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Small G Protein as a Novel Component of the Rice Bmssinosteroid Signal Transduction 被引量:5
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作者 Ge Zhang Xiaoguang Song +3 位作者 Hongyan Guo Yao Wu Xiaoying Chen Rongxiang Fang 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2016年第9期1260-1271,共12页
Brassinosteroids (BRs) are a class of steroid hormones that are essential for plant growth and development. The BR signal transduction pathway in the dicot model plantArabidopsis is well established, but the compone... Brassinosteroids (BRs) are a class of steroid hormones that are essential for plant growth and development. The BR signal transduction pathway in the dicot model plantArabidopsis is well established, but the components connecting the BR signaling steps in rice have not been fully explored. For example, how the BR signaling is fine-tuned in rice, especially at the BR receptor level, is largely unknown. Here we show that OsPRA2, a rice small G protein, plays a repressive role in the BR signaling pathway. Lamina inclination, coleoptile elongation, and root inhibition assays indicated that rice plants with suppressed expression of OsPRA2 were more sensitive to exogenously applied brassinolide than the wild-type plants. Conversety, rice overexpressing OsPRA2 was less sensitive to exogenous brassinolide. Further study uncovered that OsPRA2 inhibited the dephosphorylation of, and thus inactivated the transcription factor BRASSINAZOLE- RESISTANT 1 (OsBZR1). More importantly, OsPRA2 was found to co-localize with and directly bind to rice BR receptor BRASSlNOSTEROID-INSENSITIVE 1 (OsBRI1) at the plasma membrane. Additionally, the in vitro assays showed that OsPRA2 inhibits its autophosphorylation. This OsPRA2-OsBRI1 interaction led to the dissociation of OsBRI1 from its co-receptor OsBAK1, and abolished OsBRIl-mediated phosphorylation of OsBAK1. Together, these results reveal a possible working mechanism of OsPRA2 as a novel negative regu- lator on OsBRI1 and OsBZR1 and extend the knowledge about the regulatory mechanism of rice BR signaling. 展开更多
关键词 BRASSINOSTEROID small g protein plant hormone signal transduction
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Overexpression of a tobacco small G protein gene NtRop1 causes salt sensitivity and hydrogen peroxide production in transgenic plants 被引量:18
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作者 CAO YangRong1,2, LI ZhiGang1,2, CHEN Tao1,2, ZHANG ZhiGang1, ZHANG JinSong1 & CHEN ShouYi1 1 National Key Lab of Plant Genomics, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2 Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2008年第5期383-390,共8页
The small GTPases of Rop/Rho family is central regulators of important cellular processes in plants. Tobacco small G protein gene NtRop1 has been isolated; however, its roles in stress responses were unknown. In the p... The small GTPases of Rop/Rho family is central regulators of important cellular processes in plants. Tobacco small G protein gene NtRop1 has been isolated; however, its roles in stress responses were unknown. In the present study, the genomic sequence of NtRop1 was cloned, which has seven exons and six introns, similar to the Rop gene structure from Arabidopsis. The NtRop1 gene was constitutively expressed in the different organs whereas the other six Rop genes from tobacco had differential expression patterns. The expression of the NtRop1 gene was moderately induced by methyl viologen, NaCl, and ACC treatments, but slightly inhibited by ABA treatment, with no significant induction by NAA treatment. The transgenic Arabidopsis plants overexpressing the NtRop1 showed increased salt sensitivity as can be seen from the reduced root growth and elevated relative electrolyte leakage. The hydrogen peroxide production was also promoted in the NtRop1-trangenic plants in comparison with wild type plants. These results imply that the NtRop1 may confer salt sensitivity through activation of H2O2 production during plant response to salt stress. 展开更多
关键词 small g protein NtRop1 SALT sensitive hydrogen PEROXIDE
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辣椒小G蛋白CaROP的生物信息学分析
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作者 马思洁 朱天生 +1 位作者 何璐 杨叔青 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期165-175,共11页
【目的】研究辣椒内小G蛋白CaROP的生物学功能、蛋白理化性质、蛋白结构及系统发育关系。【方法】运用ProtParam、ProtScale、SignalP5.0、TMHMM、NetPhos3.1和NetCGlyc1.0等生物信息学软件分析9个CaROP蛋白的蛋白理化特性;运用SOPMA和S... 【目的】研究辣椒内小G蛋白CaROP的生物学功能、蛋白理化性质、蛋白结构及系统发育关系。【方法】运用ProtParam、ProtScale、SignalP5.0、TMHMM、NetPhos3.1和NetCGlyc1.0等生物信息学软件分析9个CaROP蛋白的蛋白理化特性;运用SOPMA和SWISS-MODEL等生物信息学软件预测分析9个CaROP蛋白的结构;运用生物信息学软件MEGA11分析9个CaROP蛋白的系统发育关系。【结果】9个CaROP蛋白的亲水性总平均值均小于0,均为亲水蛋白,其中6个为稳定的亲水蛋白;9个CaROP蛋白均无信号肽,即均为非分泌性蛋白;9个CaROP蛋白无跨膜结构域,即均非膜蛋白;9个CaROP蛋白均存在磷酸化位点,均无糖基化位点。9个CaROP蛋白的主要二级结构原件为无规则卷曲和α-螺旋,其次是β-折叠,最后是β-转角。9个CaROP蛋白聚为4个分支,其中分支Ⅰ和分支Ⅲ各包括1个CaROP蛋白。分支Ⅱ包括2个CaROP蛋白,其余5个CaROP蛋白均聚于分支Ⅳ中。【结论】9个CaROP蛋白具有完整的Rho功能域,均为非分泌性亲水蛋白。9个CaROP蛋白在系统进化树中共聚为了4个分支,其三级结构建模的预测结果也均较为理想,9个CaROP蛋白结构较稳定。 展开更多
关键词 辣椒 g蛋白ROP 蛋白理化特性 蛋白结构 系统发育关系
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基于蛋白质组学的艾滋病肺脾气虚证PBMC小G蛋白相关研究
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作者 于桢钰 张淼(指导) +3 位作者 王娟 马素娜 谢世平 许前磊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2246-2250,共5页
目的:筛选艾滋病肺脾气虚证外周血单个核细胞(PBMC)中差异表达的小G蛋白。方法:选取艾滋病肺脾气虚证患者与同地区健康人各20例,提取全血中的PBMC,采用iTRAQ-MS技术鉴定差异蛋白,以flod chang>1.5或flod chang<0.67,P<0.05为... 目的:筛选艾滋病肺脾气虚证外周血单个核细胞(PBMC)中差异表达的小G蛋白。方法:选取艾滋病肺脾气虚证患者与同地区健康人各20例,提取全血中的PBMC,采用iTRAQ-MS技术鉴定差异蛋白,以flod chang>1.5或flod chang<0.67,P<0.05为标准筛选。结果:与健康对照组相比,艾滋病肺脾气虚证组中9个小G蛋白差异表达上调,分别为Rho家族的Rac1、Cdc42、RhoA,Rab家族的Rab7A、Rab8A、Rab13、Rab21、Rab27B,Rap家族的Rap2B。结论:艾滋病肺脾气虚证与小G蛋白Rho、Rab、Rap等家族关系密切,应进一步研究其相关机制。 展开更多
关键词 g蛋白 艾滋病 肺脾气虚证 蛋白质组学
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蔷薇科小G蛋白ROP的鉴定、分类及特征分析
5
作者 刘礼瑶 熊仁次 +2 位作者 何璐 马思洁 杨叔青 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2023年第S01期8-17,共10页
为全面系统地挖掘蔷薇科小G蛋白ROP,在分子水平上为蔷薇科抗病育种提供候选基因。物种系统进化关系分析、ROP蛋白全基因组筛查、Rho功能域分析、蛋白聚类分析及理化性质分析分别运用了NCBI、iTOLv6、GDR、SMART、MEGA 11.0和Maximum-lik... 为全面系统地挖掘蔷薇科小G蛋白ROP,在分子水平上为蔷薇科抗病育种提供候选基因。物种系统进化关系分析、ROP蛋白全基因组筛查、Rho功能域分析、蛋白聚类分析及理化性质分析分别运用了NCBI、iTOLv6、GDR、SMART、MEGA 11.0和Maximum-likelihood algorithm1及Protparam和Expasy等数据库及生物信息学在线软件。11种蔷薇科植物聚为6个亚支;11种蔷薇科植物中筛查到80个ROP蛋白;80个蔷薇科ROP蛋白和11个拟南芥ROP蛋白聚为6个进化分支;蛋白长度、等电点、分子量、脂肪指数及不稳定指数分别为143~215 aa、5.59~9.63、15.73599~23.87859 ku、85.28~94.95和27.96~57.14。80个蔷薇科ROP蛋白在草莓中数量最多,甜樱桃最少;蔷薇科ROP蛋白分布于第Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ分支中,拟南芥ROP蛋白分布于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ分支中,即分支Ⅵ为蔷薇科特异性分支,分支Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ为拟南芥特异性分支。 展开更多
关键词 蔷薇科 g蛋白ROP 全基因组筛查 Rho功能域 系统进化关系 蛋白理化特征
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Inhibitory Effect of MiR-449b on Cancer Cell Growth and Invasion through LGR4 in Non-Small-Cell Lung Carcinoma 被引量:8
6
作者 Dong YANG Jin-song LI +2 位作者 Qian-yu XU Tian XIA Jia-hong XIA 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2018年第4期582-589,共8页
Non-small-cell lung carcinoma (NSCLC) is one of the most frequently diagnosed malignancies worldwide. Previous studies have shown that microRNA-449b (miR-449b) functions as a tumor suppressor in many cancers. Howe... Non-small-cell lung carcinoma (NSCLC) is one of the most frequently diagnosed malignancies worldwide. Previous studies have shown that microRNA-449b (miR-449b) functions as a tumor suppressor in many cancers. However, the role of miR- 449b in NSCLC is still unknown. In the present study, miR-449b was significantly down- regulated in NSCLC samples and cell lines. Bioinformatics analysis revealed that 3'-UTR region of leucine rich repeat containing G protein-coupled receptor 4 (LGR4) mRNA had putative complementary sequences to miR-449b, which was further confirmed by the luciferase assay. Western blotting showed that restoration of miR-449b in NSCLC cells decreased the expression of LGR4. Interestingly, over-expression of miR-449b inhibited growth and invasion of NSCLC cells in vitro. Furthermore, ectopic expression of LGR4 reversed miR-449b-suppressed proliferation and invasion of NSCLC cells. Therefore, the data of the present study demonstrate that miR-449b inhibits tumor cell growth and invasion by targeting LGR4 in NSCLC. 展开更多
关键词 non-small-cell lung carcinoma microRNA-449b leucine rich repeat containing g protein-coupled receptor 4 growth INVASION
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脑小血管病患者外周血GPR30 mRNA、PLR、NPAS4表达及与认知功能、短期预后的关系 被引量:4
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作者 岳丽 孙佳瑶 刘龙芳 《临床误诊误治》 CAS 2023年第1期69-74,共6页
目的探讨脑小血管病(CSVD)患者外周血G蛋白耦联受体(GPR30)mRNA、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、神经元PAS结构域蛋白4(NPAS4)表达及与认知功能、短期预后的关系。方法选取2019年1月—2021年2月收治的CSVD 200例,依据是否发生认知功能障... 目的探讨脑小血管病(CSVD)患者外周血G蛋白耦联受体(GPR30)mRNA、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、神经元PAS结构域蛋白4(NPAS4)表达及与认知功能、短期预后的关系。方法选取2019年1月—2021年2月收治的CSVD 200例,依据是否发生认知功能障碍分为发生组85例与未发生组115例。比较2组临床资料、外周血GPR30 mRNA、PLR、NPAS4表达水平,分析外周血GPR30 mRNA、PLR、NPAS4表达与CSVD患者认知功能障碍的关系,评价其对CSVD患者认知功能障碍的诊断价值及与CSVD发生认知功能障碍患者短期预后不良的关系。结果2组文化程度、腔隙性脑梗死病灶数目、脑白质病变及脑血管病面积比较差异有统计学意义(P<0.01);发生组外周血GPR30 mRNA水平低于未发生组,PLR、NPAS4表达水平高于未发生组(P<0.01);外周血GPR30 mRNA、PLR、NPAS4表达与CSVD患者认知功能障碍显著相关(P<0.01);外周血GPR30 mRNA、PLR、NPAS4表达联合诊断曲线下面积最大;CSVD发生认知功能障碍患者外周血GPR30 mRNA、PLR、NPAS4高表达时,短期预后不良发生风险是低表达的0.274、3.949、3.276倍。结论CSVD患者外周血GPR30 mRNA表达水平下调,PLR、NPAS4表达水平上调,且其表达与认知功能障碍及短期预后有关,可用于CSVD患者认知功能障碍诊断及短期预后预测。 展开更多
关键词 脑小血管病 认知功能 短期预后 g蛋白耦联受体 血小板与淋巴细胞比值 神经元PAS结构域蛋白4
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梭梭小G蛋白基因HaRAN1克隆与表达分析 被引量:5
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作者 史胜青 张守攻 +2 位作者 肖文发 齐力旺 江泽平 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1939-1945,共7页
采用cDNA-AFLP技术从梭梭中获得了一个干旱诱导的TDF序列,编码RAN基因的cDNA片段,利用5′-RACE和3′-RACE技术克隆到一个1083bp的全长基因,含有一个编码221个氨基酸的开放阅读框,具有结合GTP/GDP的4个保守结构域,属于RAN1亚家族,命名为H... 采用cDNA-AFLP技术从梭梭中获得了一个干旱诱导的TDF序列,编码RAN基因的cDNA片段,利用5′-RACE和3′-RACE技术克隆到一个1083bp的全长基因,含有一个编码221个氨基酸的开放阅读框,具有结合GTP/GDP的4个保守结构域,属于RAN1亚家族,命名为HaRAN1。Blast分析表明,HaRAN1与单、双子叶植物(毛果杨、拟南芥、小麦、水稻)的一致性高达95%~96%以上;与哺乳动物(人类)和真菌(烟曲霉)的一致性高达88%以上;半定量RT-PCR分析显示,干旱、PEG和NaCl胁迫明显诱导HaRAN1基因的表达。结果表明,Ha-RAN1基因编码蛋白在物种间具有高度保守性,可能在梭梭适应极端干旱的沙漠生境中起重要作用。 展开更多
关键词 梭梭 RAN1 g蛋白 基因克隆
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蒺藜苜蓿小G蛋白ROP在共生过程中的作用:1.MtROP5的克隆和表达分析 被引量:4
9
作者 刘伟 陈爱民 +3 位作者 冯利兴 曹连莆 孙杰 王彦章 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1355-1362,共8页
【目的】对蒺藜苜蓿ROP进行克隆与表达分析,为深入研究ROP在共生互作过程中的功能提供理论依据。【方法】通过比较基因组学和RT-PCR方法克隆了蒺藜苜蓿的MtROP5,采用半定量RT-PCR方法检测了MtROP5在蒺藜苜蓿不同组织中的表达水平,采用... 【目的】对蒺藜苜蓿ROP进行克隆与表达分析,为深入研究ROP在共生互作过程中的功能提供理论依据。【方法】通过比较基因组学和RT-PCR方法克隆了蒺藜苜蓿的MtROP5,采用半定量RT-PCR方法检测了MtROP5在蒺藜苜蓿不同组织中的表达水平,采用荧光实时定量PCR方法检测了MtROP5在根瘤菌侵染宿主植物根系后72h内不同时间阶段的表达水平。【结果】从蒺藜苜蓿中克隆了含有MtROP5完整编码区的cDNA序列,长度826bp,编码197个氨基酸。序列分析表明,MtROP5编码的蛋白具有典型的ROP蛋白特征结构域,与其它几种植物中ROP蛋白具有高度的同源性和相似性。半定量RT-PCR分析表明,MtROP5在蒺藜苜蓿的根、茎、叶、花、根瘤中均有表达,茎和花中表达量最高,根和根瘤中次之,在叶中表达最弱。荧光实时定量PCR分析表明,与未接种根瘤菌的对照处理相比较,MtROP5在根瘤菌侵染的72h内不同时间阶段的根系中都增强表达。【结论】克隆的cDNA序列是一个蒺藜苜蓿小G蛋白ROP,推测MtROP5可能在共生互作的早期信号传导过程中行使一定的调控作用。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 g蛋白 ROP 基因克隆 表达分析
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蒺藜苜蓿小G蛋白ROP在共生过程中的作用:2.MtROP5调节根毛生长发育的功能分析 被引量:4
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作者 刘伟 陈爱民 +3 位作者 冯利兴 曹连莆 孙杰 王彦章 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1563-1570,共8页
【目的】对蒺藜苜蓿MtROP5的功能进行研究,为阐明植物ROP在共生互作过程中的调控机制奠定基础。【方法】采用PCR方法克隆MtROP5的启动子序列,并构建了MtROP5的相关表达载体。利用发根农杆菌介导的遗传转化方法,对MtROP5启动子的表达模... 【目的】对蒺藜苜蓿MtROP5的功能进行研究,为阐明植物ROP在共生互作过程中的调控机制奠定基础。【方法】采用PCR方法克隆MtROP5的启动子序列,并构建了MtROP5的相关表达载体。利用发根农杆菌介导的遗传转化方法,对MtROP5启动子的表达模式以及MtROP5的功能进行了分析。【结果】克隆了MtROP5翻译起始位点上游2.1kb左右预测的启动子序列,MtROP5启动子驱动GUS在根系的各个部位中都有表达,在维管束组织和侧根起始的分生组织中表达较强,并且其启动子转录活力在受到根瘤菌侵染后诱导增强表达;MtROP5的过量表达和组成型激活突变均能显著促进根毛的伸长,相比对照转化根系,根毛长度分别增长了74.6%和54.8%,而通过RNAi干扰降低MtROP5的转录水平后,根毛的生长发育明显受到了抑制,其转化根系的根毛缩短了47.6%,但MtROP5显著性失活突变转化根系的根毛长度与对照转化根系没有显著差异。【结论】蒺藜苜蓿MtROP5调节了根毛的生长发育,并可能参与宿主植物与根瘤菌共生互作早期的信号传导过程。 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 g蛋白 ROP 共生互作 根毛生长发育
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小G蛋白Rab2基因参与小麦抗叶锈病反应的研究 被引量:10
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作者 杨静静 李星 +1 位作者 李亚宁 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期1-5,共5页
为了解叶锈菌侵染小麦后小G蛋白Rab2基因的表达情况,明确其与抗病性的关系,从分子水平上探讨小麦的抗叶锈病机制。以普通六倍体小麦近等基因系TcLr1和叶锈菌小种05-22-64①和05-8-63①为试验材料,构建小麦亲和与非亲和组合,利用实时定量... 为了解叶锈菌侵染小麦后小G蛋白Rab2基因的表达情况,明确其与抗病性的关系,从分子水平上探讨小麦的抗叶锈病机制。以普通六倍体小麦近等基因系TcLr1和叶锈菌小种05-22-64①和05-8-63①为试验材料,构建小麦亲和与非亲和组合,利用实时定量PCR技术对小麦小G蛋白Rab2基因的表达情况进行检测。结果表明:在小麦叶锈菌侵染过程中,Rab2基因主要在侵染的前期表达迅速,随着时间的推移表达量有所下降。非亲和叶锈菌菌株可以诱导小G蛋白Rab2基因表达量的升高,而亲和叶锈菌菌株抑制小G蛋白Rab2基因的表达。由此表明,小G蛋白可能与寄主和病原物的亲和程度有着直接的关系。 展开更多
关键词 小麦叶锈病 g蛋白 Rab2基因 实时定量PCR
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小麦小G蛋白Tarab5B基因全长cDNA克隆及表达特性的初步分析 被引量:5
12
作者 陈秀珍 周荣华 贾继增 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期897-901,共5页
通过对白粉病菌诱导的小麦叶片cDNA文库的测序,获得1个与水稻Rab5B基因一致性达89%的序列。以该序列为信息探针,筛选小麦EST数据库并进行电子拼接。根据拼接结果设计引物,利用RT PCR方法获得了1个小麦中尚未鉴定的全长cDNA克隆Tarab5B。... 通过对白粉病菌诱导的小麦叶片cDNA文库的测序,获得1个与水稻Rab5B基因一致性达89%的序列。以该序列为信息探针,筛选小麦EST数据库并进行电子拼接。根据拼接结果设计引物,利用RT PCR方法获得了1个小麦中尚未鉴定的全长cDNA克隆Tarab5B。Tarab5B基因编码的蛋白具有结合GTP/GDP的4个保守结构域以及Rab家族成员所特有的结构域。同源分析表明,该基因属于Rab5B亚族。麦类Rab5B蛋白的GDSGVGKS、DTAGQE、NKAD、ETSA和MGC SSS5个结构域在进化上非常保守,而YYRGA结构域及其邻近的C端6个氨基酸残基在小麦材料间同源性很低。RT PCR检测显示,抗、感两个材料Tarab5B基因在接种后24h和未接种24h的表达水平基本相同;在接种后1h、4h、7h、12h,抗、感两个材料间Tarab5B基因的表达水平有一定差异。 展开更多
关键词 小麦 g蛋白 基因克隆 结构域 白粉病
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一个水稻小G蛋白OsRan1的克隆及表达分析 被引量:3
13
作者 席江 杜志如 +4 位作者 徐永菊 张琦 万佳 江斌 徐正君 《中国农学通报》 CSCD 2008年第4期109-114,共6页
逆境对于水稻产量和品质有很大影响,研究在逆境下水稻基因的表达变化对于研究水稻抗逆有着重要意义。运用荧光差异显示(Fluorescence Differential Display,FDD)技术,从低温处理的水稻中克隆到OsRAN1基因并通过半定量PT-PCR分析该基因... 逆境对于水稻产量和品质有很大影响,研究在逆境下水稻基因的表达变化对于研究水稻抗逆有着重要意义。运用荧光差异显示(Fluorescence Differential Display,FDD)技术,从低温处理的水稻中克隆到OsRAN1基因并通过半定量PT-PCR分析该基因在低温和高盐逆境下的表达。该基因cDNA序列全长为984bp,含有一个编码221个氨基酸残基的开放阅读框,推测分子量为25.0KD,此氨基酸序列具有GTPase活性区域,属于小G蛋白Ran亚家族,通过氨基酸相似性比对发现,Ran家族氨基酸序列高度保守,OsRAN1与TaRAN1和AtRAN1相似性分别达到98.19%和92.76%。通过半定量PT-PCR分析,发现在低温胁迫下,OsRAN1在根和叶鞘中表达量均有增加,尤其是高盐胁迫下根中OsRAN1表达量有迅速升高然后降低的变化。推测该基因在水稻逆境应答中起着重要作用。 展开更多
关键词 水稻 RAN g蛋白 荧光差异显示 克隆 表达
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辣椒小G蛋白CaRab11基因全长cDNA的分离及序列分析 被引量:1
14
作者 赖燕 林金辉 +4 位作者 陈成聪 官德义 牟少亮 邱爱连 何水林 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1021-1025,共5页
通过分析克隆获得的辣椒Rab11全长cDNA及其编码的氨基酸序列结构特征,为进一步研究辣椒Rab11功能奠定基础。通过对辣椒均一化cDNA文库的筛选分离获得了一个与葡萄Rab11小G蛋白VvRabA1f高度同源的全长cDNA,命名为CaRab11。序列分析结果表... 通过分析克隆获得的辣椒Rab11全长cDNA及其编码的氨基酸序列结构特征,为进一步研究辣椒Rab11功能奠定基础。通过对辣椒均一化cDNA文库的筛选分离获得了一个与葡萄Rab11小G蛋白VvRabA1f高度同源的全长cDNA,命名为CaRab11。序列分析结果表明:该cDNA包含有1 164 bp的完整开放阅读框,编码217个氨基酸。该蛋白含有Rab GTP酶超家族保守的RabSF模体;Rab亚家族蛋白所特有的五个氨基酸序列RabF模体(RabF1-RabF5);参与GTP/Mg++结合及GTP水解的G结构域(G1-G5:GDSGVGKS,T,DTAGQE,GNKADL及ETSAL);两个构象变构域(SwitchⅠ和SwitchⅡ)及与异戊二烯化相关的CCX序列。氨基酸同源性及进化分析同样表明CaRab11为辣椒小G蛋白Rab11家族新成员。 展开更多
关键词 辣椒 g蛋白 基因克隆 序列分析
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辣椒小G蛋白CaRab8基因全长cDNA的分离及表达特征的初步分析 被引量:1
15
作者 赖燕 肖翔 +4 位作者 林菁 虞露 陈桂信 官德义 何水林 《热带作物学报》 CSCD 2011年第6期1111-1115,共5页
通过对辣椒均一化cDNA文库的筛选,分离获得了一个与烟草RAB8-2基因编码的蛋白有着高度同源性的cDNA阳性克隆,命名为CaRab8。测序结果表明,该cDNA长度为961 bp,包含有651 bp的完整的开放阅读框,推测编码一个217个氨基酸的蛋白,该蛋白具有... 通过对辣椒均一化cDNA文库的筛选,分离获得了一个与烟草RAB8-2基因编码的蛋白有着高度同源性的cDNA阳性克隆,命名为CaRab8。测序结果表明,该cDNA长度为961 bp,包含有651 bp的完整的开放阅读框,推测编码一个217个氨基酸的蛋白,该蛋白具有GTP/GDP结合活性必需的保守域和包括YYRGA在内的Rab家族成员特有的5个结构域。实时定量RT-PCR结果表明,CaRab8基因的表达水平在茉莉酸甲酯(MeJA)的诱导下在短时间内呈上调表达,在相应时间点受水杨酸(SA)诱导下调表达。 展开更多
关键词 辣椒 g蛋白 实时定量RT—PCR
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基于GST-pull down的小G蛋白Rac1活性检测体系的建立 被引量:1
16
作者 甄诚 陈亮 +2 位作者 柏兆方 王芊艺 满江红 《生物技术通讯》 CAS 2011年第4期540-543,共4页
目的:根据人PAK1基因的p21结合结构域(PBD)能够特异结合GTP-Rac1的特性,构建GST-PBD原核表达质粒,并利用GST-pull down方法检测真核细胞内小G蛋白Rac1的活性。方法:将人PAK1基因的PBD结构域克隆到pGEX原核表达载体上,经诱导纯化得到GST-... 目的:根据人PAK1基因的p21结合结构域(PBD)能够特异结合GTP-Rac1的特性,构建GST-PBD原核表达质粒,并利用GST-pull down方法检测真核细胞内小G蛋白Rac1的活性。方法:将人PAK1基因的PBD结构域克隆到pGEX原核表达载体上,经诱导纯化得到GST-PBD融合蛋白,并通过GST-pull down实验评估该方法的特异性和准确性。结果:pGEX-PBD质粒构建成功;纯化得到的GST-PBD融合蛋白能够特异性地与激活形式的Rac1(GTP-Rac1)结合,并且能够准确反映血小板衍生生长因子刺激下细胞内Rac1的激活过程。结论:GST-PBD融合蛋白及其整套GST-pull down检测体系能方便有效地检测细胞内Rac1的活性。 展开更多
关键词 RAC1 g蛋白 gST-pulldown
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小G蛋白与动脉粥样硬化 被引量:1
17
作者 李小林 关瑞锦 《心血管病学进展》 CAS 2008年第4期576-579,共4页
随着他汀类药物的多效性或降脂外作用被广泛研究,小G蛋白在心血管疾病中的作用越来越来受到关注。小G蛋白在调节血管内皮细胞功能、炎症细胞浸润和平滑肌细胞收缩、迁移、增殖以及基因表达等过程发挥重要作用,越来越多证据表明小G蛋白... 随着他汀类药物的多效性或降脂外作用被广泛研究,小G蛋白在心血管疾病中的作用越来越来受到关注。小G蛋白在调节血管内皮细胞功能、炎症细胞浸润和平滑肌细胞收缩、迁移、增殖以及基因表达等过程发挥重要作用,越来越多证据表明小G蛋白在动脉粥样硬化/再狭窄、血管痉挛、缺血再灌注损伤、肺动脉高压以及心肌肥厚等过程中扮演重要角色,靶向干预小G蛋白例如他汀或法舒地尔等为治疗这些心血管疾病提供一个新策略,现就小G蛋白与动脉粥样硬化的关系作一综述。 展开更多
关键词 g蛋白 动脉粥样硬化 鸟苷三磷酸酶 他汀 RHO RAS
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靶向G蛋白偶联受体91的小发夹RNA慢病毒载体的构建及功能初步检测 被引量:1
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作者 李婷婷 胡健艳 吴强 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第8期705-709,共5页
目的构建靶向大鼠G蛋白偶联受体91(G protein-coupled receptor 91,GPR91)基因的小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,探讨GPR91受体对高糖诱导下血管内皮生长因子(vascular endothlial growth factor,VEGF)释放的调节作用。... 目的构建靶向大鼠G蛋白偶联受体91(G protein-coupled receptor 91,GPR91)基因的小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,探讨GPR91受体对高糖诱导下血管内皮生长因子(vascular endothlial growth factor,VEGF)释放的调节作用。方法设计合成4对针对大鼠GPR91(NM_001001518)的特异性单链寡核苷酸链,两端分别引入Age I和EcoR I酶切位点,退火后得到小片段带黏性末端的双链DNA,克隆入慢病毒载体pGCSIL-GFP,行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和DNA测序鉴定重组体。将各慢病毒shRNA干扰载体和辅助包装载体共转染293T细胞,收集病毒颗粒并行浓缩滴度检测。将各慢病毒载体转染RGC-5细胞后,Western blot法筛选有效的慢病毒shRNA干扰载体。使用45 mmol·L-1的高糖刺激RGC-5细胞24 h,用ELISA法观察干扰GPR91后VEGF的表达情况。结果 PCR及DNA测序结果均显示慢病毒载体pGCSIL-GFP-shGPR91构建正确;包装病毒颗粒后,pGCSIL-GFP-shGPR91-1、2、3、4组病毒浓缩液的滴度依次为1.5×109 TU·mL-1、1.5×109 TU·mL-1、3.0×109 TU·mL-1、3.0×109 TU·mL-1。将慢病毒颗粒感染RGC-5细胞后,Western blot检测显示NC组GPR91蛋白(0.60±0.08)空白组(0.62±0.07)的表达无明显差异(F=49.03,P>0.05)。而与空白组相比,4个慢病毒载体组(0.48±0.05、0.34±0.06、0.30±0.04和0.11±0.06)均能不同程度沉默GPR91的表达,差异有统计学意义(F=49.03,P<0.01),其中pGCSIL-GFP-shGPR91-3干扰效率最高。ELISA结果显示空白组、高糖组、高糖+NC组、高糖+pGCSIL-GFP-shGPR91-3组VEGF蛋白表达分别为(25.63±4.52)pg·mL-1、(72.74±8.24)pg·mL-1、(71.68±8.31)pg·mL-1和(46.77±6.21)pg·mL-1,表明GPR91病毒干扰载体可显著降低高糖引起的VEGF分泌,差异有统计学意义(F=30.852,P<0.01)。结论本实验成功构建了靶向大鼠GPR91的shRNA慢病毒载体并进行病毒颗粒包装。所构建的慢病毒载体能够降低高糖作用下的VEGF表达,为进一步研究GPR91基因在糖尿病视网膜病变中的作用机制和动物基因治疗奠定基础。 展开更多
关键词 小发夹RNA 慢病毒属 g蛋白偶联受体91 糖尿病性视网膜病变 血管内皮生长因子
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人肺腺癌细胞系中小G蛋白Rho-GDP解离抑制因子α的克隆及序列分析
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作者 韩昱晨 贾心善 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期490-492,共3页
目的 :研究人肺腺癌细胞系中小G蛋白Rho解离抑制因子α基因结构的改变。方法 :应用RT PCR扩增Rho解离抑制因子αcDNA ,并进行测序。结果 :在人肺腺癌细胞系AGZY 83α 中 ,除Rho解离抑制因子基因α存在外 ,还存在缺失型的Rho解离抑制因子... 目的 :研究人肺腺癌细胞系中小G蛋白Rho解离抑制因子α基因结构的改变。方法 :应用RT PCR扩增Rho解离抑制因子αcDNA ,并进行测序。结果 :在人肺腺癌细胞系AGZY 83α 中 ,除Rho解离抑制因子基因α存在外 ,还存在缺失型的Rho解离抑制因子αcDNA ,即在第 5个外显子有 78bp的缺失。结论 :在人肺腺癌细胞系AGZY 83α 展开更多
关键词 g蛋白 Rho-gDP解离抑制因子α 突变
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植物G蛋白的种类及异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用 被引量:1
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作者 沈雪梅 《安徽农学通报》 2009年第15期35-37,236,共4页
近年来,植物G蛋白(包括异三聚体G蛋白、小G蛋白及超大G蛋白)的存在受到人们的普遍关注,同时它在细胞信号转导过程中起着重要作用,已成为人们研究信号调控的热点问题。阐述了已发现的植物G蛋白的种类,总结了异三聚体G蛋白在植物细胞信号... 近年来,植物G蛋白(包括异三聚体G蛋白、小G蛋白及超大G蛋白)的存在受到人们的普遍关注,同时它在细胞信号转导过程中起着重要作用,已成为人们研究信号调控的热点问题。阐述了已发现的植物G蛋白的种类,总结了异三聚体G蛋白在植物细胞信号转导中的作用。 展开更多
关键词 异三聚体g蛋白 g蛋白 细胞信号转导
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