阻塞性胆汁淤积大鼠肝脏胆固醇7α-羟化酶和核受体FXR、SHP表达变化

目的:通过建立梗阻性黄疸动物模型,观察胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7alpha-hydroxylase,CYP7A1)、类法尼醇X受体(farnesoid Xreceptor,FXR)及小异源二聚体伴侣受体(small heterodi mer partner,SHP)的表达变化,并分析CYP7A1和FXR、SHP之间的关系。方法:采用胆总管结扎术制备大鼠梗阻性黄疸模型,分别于术后1、3、14 d麻醉后放血处死。取大鼠肝脏,抽提总RNA,采用实时定量RT-PCR检测CYP7A1 mRNA表达;提取肝细胞核蛋白,采用蛋白质印迹技术检测FXR和SHP蛋白表达。结果:与假手术对照组相比,梗阻性黄疸组大鼠肝细胞CYP7A1 mRNA表达明显增强,FXR和SHP蛋白表达同步降低,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.05)。结论:CYP7A1表达增强可能与FXR、SHP表达减弱有关。

孤儿核受体SHP敲减抑制BMP9诱导C3H10T1/2细胞的成骨分化

孤儿核受体SHP(small heterodimer partner)是核受体超家族中的一员,具有LXXLL模体及配体结合域,但无经典的DNA结合域.它可与多种转录因子结合,调节细胞的增殖、分化和代谢等生物学过程.但目前关于SHP在BMP9诱导成骨分化中的确切作用却尚不清楚.本研究证明,SHP参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化.RT-PCR结合Western印迹方法检测蛋白揭示,异位表达BMP9上调了SHP在C3H10T1/2细胞中的表达.小干扰RNA敲减SHP基因在C3H10T1/2细胞的表达下调了成骨相关基因Runx2、Id1、Id2及CTGF的表达,而过表达BMP9则可上调这些基因的表达.碱性磷酸酶(ALP)活性测定/染色及茜素红染色显示,敲减核受体SHP基因可抑制BMP9的成骨分化作用,而过表达BMP9可部分消除SHP敲减导致的成骨抑制作用.上述结果提示,核受体SHP为BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化所必需.究竟BMP9如何上调SHP基因表达,以及SHP究竟通过何种机制上调BMP9下游成骨分化相关基因的表达尚待进一步研究.

孤儿核受体SHP对人骨肉瘤细胞株143B的影响及机制

目的 分析孤儿核受体小异二聚体伴侣(small heterodimer partner,SHP)对人骨肉瘤细胞株143B增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并初步探讨其可能机制。方法 分别构建过表达SHP的腺病毒、以及SHP的RNA干扰(RNA interference,RNAi)腺病毒;结晶紫染色和克隆形成实验检测143B细胞增殖情况;Horchest33258染色检测143B细胞凋亡情况;Transwell实验检测143B细胞迁移和细胞侵袭情况;Western Blot检测143B细胞Wnt/β-catenin信号的活化情况。结果 过表达SHP可抑制143B细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.01),但促进细胞凋亡(P<0.01);反之,抑制SHP表达,可促进143B细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.01),但对细胞凋亡无明显影响。过表达SHP可降低β-catenin及其下游靶分子Cyclin D1和c-Myc的蛋白水平(P<0.01);抑制SHP表达可增加β-catenin、Cyclin D1和c-Myc的蛋白水平(P<0.01)。结论 SHP可抑制143B细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡,这可能与SHP抑制Wnt/β-catenin信号活性有关。

栀子酸调节胆汁淤积大鼠SHP-LRH-1信号通路的实验研究

目的:研究栀子酸(geniposidic acid,GPA)对α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠胆汁酸代谢小分子异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)与肝受体同源物1(liver receptor homologue 1,LRH-1)信号通路的调节.方法:将50只SD大鼠随机分为5组,分别为空白组、ANIT组、ANIT+GPA 100 mg/kg组(AG100组)、ANIT+GPA 50 mg/kg组(AG50组)、ANIT+GPA 25 mg/kg组(AG25组),每组10只,连续给药10 d,空白组和ANIT组用生理盐水灌胃,ANIT+GPA各组给予GPA,给药的第8天,除空白组外,其余各组用ANIT(65 mg/kg)灌胃1次造模,继续给药至第10天,测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)和总胆汁酸(total bile acids,TBA)的含量;分离并培养大鼠原代肝细胞(rat primary hepatocytes,RPH),将RPH分为空白组、40μmol/L ANIT组、40μmol/L ANIT+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(A4G,A1G和A0.25G组),real-time RT-PCR检测RPH中SHP和胆汁酸合成关键酶胆固醇7α羟化酶(cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1,CYP7a1)mRNA转录水平,蛋白印迹法检测SHP和CYP7a1蛋白表达;沉默实验中,将RPH分为空白对照组、阴性转染组、siRNA-LRH-1组(ZR组)、siRNA-LRH-1+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(ZR4G、ZR1G、ZR0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达;过表达实验中,将RPH又分为空白对照组、阴性转染组(空白转染siRNA-阴性组)、LRH-1过表达组(LRH-1过表达质粒,OE组)、LRH-1过表达质粒+GPA 4.00,1.00,0.25 mmol/L组(OE4G,OE1G,OE0.25G组),检测SHP,CYP7a1和LRH-1蛋白和基因的表达.结果:在体实验中,与空白对照组比较,ANIT组的TC和TBA均显著升高(均P<0.01)、TG无差别;与ANIT组比较,AG100组和AG50组的TC和TBA均显著降低(均P<0.01).RPH实验中,与空白对照组比较,ANIT组中SHP的蛋白和基因水平均显著降低(均P<0.01),CYP7a1的蛋白和基因水平均显著升高(均P<0.01);与ANIT组比较,A4G和A1G组的SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),A0.25G组SHP基因和蛋白水平均升高(P<0.05),A4G和A1G组的CYP7a1基因和蛋白水平均显著降低(均P<0.01).LRH-1沉默实验中,与阴性转染组比较,ZR组中CYP7a1和LRH-1蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与ZR组比较,ZR4G,ZR1G和ZR0.25G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),LRH-1和CYP7a1无显著变化.LRH-1过表达实验中,与阴性转染组比较,OE组的CYP7a1和LRH-1蛋白和基因均显著抑制(均P<0.01),SHP无变化;与OE组比较,OE4G和OE1G组SHP基因和蛋白水平均显著升高(均P<0.01),OE0.25G组SHP基因显著升高(P<0.05),LRH-1和CYP7a1无显著变化.结论:RPH中LRH-1的过表达能上调CYP7a1的活性,GPA可以改善ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的生物化学水平和肝脏病理,其机制可能与GPA激活大鼠RPH中SHP造成LRH-1的消耗来降低CYP7a1的表达有关.

小异源二聚体伴侣受体在淤胆型肝炎模型中的表达及大黄素的干预作用

目的研究小异源二聚体伴侣受体(small heterodimer partner,SHP)在急性淤胆型肝炎大鼠模型中的表达及大黄素的干预作用。方法 40只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为4组:正常对照组,模型组,大黄素组,熊去氧胆酸(UDCA)组,每组10只。除正常对照组外,其余3组给予α-异硫氰酸萘酯(alphanaphthylisothiocyanate,ANIT)50 mg·kg^(-1)一次灌胃,建立大鼠急性淤胆型肝炎动物模型,并给予相应的药物干预,造模后48 h留取标本,以实时荧光定量PCR法及Western blot法分别检测肝组织中SHPm RNA表达及蛋白表达的变化;全自动生化分析仪检测血清总胆红素(total bilirubin,TB)、直接胆红素(direct bilirubin,DB)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、胆汁酸(total bile acid,TBA)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、γ-谷氨酰转移酶(gamma glutamine transferase,GGT)的水平;肝组织切片、HE染色后显微镜下观察肝组织病理学改变。结果模型组肝组织中SHP m RNA及蛋白表达水平分别为0.559±0.194、0.313±0.087,均低于正常对照组(P<0.05),大黄素组肝组织中SHP m RNA及蛋白表达水平分别为0.892±0.390、0.706±0.193,均高于模型组(P<0.05);大黄素组血清TB、DB、ALT、TBA、AST、ALP均明显低于模型组(P<0.05),且大黄素组TB、DB、ALT、TBA、AST、ALP明显低于熊去氧胆酸组(P<0.05);大黄素组肝组织病理改变较模型组明显减轻,熊去氧胆酸组肝组织病理改变亦较模型组明显减轻,但程度重于大黄素组。结论大黄素可升高ANIT诱导的大鼠急性淤胆型肝炎肝组织中SHP m RNA及蛋白表达水平。大黄素可降低血清中TB、DB、ALT、TBA、AST、ALP水平及减轻肝组织病理学损害,疗效优于熊去氧胆酸,其作用机制与促进SHP表达有关。

鹅去氧胆酸对高果糖喂养大鼠肾组织中法尼醇X受体和小异源二聚体伴侣的影响

目的通过观察高果糖喂养大鼠肾组织中法尼醇X受体(FXR)及小异源二聚体伴侣(SHP)的表达,探讨高果糖致肾损伤的机制。通过鹅去氧胆酸的干预,初步探讨其保护作用机制。方法将48只大鼠分为正常对照组(对照组,n=16),高果糖组(n=16)及鹅去氧胆酸组(n=16),8周及16周时分批处死,检测各组大鼠的肾功能、空腹血糖、血脂及24 h尿微量白蛋白;检测大鼠肾皮质三酰甘油含量;免疫组织化学染色检测FXR的表达和定位;FXR及SHP的表达采用实时荧光定量PCR分析技术,并应用Western-blot法分析FXR及SHP的蛋白表达。结果与对照组比较,高果糖组大鼠左肾重/体重,血中三酰甘油和极低密度脂蛋白水平明显升高,24 h尿白蛋白增加,肾组织中三酰甘油水平明显增高,且随时间延长而加重(P<0.05);高果糖组大鼠肾组织FXR表达明显下调,FXR及SHP的基因及蛋白表达明显减少,且随时间延长其表达减弱(P<0.01)。鹅去氧胆酸组上述指标明显改善(P<0.05)。结论高果糖饮食喂养可导致大鼠高三酰甘油血症、高极低密度脂蛋白血症、高尿酸血症和尿微量白蛋白水平增加,可引起大鼠肾皮质三酰甘油蓄积,使大鼠肾组织FXR及SHP的基因及蛋白表达明显减少,从而使肾脏脂质合成增加,进而导致肾脏损伤。鹅去氧胆酸可上调高果糖喂养大鼠肾组织FXR及SHP的基因及蛋白表达,减轻肾损伤。

小檗碱对糖尿病肾病小鼠肾脏中FXR和SHP表达的影响

目的 基于转录组学探究小檗碱(berberine,BBR)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠的改善作用及其潜在机制。方法 8周龄db/db小鼠随机分为模型组(DN组)、BBR 50 mg·kg^(-1)组(BBR-L组)、BBR 100 mg·kg^(-1)组(BBR-H组)和恩格列净10 mg·kg^(-1)组(EMPA组);同时以同龄db/m小鼠作为对照组(NC组),每组8只,灌胃1次/d,连续8周。给药结束后,采集血清、尿液和肾脏样本,评估肾功能指标并观察肾脏病理变化。通过转录组学检测各组小鼠肾组织差异表达基因(DEGs),并进行KEGG和GO富集分析。最后,利用分子对接、分子动力学模拟、Western blot和免疫组化验证潜在靶点。结果 BBR和EMPA均明显降低DN小鼠的空腹血糖水平,改善肾功能,减轻肾损伤和纤维化。与NC组相比,DN组共有855个DEGs;与DN组相比,BBR-H组共有194个DEGs。KEGG富集分析表明,BBR治疗DN的作用机制主要与1型糖尿病和胆汁分泌等信号通路有关。分子对接结果表明BBR与FXR具有强烈的结合活性,与SHP具有较好的结合活性。分子动力学模拟结果与分子对接结果基本一致。与NC组比,DN组FXR和SHP蛋白表达明显降低;而与DN组相比,BBR组FXR和SHP蛋白表达明显升高。结论 BBR可能通过上调FXR、SHP的表达调控胆汁酸和脂质稳态,减轻DN引起的肾脏损伤。

复方降脂3号对高胆固醇血症新西兰白兔胆固醇-胆汁酸代谢的影响

目的:探讨复方降脂3号对胆固醇-胆汁酸代谢的影响。方法:24只新西兰白兔分为正常对照组、模型组和复方降脂3号组,每组8只。模型组和复方降脂3号组予高胆固醇饮食诱导高血脂,并给予相应药物灌胃。治疗4周后,检测白兔外周血清总胆固醇、胆汁酸水平,酶联免疫吸附测定法检测肝脏胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)活性,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测CYP7A1、法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)靶基因胆盐输出泵(bile saltexport pump,BSEP)和短异源二聚体伴侣(small heterodimer partner,SHP)受体mRNA表达情况。结果:模型组胆固醇和胆汁酸水平较正常对照组明显升高(P<0.01);肝脏CYP7A1活性降低,mRNA表达下降(P<0.01);BSEP和SHP mRNA表达明显增加(P<0.01)。与模型组比较,复方降脂3号组胆固醇水平明显下降(P<0.01);肝脏CYP7A1活性升高,mRNA表达增加(P<0.01);BSEP和SHP mRNA表达明显下降(P<0.01)。复方降脂3号组胆汁酸含量与模型组比较,差异无统计学意义。结论:复方降脂3号可能通过上调CYP7A1表达和抑制BSEP、SHP mRNA表达,促进肝脏内胆固醇合成胆汁酸,继而降低血清胆固醇水平。

孤儿核受体小异二聚体伴侣在胆汁酸及糖脂代谢中的作用研究进展

小异二聚体伴侣(small heterodimer partner,SHP)是一种转录抑制因子,可与多种核受体及转录因子相互作用形成复杂的调节网络,参与包括胆汁酸、胆固醇、甘油三酯及葡萄糖等在内的多条代谢通路。SHP在肝脏、脂肪和胰腺等组织中均有表达。在肝脏中,SHP可通过影响一系列与胆固醇降解、胆汁酸生成、葡萄糖异生以及脂肪生成等相关的基因表达调控肝脏代谢途径,持续表达SHP可造成胆汁酸池耗竭和肝脏甘油三酯水平的积聚,而敲除SHP则会抑制脂肪肝的发展。在脂肪组织中,过表达SHP会加重葡萄糖耐受不良和高脂饮食诱导的肥胖。在胰腺内,调节SHP的表达则可能影响葡萄糖刺激的胰岛素分泌以及内质网应激引起的β细胞功能障碍。此外,SHP遗传突变与肥胖相关,并可能增加部分人群对2型糖尿病的易感性。本文将重点讨论SHP调控胆汁酸及糖脂代谢的机制,并总结SHP的主要生理功能及其在2型糖尿病发生发展中的作用。

TLR4 signaling and the inhibition of liver hepcidin expression by alcohol

AIM: To understand the role of toll-like receptor 4 (TLR4) signaling in the regulation of iron-regulatory hormone, hepcidin by chronic alcohol consumption.

亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12损伤的作用机制

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12损伤作用的机制。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,设置6个NaAsO_(2)浓度[0(对照)、10、15、20、25及30μmol/L]组,分别用相应浓度的NaAsO_(2)处理AML12细胞24 h;采用化学比色法和油红O染色法检测各组AML12细胞内丙二醛(MDA)和脂质含量水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测各组小鼠AML12细胞内法尼醇X受体(FXR)、小异二聚体伴侣(SHP)mRNA和FXR、SHP、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果与对照组相比,10-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内MDA含量升高、但FXR和SHP mRNA及FXR蛋白相对表达量下降(P<0.05),2-33 pmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内脂滴含量增加(P<0.05),20-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内SHP蛋白相对表达量降低(P<0.05),25-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内BAX蛋白相对表达量增高(P<0.05)。结论NaAsO_(2)可致小鼠肝细胞AML12损伤,其机制可能与FXR-SHP信号通路的失调有关。

加味葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠FXR/SHP/PPARα信号通路的影响

目的:该研究拟通过观察加味葛根芩连汤对2型糖尿病(T2DM)模型db/db小鼠肝组织核受体法尼醇X受体/小异源二聚体伴侣/过氧化物酶体增殖物激活受体α(FXR/SHP/PPARα)信号通路相关蛋白表达水平的影响,探讨加味葛根芩连汤可能的作用机制。方法:将30只db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.2 g·kg^(-1))、加味葛根芩连汤高、中、低剂量组(31.9、19.1、6.4 g·kg^(-1)),每组6只,另取6只m/m小鼠作为空白组,分别给予相应药物灌胃12周。检测小鼠体质量、空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,油红O染色观察肝脏脂质蓄积,过碘酸-雪夫(PAS)染色观察肝糖原沉积,硫酸铁铵染色观察回肠组织胆固醇沉积,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织FXR、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)、SHP、PPARα蛋白表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清游离脂肪酸(FFA)水平。结果:治疗结束后,与空白组比较,模型组小鼠体质量、FBG、FFA、TC、TG、LDL-C水平均显著升高(P<0.01),肝组织内有大量脂滴,肝糖原显著减少,回肠组织内有明显胆固醇堆积,肝组织FXR、SHP、PPARα蛋白表达显著降低,CYP7A1蛋白表达显著增高(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组及加味葛根芩连汤高、中剂量组小鼠体质量、FBG、FFA、TC、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平明显增加(P<0.05,P<0.01),肝细胞脂质蓄积减少,肝糖原显著增加,回肠组织胆固醇减少,肝组织FXR、SHP、PPARα蛋白表达显著增高,CYP7A1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:加味葛根芩连汤可能通过调节FXR/SHP/PPARα信号通路抑制FFA水平,改善T2DM小鼠脂质代谢。

诱导性低温对失血性休克大鼠肝脏PGC-1和SHP表达的影响

目的探讨诱导性低温对失血性休克大鼠肝脏PGC-1和SHP表达的影响。方法SD大鼠随机（随机数字法）分为：对照组、低温组和常温组。按25ml／kg放血建立失血性休克模型，放血后分别维持大鼠直肠温度在32℃和38℃，休克60min后回输放出的血和2倍放血量的林格液，复苏期维持60min，复苏结束后恢复大鼠体温到38℃，监测血流动力学3h。记录建模前及建模后不同时点的血细胞压积（Hct）、乳酸（Lac）、剩余碱（BE）和血糖（Glu）。采用蛋白印迹及定量PCR的方法检测复苏3h后肝组织PGC-1和SHP蛋白及mRNA表达的变化。采用SPSS11．0软件包行计量资料的成组t检验。结果休克模型建立后血乳酸升高（0．9±0．2）m（8．3±1．8）、剩余碱减少（-3．2±1．1）135．（-7．4±3．3），与常温复苏比较，低温复苏可以显著降低血乳酸（6．3±2．1）US．（10．4±1．5）并增加碱剩余（-4．7±2．5）vs．（-9．0±3．2）。常温组动物的病死率较低温组明显增加。常温复苏可以上调PGC-1和SHPmRNA的表达（6．2±0．6）vs．（2．3±0．9），低温复苏导致PGC-1mRNA的表达下调（-2．2±0．4），但进一步增加了SHPmRNA的表达（7．4±1．3）。常温复苏3h后，PGC-1蛋白表达减少（0．39±0．13）vs．（0．24±0．12），而SHP蛋白表达增加（0．22±0．11）vs．（0．55±0．15）；低温复苏后PGC-1蛋白表达进一步减少（0．39±0．13）vs．（0．18±0．11），而SHP蛋白表达增加更加明显（0．22±0．11）vs．（1．02±0．21）。结论诱导性低温可以对PGC-1和SHP基因表达进行适应性调节，进而改善酸中毒和能量代谢失衡。

基于FXR/SHP信号通路探讨芩连红曲汤改善高脂血症大鼠肝脂肪变性的机制研究

目的:探讨芩连红曲汤改善高脂血症大鼠肝脂肪变性的作用机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组、模型对照组、芩连红曲汤0.7、1.4、2.8 g/kg组,每组8只。正常对照组给予基础饲料喂养,其余各组给予D12451高脂饲料喂养,制备高脂血症大鼠模型。造模成功后各造模组给予相应药物灌胃,正常对照组和模型对照组给予等体积的生理盐水灌胃,1次/d,连续给药8 w。采用全自动生化仪检测血清中胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;HE及油红染色观察肝脏病理学变化;ELISA法检测肝脏的TC、TG含量;Western blot法测定肝脏的FXR、SHP、SREBP1-C及PPARα蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组血清TC、TG和LDL-C含量显著升高(P<0.01),肝细胞脂滴明显增多、肝细胞脂肪变性,肝脏TC、TG含量明显升高(P<0.05),肝脏FXR、SHP和PPARα蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),SREBP1-C蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,芩连红曲汤0.7 g/kg组的血清TC、TG、LDL-C含量显著降低(P<0.01),HDL-C含量显著升高(P<0.01),肝细胞脂滴沉积减少、肝细胞脂肪变性明显改善,肝脏TC、TG含量明显降低(P<0.05),肝脏FXR、SHP和PPARα蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01),SREBP1-C蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论:芩连红曲汤对高脂血症大鼠降脂效果显著,能减轻高脂血症引起的肝细胞脂肪变性,其机制可能与调节肝脏FXR/SHP信号通路,上调肝脏PPARα蛋白表达促进脂肪酸氧化,下调肝脏SREBP1-C蛋白表达抑制肝脏脂肪合成有关。

SHP基因与新生儿出生体重关系的探讨

目的评价微小异源二聚体伙伴基因(small heterodi mer partner gene,SHP)基因与新生儿出生体重的关系。方法应用队列研究的方法,收集191例无妊娠合并症及并发症的母血及新生儿脐血标本,利用PCR-RFLP的方法研究SHP基因的单核苷酸多态性,(single nucleotide poly-morphism,SNP)位点rs7504的基因多态性。结果(1)随出生体重的增加新生儿携带C等位基因和TC+CC基因型频率增加,且有统计学差异(P=0.004;P=0.005);孕妇C等位基因和TC+CC基因型频率亦随新生儿出生体重增加而增加,有统计学差异(P=0.013,P=0.013)。(2)此位点携带C等位基因者新生儿体重增加,携带TC+CC基因型的新生儿比携带TT基因型的新生儿体重平均增加246.3g[(3658.7±400.9)g和(3412.4±444.4)g,P=0.005)]。同时孕妇携带C等位基因者其分娩新生儿体重比不携带C等位基因孕妇分娩的新生儿体重平均增加210.3g[(3418.6±449.0)g和(3628.9±405.5)g,P=0.011)]。(3)比较脐血TC+CC基因型与TT基因型的临床参数,发现SHP基因与血糖和胰岛素不相关;与母亲的体重、孕前BMI、父亲的身高、体重相关。孕妇携带TC+CC基因型者体重和孕前BMI略有增加,但无统计学差异;且与血糖和胰岛素水平无明显相关。(4)多因素分析结果表明孕妇身高、孕期增重、孕前BMI、分娩孕周、脐血胰岛素、母血胰岛素水平均与新生儿体重相关,调整以上因素之后,脐血SHP基因仍与新生儿体重显著相关(P=0.0354),母血SHP基因与新生儿体重无明显相关(P>0.05)。结论SHP基因与新生儿出生体重相关,在胎儿宫内发育中起一定的作用。

核受体FXR调控SHP的机制及FXR-SHP轴在肝脏中作用的研究进展

法尼醇X受体(Farnesoid X Receptor,FXR)属于代谢性核受体,是需配体激活的转录因子,在肝脏胆汁酸、脂质代谢过程,肝脏炎症和肿瘤的发展过程中起着重要的调节作用。小异二聚体伴侣受体(Small Heterodimer Partner,SHP)是核受体超家族中的一个特殊成员,在特异的组织中作为转录调节的共抑制因子,抑制其他多种转录因子的活性,在众多代谢通路中起到了负性调节作用。近年来研究发现,核受体FXR通过对SHP的调控来实现其在肝脏的多种功能。本文着重对FXR调节SHP的机制及FXR-SHP轴在肝脏中作用进行综述。

法尼醇X受体在大鼠急性淤胆型肝炎中的作用

目的 探讨核受体法尼醇X受体（FXR）及其相关下游分子小异源二聚体伴侣受体（SHP）、尿苷二磷酸葡萄糖苷酸转移酶2B4 （UGT2B4）、胆盐输出泵（BSEP）在大鼠急性淤胆型肝炎中的作用.方法 将20只Sprague-Dawley （SD）大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组10只.模型组给予α-异硫氰酸萘酯50 mg/kg一次灌胃建立急性淤胆型肝炎的动物模型,实时荧光定量PCR检测灌胃后48 h肝组织中FXR、SHP、UGT2B4、BSEP mRNA表达量.全自动生物化学分析仪检测血清总胆红素、直接胆红素、丙氨酸氨基转移酶、总胆汁酸、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶的水平.组间均数差异性比较采用两个独立样本的t检验. 结果 模型组肝组织FXR、SHP、UGT2B4、BSEP mRNA的相对表达量分别为0.152±0.088、0.559±0.194、0.177±0.039、0.561±0.123,均低于正常对照组（分别为1.137±0.215、1.512±0.309、2.394±0.462、1.631±0.376,t值分别为13.408,8.260,15.121,8.553,P值均＜0.05）;而肝功能各指标水平明显高于正常对照组（P值均＜ 0.01）. 结论 FXR和SHP、UGT2B4、BSEP参与了急性淤胆型肝炎的发生,其中FXR的表达降低可能在急性淤胆型肝炎中作为始动环节引起其下游的SHP、UGT2B4、BSEP表达降低,导致胆汁酸合成增加,解毒及转运功能减弱,从而介导了胆汁淤积性肝炎的发生.

小异二聚体伴侣与胆固醇7a-羟化酶在肝内胆汁淤积症孕鼠中的表达

目的建立妊娠期肝内胆汁淤积症孕鼠模型，检测小异二聚体伴侣（SHP）及其靶基因胆固醇7a-羟化酶（CYP7A1）在肝脏的表达，探讨其在妊娠期肝内胆汁淤积症发病机制中的作用。方法孕15d SD大鼠30只随机分为对照组和雌激素组，每组15只。用药前和用药后第5天分别检测血清中ALT、AST、碱性磷酸酶、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素水平，同时观察肝脏形态学变化，并应用RT-PCR和Western blot分别检测肝脏SHP和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达。结果雌激素组用药后ALT、AST、碱性磷酸酶、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素比用药前明显升高（P〈0．01）；对照组用药前后各血清生物化学指标无明显变化（P〉0.05）。雌激素组孕鼠肝脏出现肝内胆汁淤积表现，对照组肝脏形态、结构正常。雌激素组和对照组SHP mRNA分别为0．4865±0．0237和0．3657±0．0317，CYP7A1 mRNA分别为0．4311±0．0157和0．3285±0．0123，差异均有统计学意义（P〈0．01）。雌激素组和对照组SHP蛋白表达分别为0．5033±0、0274和0、3762±0．0284，CYP7A1蛋白表达分别为0．4802±0．0217和0．3570±0．0175，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论雌激素诱导的胆汁淤积促进肝脏SHP及其靶基因CYP7A1表达增加，导致胆汁酸合成进一步增加，从而引发胆汁淤积，这可能是妊娠期肝内胆汁淤积症发病机制之一。

大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及机制探讨

目的探讨大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及其机制。方法50只SD大鼠按随机数字表法随机分为5组：正常对照组、模型组、大黄素组、熊去氧胆酸（UDCA）组、地塞米松组，除正常对照组外，其余4组均给予α-异硫氰酸萘酯（ANIT）50 mg/kg一次灌胃大鼠建立淤胆型肝炎动物模型，并给予相应的药物干预，造模后48 h留取标本，检测其肝功能和进行肝脏病理学检查。实时荧光定量PCR检测肝组织中法尼醇X受体（FXR）、小异源二聚体伴侣受体（SHP）、胆盐输出泵（BSEP）、尿苷二磷酸葡萄糖苷酸转移酶2B4（UGT2B4）mRNA表达量。全自动生化分析仪检测γ-谷氨酰转移酶（GGT）的水平。结果模型组血清总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）、丙氨酸转氨酶（ALT）、胆汁酸（TBA）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）水平分别为（68.1±26.1） μmol/L、（46.3±20.1） μmol/L、（483±228） U/L、（159.1±57.9） μmol/L、（2.0±0.5） U/L、（996±382） U/L、（324±120） U/L，大黄素组TB、DB、ALT、TBA、AST、ALP水平分别为（15.0±8.7） μmol/L 、（10.8±3.9） μmol/L、（147±71） U/L、（60.1±22.7） μmol/L、（295±104） U/L、（222±59） U/L，均明显低于模型组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。大黄素组TB、DB、ALT、TBA、GGT、AST、ALP明显低于熊去氧胆酸组，差异均有统计学意义（均P〈0.05），TB、DB、ALT、TBA、GGT、AST明显低于地塞米松组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。大黄素组48 h肝组织FXR、SHP、BSEP、UGT2B4 mRNA表达水平分别为（1.087±0.285、0.892±0.390、0.902±0.149、1.785±0.403），均明显高于模型组（0.152±0.088、0.559±0.194、0.561±0.123、0.177±0.039），差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论大黄素可显著降低ANIT诱导的淤胆型肝炎大鼠中TB、DB、ALT、TBA、AST、ALP水平及减轻其肝组织病理学损害，疗效优于熊去氧胆酸及地塞米松。其作用机制可能与促进FXR及其下游分子SHP、BSEP、UGT2B4的表达有关。

片仔癀防治大鼠非酒精性脂肪肝的探讨

目的:观察片仔癀对非酒精性脂肪肝模型大鼠的防治作用,并探讨其防治作用的相关机制。方法:将48只Wistar雄性大鼠随机平均分为正常组、模型组、舒降之辛伐他片组、片仔癀低、中、高剂量组6个组,采用高脂饲料制备大鼠非酒精性脂肪肝模型,同时分别灌服舒降之辛伐他片(0.003 g·kg-1·d-1)和不同剂量的片仔癀(0.5,1,2 g·kg-1·d-1)进行干预。实验4周后结束,收集标本用生化分析仪检测肝功能天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),白蛋白(Alb),总胆红素(TBIL),γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-GT)和血脂胆固醇(TCH),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL),高密度脂蛋白(HDL)水平,做肝脏组织病理学观察,并用RT-PCR检测法尼醇X受体(FXR),靶基因小异二聚体伴侣(SHP)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)mRNA表达情况。结果:与正常组比较,模型组AST,ALT,γ-GT水平明显升高,LDL明显升高(P<0.01),肝细胞脂肪变性,肝细胞坏死和炎症细胞浸润,FXR,SHP mRNA表达明显降低(P<0.01),SREBP-1c mRNA的表达升高;与模型组比较,片仔癀低、中剂量组能不同程度地降低AST,ALT,γ-GT水平(P<0.05,P<0.01);明显降低TG含量(P<0.05);能明显改善肝细胞脂肪变性,减少肝细胞坏死和炎症细胞浸润;提高FXR,SHP mRNA的表达,降低SREBP-1c mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:片仔癀能够一定程度上改善脂肪肝的肝功能,降低血脂,其机制可能是通过FXR-SHPSREBP-1c通路调节血脂起作用,其中以低、中剂量组疗效相对较好。