CRISPR/Cas9介导的猪Six1和Six4基因敲除细胞系的建立

目的:利用干细胞囊胚互补技术再生同种或异种动物器官已得到验证,其重要的前提是需要构建出相应的器官缺失动物模型。本文拟通过CRISPR/Cas9基因编辑技术建立猪Six1单基因和Six1/Six4双基因敲除猪细胞系,为构建肾脏发育缺陷和缺失猪模型奠定重要的研究基础。方法:选取猪Six1基因和Six4基因第一外显子为敲除靶点,分别设计并合成单导向RNA(single guide RNA,sg RNA),将其插入含有Cas9骨架的PX330质粒,分别构建Six1基因和Six4基因敲除打靶载体PX330-sg RNA1和PX330-sg RNA4;用T7EN1酶验证打靶载体敲除效率后,将高效打靶载体与含G418抗性的质粒(p CMV-td Tomato)共转染原代猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts,PFFs)中,并通过药物筛选获得单克隆细胞群落,随后对单克隆细胞进行基因型鉴定。结果:分别成功构建Six1和Six4基因的Cas9/sg RNA表达载体。转染Six1基因打靶载体经药物筛选后,利用PCR方法鉴定所获得的Six1基因敲除单克隆细胞系48个,其中Six1-/-细胞系21个。通过同样方法同时转染Six1基因和Six4基因打靶载体,经药物筛选后共获得44个单克隆细胞系,其中Six1-/-Six4-/-细胞系为13个。结论:通过CRISPR/Cas9基因编辑技术可高效获得Six1单基因敲除细胞系和Six1/Six4双基因敲除细胞系,为构建肾脏发育缺陷猪动物模型提供了基础,并有助于研究Six1和Six4基因在猪肾脏发育中的功能。

人Six1基因缺失突变体对上皮钙黏素(E-cadherin)启动子活性的影响

Sine oculis homeobox homolog（Six）基因为同源盒基因,最早发现于果蝇,是一种在多种生物中均有表达且高度保守的转录因子,不仅参与调控胚胎的正常发育和器官形成,还参与多种肿瘤的发生发展。胃癌细胞Six1高表达增加胃癌细胞的侵袭能力。在胰腺癌细胞中,Six1能够通过上调细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表达促进胰腺癌细胞的增殖。

原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的相关性

目的探讨原代人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达相关性。方法取新鲜人喉鳞状细胞癌组织,进行原代细胞培养,利用基因干扰技术,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向si RNA转染至人喉鳞癌细胞,转染成功后将实验细胞分为5组:A组(未转染组)、B组(转染空载体组)、C组(SIX1-si RNA组)、D组(TGFβ-si RNA组)、E组(SIX1+TGF-β-si RNA组)。Western blot及细胞爬片免疫荧光检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达。RT-PCR检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C m RNA的表达。结果 SIX1、TGF-β、VEGF-C蛋白及其m RNA的表达在未转染组、转染空载体组中差异无统计学意义。同未转染组相比,SIX1蛋白及其m RNA的表达在SIX1-si RNA组降低的同时出现了VEGF-C表达的降低;TGF-β蛋白及其m RNA的表达在TGFβ-si RNA组降低的同时也出现了VEGF-C表达的降低,差异均有统计学意义。同SIX1-si RNA组、TGFβ-si RNA组相比,VEGF-C蛋白及其m RNA的表达在SIX1+TGF-β-si RNA组未出现进一步降低。结论 SIX1和TGF-β能够共同作用促进VEGF-C蛋白及其m RNA的表达,进而促进人喉鳞癌的淋巴转移。SIX1、TGF-β的变化可能成为临床抑制人喉鳞癌淋巴结转移的潜在靶点。

RNAi下调Six1基因对人骨肉瘤细胞增殖和转移能力的影响

背景与目的:Six1(sine oculis homeobox homolog1)基因的编码产物属于复合同源异型蛋白家族一员,主要参与中枢神经系统、眼、肾、肌肉等组织器官的发育。最新的研究表明Six1也参与了调控转录和细胞周期,进而发现与恶性肿瘤的发生及转移相关。在骨肉瘤中,Six1的功能还未完全明确。本研究拟对Six1在人骨肉瘤细胞增殖和转移中所发挥的作用进行初步探讨。方法:以人骨肉瘤MG-63细胞系为研究对象,针对其Six1基因序列设计小干扰RNA片段,筛选出能高效沉默目标基因的片段序列后,重组其短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,转染入细胞,筛选出稳定表达干扰质粒的细胞克隆。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western blot)方法分别检测转染后Six1的mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝法检测增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,并将肿瘤细胞注入裸小鼠体内进行肿瘤转移的观察。结果:RT-PCR和Western blot显示shRNA对Six1在基因和蛋白水平均有显著的下调作用。骨肉瘤细胞的生长速度减慢,处于G2-M期的细胞比例由25.62%±1.81%下降为18.25%±1.56%,处于G1期的细胞比例由57.31%±2.11%上升到65.51%±2.65%。裸鼠转移瘤实验发现转移瘤的抑制率为69.5%。结论:下调Six1基因后,骨肉瘤细胞的增殖和转移能力都得到了明显的抑制,有可能成为临床治疗骨肉瘤的靶点之一。

miR-185靶向Six1对肺癌上皮-间质转化过程的影响及其机制

目的探讨miR-185影响人肺癌细胞迁移和侵袭能力的分子机制。方法在肺癌细胞系H520和A549中转染miR-185mimic获得miR-185过表达,利用Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞的迁移和侵袭能力;荧光素酶报告实验验证miR-185靶向Six1基因;采用qRT-PCR和Western blot法检测miR-185对细胞中Six1基因表达水平的影响;Western blot法检测miR-185过表达对肺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响。结果 miR-185过表达降低肺癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),上皮细胞标志物E-cadherin表达升高(P<0.01),间质细胞标志物vimentin表达降低(P<0.01),H520细胞过表达miR-185后,Six1基因表达水平降低(P<0.01),miR-185调控肺癌细胞的迁移和侵袭是通过靶向Six1基因实现的。结论 miR-185靶向Six1基因调控人肺癌细胞EMT途径。

乳腺癌患者血清中Six1的检测及临床意义

目的:检测乳腺癌患者及对照组患者血清中Six1的水平,分析临床意义。方法:收集乳腺癌75例、乳腺不典型增生35例、乳腺导管内乳头状瘤32例、乳腺纤维瘤28例及正常人30例,应用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测Six1的水平。结果:乳腺癌患者血清中Six1水平明显高于乳腺不典型增生组、乳腺导管内乳头状瘤组、乳腺纤维瘤组及正常人群组(F=23.57,P<0.01)。乳腺癌患者中Six1的表达水平与年龄无关(P>0.05),而与TNM分期、组织学分级、淋巴结状态及脉管浸润有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Six1与乳腺癌发生及侵袭转移相关,可为乳腺癌提供潜在的诊治靶点。

人参皂苷Rg3对原代人喉鳞癌细胞SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞中SIX1、TGF-β、VEGF-C表达的影响。方法:培养原代人喉鳞癌细胞,待细胞稳定传代后将其分为3组:A组(正常对照组)、B组(顺铂对照组)、C组(Rg3处理组)。Westernblot及细胞爬片免疫荧光检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达。RT-PCR检测各组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C mRNA的表达。结果:正常对照组细胞SIX1、TGF-β及VEGF-C蛋白及其mRNA表达均呈现强阳性。同正常对照组相比,顺铂对照组及Rg3处理组细胞TGF-β表达无明显变化,SIX1及VEGF-C蛋白及其mRNA表达下调,差异有统计学意义;同顺铂对照组相比,Rg3处理组细胞TGF-β表达无明显变化,SIX1及VEGF-C蛋白及mRNA表达出现了明显下调,差异有统计学意义。结论:Rg3能够通过降低人喉鳞癌细胞SIX1表达下调VEGF-C蛋白表达,进一步抑制喉鳞癌淋巴转移。同时提示,Rg3有比顺铂更强的抑制喉鳞癌淋巴转移的作用。

Six1蛋白在恶性肿瘤中的研究进展

Six1是同源盒基因家族中的成员,与胚胎细胞发育和器官分化有关,促进细胞分化前的前体细胞增殖和生存。Cyclin D1、Cyclin A1和c-myc在细胞生长和增殖中起着至关重要的作用,Six1通过这些蛋白可调控细胞周期。文献报道,Six1通过组织、血液系统及阶段依赖等多种方式调节癌细胞启动、增殖和转移,在肿瘤发生、发展中发挥重要作用。该文总结Six1蛋白在恶性肿瘤发生、发展中的作用及其分子机制研究进展,Six1有可能成为抑制肿瘤生长的靶点。

人Six1真核表达载体的构建及应用

Six1（sineoculis homeobox homolog 1,Six1）是一种转录调控因子,属于同源盒基因家族成员,是转录因子E2F1的转录靶基因,激活G1/S期的转录,增加S期转录水平,并通过激活靶基因如细胞周期蛋白A1（cyclin A1）、cyclin D1等,启动靶基因转录,从而抑制与DNA结合能力,最后被蛋白酶水解[1]。当Six1过表达时,这一作用则被削弱,

乳腺癌患者血清炎性因子、CTGF、Six1水平及临床意义分析

目的检测乳腺癌患者血清炎性因子、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、同源盒异型蛋白Six1水平,并分析其临床意义。方法将2013年8月至2016年8月本院收治的117例乳腺癌患者、89例乳腺良性疾病患者及70例健康体检者分别纳入乳腺癌组、乳腺良性疾病组、健康对照组,均为女性受试者。检测三组受试者血清白介素(interleukin,IL)-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、CTGF及Six1水平,并比较不同病理参数乳腺癌患者上述血清指标的差异,分析其临床意义。结果乳腺癌组患者血清IL-6、IL-8、TNF-α、CTGF、Six1水平均高于乳腺良性疾病组和健康对照组(P<0.05),IL-10水平低于乳腺良性疾病组和健康对照组(P<0.05);乳腺良性疾病组患者血清IL-6、IL-8、TNF-α、CTGF、Six1水平均高于健康对照组(P<0.05),IL-10水平低于健康对照组(P<0.05)。随着乳腺癌患者临床分期、组织学分级的增加及发生淋巴结转移,其血清IL-6、IL-8、TNF-α、CTGF、Six1水平均逐渐升高(P<0.05),IL-10水平逐渐下降(P<0.05)。肿瘤直径<2 cm患者与肿瘤直径≥2 cm患者的血清IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、CTGF水平比较均有显著差异(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,IL-6、IL-8、TNF-α、CTGF、Six1水平间互相呈正相关(P<0.05),且均与IL-10水平呈负相关(P<0.05)。结论血清炎性因子及CTGF、Six1在乳腺癌的发生、发展中均扮演了重要角色,且各指标间具有显著相关性,检测乳腺癌患者血清上述指标变化对评估病情进展、指导治疗方案、评估预后均有一定参考价值。

喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清肿瘤标志物含量、细胞增殖活力的相关性

目的:探讨喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清肿瘤标志物含量、细胞增殖活力的相关性。方法:收集在本院确诊的原发性喉癌患者48例作为观察组,同期在本院进行喉镜检查的声带息肉患者50例作为对照组。采用荧光定量PCR法检测两组患者病灶组织中Six1、MTDH、TKTL1的表达量,癌基因及抑癌基因的表达量,检测血清中肿瘤标志物的含量。采用Pearson检测评估喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清肿瘤标志物含量、细胞增殖活力的相关性。结果:观察组病灶组织中Six1、MTDH、TKTL1、c-myc、STAT3、ras mRNA的表达量以及血清中肿瘤标志物CA72-4、CA19-9、CYFRA21-1、SCC-Ag、TK1的含量均高于对照组病灶组织,LKB1、CDKN2、PTEN mRNA的表达量低于对照组病灶组织;喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清CA72-4、CA19-9、CYFRA21-1、SCC-Ag、TK1的含量及c-myc、STAT3、ras的mRNA表达量呈正相关,与LKB1、CDKN2、PTEN的mRNA表达量呈负相关。结论:喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量增高,且其具体表达量与肿瘤恶性程度直接相关。

SIX1和TGF-β对原代人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的影响

目的探讨原代培养的人喉鳞癌细胞中SIX1和转化生长因子-β(TGF-β)共同作用对上皮—间质转化(EMT)的影响及相关机制。方法收集2016年1月—2018年1月于河北医科大学第一医院耳鼻咽喉科行喉鳞癌手术患者21例,均留存切除组织,并对其进行人喉鳞癌原代细胞培养,制备SIX1、TGF-β及SIX1+TGF-β靶向siRNA,并转染至原代人喉鳞癌细胞,成功转染后分5组,即未转染组、空转组、SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组。应用免疫组化荧光法及蛋白印记Western-blot法检测细胞中SIX1、TGF-β及上皮标志物E-cadherin的蛋白表达。PCR方法检测各组细胞中SIX1、TGF-β及E-cadherin mRNA表达。结果与未转染组比较,空转组细胞中SIX1、TGF-β、E-cadherin mRNA及蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组E-cadherin蛋白及mRNA表达均上调,差异均有统计学意义(F/P=6.846/0.006、13.396/0.000、9.673/0.000)。SIX1转染组、TGF-β转染组及SIX1+TGF-β转染组3组比较,E-cadherin mRNA及其蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论人喉鳞癌细胞上皮—间质转化呈SIX1及TGF-β依赖性。SIX1和TGF-β共同作用可能是人喉鳞癌细胞上皮—间质转化的关键;SIX1和TGF-β是人喉鳞癌细胞转移潜能的重要标志。

子宫颈癌中SIX1的表达及其与细胞增殖的关系

目的探讨SIX1在子宫颈癌组织中的表达以及生物学作用。方法采用免疫组化Eli Vision两步法检测35例子宫颈癌、42例子宫颈上皮内病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及15例正常子宫颈组织中SIX1的表达及Ki-67增殖指数。应用RNA干扰技术,采用SIX1-siRNA表达质粒转染子宫颈癌Hela细胞,检测转染后子宫颈癌Hela细胞SIX1的mRNA和蛋白表达水平;应用MTT检测Hela细胞的增殖能力。结果子宫颈癌组织中SIX1阳性率高于CIN组织及正常子宫颈组织(P<0.05),且与Ki-67增殖指数呈正相关(P<0.05)。RT-PCR和Western blot检测显示转染SIX1-siRNA子宫颈癌Hela细胞中SIX1在mRNA和蛋白水平均显著下调;Hela细胞生长速度减慢。结论 SIX1可能通过促进子宫颈癌细胞的增殖,在子宫颈癌的发生、发展过程中发挥重要作用。

人参皂甙Rg3对人喉鳞癌细胞中SIX1和TGF-β诱导上皮-间质转化的作用研究

目的探讨中药单体人参皂甙Rg3对原代培养人喉鳞癌细胞上皮-间质转化的影响及SIX1和TGF-β在上皮-间质转化中的作用。方法术中留存人喉鳞状细胞癌组织,常规处理后,体外进行人喉鳞癌原代细胞培养,待细胞传代稳定后分为对照组、顺铂组、Rg3组。顺铂组加入顺铂,使其终浓度为3μg/mL;Rg3组加入Rg3,使其终浓度为300μg/mL。处理后继续培养细胞24 h,免疫组化及Western blot检测3组细胞中SIX1、TGF-β及上皮标志物E-cadherin蛋白表达情况,RT-PCR法检测各组原代细胞中SIX1 mRNA、TGF-βmRNA及E-cadherin mRNA表达情况。结果免疫组化染色显示对照组SIX1、TGF-β蛋白强阳性表达,E-cadherin蛋白弱阳性表达;顺铂组SIX1和E-cadherin蛋白阳性表达,TGF-β蛋白强阳性表达;Rg3组SIX1蛋白弱阳性表达,E-cadherin和TGF-β蛋白强阳性表达。顺铂组及Rg3组SIX1蛋白及mRNA表达水平均明显低于对照组(P均<0.05),且Rg3组均明显低于顺铂组(P均<0.05);顺铂组及Rg3组E-cadherin蛋白及mRNA表达水平均明显高于对照组(P均<0.05),且Rg3组明显高于顺铂组(P均<0.05);3组间TGF-β蛋白及mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论Rg3能够通过下调SIX1表达起到抑制人喉鳞癌细胞上皮-间质转化的作用,且其作用强于顺铂。

Six1基因异常表达促癌机制及药物靶点

Six1基因在肿瘤中表达异常增高,如乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌及白血病等。过表达的Six1调控癌细胞的增殖、抑制肿瘤细胞的凋亡,促进上皮间质转化及新血管、淋巴管生成,通过转录及蛋白互作调控相关靶基因。本文概括了Six1基因过表达的促癌机制,集中于Six1如何影响TGFβ通路及这一网络中可能的药物靶点。

Six1、TGF-β、VEGF-C在人喉鳞癌中的表达及相关性分析

目的检测Six1、转化生长因子-β(TGF-β)及其共同诱导的血管内皮生长因子(VEGF)-C蛋白在人喉鳞癌中的表达,探讨三者在喉鳞癌发生、发展、转移及预后中的意义。方法收集病理学确诊的96例手术后喉鳞癌患者的临床资料和留存石蜡标本。采用免疫组织化学和Western blot法检测喉鳞癌组织中Six1、TGF-β及VEGF-C蛋白的表达情况,并分析上述蛋白表达与喉鳞癌患者临床特征的关系。结果96例喉癌组织标本中,Six1、TGF-β、VEGF-C的阳性表达率分别为84.4%(81/96)、89.6%(86/96)和91.7%(88/96)。Six1阳性表达率在低分化、有淋巴结转移的喉鳞癌患者中较高;TGF-β阳性表达率在有淋巴结转移的喉鳞癌患者中较高,同分化程度无关;VEGF-C阳性表达率在低分化、有淋巴结转移的喉鳞癌患者中较高;人喉鳞癌组织中Six1的表达与VEGF-C表达呈正相关。结论 Six1、TGF-β、VEGF-C的高表达可能促进了喉鳞癌的淋巴转移,Six1的表达可能是VEGF-C表达变化的重要影响因素之一。联合检测Six1、TGF-β、VEGF-C对判断人喉鳞癌的转移及预后有重要临床意义。

喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清肿瘤标志物含量、细胞增殖活力的相关性

目的:探讨喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清肿瘤标志物含量、细胞增殖活力的相关性。方法:收集在本院确诊的原发性喉癌患者48例作为观察组,同期在本院进行喉镜检查的声带息肉患者50例作为对照组。采用荧光定量PCR法检测两组病灶组织中Six1、MTDH、TKTL1的表达量,癌基因及抑癌基因的表达量,检测血清中肿瘤标志物的含量。采用Pearson检测评估喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清肿瘤标志物含量、细胞增殖活力的相关性。结果:观察组患者病灶组织中Six1、MTDH、TKTL1、c-myc、STAT3、ras mRNA的表达量以及血清中肿瘤标志物CA72-4、CA19-9、CYFRA21-1、SCC-Ag、TK1的含量均高于对照组患者病灶组织,LKB1、CDKN2、PTEN mRNA的表达量低于对照组病灶组织;喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量与血清CA72-4、CA19-9、CYFRA21-1、SCC-Ag、TK1的含量及c-myc、STAT3、ras的mRNA表达量呈正相关,与LKB1、CDKN2、PTEN的mRNA表达量呈负相关。结论:喉癌组织中Six1、MTDH、TKTL1表达量增高,且其具体表达量与肿瘤恶性程度直接相关。

Six1基因在肺癌组织表达水平及RNA干扰抑制其表达后对肺癌细胞生物学特性的影响

目的探讨Six1基因在肺癌组织表达及抑制其表达后对肺癌细胞增殖凋亡的影响。方法提取肺癌及癌旁组织蛋白,Western印迹检测Six1的表达; Six1-siRNA转染人肺癌A549细胞,分为空白组和阴性对照组(NC组)、Six1-siRNA组,转染48 h后通过Western印迹检测各组细胞Six1的表达; CCK8检测Six1-siRNA转染A549细胞24～72 h的细胞增殖;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率; Western印迹检测增殖相关蛋白细胞增殖核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)家族Bcl-2相关X蛋白(Bax)及Notch1信号通路Notch1和Hes1的蛋白表达。结果 Six1在肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0. 05); Six1-siRNA转染能明显降低A549细胞Six1的表达;与空白组比较,Six1-siRNA组细胞24～72 h的细胞增殖均显著降低,在48 h的细胞凋亡率显著升高,PCNA、Notch1和Hes1蛋白表达均显著降低,Bax蛋白表达显著升高(P<0. 05)。结论 Six1在肺癌组织中高表达,通过RNA干扰抑制其表达可通过下调Notch1信号通路降低肺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,对细胞增殖凋亡的影响方式是下调PCNA和上调Bax蛋白表达。

Six1通过PI3K通路抑制肺癌细胞A549的增殖和迁移

目的研究Six1基因对人肺癌细胞A549增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法将Six1的特异小干扰RNA序列转染入A549细胞中,应用Western印迹法检测Six1在A549细胞中的蛋白水平的表达情况,应用MTT法和细胞计数观察低表达Six1对A549细胞增殖的作用,应用划痕实验和transwell侵袭小室实验检测A549细胞迁移能力的变化情况,应用Western印迹法检测PI3K信号通路蛋白的表达变化。结果在A549细胞中,特异的小干扰RNA使Six1在蛋白水平表达降低,低表达Six1的A549细胞系增殖和迁移能力下降,p-AKT的蛋白表达降低。结论在A549细胞系中Six1通过PI3K通路抑制A549细胞的侵袭和转移能力。

下调Six1基因表达对胃癌细胞生物学特性及B7-H1表达的影响

目的探讨抑制胃癌细胞Six1表达对癌细胞增殖侵袭及B7-H1表达的影响及机制。方法以人正常胃黏膜上皮细胞GES-1为对照细胞,Western印迹检测胃癌MKN45、BGC823和AGS细胞Six1的蛋白表达;参照LipofectamineTM2000转染说明将非特异性siRNA(NC组)和Six1特异性的siRNA(si-Six1组)转染BGC823细胞,并设置空白对照组,转染48 h,通过MTT及Transwell小室分别检测各组细胞活力及侵袭能力;Western印迹检测Six1、B7-H1及JAK2/STAT3信号通路磷酸化的JAK2、STAT3及下游分子细胞周期蛋白(cyclin)D1和基质金属蛋白酶(MMP)-2的蛋白表达。结果胃癌MKN45、BGC823和AGS细胞Six1的表达均显著高于在GES-1细胞表达(P<0.05);转染si-Six1的BGC823细胞Six1的蛋白表达显著低于空白对照组(P<0.05);与NC组比较,si-Six1组细胞活力及侵袭能力均显著降低,B7-H1、p-JAK2、p-STAT3、cyclinD1和MMP-2的蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论下调胃癌细胞Six1表达可降低癌细胞活力及侵袭能力,降低B7-H1表达,机制可能是抑制JAK2/STAT3信号通路。