应用噬菌体展示随机12肽库筛选诺如病毒抗原模拟表位

目的:利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库筛选诺如病毒(NoV)的抗原模拟表位。方法:包被与GⅡ.4、GⅡ.6、GⅡ.17型NoV具有高特异性及中和能力较强的单链可变片段抗体(scFv),用Ph.D.-12噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选。ELISA鉴定淘选所得噬菌体与scFv的结合活性及其与NoV P蛋白的竞争作用;阳性克隆测序后进行生物信息学分析,合成多肽鉴定其抗原性。结果:发现1段与GⅡ.6 VP1区同源性较高的氨基酸序列“MG-D-W”,综合分析提示其可能为GⅡ.6 NoV的抗原模拟表位,且合成的包含“MG-D-W”的多肽可竞争抑制P蛋白与人类组织血型抗原(HBGAs)受体的结合。结论:“MG-DW”是与NoV单链抗体高亲和力的肽段,可能模拟了GⅡ.6 NoV与scFv结合的抗原表位。

Effect of phase-shift angle on 12-pulse star connection transformer system

Based on the study of the harmonic suppression on DC side of the multi-pulse rectification system,a software platform is established in Matlab environment.The phase-shift angle is studied from the aspects of system stability and economy,analyzing the effects of phase-shift angle on the input-side line current,the output-side voltage ripple,the equivalent capacity of autotransformer and other auxiliary devices in 12-pulse rectifier system.The software platform can complete the analysis only by inputting the initial conditions,eliminating the derivation of the intermediate formula and reducing the complexity of the system analysis,and have good scalability.The simulation results show that the system can effectively analyze the influence of phase angle on 12-pulse star-connected transformer.

孟德尔随机化探索维生素B_(12)缺乏性贫血和1型糖尿病风险的因果关系

目的使用孟德尔随机化(Mendelian randomization,MR)研究方法确定维生素B_(12)(VitB_(12))缺乏性贫血是否与1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)有因果关系。方法双样本MR研究选择从T1D和VitB_(12)缺乏性贫血的全基因组关联研究获得的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)作为工具变量,采用逆方差加权(inverse-variance weighted,IVW)作为MR的主要分析方法,并额外采用加权中位数法(weighted median,WME)、MR-Egger和weighted mode方法来进行验证。对工具变量进行敏感性分析,保证分析的稳健性。结果共获得10个与VitB_(12)缺乏性贫血密切相关的SNP作为工具变量,IVW结果(OR=2.706,95%CI 1.357~5.396,P<0.05)、WME结果(OR=5.179,95%CI 2.678~10.015,P<0.05)、MR-Egger结果(OR=13.088,95%CI 2.230~76.802,P<0.05)和Weighted mode结果(OR=5.699,95%CI 2.807~11.570,P<0.05)均表明基因预测VitB_(12)缺乏性贫血与T1D的发病风险显著相关。同时反向MR研究发现T1D并不是VitB_(12)缺乏性贫血原因。多种敏感性分析表明研究分析结果具有稳健性。结论本研究表明VitB_(12)缺乏性贫血是T1D发生的危险因素,两者之间存在正向因果关联。

Synthesis and study the influence of yttrium doping on band structure,optical,non-linear optical and dielectric results for Ca_(12)Al_(14)O_(33) (C12A7) single crystals grown using traveling-solvent floating zone (TSFZ) method

Ca_(12)Al_(14)O_(33)(C12A7)and Y_(0.02)Ca_(11.98)Al_(14)O_(33)(Y-C12A7)single crystals were grown by using the traveling-solvent floating zone(TSFZ)method.The temperature was increased to avoid the bubbles and cracks which may be formed during the preparation of the ingot material.We have started with the flux higher than the normal to avoid the bubbles and make good treatment for the solid-liquid interface.The structures of both Ca_(12)Al_(14)O_(33)(C12A7)and Y_(0.02)Ca_(11.98)Al_(14)O_(33)(Y-C12A7)were studied by using x-ray diffraction(XRD).Optical properties for C12A7 and Y-C12A7 single crystals have been studied in order to determine the optical parameters such as optical energy gap(Eg),refractive index n,oscillating energy(Eo),dispersion energy(Ed),volume energy loss function(VELF),and surface energy loss function(SELF).Finally,a new result for these samples is that the third-order nonlinear optical susceptibility(χ(3))was determined.The results have been discussed with effect of Y-doping on the C12A7 single crystals for optical and industrial applications.

胃腺癌组织RBMS1、AKAP12表达变化及其临床意义

目的探讨胃腺癌组织RNA结合基序单链相互作用蛋白1(RBMS1)、A激酶锚定蛋白12(AKAP12)表达变化及其临床意义。方法选择胃腺癌患者102例,取手术切除的胃癌组织及其癌旁组织(距肿瘤组织边缘5 cm以上,经病理检查明确为正常胃组织),采用免疫组化法检测RBMS1、AKAP12表达。比较胃癌组织与癌旁正常组织RBMS1、AKAP12阳性表达率,采用Pearson线性相关分析法分析胃癌组织RBMS1阳性表达与AKAP12阳性表达的关系。分析胃癌组织RBMS1、AKAP12阳性表达与临床病理特征的关系以及二者表达与预后的关系。结果胃癌组织RBMS1阳性表达率显著高于癌旁正常组织,AKAP12阳性表达率显著低于癌旁正常组织(χ^(2)分别为75.583、53.204,P均<0.05)。胃癌组织RBMS1阳性表达与AKAP12阳性表达呈负相关关系(r=-0.625,P<0.05)。胃癌组织RBMS1、AKAP12阳性表达与TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤部位、组织分化程度无关(P均>0.05)。所有患者术后随访2~36个月,中位随访时间25.30个月。随访期间失访1例,死亡30例,3年总体生存率为70.30%(71/101)。胃癌组织RBMS1阳性表达者与阴性表达者3年总体生存率分别为66.20%(47/71)、80.00%(24/30),胃癌组织AKAP12阳性表达者与阴性表达者3年总体生存率分别为82.14%(23/28)、65.75%(48/73)。胃癌组织RBMS1阳性表达者3年总体生存率显著低于其阴性表达者(χ^(2)=4.310,P<0.05),胃癌组织AKAP12阳性表达者3年总体生存率显著高于其阴性表达者(χ^(2)=4.569,P<0.05)。结论胃腺癌组织RBMS1高表达、AKAP12低表达,二者表达变化与肿瘤TNM分期、淋巴结转移和患者预后密切相关。

应用重组PCR技术构建人单链白细胞介素12融合基因

目的构建人单链白细胞介素 12 (hsc IL- 12 )融合基因并在真核细胞中进行表达 ,为进一步研究 hsc IL- 12融合蛋白的生物学活性奠定基础。方法应用重组 PCR技术将 h IL - 12 p40和 p35亚单位两段编码序列的 c DNA通过一疏水性多肽接头 (Gly4Ser) 3碱基序列进行前后拼接 (IL- 12 p40 -多肽接头 - p35 ) ,构建 hsc IL- 12融合基因 ,并进行核苷酸序列测定 ,进一步将 hsc IL - 12融合基因插入 pc DNA3.1真核表达载体中 ,转染 COS- 7细胞表达 hsc IL - 12融合蛋白 ,并行 Western blot分析。结果该融合基因经 DNA序列分析表明 :p40、p35、linker的连接顺序、方向及序列完全正确 ,融合基因可在 COS- 7细胞中表达hsc IL- 12融合蛋白。Western blot显示该融合蛋白分子量为 70 0 0 0 u,可与鼠抗人 IL- 12 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论重组 PCR技术是十分有效。

IL-12p403'非翻译区rs3212227单核苷酸多态性与呼吸道合胞病毒感染后喘息发生的关系研究

目的探讨IL-12 p40基因3'非翻译区(3'URT)单核苷酸多态性位点(rs3212227)与呼吸道合胞病毒(RSV)感染后病情严重度的关系。方法对2004-2006年儿内呼吸科收治的呼吸道感染患儿用直接免疫荧光法进行鼻咽部分泌物呼吸道病原抗原检测,选取RSV阳性患儿共175例,按临床表现分为喘息组(112例)和非喘息组(63例),用Taqman探针检测法对两组患儿行IL-12 p40rs3212227位点单核苷酸多态性分析。两组患儿血清总IgE定量采用Unicap体外检测系统测定。结果RSV感染后喘息组rs3212227位点等位基因A和C的发生频率分别为48.2%、51.8%,非喘息组分别为29.4%、70.6%,两组等位基因频率差异有统计学意义。喘息组A/A纯合子、C/C纯合子和A/C杂合子基因型频率分别为21.4%、25.0%和53.6%,非喘息组A/A纯合子、C/C纯合子和A/C杂合子基因型频率分别为9.5%、50.8%和39.7%,两组基因型频率差异有统计学意义。尽管喘息组患儿血清总IgE水平显著高于非喘息组患儿(P<0.05),但喘息组rs3212227位点A/A纯合子、C/C纯合子和A/C杂合子患儿之间的血清总IgE水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-12 p40rs3212227位点单核苷酸多态性与RSV感染后喘息的发生有关,但与血清总IgE水平无关。

白细胞介素12基因多态性与广西壮族人群骨关节结核易感性的关系

背景:研究提示白细胞介素12可能在骨关节结核发生中发挥免疫调节作用。目的:分析白细胞介素12A基因rs568408 G/A和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点单核苷酸多态性与广西壮族人群骨关节结核易感相关性及其与骨关节结核患者血清白细胞介素12水平的关系。方法:采用单碱基延伸的PCR技术和DNA测序方法对150例骨关节结核患者(病例组)及165例健康体检者(对照组)rs568408和rs3212227位点进行多态性检测,分析各基因型以及等位基因的分布频率,各基因型与骨关节结核易感性的关系。结合已检测的血清白细胞介素12水平,分析2位点基因型与骨关节结核患者血清白细胞介素12水平的关系。结果与结论:白细胞介素12A基因rs568408 G/A位点和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点在对照组与骨关节结核组中的基因型及等位基因频率分布差异无显著性意义(P>0.05)。2个位点的4种单倍型在对照组和骨关节结核组中的分布差异亦无显著性意义(P>0.05)。病例组rs568408位点野生型GG和GA+AA突变型间血清白细胞介素12水平比较差异无显著性意义(P>0.05),rs3212227位点野生型AA和AC+CC突变型间血清白细胞介素12水平比较差异无显著性意义(P>0.05)。说明白细胞介素12A基因rs568408 G/A和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点多态性可能与广西壮族人群骨关节结核易感性无关。

（YbTbBi）_3Fe_5O_（12）块状单晶生长及其磁光性能

用助熔剂法生长出（ＹｂＴｂＢｉ）３Ｆｅ５Ｏ１２块状单晶，测量了该单晶在１．０～１．７μｍ范围的Ｆａｒａｄａｙ旋转谱及透射谱．当温度为１０～８０℃，λ＝１．５５μｍ时，测得该单晶的Ｆａｒａｄａｙ旋转温度系数为２．０×１０－２．（°）·ｍｍ－１·Ｋ－１．所得结果表明：（ＹｂＴｂＢｉ）３Ｆｅ５Ｏ１２单晶既有较大的Ｆａｒａｄａｙ旋转角。

重组猪单链IL-12的构建及真核表达

目的克隆猪IL-12(pIL-12)p35和p40亚单位cDNA,构建含有重组猪单链IL-12(pscIL-12)融合基因的真核表达质粒并进行表达。方法分别从正常成年肉猪的外周血单个核细胞(PBMCs)和脾淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR分别获得pIL-12 p35和p40亚单位编码序列的cDNA,应用重叠延伸PCR技术通过一柔性接头(linker)(Gly4Ser)3串联这两个亚基构建融合基因pscIL-12,将融合基因pscIL-12插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,通过阳离子聚合物介导转染CHO-K1细胞进行表达,RT-PCR鉴定pscIL-12融合基因在真核细胞中的表达。结果所克隆的pIL-12 p35亚基和p40亚基的编码基因序列和构建的融合基因pscIL-12序列均经PCR、酶切、测序得以证实;融合基因pscIL-12在CHO-K1细胞中成功转录。结论成功构建了pcDNA3.1(+)-pscIL-12融合基因的真核表达质粒;pcDNA3.1(+)-pscIL-12在CHO-K1细胞中成功转录,为进一步探讨pscIL-12融合蛋白的生物学活性和疫苗佐剂效应奠定了基础。

12/3相DWIG励磁系统电容电压的模糊-PI双模控制

12/3相双绕组感应发电机是为了实现适合于原动机高速运行特性而设计的一种特殊电机。系统在电机上增设了一个励磁绕组,使用静止励磁装置对电机进行励磁控制。文中对励磁装置的直流侧电容电压的控制原理和方法进行了详细讨论。给出了减小启动电流的方法。将模糊-PI双模控制应用于对有功电流的控制,用来对电容电压进行精确调整。当实际电容电压和设定的参考值误差较大时,使用模糊控制来提高系统的动态特性,当误差比较小时,使用PI控制来实现精确控制。给出了仿真和试验结果,证明这种方法可以实现电容电压的精确控制。动态试验结果表明,在突加和突卸负载时电容电压的变化非常小。

重组人单链白细胞介素12融合基因(rhscIL-12)的构建和真核表达

克隆人 IL - 1 2 ( h IL - 1 2 ) p40和 p35亚单位 c DNA,构建人单链 IL- 1 2 ( rhsc IL- 1 2 )融合基因 ,并在哺乳动物细胞中进行表达。方法 从经 PDBu刺激的 EBV转化的人 B淋巴母细胞株 NC37中提取 m RNA,经 RT- PCR分别获得 h IL- 1 2 p40和 p35亚单位编码序列的 c DNA,运用重组 PCR技术将两段基因通过一疏水性多肽接头 ( Gly4 Ser) 3 DNA序列进行体外基因重组 ,构建 rhsc IL- 1 2融合基因 ,将其插入 pc DNA3.1 ( + )真核表达载体 ,经脂质体转染 COS7细胞进行表达 ,Western blot进行分析。结果 所克隆的 h IL- 1 2 p40、p35c DNA序列和构建的 rhsc IL - 1 2融合基因 DNA序列均经测序得以证实 ,融合基因可在 COS7中表达其产物 rhsc IL- 1 2融合蛋白 ,其分子量为 70 KD,可与鼠抗人 IL - 1 2 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论 本研究结果为进一步探讨 rhsc IL- 1 2融合蛋白的生物学活性和特性奠定了基础 ,也为 rhsc IL- 1

慢性乙型肝炎患者白细胞介素12B+1188(A/C)位点基因多态性分析

目的探讨白细胞介素12(IL-12)亚基p40(IL-12B)3′非翻译区+1188(A/C)位点的基因多态性与慢性乙型肝炎的相关性以及对HBVDNA水平的影响。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和DNA测序的方法检测157例慢性乙型肝炎患者(慢性乙肝组)和122名健康对照(对照组)IL-12B3′非翻译区+1188(A/C)位点的基因型,采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定慢性乙肝患者的血浆HBVDNA水平。结果慢性乙肝组IL-12B+1188(A/C)位点AA、AC、CC基因型分布频率分别为34.4%、42.0%、23.6%,对照组三种基因型的分布频率分别为47.5%、39.3%、13.2%。慢性乙肝组与对照组间CC基因型和非CC基因型(AA+AC)之间频率分布差异有统计学意义(χ2=4.874,P=0.027;ORCC=1.797,95%CI1.051～3.073)。慢性乙肝组等位基因A、C分布频率分别为55.4%、44.6%,对照组分别为67.2%、32.8%,两组比较差异有统计学意义(χ2=8.004,P=0.005;ORA=0.824,95%CI0.722～0.941;ORC=1.360,95%CI1.094～1.691);慢性乙肝患者中高水平≥5.0×102拷贝/ml(HBVDNA组)C等位基因分布频率明显高于低水平<5.0×102拷贝/ml(HBVDNA组),差异有统计学意义(χ2=9.750,P=0.002)。结论 IL-12B3′非翻译区+1188(A/C)位点基因多态性与HBV感染相关,其中C等位基因可能是慢性乙肝的遗传易感基因,携带C等位基因的个体可能更有利于HBVDNA的复制。

玉米杂交种嫩单12号的选育与栽培技术研究

[目的]推广中晚熟杂交玉米品种嫩单12号。[方法]对嫩单12号的特征特性、产量表现、栽培及制种技术要点进行阐述。[结果]该品种具有产量高、品质优、抗逆性强、适应范围广等特性,已于2005年通过黑龙江省农作物品种审定委员会审定。[结论]该品种适宜在黑龙江省西部第1积温带下限和第2积温带种植,及在四单19种植区域推广应用。

P2Y12基因单核苷酸多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨血小板二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)受体亚基12(P2Y12)基因单核苷酸多态性位点rs2046934、rs6787801、rs6798347及rs6801273与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)发生的相关性。方法入选455例冠心病患者和90例健康对照。所有冠心病患者均行冠状动脉造影检查或冠状动脉计算机断层扫描血管造影确诊冠心病。应用Mass ARRAY时间飞行质谱技术对P2Y12基因的单核苷酸多态性位点进行基因分型。比较两组在基因型分布及等位基因频率上的差别。结果冠心病组与对照组在rs2046934位点的基因型分布(CC:2.4%vs.4.4%、TT:71.0%vs.74.4%、CT:26.6%vs.21.2%)和等位基因频率(C等位基因:15.7%vs.15.0%、T等位基因:84.3%vs.85.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组rs6787801位点的基因型分布(GG:17.4%vs.17.8%、AA:36.9%vs.31.3%、GA:45.7%vs.51.1%)和等位基因频率(G等位基因:40.2%vs.43.3%、A等位基因:59.8%vs.56.7%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组rs6798347位点的基因型分布(AA:9.1%vs.6.7%、GG:41.6%vs.52.2%、AG:49.3%vs.41.1%)和等位基因频率(A等位基因:29.9%vs.27.2%、G等位基因:70.1%vs.72.8%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组rs6801273位点的基因型分布(CC:13.4%vs.10.0%、TT:42.6%vs.50.0%、CT:44.0%vs.40.0%)和等位基因频率(C等位基因:35.4%vs.30.0%、T等位基因:64.6%vs.70.0%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 P2Y12基因单核苷酸多态性位点(rs2046934、rs6787801、rs6798347及rs6801273)与冠心病发生无相关性。

串行12位ADC MAX1247及其应用

阐述了ＭＡＸ１２４７的特性和工作原理，介绍了单片机与ＭＡＸ１２４７的硬件接口设计以及软件编程的方法，最后简述了该模／数转换技术在螺杆钻具密封性能测试台架中的应用。

基于PKCS#12证书身份认证系统的实现

针对校园网信息安全的问题,提出一种切实可行的方案,设计与实现了基于公钥基础设施PKI和PKCS#12个人证书的身份认证系统。通过移动存储设备作为PKCS#12证书载体实施单点登录功能,增强了数字证书的安全性和使用的方便性。在实现中采用MVC模式并引入Bouncy Castle Crypto APIs第三方加密软件开发包提高了系统的重用性、安全性和易维护性。

基于SDI-12总线的土壤多参数检测仪设计与实现

研发了一种基于SDI-12总线的土壤多参数检测仪。该检测仪以单片机为核心控制单元,结合5TE三合一土壤传感器,设计了传感器接口电路、通信时序控制、数据存储电路及显示电路等;将传感器技术、数据通信技术和微计算机技术相结合,在实验室初步实现对土壤水分、电导率和温度等数据的实时采集与传输。检测仪性能试验表明测量参数精度较高,能够满足土壤检测要求。

染色体12p13的rs12425791位点基因多态性与急性缺血性卒中短期预后的关系

目的：探讨染色体12p13的rs12425791位点基因多态性与急性缺血性卒中（AIS）短期预后（1年）的关系。方法选择401例AIS患者，运用PCR-RFLP法检测染色体12p13的rs12425791位点基因型，患者出院后随访1年，观察患者死亡和再发缺血性卒中情况。运用Logistic回归模型分析个体基因型和脑卒中预后的关系。结果401例AIS患者中，有31例发生死亡和复发卒中。在校正了年龄、性别和病史等因素后，Logistic回归分析结果显示，rs12425791纯合子突变（AA型基因）的AIS患者1年内发生死亡或再发卒中的危险度较高，是GG型基因患者的2．602倍（95％CI1．216～5．564）。结论染色体12p13的rs12425791位点纯合子突变是AIS患者短期预后不良的独立危险因素。

IL-12B基因多态性及血清表达水平与食管癌的关系

目的探讨白细胞介素（IL）-12B 3′UTR＋16974（A/C）位点单核苷酸多态性（SNP）及其血清表达水平与食管癌的关系。方法随机选取2013年6月~2014年6月在四川省南充市中心医院就诊的食管癌患者52例为试验组,术后收取患者肿瘤组织和癌旁组织,提取其基因组DNA,针对IL-12B基因3′UTR＋16974（A/C）SNP位点进行PCR,扩增产物测序,其中患者肿瘤组织DNA作为癌组织,癌旁3~5 cm组织DNA作为癌旁组织,分析IL-12B基因多态性与肿瘤发生的关系。选取同期健康体检者40例为对照组,同时收集患者和健康体检者血清,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测IL-12 p40和IL-12血清表达水平。结果癌组织AA、AC、CC基因型频率分别是23.08%、15.38%、61.54%,癌旁组织AA、AC、CC基因型频率分别是15.38%、38.46%、46.15%,差异有统计学意义（P〈0.05）。癌组织A、C等位基因频率分别为30.77%（32/104）、69.23%（72/104）,癌旁组织A、C等位基因频率分别为34.62%（36/104）、65.38%（68/104）,差异无统计学意义（P〉0.05）。试验组IL-12 p40和IL-12血清表达水平均明显高于对照组（P〈0.01）。结论 IL-12B 3′UTR＋16974（A/C）位点CC基因型可能是食管癌的易感基因型,IL-12 p40和IL-12血清表达水平升高与食管癌发生有关。