沙库巴曲缬沙坦治疗慢性心力衰竭的临床疗效及对血清Sirtuin-4和Beclin-1水平的影响

目的探讨沙库巴曲缬沙坦对慢性心力衰竭患者的疗效及对患者心功能、血清沉默调节蛋白-4(Sirtuin-4)和Beclin-1水平的影响。方法选取2019年1月—2021年9月内蒙古自治区国际蒙医医院收治的60例慢性心力衰竭患者作为研究对象,依据随机数表法将患者分为对照组和观察组,每组30例。对照组采用贝那普利治疗,观察组采用沙库巴曲缬沙坦治疗,比较两组患者治疗前后左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室射血分数(LVEF)和血清Sirtuin-4及Beclin-1的水平,以及总有效率、住院次数、平均住院天数、不良反应发生率。结果观察组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组LVEF、LVESV及LVEDV水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组LVEF、LVESV及LVEDV水平均高于治疗前,且观察组LVEF、LVESV及LVEDV水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组Sirtuin-4及Beclin-1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组Sirtuin-4及Beclin-1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组住院次数和平均住院天数均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论沙库巴曲缬沙坦治疗慢性心力衰竭疗效确切,其能改善患者心功能,降低患者血清Sirtuin-4及Beclin-1水平,减少住院次数和平均住院天数,该方法安全性佳,值得临床应用。

过表达SIRT4对骨肉瘤细胞恶性生物学行为及能量代谢的影响

目的:探讨过表达SIRT4对人骨肉瘤细胞恶性生物学行为及对成骨分化的调控作用,以及过表达SIRT4对线粒体能量代谢的影响。方法:构建稳定过表达SIRT4的U2OS、MG63骨肉瘤细胞株,通过qRT-PCR和Western blot检测SIRT4的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8、克隆形成实验、EDU555染色法及检测细胞增殖;裸鼠胫骨成瘤实验检验成瘤能力;流式细胞术检测细胞周期;DAPI染色及Annexin V-APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡;细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红S染色分别检测细胞的早期和晚期成骨分化;葡萄糖检测试剂盒测定培养基及细胞内葡萄糖含量;乳酸检测试剂盒测定培养基及细胞内乳酸含量;三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)检测试剂盒检测细胞总ATP含量;四甲基罗丹明酯染色(tetramethylrhodamine ethylester perchlorate,TMRE)测定试剂检测线粒体膜电位。结果:过表达SIRT4组细胞增殖、迁移及侵袭能力降低,裸鼠胫骨成瘤的瘤体体积减小,凋亡细胞增多;过表达SIRT4组细胞的G_(0)/G_(1)期占比明显增多,S期占比明显减少;过表达SIRT4组细胞ALP染色、茜素红S染色钙盐结节明显增多;过表达SIRT4组培养基中的葡萄糖较对照组消耗减少,细胞中的葡萄糖含量较对照组减少;过表达SIRT4组细胞中的乳酸含量较对照组减少,培养基中的乳酸较对照组产生减少;过表达SIRT4组细胞的总ATP较对照组更低;过表达SIRT4组的线粒体膜电位较对照组更低。结论:在U2O和MG63细胞中,过表达SIRT4抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭以及成瘤能力,促进骨肉瘤细胞凋亡以及早晚期成骨分化,调节骨肉瘤细胞能量代谢。

中重度肥胖患儿体格测量指标和代谢指标与血清沉默调节蛋白4水平及生长激素/胰岛素样生长因子-1分泌状态的相关性研究

目的探究中重度肥胖症患儿体格测量指标和代谢指标与血清沉默调节蛋白4(SIRT4)水平、生长激素(GH)/胰岛素样生长因子-1(IGF-1)分泌状态的相关性。方法选取2020年5月至2022年3月抚州市第一人民医院收治的200例肥胖症患儿作为研究对象,根据肥胖程度分为中度肥胖组与重度肥胖组,每组100例,另选取于本院体检的100名健康儿童作为对照组。比较3组身高、体质量、体重指数(BMI)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、SIRT4、GH/IGF-1,采用Pearson分析血清SIRT4水平与血清TG、TC、BMI、GH/IGF-1水平的相关性。结果中度肥胖组、重度肥胖组身高均低于对照组,体质量、BMI均高于对照组,且重度肥胖组身高低于中度肥胖组,体质量、BMI均高于中度肥胖组,差异有统计学意义(P<0.05)。中度肥胖组、重度肥胖组血清SIRT4水平、GH/IGF-1均低于对照组,TG、TC水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中度肥胖组、重度肥胖组GH/IGF-1及SIRT4、TG、TC水平比较差异无统计学意义。血清SIRT4水平与TG、TC均呈负相关(r=−0.330、−0.172,P<0.05),与BMI、GH/IGF-1呈正相关(r=0.830、0.285,P<0.05)。结论SIRT4水平与血脂、GH/IGF-1水平密切相关,SIRT4水平在一定程度上可以反映儿童的肥胖程度,从而从根源上针对肥胖程度做出一定的调整和预防,预防重度疾病的发生。

沉默信息调节蛋白4在2型糖尿病肾病中表达水平变化的意义

目的探讨沉默信息调节蛋白4(SIRT4)在2型糖尿病肾病患者中表达水平变化的意义。方法收集30例健康体检者和90例不同尿白蛋白/肌酐比值(UACR)的糖尿病患者外周血,采用实时定量PCR和Western blotting检测SIRT4的表达水平。结果实时PCR和Western blotting结果显示,糖尿病患者体内SIRT4的表达水平较健康体检者降低(P<0.05),且随着UACR的升高而降低(r=-0.915,P<0.001)。相关分析结果显示,SIRT4与糖尿病病程(P<0.001)、体质量指数(P=0.001)、总胆固醇(P=0.009)、甘油三酯(P<0.001)、血肌酐(P<0.001)、UACR(P<0.001)、胱抑素C(P<0.001)呈负相关,与估算肾小球滤过率呈正相关(P<0.001)。结论外周血SIRT4与糖尿病肾病有一定的相关性,可能作为糖尿病肾病的早期诊断指标之一,并在反映糖尿病肾病患者肾脏功能方面也具有一定的临床参考价值。

肥胖患儿体格指标和代谢指标与血清SIRT4水平的相关性研究

目的:分析肥胖患儿体格指标和代谢指标与血清沉默信息调节因子4(SIRT4)水平的相关性,为临床治疗提供指导。方法:选取江西省儿童医院内分泌遗传代谢科2020年9月—2022年10月诊治的210例单纯性肥胖患儿,参照体重指数(BMI)分为轻度肥胖组(n=74)、中度肥胖组(n=121)和重度肥胖组(n=15)。对比三组体格指标[BMI、腰围、臀围、腰臀比(WHR)和皮褶厚度]、糖脂代谢指标[空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)]、SIRT4水平和生长激素/胰岛素样生长因子1(GH/IGF-1)。采用Pearson相关性分析患儿相关体格指标和糖脂代谢指标与血清SIRT4水平相关性;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清SIRT4水平对患儿肥胖程度的预测价值。结果:三组患儿年龄、性别、身高、WHR、GH/IGF-1和FBG比较,差异均无统计学意义(P>0.05);三组患儿体格指标(BMI、腰围、臀围和皮褶厚度)、糖脂代谢指标(HOMA-IR、TC、TG)和血清SIRT4水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且重度肥胖组体格指标和糖脂代谢指标水平均最高,血清SIRT4水平最低。Pearson相关性分析结果显示,患儿相关体格指标、糖脂代谢指标与血清SIRT4水平呈负相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清SIRT4水平预测患儿肥胖结局(中重度)的AUC为0.763(P<0.05)。结论:肥胖患儿体格指标、糖脂代谢指标均与血清SIRT4水平呈负相关,且血清SIRT4水平与患儿肥胖程度有关。

沉默调节蛋白4在肝脏疾病发生发展中的作用

沉默调节蛋白(SIRT)家族是一类高度保守、依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷(NAD+)的去乙酰化酶类,包括7个家族成员(SIRT 1~7)。定位于线粒体的SIRT-4具有去乙酰基酶、ADP-核糖转移酶、依赖NAD+蛋白脂酰胺酶和脱酰酶活性,参与线粒体蛋白翻译后修饰,调节体内多个代谢过程。由于代谢功能障碍与肝脏疾病息息相关,近些年,SIRT-4在肝脏疾病中的作用及调控机制日益受到关注。阐述了SIRT-4在病毒性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、肝纤维化以及肝细胞癌等疾病中的作用,为这些肝脏疾病的防治提供新的视角。

沉默信息调节因子4表达与肿瘤患者预后和临床特征关系的Meta分析

目的 系统评价沉默信息调节因子4(SIRT4)表达与肿瘤患者预后和临床特征的关系。方法 通过计算机在PubMed、EMBase、Web of Science、Cochrane library数据库中检索有关肿瘤患者中SIRT4表达情况及预后的临床试验。应用Review Manager 5.4.1和STATA 11.0软件对纳入文献中提取的数据进行Meta分析。计算汇总的风险比(HR)和比值比(OR)及相应95%置信区间(CI),评估SIRT4表达情况与肿瘤患者总生存期(OS)和临床特征的关系。结果 共纳入8篇文献1229例患者。Meta分析结果表明,SIRT4高表达肿瘤患者的OS优于SIRT4低表达患者,差异有统计学意义(HR=0.66,95%CI:0.52~0.85,P﹤0.01)。SIRT4低表达肿瘤患者淋巴结转移率高于SIRT4高表达患者,差异有统计学意义(OR=0.51,95%CI:0.31~0.85,P﹤0.01)。癌症基因组图谱(TCGA)数据库的结果表明,SIRT4低表达预示着更短的OS。结论 SIRT4低表达与肿瘤患者预后不良密切相关,其可能成为肿瘤患者的预后标志物及潜在治疗靶点。

松油烯-4-醇调节SIRT1/Nrf2信号抑制慢性肾病血管氧化应激损伤

目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD小鼠模型用于信号机制研究。给药组以T4O低、高剂量(10 mg/kg和20 mg/kg)连续灌胃给药6周。收集小鼠血清检测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,采用HE染色观察小鼠胸主动脉和肾脏组织形态,试剂盒检测血管组织丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫荧光检测血管组织ROS水平;Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO-1及SIRT1的表达。结果T4O可降低CKD小鼠血清BUN和CRE水平,改善肾脏病理损伤和主动脉血管形态结构,降低血管组织MDA含量,增加SOD含量,降低ROS水平;T4O干预能够促进Nrf2核易位及上调HO-1、NQO-1以及SIRT1的蛋白表达。分子机制研究表明,LV-SIRT1 RNAi+T4O+CKD组能够抑制T4O对CKD诱导的MDA和SOD含量的影响,部分抵消T4O上调Nrf2核易位以及SIRT1、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平的作用。结论T4O对CKD小鼠胸主动脉氧化应激损伤具有保护作用,其分子信号机制可能与调节SIRT1/Nrf2级联信号有关。

微小RNA-122、人去乙酰化酶4、网膜素-1对非酒精性脂肪肝的预测效能研究

目的:探讨肥胖儿童微小RNA-122(miR-122)、人去乙酰化酶4(SIRT4)、网膜素-1(Omentin-1)与肥胖程度关系及对非酒精性脂肪肝(NAFLD)的预测效能。方法:选取2019年8月-2021年6月本院收治的160例肥胖儿童为研究对象,根据其是否发生NAFLD分为NAFLD组58例、非NAFLD组102例。分析两组不同肥胖程度儿童血清miR-122、SIRT4、Omentin-1水平,分析其与肥胖程度、临床指标[尿酸、腰围、体质量、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]对NAFLD的预测价值。结果:与非NAFLD组比较,NAFLD组血清miR-122水平升高(P<0.05),SIRT4、Omentin-1水平降低(P<0.05);血清miR-122水平随着肥胖程度增加而升高(P<0.05),SIRT4、Omentin-1水平随着肥胖程度增加而降低(P<0.05);miR-122水平与肥胖程度、尿酸、腰围、体质量、FINS、TG、HOMA-IR呈正相关,与HDL呈负相关(P<0.05);SIRT4、Omentin-1与肥胖程度、尿酸、腰围、体质量、FINS、TG、HOMA-IR呈负相关,与HDL呈正相关(P<0.05);联合预测NAFLD的AUC大于单项预测(P<0.05)。结论:NAFLD儿童血清miR-122水平升高,SIRT4、Omentin-1水平降低,其与肥胖程度、脂质代谢、胰岛素抵抗密切相关,联合检测其水平对肥胖儿童NAFLD的发生具有一定预测价值。

沉默信息调节因子3对白藜芦醇诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响

目的:检测沉默信息调节因子3 (Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0mg·L-1)Res培养24h,MTT法检测细胞存活率。将细胞随机分为对照组、Sirt3抑制剂3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶(3-TYP)组、Res组和3-TYP+Res组,培养24h后,MTT法检各组细胞增殖抑制率;采用Hoechst 33342进行细胞核染色,激光共聚焦显微镜观察细胞核形态;采用活性氧(ROS)探针检测细胞中ROS水平;Western blotting法检测各组细胞中Sirt3、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:MTT实验,随着Res浓度的增加,细胞存活率明显降低,Res的半数抑制浓度(IC50)为42.73mg·L^-1。与对照组比较,Res组和3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,3-TYP+Res组细胞核出现固缩、染色增强、核碎裂增多。与对照组比较,3-TYP组细胞红色荧光无明显变化,Res组和3-TYP+Res组细胞红色荧光明显减少。Western blotting法检测,与对照组比较,3-TYP组细胞中Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),Res组细胞中Sirt3和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞中Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2和Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:Res可以诱导SKOV3细胞的凋亡,3-TYP通过抑制Sirt3表达可增强Res的作用。

抗衰老蛋白Klotho阻断高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞TLR4／NF—κB p65／NGAL通路的激活及其作用机制

目的探讨体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞（RMCs）中抗衰老蛋白Klotho及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）两者表达水平的变化及其相关作用，同时观察Toll样受体-4（TLR4）／核因子-κB（NF—κB）p65通路在此过程中的作用。方法设计并合成针对NGAL基因的3个特异性siRNA序列转入RMCs，筛选抑制效率最佳的siRNA用于后续实验；以吡咯烷二硫基甲酸盐（PDTC）或Klotho重组蛋白干预体外高糖培养的RMCs；采用实时定量PCR检测Klotho、TLR4、NGALmRNA的表达，Western印迹检测Klotho、TLR4、NF—κB p65、NGAL、纤连蛋白、结缔组织生长因子（CTGF）的表达，ELISA检测单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、趋化因子配体5（CXCL5）的分泌。结果高糖抑制Klotho表达（P〈0．05）并激活TLR4／NF—κB p65通路促进NGAL、纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5表达，基因沉默NGAL表达后纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5表达明湿下降（P〈0．01），PDTC干预后NGAL蛋白表达明显下降（P〈0．01），Klotho重组蛋白干预可抑制TLR4／NF-κB p65通路活性，下调NGAL、纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5的表达（P〈0．01）。结论在RMCs中，Klotho可通过抑制高糖刺激的TLR4／NF—κB p65通路活性下调NGAL的表达．从而抑制纤连蛋白、CTGF、MCP-1、CXCL5的表达，可能对糖尿病肾脏组织起保护作用。

非小细胞肺癌患者癌组织乙酰化酶4和动态相关蛋白1表达及其与预后的关系

目的观察非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)患者癌组织乙酰化酶4(sirtuin 4, SIRT4)和动态相关蛋白1(dynamin 1 like, DRP1)的表达变化,探讨其与NSCLC临床病理特征和预后的关系。方法 98例NSCLC患者均行手术治疗,取其手术切除的癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测癌组织和癌旁组织SIRT4、DRP1 mRNA相对表达量,采用Pearson相关性分析NSCLC患者癌组织SIRT4与DRP1表达的相关性;随访2~36个月,根据随访期间的存活情况分为存活组65例和死亡组33例,比较2组癌组织SIRT4、DRP1 mRNA相对表达量,采用多因素logistic回归分析NSCLC患者预后不良的影响因素;采用Kaplan-Meier生存分析法分析不同SIRT4、DRP1表达患者的3年总生存率和生存时间。结果 NSCLC患者癌组织SIRT4 mRNA相对表达量(0.854±0.212)低于癌旁组织(1.632±0.315)(P<0.05),DRP1 mRNA相对表达量(1.935±0.331)高于癌旁组织(0.742±0.110)(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移患者癌组织SIRT4 mRNA相对表达量(0.774±0.287、0.771±0.295)低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(0.891±0.203、0.889±0.192)(P<0.05),DRP1 mRNA相对表达量(2.078±0.381、2.128±0.399)高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(1.869±0.293、1.854±0.302)(P<0.05)。NSCLC患者癌组织SIRT4与DRP1表达呈负相关(r=—0.582,P<0.001)。死亡组癌组织SIRT4 mRNA相对表达量(0.468±0.255)低于生存组(1.050±0.203)(P<0.05),DRP1 mRNA相对表达量(4.102±0.321)高于生存组(0.835±0.191)(P<0.05)。SIRT4、DRP1 mRNA相对表达量是NSCLC患者预后不良的影响因素(OR=1.765,95%CI:1.201~3.420,P<0.001;OR=1.824,95%CI:1.310~3.557,P<0.001)。癌组织SIRT4低表达DRP1高表达(SIRT4<0.854且DRP1≥1.935)的NSCLC患者3年总生存率(36.6%)低于非SIRT4低表达DRP1高表达者(SIRT4≥0.854且/或DRP1<1.935)(87.7%)(P<0.05),生存时间[(20.3±4.2)个月]短于非SIRT4低表达DRP1高表达者[(32.1±5.1)个月](P<0.05)。结论 SIRT4低表达、DRP1高表达的NSCLC患者病死率较高,生存时间较短;肿瘤TNM分期晚、有淋巴结转移的NSCLC患者SIRT4表达降低、DRP1表达增高,SIRT4与DRP1有可能成为预测NSCLC患者生存预后的肿瘤标志物。