香味游离氨基酸含量增高,鱼骨汤中的鱼腥味明显减小,风味得到较大改善。

鲢鱼鳞胶原蛋白饮料的研制

对鱼鳞胶原蛋白进行提取,用提取液制作饮料。用胃蛋白酶提取胶原蛋白并进行氨基酸成分分析,对提取的胶原蛋白液分别进行脱腥、纯化,然后用于饮料的调配。用正交试验来确定胶原蛋白的最佳提取工艺和调配饮料的最佳配方。结果表明:最佳提取条件为温度38℃、酶量30mg/g、pH=2、时间24h、酵母粉最佳用量2%;在进行饮料调配时,最佳配方为:果珍4g、胶原蛋白液15ml、白砂糖3g、柠檬酸0.3g。

鲢鱼肌肉中不同亚型小清蛋白的鉴定及序列分析

小清蛋白(parvalbumin,PV)是鱼类的主要过敏原,为了解鱼类中不同亚型PV、氨基酸序列及其蛋白修饰情况,以鲢鱼肌肉为研究对象,经分级盐析、高效液相结合尺寸排阻色谱及高分辨质谱分离纯化鉴定PV亚型,并对其氨基酸序列和蛋白修饰进行研究。结果表明,从鲢鱼肌肉中自制的PV含有3种亚型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),其平均分子质量分别为12.0290 kDa、11.5810 kDa和11.6220 kDa;PVI、PVII和PVIII的氨基酸序列分别与蛋白质数据库中鱼类PV亚型Q804W2、Q6IMW7和Q9I8V0的氨基酸序列匹配率为74%、100%和99%,且PVII和PVIII分别与已报道的鲢鱼PV亚型gi 209902357和gi 209902355有着89%和88%的相似性。在蛋白修饰中,除PVI只存在酰基化修饰外,其余2个亚型主要存在磷酸化、酰基化、甲基化和泛素化修饰,且PVII的修饰程度明显高于PVIII和PVI。该研究可为鱼类不同PV亚型的提取、纯化和鉴定提供一种新思路,同时为淡水鱼类及其制品安全性的研究提供科学依据。

白鲢鱼头蛋白酶解工艺研究

以白鲢鱼下脚料中最为重要的鱼头为原料,以水解液中氨基氮含量为指标,比较了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶5种酶的水解效果,从中选出最佳水解酶,在单因素实验基础上对其水解工艺进行正交实验优化,并对其水解产物中游离氨基酸组成进行分析。结果表明:胰蛋白酶对鱼头蛋白的水解效果最佳,最佳工艺条件为水解温度55℃,pH8.0,料水比1∶3(g/m L),加酶量80 U/g,在此条件下水解液中游离氨基氮含量为63.69 mg,水解液中游离氨基酸含量较高。

鲢鱼轻酶解肌球蛋白的cDNA克隆及结构解析

与栖息温度相关的鲢鱼两种轻酶解肌球蛋白重链(light meromyosin,LMM)同工型(低温型,sc-w;高温型,sc-s)的氨基酸序列解析结果表明:sc-w与sc-s在LMM的氨基酸序列上显示91.8%的同源性,但与已经报道的草鱼(Ctenopha-ryngodon idella)低温型(gc10)有96.9%的高同源性。低温型的sc-w和gc10在LMM初级结构上展现的特有变异主要发生在21个氨基酸残基位点,其中9个属保守性残基。此外,sc-w和sc-s的氨基酸序列均显示了一个高度保守的、具有典型α-螺旋结构蛋白质的特征,但sc-s较sc-w的疏水性残基含量略高。鲢鱼两种LMM同工型之间在初级结构上展现的差异可能导致了栖息于不同环境温度下的鲢鱼骨骼肌肌球蛋白具有不同的凝胶形成特性。

鲢肌球蛋白重链球状结构域的cDNA克隆及结构解析

根据已经获得的两种鲢肌球蛋白重链同工型基因(低温型sc-w和高温型sc-s)在3′端展现的明显差异,设计了2个特异性的反向引物,以鲤科鱼类肌球蛋白重链5′端的保守序列为正向引物,通过Long-PCR对编码鲢两种肌球蛋白重链同工型的球状结构域(Subfragment-1,S1)的全长基因进行了克隆和测序,并推断出它们一级结构的氨基酸序列。研究结果表明,sc-w与sc-s在S1的初级结构上显示80.5%的同源性、与已经报道的草鱼低温型(gc10)有97.2%的高同源性;sc-s则与草鱼中间型(gcI)和高温型(gc30)显示了分别为98.4%和97.1%的高同源性。低温型的sc-w和gc10在S1初级结构上展现的特有变异主要发生在43个氨基酸残基位点,其中15个属保守性残基。对S1区域中两个功能性的表面环loop1(与ATP结合位点有关)和loop2(与肌动蛋白结合位点有关)的结构解析发现,sc-w和gc10在两个表面环的长度、残基电荷分布和氨基酸组成等方面与其它同工型之间存在明显差异,揭示了这两个表面环的结构差异可能影响了栖息于不同环境温度下的淡水鱼的肌球蛋白"分子马达"功能。分子系统树的分析结果进一步证明,鱼类栖息环境温度对其肌球蛋白同工型的基因和功能歧化的影响。

4种蛋白酶对鲢鱼骨汤特性的影响

以鲢脊骨为原料,采用高温蒸煮、酶解、真空浓缩、灌装、灭菌等工序制备鲢鱼骨汤,并研究了4种蛋白酶(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶)对鱼骨汤的氮收率、基本组成、蛋白肽含量、外观、色度和滋味特性的影响。结果表明,与空白样品(未加酶)相比,酶解制备鱼骨汤的氮收率、游离氨基酸含量、钙含量和分子质量小于3 ku的蛋白肽含量显著增加(P<0.05),其中采用风味蛋白酶制备鱼骨汤的这4项指标最高,分别比空白样品(未加酶)增加了46.61%、3 478.82%、233.40%和56.25%。外观与色度结果表明,风味蛋白酶制备鱼骨汤颜色为深黄色,b*值最大(3.24),其次为其他3种蛋白酶制备的鱼骨汤(1.72~2.86),空白样品(未加酶)的最低(-1.78)。电子舌结果表明,风味蛋白酶制备的鱼骨汤鲜味最强,苦味最弱。综上所述,风味蛋白酶制备的鲢鱼骨汤的营养、外观和滋味品质最佳。

漂洗过程中白鲢鱼糜风味物质变化的分析

以白鲢为原料,研究了漂洗过程中白鲢鱼糜的呈味核苷酸类物质和游离氨基酸含量的变化,通过电子鼻及气相质谱联用仪(GC-MS)分析了其挥发性成分的变化。结果表明:一次漂洗和二次漂洗后鱼糜中IMP含量显著性减少,三次漂洗后AMP含量显著性减少;漂洗过程中一次、二次和三次漂洗后游离氨基酸总量和鲜、甜味氨基酸总量均显著性减少;漂洗过程对白鲢鱼糜的气味有所影响,电子鼻主成分分析(PCA)结果显示二次漂洗和脱水后的两组鱼糜气味相似,其它各组间均能得到有效区分;通过GC-MS分析,未漂洗、一次漂洗、二次漂洗、三次漂洗、脱水后的白鲢鱼糜样品分别检测确认30、27、21、15、18种挥发性物质,主要为己醛、庚醛、壬醛、1-己醇、1-辛烯-3-醇等羰基化合物和醇类。

鱼皮明胶蛋白对淡水鱼糜凝胶特性的影响

为了高效利用丰富的淡水鱼资源,提高淡水鱼糜制品的品质,以淡水鱼糜为原料,利用罗非鱼皮提取明胶蛋白,探讨了添加鱼类明胶蛋白对淡水鱼糜凝胶形成性能的影响。结果表明,利用鱼皮提取的明胶中鲜味氨基酸占总氨基酸含量56.8%,表明鱼皮明胶具有一定的营养价值。将鱼皮明胶添加到鲢鱼鱼糜中,可以提高鱼糜凝胶的破断强度和保水性能,如当其添加量为鱼糜蛋白含量10%时,破断强度提高20%,失水率下降35%。根据鱼糜凝胶在各种蛋白质变性剂中的溶解性和溶解组分的SDS-PAGE分析结果,鱼皮明胶蛋白主要是通过离子键与鱼糜蛋白结合,进而提高鱼糜凝胶形成能。