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金黄色葡萄球菌小菌落突变体诱导筛选及特性研究 被引量:1
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作者 周宇 李佳玉 +4 位作者 王乐 贾晓爽 高思琦 王潇 焦健 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期147-157,共11页
稳定型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)小菌落突变体(small colony variants,SCVs)的获得,为抗SCVs药物的研究提供了重要的生物学材料。以S.aureus ATCC43300为出发菌株,利用低质量浓度(1.25~5.00µg·mL^(-1))庆大霉素... 稳定型金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)小菌落突变体(small colony variants,SCVs)的获得,为抗SCVs药物的研究提供了重要的生物学材料。以S.aureus ATCC43300为出发菌株,利用低质量浓度(1.25~5.00µg·mL^(-1))庆大霉素二次诱导技术获得稳定型SCVs,并对其特性进行分析。结果表明,1/2×最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)及2×MIC庆大霉素分别诱导6和12 h,可获得稳定型SCVs。SCVs生长缓慢,培养24 h可见较小菌落,培养7 h至生长对数期;对庆大霉素敏感性及产生物膜能力分别提高3和1倍;传代20次后恢复突变率为0%,抗逆性、药物敏感性、抗凝血性均增强,SigB调控系统及生物膜相关基因呈上调趋势,Agr调控系统及毒力因子下调。该方法的成功建立为SCVs的获得提出新的筛选策略,并为开展SCVs致病机理研究及新型抗SCVs药物研发提供稳定型受试菌株。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 小菌落突变体 庆大霉素
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食源性致病菌小菌落突变体表型变化及其机制研究进展
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作者 贲蕾洁 朱雨琪 +5 位作者 施菊萍 吴瑜凡 秦晓杰 李卓思 董庆利 王翔 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期317-323,共7页
食源性致病菌小菌落突变体(small colony variants,SCV)表型和遗传的变化使其具有更好的环境压力适应性。与亲本菌株相比,其具有生长缓慢、菌落形态及生化特征不明显,抗生素耐药性增加等特点,给食品安全带来新的挑战。目前,在多种食源... 食源性致病菌小菌落突变体(small colony variants,SCV)表型和遗传的变化使其具有更好的环境压力适应性。与亲本菌株相比,其具有生长缓慢、菌落形态及生化特征不明显,抗生素耐药性增加等特点,给食品安全带来新的挑战。目前,在多种食源性致病菌中有小菌落突变体的发现,文章就金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和单增李斯特氏菌等常见食源性致病菌小菌落突变体获得途径、表型变化及产生机制进行综述,以期为小菌落突变体危害识别提供信息并为降低其带来的食品安全风险提供参考。 展开更多
关键词 食源性致病菌 小菌落突变体 获得途径 表型特征
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多组学诠释食源性致病菌小菌落变种形成分子机制研究进展
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作者 关鹏 冻梓杰 +4 位作者 王淑莉 姬生鑫 王晓杰 艾志录 索标 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第14期52-58,共7页
食源性致病菌在环境胁迫下可形成小菌落变种(small colony variants,SCVs),被认为是其抗逆存活的重要调控方式之一。SCVs的形成及防治给食品安全领域带来重大挑战,因为与正常细胞相比,SCVs通常具有较强的耐药性,而且能够抵抗宿主细胞的... 食源性致病菌在环境胁迫下可形成小菌落变种(small colony variants,SCVs),被认为是其抗逆存活的重要调控方式之一。SCVs的形成及防治给食品安全领域带来重大挑战,因为与正常细胞相比,SCVs通常具有较强的耐药性,而且能够抵抗宿主细胞的清除并存活数十年。当条件适宜时,SCVs细胞甚至能够在保持耐药性的同时,重新转变为快速生长细胞。随着生物技术的高速发展,多组学方法在微生物抗逆分子机制研究领域的应用越来越常见。基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学和联合组学等手段大大增加研究者对细胞中基因调控及蛋白质表达关键途径的理解。本文就近年来食源性致病菌SCVs诱导途径及多组学诠释SCVs分子机制研究进展进行综述,并对冷链食品中金黄色葡萄球菌SCVs形成机制及低温耐受性研究进行展望,以期为建立针对性的安全控制技术,抑制食品加工中致病菌SCVs形成提供参考。 展开更多
关键词 食源性致病菌 小菌落突变体 多组学 分子机制
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金黄色葡萄球菌小菌落变异体在关节假体周围感染中的分子病原学特征
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作者 魏莹 刘颖 +1 位作者 刘薇 郭宇 《微生物与感染》 CAS 2023年第2期65-74,共10页
本研究旨在了解关节假体周围感染(periprosthetic joint infection,PJI)中金黄色葡萄球菌小菌落变异体(Staphylococcus aureus small colony variant,SASCV)的毒力、耐药基因携带情况及分子型别,为探讨其致病机制提供基础数据。收集从19... 本研究旨在了解关节假体周围感染(periprosthetic joint infection,PJI)中金黄色葡萄球菌小菌落变异体(Staphylococcus aureus small colony variant,SASCV)的毒力、耐药基因携带情况及分子型别,为探讨其致病机制提供基础数据。收集从19例PJI患者关节液中分离出的SASCV,进行全基因组测序、生物信息学分析及数据库比对,以了解其毒力相关基因和耐药基因的携带情况;采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分析菌株型别,并构建系统发育树。结果显示,19株SASCV中,有8株与正常形态金黄色葡萄球菌混合生长。对全部27株菌株进行全基因组测序,基因组长度为2696437~3011803 bp,G+C含量为(32.8±0.05)%。共检出23种毒力相关基因:其中14种黏附素相关基因的检出率较高,为21.1%~100.0%;4种与免疫逃逸相关基因的检出率为36.8%~68.4%;5种溶血及杀白细胞素基因也有检出。耐药基因检出12种:blaZ检出率为78.9%(15/19);mecA检出率为31.6%(6/19);大环内酯类及氨基糖苷类抗生素耐药基因也有不同比例的检出。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中耐药基因的检出数量高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。MLST分析结果显示,19株SASCV共分10个型别。8组表型混合生长的菌株中,2组SCV与正常表型菌株分属不同型别,且毒力及耐药基因差异较大,其余6组为同一型别。本研究还发现,PJI中SASCV的生物膜相关黏附素基因检出率高,耐药基因中mecA检出率较高,MLST以ST59最多,其次为ST398和ST25。SCV与正常表型菌株混合生长时可分属不同型别。 展开更多
关键词 小菌落变异体 关节假体周围感染 金黄色葡萄球菌 全基因组测序
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纳米凝胶提高硫酸头孢喹肟抗菌活性研究
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作者 罗万和 周继萍 +5 位作者 鞠牧洁 刘金环 买热亚木古力·尼吉米丁 古丽乃再尔·艾麦提 弓超 韩俊成 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第3期62-67,共6页
为治疗金黄色葡萄球菌小菌落变异体(SCVs)感染,分别以羧甲基纤维素钠和明胶为阴、阳离子载体,通过静电作用制备一种硫酸头孢喹肟纳米凝胶。以溶胀率为指标,筛选最优配方;以外观性状、扫描电镜图、包封率(EE)、载药量(LC)、粒径和Zeta电... 为治疗金黄色葡萄球菌小菌落变异体(SCVs)感染,分别以羧甲基纤维素钠和明胶为阴、阳离子载体,通过静电作用制备一种硫酸头孢喹肟纳米凝胶。以溶胀率为指标,筛选最优配方;以外观性状、扫描电镜图、包封率(EE)、载药量(LC)、粒径和Zeta电位为指标,进行质量评价;通过溶血性试验进行安全性评价;采用微量肉汤稀释法评价硫酸头孢喹肟原料药、市售硫酸头孢喹肟注射液和硫酸头孢喹肟纳米凝胶对SCVs的抗菌活性。结果表明,当明胶500 mg、羧甲基纤维素钠200 mg、三聚磷酸钠0.5 mg时为最优配方,为均一淡黄色;扫描电镜图显示硫酸头孢喹肟被明胶、羧甲基纤维素钠和三聚磷酸钠所交联的网络结构所包裹,网络大小均一;平均粒径为(75.72±2.62)nm, Zeta电位为(-0.010 2±0.001 4)mV,EE和LC分别为(85.68±2.41)%和(22.35±1.93)%;且硫酸头孢喹肟纳米凝胶在3 h内均未有溶血现象发生;硫酸头孢喹肟原料药、市售硫酸头孢喹肟注射液和硫酸头孢喹肟纳米凝胶对SCVs的最小抑菌浓度分别为2、1和0.5μg/mL。故本研究所制备的硫酸头孢喹肟纳米凝胶具有较小的纳米尺寸和良好的生物相容性,可为提高由SCVs引起的感染性疾病疗效提供依据。 展开更多
关键词 纳米凝胶 小菌落变异体 硫酸头孢喹肟 抗菌活性 制备
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金黄色葡萄球菌在人工关节感染中的分子型别与耐药基因特征
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作者 梁玉龙 程翔 +2 位作者 魏莹 刘颖 郭宇 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第23期2886-2892,共7页
目的探讨导致人工关节假体周围感染(PJI)的金黄色葡萄球菌的抗菌药物耐药率、耐药基因和分子型别,为抗感染治疗提供依据和流行病学信息。方法收集2017年1月至2022年1月该院80例髋膝PJI患者关节液及假体周围组织中分离的金黄色葡萄球菌,... 目的探讨导致人工关节假体周围感染(PJI)的金黄色葡萄球菌的抗菌药物耐药率、耐药基因和分子型别,为抗感染治疗提供依据和流行病学信息。方法收集2017年1月至2022年1月该院80例髋膝PJI患者关节液及假体周围组织中分离的金黄色葡萄球菌,进行抗菌药敏试验,分析其对骨科常用抗菌药物的耐药率;对菌株进行全基因组测序和生物信息学分析,研究其耐药基因携带情况;采用多点位序列分型(MLST)进行菌株分型和系统发育分析,比较主要流行分子型别对抗菌药物的耐药差异。结果该研究共收集80株金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为26.25%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)检出率为73.75%。耐药性分析结果显示,MRSA对红霉素、克林霉素、氟喹诺酮类药物和四环素的耐药率较高,未发现对万古霉素、利奈唑胺和替加环素耐药菌株。95%的金黄色葡萄球菌携带耐药基因,其中β-内酰胺类耐药基因检出率最高(92.50%)。MRSA平均携带4.3种耐药基因,MSSA平均携带2.2种。金黄色葡萄球菌小菌落变异体(SCVs)检出率为23.75%。MLST结果显示,PJI中金黄色葡萄球菌主要流行克隆复合物型别为ST-398型(22.50%)、ST-5型(13.75%)和ST-59型(11.25%)。ST-59型金黄色葡萄球菌的万古霉素最低抑菌浓度相对较高。结论万古霉素、利奈唑胺可作为PJI中抗MRSA感染的主要选择;PJI中金黄色葡萄球菌SCVs检出率较高;ST-398、ST-5、ST-59型是该院PJI金黄色葡萄球菌的主要流行克隆菌株,应针对不同金黄色葡萄球菌克隆类型采取个性化抗感染治疗策略。 展开更多
关键词 人工关节假体周围感染 金黄色葡萄球菌 多位点序列分型 耐药基因 小菌落变异体
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胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌小菌落突变株的分离鉴定 被引量:4
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作者 朱立力 孙玉林 +2 位作者 于馨 王奇惠 曲伟杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期241-246,共6页
本试验对由患慢性奶牛乳房炎奶样中分离出的1株疑似金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行形态观察、金黄色葡萄球菌相关保守基因片段(nuc、nucA、16SrDNA)多重PCR扩增鉴定、药敏试验、生理生化特性研究及补偿试验。结果显示分离出1株... 本试验对由患慢性奶牛乳房炎奶样中分离出的1株疑似金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行形态观察、金黄色葡萄球菌相关保守基因片段(nuc、nucA、16SrDNA)多重PCR扩增鉴定、药敏试验、生理生化特性研究及补偿试验。结果显示分离出1株金黄色葡萄球菌SCVs,该菌含有金黄色葡萄球菌菌种特异性基因nuc和nucA;与金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC 25923的抑菌圈大小明显不同;菌落形态主要表现为菌落细小、生长缓慢、溶血能力下降;凝固酶活性下降;耐盐能力降低;革兰氏染色为革兰氏阳性球菌,呈葡萄状排列;补偿试验鉴定该金黄色葡萄球菌SCVs为胸腺嘧啶依赖型。结果表明成功分离鉴定出1株胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌SCVs,为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究奠定前期基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 小菌落突变株 分离鉴定 胸腺嘧啶依赖型
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甲氧西林耐药的CO_2依赖型金黄色葡萄球菌小菌落突变株的分离和鉴定 被引量:4
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作者 俞静 刘瑛 陈峰 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1338-1342,共5页
目的对由临床分离的一株拟是金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行鉴定、药敏试验和补偿试验,为预防和控制SCVs感染提供依据。方法从患儿脑瘤切除部位分泌的脓液中分离培养出一株金黄色葡萄球菌,进行菌落形态观察及生化鉴定、药敏试验... 目的对由临床分离的一株拟是金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行鉴定、药敏试验和补偿试验,为预防和控制SCVs感染提供依据。方法从患儿脑瘤切除部位分泌的脓液中分离培养出一株金黄色葡萄球菌,进行菌落形态观察及生化鉴定、药敏试验、金黄色葡萄球菌种特异性基因(nuc)和甲氧西林耐药相关基因(mecA)的测序以及补偿试验。结果该菌株通过Vitek-2 Compact系统鉴定为金黄色葡萄球菌,该菌含有金黄色葡萄球菌菌种特异性基因nuc和甲氧西林耐药相关基因mecA。菌落形态主要表现为菌落细小、生长缓慢、溶血圈不明显(24 h);凝固酶活性下降;触酶阳性;革兰染色为革兰阳性球菌,呈葡萄状排列;对β-内酰胺类抗生素有抗药性;补偿试验鉴定该SCVs为CO2依赖型。结论成功分离鉴定出一株甲氧西林耐药的CO2依赖型金黄色葡萄球菌SCVs,为开展金黄色葡萄球菌SCVs相关疾病的预防和控制及其相关致病机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 小菌落突变株 分离鉴定 CO2依赖型
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金黄色葡萄球菌小菌落突变株感染小鼠乳房炎模型的建立 被引量:3
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作者 朱立力 王奇惠 +1 位作者 时永强 曲伟杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期1865-1870,共6页
为了建立由金黄色葡萄球菌小菌落突变株(small colony variants,SCVs)诱发感染乳房炎动物模型,本试验取40只分娩6-8d的BALB/c小鼠,随机分成8组(n=5),分别为阴性对照、生理盐水组和不同剂量金黄色葡萄球菌SCVs及金黄色葡萄球菌... 为了建立由金黄色葡萄球菌小菌落突变株(small colony variants,SCVs)诱发感染乳房炎动物模型,本试验取40只分娩6-8d的BALB/c小鼠,随机分成8组(n=5),分别为阴性对照、生理盐水组和不同剂量金黄色葡萄球菌SCVs及金黄色葡萄球菌质控菌株(1.0×10^3、1.0×10^4、1.0×10^5CFU/mL)试验组,对生理盐水组及各试验组小鼠第4对乳腺注射生理盐水和对应剂量的菌液(50mL/只),注射后24h解剖观察病理变化,一侧乳头制作石蜡切片,另一侧研磨后用ELISA检测试剂盒检测组织匀浆上清中的TNF-α含量。结果显示,注射菌液的试验组,小鼠均出现不同程度的临床症状,乳腺出现不同程度的炎性症状和病理变化。同一注射剂量下,金黄色葡萄球菌质控菌株较金黄色葡萄球菌SCVs病理变化严重,通过SPSS等软件对试验数据进行统计分析后得出,高浓度处理组金黄色葡萄球菌质控菌株的TNF-α表达量极显著高于金黄色葡萄球菌SCVs(P〈0.01)。结果表明,金黄色葡萄球菌及其SCVs均可用来建立小鼠乳房炎模型,且金黄色葡萄球菌SCVs引起的情况较其正常株轻微,这一结果为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究提供了新的材料和有益的探索,为SCVs与慢性乳房炎更深层次关系的研究奠定基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌小菌落突变株 小鼠 乳房炎模型
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菌落突变株与细菌适应性生存关系研究进展 被引量:1
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作者 高翔 郭玉茹 +4 位作者 杨杰 黄程程 田春莲 宏伟 刘明春 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第11期3300-3305,共6页
小菌落突变株(small colony variants,SCVs)是细菌正常生长周期中的一种细菌亚群,它在各种不利条件下可被选择出现。其生化特征表现为生长缓慢、菌落形态不规则、生化特性异常,这使得SCVs的分离鉴定较困难。临床上,SCVs可引起慢性持续... 小菌落突变株(small colony variants,SCVs)是细菌正常生长周期中的一种细菌亚群,它在各种不利条件下可被选择出现。其生化特征表现为生长缓慢、菌落形态不规则、生化特性异常,这使得SCVs的分离鉴定较困难。临床上,SCVs可引起慢性持续性感染,而不引起宿主强烈的免疫反应,且对抗菌药物产生严重的耐药性。文章对SCVs在临床上的表型分类、与宿主免疫反应的关系及抗菌药物对其影响进行综述,以期为SCVs的深入研究提供理论支持。 展开更多
关键词 小菌落突变株 表型 免疫反应 耐药性
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小菌落突变株:一种利于持续复发性感染的细菌致病形式 被引量:2
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作者 何娟梅 朱国强 《生物技术通讯》 CAS 2009年第3期388-395,共8页
小菌落突变株是一种具有独特表型及致病特征且生长缓慢的细菌亚群。在表型上,小菌落突变株表现为生长率低、菌落形态不规则及生化特性异常,这使得临床微生物学家在鉴定时遇到了挑战。在临床上,小菌落突变株比相应的野生株更能持续存在... 小菌落突变株是一种具有独特表型及致病特征且生长缓慢的细菌亚群。在表型上,小菌落突变株表现为生长率低、菌落形态不规则及生化特性异常,这使得临床微生物学家在鉴定时遇到了挑战。在临床上,小菌落突变株比相应的野生株更能持续存在于哺乳动物细胞中,且对抗生素更不敏感。当宿主细胞形成应急的保护性环境时,小菌落突变株会引发隐性或复发性感染。这篇综述涵盖了小菌落突变株相关表型、遗传及临床上的特征,重点描述目前研究最多的葡萄球菌。 展开更多
关键词 小菌落突变株 持续复发性感染 表型 临床特征
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小鼠细菌性乳腺炎模型研究进展 被引量:2
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作者 吴有华 刘雪松 杨庆稳 《中国兽药杂志》 2021年第5期72-77,共6页
奶牛细菌性乳腺炎一直是困扰奶牛养殖业的一大难题,给奶牛养殖行业造成巨大经济损失,直接危害奶牛健康。为有效治疗奶牛细菌性乳腺炎,研究人员需要通过动物模型来进行相关研究,以期找到优良的治疗方法。随着动物模型多年的探索与使用,... 奶牛细菌性乳腺炎一直是困扰奶牛养殖业的一大难题,给奶牛养殖行业造成巨大经济损失,直接危害奶牛健康。为有效治疗奶牛细菌性乳腺炎,研究人员需要通过动物模型来进行相关研究,以期找到优良的治疗方法。随着动物模型多年的探索与使用,小鼠细菌性乳腺炎模型因具有省时、省力以及性价比高的优点获得了研究人员的广泛认可,被大量用于相关研究中。就此对小鼠细菌性乳腺炎模型的建立、特点以及应用进行综述,旨在为细菌性乳腺炎相关研究提供参考。 展开更多
关键词 小鼠 急性乳腺炎 慢性乳腺炎 金黄色葡萄球菌 小菌落突变
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小菌落变异型的特征及在持续性感染中的作用研究进展
13
作者 刘晔华 穆红 《医学综述》 2018年第4期636-641,共6页
同质的微生物群体在环境压力尤其是抗菌药物治疗的压力作用下易产生小菌落变异型(SCV)。SCV这类微生物亚群具有自发产生、生长缓慢且表型多样的特征。SCV在临床上常与复发或持续性感染有关。鉴于SCV菌株生长缓慢,与其野生型菌株的菌落... 同质的微生物群体在环境压力尤其是抗菌药物治疗的压力作用下易产生小菌落变异型(SCV)。SCV这类微生物亚群具有自发产生、生长缓慢且表型多样的特征。SCV在临床上常与复发或持续性感染有关。鉴于SCV菌株生长缓慢,与其野生型菌株的菌落相比明显减小,且产色素较少或者不产色素,临床微生物实验室工作人员在日常检验工作中可能会忽视或漏检SCV菌株,最终导致临床上常规抗生素疗程未覆盖SCV菌株或难以清除SCV引起的感染。临床上SCV菌株产生的原因主要与宿主的基础免疫状态和抗生素治疗疗程是否规范相关,因此,建议临床医师对免疫力低下、长期应用抗生素治疗或患有基础疾患的患者多送检标本,同时微生物室工作人员也需要细心留意相关标本,积极与临床医师沟通,提高SCV菌株的检出率,有针对性地指导临床合理使用抗生素。 展开更多
关键词 表型 基因型 小菌落变异型 持续性感染
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成骨细胞吞噬内化金黄色葡萄球菌在骨髓炎发病机制中的作用 被引量:4
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作者 蔡渊卿 方心俞 +5 位作者 张翀景 张超凡 黄子达 李文波 杨滨 张文明 《中华骨与关节外科杂志》 2020年第8期681-687,共7页
成骨细胞与破骨细胞存在于骨组织中,负责骨细胞外基质的形成与吸收,共同维持骨代谢的平衡。近年研究发现,这些骨组织中的细胞与免疫细胞通过多种通路存在相互作用,从而衍生出了一门新学科——"骨免疫学",其目的在于研究骨骼... 成骨细胞与破骨细胞存在于骨组织中,负责骨细胞外基质的形成与吸收,共同维持骨代谢的平衡。近年研究发现,这些骨组织中的细胞与免疫细胞通过多种通路存在相互作用,从而衍生出了一门新学科——"骨免疫学",其目的在于研究骨骼系统与免疫系统之间相互作用的分子机制。其中成骨细胞发挥了重要作用。金黄色葡萄球菌是骨髓炎中最常见的致病菌,可以粘附于成骨细胞表面并被内化,逃避宿主免疫系统的杀灭,并发生表型的转变(如小菌落变异等),而当细胞死亡后这些细菌被释放,再次感染其他细胞,形成新的感染,导致骨髓炎临床治疗效果较差且迁延不愈。对金黄色葡萄球菌侵袭成骨细胞这一过程进行深入的了解和研究将有助于开发治疗骨髓炎的新靶标。本文就成骨细胞吞噬内化金黄色葡萄球菌在骨髓炎发病中的作用做一综述。 展开更多
关键词 成骨细胞 金黄色葡萄球菌 骨髓炎 溶酶体 小菌落变异
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金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染乳腺上皮细胞的研究 被引量:5
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作者 王奇惠 朱立力 +2 位作者 时永强 朱娟 曲伟杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第8期2169-2175,共7页
为研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株(S.aureus small colony variants,SASCVs)与正常株对原代培养的乳腺上皮细胞的侵袭情况,并观察对比其对细胞结构的损坏程度和对乳腺上皮细胞的影响,本试验对由云南农业大学动物医学实验教学中心实验... 为研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株(S.aureus small colony variants,SASCVs)与正常株对原代培养的乳腺上皮细胞的侵袭情况,并观察对比其对细胞结构的损坏程度和对乳腺上皮细胞的影响,本试验对由云南农业大学动物医学实验教学中心实验室分离的一株SASCV进行体外感染小鼠乳腺上皮细胞试验,将分离出的一株SASCV及质控菌株ATCC 25923分别注入实验室体外培养的小鼠乳腺上皮细胞内,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察质控菌株ATCC 25923及SASCVs诱导乳腺上皮细胞凋亡的细胞形态学变化;用流式细胞仪(Annexin VFITC/PI双染法)定量检测质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用,观察细胞的变化。结果显示,质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染小鼠乳腺上皮细胞3h后,可诱导乳腺上皮细胞发生凋亡,显示为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型的凋亡特征。Annexin V-FITC/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,并且阳性对照组的细胞凋亡率明显高于试验组。结果表明,SASCVs在侵染细胞的过程中达到一定数量不再上升;SASCVs的凋亡率明显的较正常金黄色葡萄球菌低。因此,SASCVs也可诱导乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征。本试验结果为以后预防和控制SASCVs感染奶牛慢性乳房炎提供试验依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌及其小菌落突变株 小鼠乳腺上皮细胞 细胞培养 体外感染 细胞凋亡
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低温对不同抗性金黄色葡萄球菌细胞膜完整性及相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 关鹏 冻梓杰 +5 位作者 贺舒佳 刘悦阳 雷萌萌 黄忠民 艾志录 索标 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第19期16-22,共7页
为研究不同金黄色葡萄球菌对低温(4℃)的耐受性差异,及其与细胞膜完整性及相关基因表达调节之间的关系,首先通过涂布平板计数法对4株金黄色葡萄球菌食品分离菌株的低温抗性进行比较,发现经过4周的低温胁迫后,与其他菌株相比,BB-1菌株可... 为研究不同金黄色葡萄球菌对低温(4℃)的耐受性差异,及其与细胞膜完整性及相关基因表达调节之间的关系,首先通过涂布平板计数法对4株金黄色葡萄球菌食品分离菌株的低温抗性进行比较,发现经过4周的低温胁迫后,与其他菌株相比,BB-1菌株可形成小菌落变种(small colony variants,SCVs),且低温耐受能力最强,存活率达75.50%。而低温耐受能力最弱,且不能形成小菌落变种的BH-25菌株存活率仅为45.68%。随后通过测定胞内容物泄露量、菌悬液电导率和结晶紫染色分析,研究低温对不同金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的影响,发现BB-1细胞膜的完整性在低温胁迫下强于BH-25。采用实时荧光定量PCR分析金黄色葡萄球菌胁迫耐受的主要基因(rsbV、rsbW和sigB)和细胞膜脂肪酸合成的主要编码基因(fabD、fabF、fabG、fabH和fabI)表达量的变化,发现BB-1的抗性调控基因和细胞膜脂肪酸调控基因表达水平显著高于BH-25(P<0.05)。可形成SCVs细胞的BB-1菌株在低温下存活能力更强,并且细胞膜更完整,细胞内容物泄露量最少,而且在低温环境下rsbV-rsbW/sigB调节系统基因和调控细胞膜脂肪酸fab家族基因的转录表达水平均显著高于不能形成SCVs细胞的其他菌株(P<0.05)。该研究对深入分析金黄色葡萄球菌的低温抗性机制,以及确立冷链食品安全控制技术具有一定的理论指导意义。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 小菌落变种 细胞膜 细胞内容物泄露 实时荧光定量PCR
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槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究 被引量:5
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作者 刘金环 张珊玲 +2 位作者 宋玮 罗万和 陈伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1470-1478,共9页
【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、... 【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1000、1500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。 展开更多
关键词 槲皮素 替米考星 混合物纳米粒 金黄色葡萄球菌小菌落变异株 抗菌活性
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纳米抗菌药物抗金黄色葡萄球菌感染研究进展 被引量:1
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作者 鲁壮壮 刘金环 +3 位作者 张珊玲 鞠牧洁 罗万和 陈伟 《畜牧与兽医》 北大核心 2022年第7期140-144,共5页
金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus耐药性问题日益严重,由其引起的奶牛乳腺炎的临床治疗面临着严峻的挑战。通过新型纳米载体系统所制备的纳米抗菌药物治疗金葡菌感染尤为重要。通过总结金葡菌感染机制、常规药物及纳米抗菌药物在治... 金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus耐药性问题日益严重,由其引起的奶牛乳腺炎的临床治疗面临着严峻的挑战。通过新型纳米载体系统所制备的纳米抗菌药物治疗金葡菌感染尤为重要。通过总结金葡菌感染机制、常规药物及纳米抗菌药物在治疗金葡菌感染中的应用,讨论并分析纳米抗菌药物在兽医临床上治疗金葡菌感染所面临的挑战,对纳米抗菌药物治疗金葡菌感染的应用前景进行展望。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 感染机制 小菌落变异体 纳米抗菌药物 纳米载体系统
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新疆阿克苏地区一株羊源沙门菌及其小菌落变异株的生物学特性 被引量:1
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作者 鲁壮壮 吴自豪 +2 位作者 池昊明 龚洁 陈伟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3467-3478,共12页
【背景】小菌落变异株(smallcolonyvariant,SCV)是一种具有独特的表型及致病特征且生长缓慢的细菌亚群,而国内鲜有关于食源性沙门菌SCV的研究报道。【目的】为食源性沙门菌的防治及动物性食品安全提供实验数据。【方法】使用氨基糖苷类... 【背景】小菌落变异株(smallcolonyvariant,SCV)是一种具有独特的表型及致病特征且生长缓慢的细菌亚群,而国内鲜有关于食源性沙门菌SCV的研究报道。【目的】为食源性沙门菌的防治及动物性食品安全提供实验数据。【方法】使用氨基糖苷类抗生素对羊源胆汁中分离的沙门菌进行实验室诱导得到SCV,然后分别对野生株和诱导株的菌落形态、生长、生化特性、营养缺陷型检测、运动性、耐药性检测及耐药基因、毒力基因、生物被膜形成能力进行比较和分析。【结果】经卡那霉素诱导获得一株血红素依赖型沙门菌SCV,与野生株相比,诱导株生长缓慢,低于野生株84%,不利用柠檬酸盐,溶血能力增强40%,对磺胺类和氨基糖苷类药物的耐受性增强,生物被膜形成能力减弱45%,运动能力减弱78%。【结论】沙门菌SCV的生长和生理生化特性与野生株相比有显著差异,使得沙门菌SCV的分离鉴定尤为困难;并且SCV的致病性与耐药性等方面的变化可能给沙门菌病的防治带来更大挑战,其机制还有待深入研究。 展开更多
关键词 沙门菌 小菌落变异株 耐药性 生物膜形成能力 生物学特性
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新疆动物源大肠杆菌小菌落变异体生物学特性分析
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作者 吴自豪 李广西 +1 位作者 刘士哲 陈伟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4976-4987,共12页
【背景】小菌落变异体(small colony variants,SCVs)在细菌耐药和持续残留等过程中发挥着重要作用,但目前国内鲜有动物源大肠杆菌(Escherichia coli,EC)SCVs的相关报道。【目的】对新疆动物源EC-SCVs的生物学特性进行对比研究分析,为国... 【背景】小菌落变异体(small colony variants,SCVs)在细菌耐药和持续残留等过程中发挥着重要作用,但目前国内鲜有动物源大肠杆菌(Escherichia coli,EC)SCVs的相关报道。【目的】对新疆动物源EC-SCVs的生物学特性进行对比研究分析,为国内EC-SCVs的相关研究提供基础数据。【方法】使用氨基糖苷类抗生素对新疆动物源大肠杆菌进行诱导,使其形成SCVs。然后对野生株和诱导株进行培养特征、生化特性、药物敏感性、运动力、生物被膜和溶血活性等生物学特性检测。【结果】经卡那霉素和庆大霉素诱导,从牛、羊和马源大肠杆菌中得到5株EC-SCVs(2株为血红素依赖型,3株未知其营养依赖型)。与野生株相比,EC-SCVs的生化特性改变,所有EC-SCVs转变为不利用醋酸盐,在不同培养基中的培养特征也存在差异。并且对氨基糖苷类抗生素的耐受性增强,生物被膜形成能力增强,但运动力下降。除血红素依赖型EC-SCVs的溶血活性增强外,其他SCVs的溶血活性并无差异。【结论】动物源EC-SCVs的生物学特性与野生株相比有较大差异,这些生物学特性的改变可能会给大肠杆菌致病或耐药等方面的防治带来更大挑战,其相关机制还有待深入研究。 展开更多
关键词 大肠杆菌 小菌落变异体 生物学特性
原文传递
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