Primary Research on UVB-irradiation Protective Effect of Total Flavonoids from Large-leaved Kuding Tea (Ilex latifolia Thunb.)

Total flavonoids extracted from large-leaved Kuding tea(Ilex latifolia Thunb.) were investigated to develop anti-UV sun-screening agents. The results showed that total flavonoids of I. latifolia Thunb.(TFILT) showed maximum absorb peak at 325 nm between UVB and UVA by wavelength scanning spectrum. TFILT could inhibit the decrease of cell viability induced by UVB irradiation by CCK-8 method, and 0.25 mg/ml of TFILT showed the most significant protective activity on cells. The dermal thickness and collagen fiber density as skin structural characteristic were analyzed by Histological staining. The results showed that TFILT protected mice skin by significantly attenuating the dermal thickness and inhibiting collagen fiber degradation. The mechanism in vivo needs to be further confirmed in future.

苦丁茶多酚的提取及抗氧化活性

对苦丁茶中多酚的提取及抗氧化活性进行研究。通过单因素和响应面试验可知,在乙醇体积分数52%、料液比1:24(g/mL)、提取时间62s、微波功率291W条件下可获得最高的提取量115.40mg/g。苦丁茶多酚提取液对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的半清除质量浓度以及对脂质过氧化的半抑制质量浓度分别为29.24、34.14、872.3、11.48mg/L。表明苦丁茶多酚具有较强的抗氧化作用。

苦丁茶大叶冬青的降脂作用研究

以不同剂量的苦丁茶大叶冬青提取液喂饲高脂模型大鼠,采用Transansio全自动生化分析仪测定正常及各高脂模型组大鼠的血清脂质含量。结果苦丁茶和月见草油均能显著降低高脂血症大鼠的血清TC、TG指标(P<0.05),对HDL-C、LDL-C、 AI、R-CHR有一定的调节作用。证明苦丁茶大叶冬青有显著的降脂效果,对抗动脉粥样硬化有一定的预防作用。

苦丁茶的保健作用与开发

苦丁茶（ＩｌｅｘｌａｔｉｆｏｌｉａＴｈｕｎｂ）叶片含有多酚类、黄酮类、氨基酸等多种生理活性成分。经过动物试验，认为苦丁茶具有降低血压，胆固醇和甘油三酯之疗效，并经过毒理试验，认为苦丁茶是一种安全性好的保健食品。

苦丁茶黄酮类化合物的提取与分析

采用不同浓度的乙醇溶液提取苦丁茶中的黄酮类化合物,通过提取效果的对比,确定了合理的乙醇浓度为70%～80%.研究表明,与单纯采用溶剂提取相比,采用超声振荡辅助提取对黄酮类化合物的相对提取率影响较小,但是可以缩短提取时间、降低提取温度,有利于提取过程中生物活性成分的保持.与小叶苦丁茶(粗壮女贞)相比,在相同提取和分析条件下,浙江本地产的大叶苦丁茶(大叶冬青)中黄酮类化合物含量较多.

贵州苦丁茶化学成份研究

贵州苦丁茶主要成份为可溶性糖（１０．５７％）、多酚类物质（８．８％）、脂肪（６．３４％）以及蛋白质（０．５７％）、氨基酸等。从中检测出１６种游离氢基酸组份，其含量和组成与大叶冬青苦丁茶完全不同。贵州苦丁茶中黄酮、γ－氨基酸和硒含量较高，咖啡碱含量极低，仅０．０８７％，是一种具特殊保健价值的饮料植物。

海南苦丁茶不同组分对高血糖小鼠血糖与血脂的作用研究

目的研究海南苦丁茶不同组分对四氧嘧啶诱导的高血糖小鼠体质量、血清中血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(NEFA)的影响。方法选用雄性昆明种小鼠,采用单次腹腔注射四氧嘧啶(剂量200 mg.kg-1)的方法建立小鼠高血糖模型。连续灌胃给予苦丁茶水提物经100%乙醇回流提取组分(组分1),50%乙醇回流提取组分(组分2)及残渣(组分3),28 d后测定小鼠空腹血糖值、糖耐量及血清中各项生化指标。结果海南苦丁茶组分1能显著降低高血糖小鼠的GLU,TC(P<0.05),显著升高高血糖小鼠SOD活力(P<0.05),并缓解糖尿病小鼠"三多一少"的症状。结论苦丁茶组分1能降低四氧嘧啶诱导的高血糖模型小鼠的血糖值,改善高血糖模型小鼠糖尿病的症状。

苦丁茶树茎段离体培养的研究

报道了通过茎段离体培养快速繁殖苦丁茶树的研究结果：筛选出了比较理想的初代培养基,在该培养基上茎段腋芽的萌发率在80％以上,扩大繁殖阶段腋芽萌发率在90％以上,并有18％-20％的材料形成丛芽;生根培养阶段95％以上的无根苗均能形成良好的根系;试验了有根苗移栽法和无根苗移栽法,两种方法的移栽成活率均达到100％.

苦丁茶叶制虫茶粗多酚对HepG2人肝癌细胞的凋亡诱导效果

茶多酚是茶叶中的功能性成分。虫茶作为传统饮品也含有这些化合物,这些多酚类物质的抗癌效果有待科学的研究。本研究对苦丁茶叶制虫茶粗多酚(CPKMI)的癌细胞凋亡诱导作用进行了测定。采用MTT法对CPKMI对癌细胞的体外生长抑制作用进行了分析,然后进一步采用RT-PCR检测对CPKMI的癌细胞凋亡诱导效果进行了实验。经过25、50和100μg/m L的CPKMI处理癌细胞48h,Hep G2人肝癌细胞的增殖被抑制,其中100μg/m L的CPKMI表现出最高的抑制率(72.8%)。CPKMI也可以通过上调caspase-3、caspase-9、p53、p21、E2F1、p73和下调HIAP-1,HIAP-2基因的mRNA的表达对Hep G2癌细胞起到显著的凋亡诱导效果(p<0.05)。由此可见,CPKMI表现出强的体外癌细胞凋亡诱导效果。

苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用研究

目的探讨苦丁茶熊果酸对鼻咽癌细胞的抑制作用,为苦丁茶的深加工提供研究依据。方法从苦丁茶老叶中提取熊果酸并纯化与鉴定,用5,10,20,40,80,100μmol.L-16个梯度浓度的熊果酸,持续作用于在培养的鼻咽癌细胞24,48,72,96,120 h后,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测熊果酸对鼻咽癌细胞的抑制作用情况,流式细胞术分析其细胞周期和凋亡率。结果不同浓度的苦丁茶熊果酸在不同时间内对鼻咽癌细胞均具有较强的抑制作用,并随浓度的升高及作用时间的延长而作用增强;流式细胞术结果显示,苦丁茶熊果酸阻滞鼻咽癌细胞于G0/G1期;40μmol/L熊果酸作用48 h后抑制效果逐渐明显。结论从苦丁茶提取的熊果酸对鼻咽癌细胞有较强的抑制作用,能阻滞癌细胞于G0/G1期,并诱导肿瘤细胞凋亡,苦丁茶极具开发前景。

响应面法对苦丁茶总黄酮提取工艺的优化

在对微波辅助提取苦丁茶总黄酮的工艺优化研究过程中,利用单因素实验确定乙醇浓度、提取温度、料液比及提取时间4因素的单因素最佳值.然后通过单变量多因素方差分析来选定3个对总黄酮提取率影响最大的因素来进行BBD(Box-Behnken Design)响应面优化,从而确定它们的最优组合.实验结果表明,各单因素实验的最佳值为:乙醇浓度50%,提取温度80℃,料液比1∶20,提取时间8min;乙醇浓度、提取温度及料液比对总黄酮提取率的影响最为显著,其影响顺序依次为:料液比、乙醇浓度、提取温度;响应面分析得到的苦丁茶总黄酮提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度50.75%,料液比1∶21.6,提取温度80.35℃,总黄酮提取率为7.622 86.

苦丁茶总黄酮提取工艺优化研究

利用微波辅助提取苦丁茶总黄酮,并对提取条件进行优化。以苦丁茶粉为原料,探讨乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对总黄酮提取的影响。在单因素试验基础上,对乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度4个因素进行正交试验,以总黄酮提取率为指标对提取条件进行优化。在乙醇浓度50%、料液比1∶20(g/mL)、提取温度80℃、提取时间8 min,总黄酮提取率达到7.630 mg/g。优化后的总黄酮提取率比单因素试验有较大提高。

绿茶与4种乔木型别样茶抗氧化活性比较研究

目的:比较绿茶与4种乔木型别样茶的抗氧化活性。方法:通过清除二苯代苦味酰基(DPPH)法、铁离子还原测定(FRAP)法、亚铁离子螯合(FIC)法、β胡萝卜素-亚油酸4种体外抗氧化活性测定方法,综合考察绿茶和老鹰茶、大叶苦丁茶、石崖茶、青钱柳茶4种乔木型别样茶水提物的抗氧化活性,同时用Folin-Ciocalteus法测定4种别样茶的总多酚含量。结果:石崖茶具有卓越的抗氧化能力,其螯合亚铁离子能力和还原铁离子能力均优于绿茶;老鹰茶、大叶苦丁茶具有良好的抗氧化活性,大叶苦丁茶还原铁离子能力优于绿茶,老鹰茶和大叶苦丁茶清除自由基(DPPH)能力比绿茶稍低,但高于人工合成抗氧化剂二丁基羟基甲苯(BHT);青钱柳茶抗氧化活性最低。结论:石崖茶、老鹰茶、大叶苦丁茶均具有较高的开发利用价值,值得深入研究和大力推广。

强化苦丁茶提高热耐受能力的观察

目的 :探讨强化苦丁茶提高热耐受能力的作用 ,为研制新型防暑饮料提供依据。方法 :以果蝇及小鼠为模型 ,分别以加入培养基或灌胃给药方法观察不同剂量 (低、中、高 )强化苦丁茶对热暴露的果蝇死亡率的影响以及对小鼠在热环境暴露的存活时间和高温游泳时间的影响。结果 :强化苦丁茶 (中剂量 )能显著减少热暴露果蝇的死亡率 ,处理组雄果蝇死亡率为 54.2 9% ,雌果蝇为 2 0 .0 0 % ,而对照组分别为 88.57%和 54.2 9% (P <0 .0 5) ;能提高热暴露小鼠存活时间 ,处理组为 ( 17.0± 2 .0 )min ,而生理盐水对照组为 ( 14.5± 2 .1)min ,(P <0 .0 5) ;还能延长小鼠高温游泳时间 ,处理组雄小鼠为 ( 77.8± 2 0 .7)min ,雌小鼠为 ( 91.0± 2 8.1)min ,而生理盐水对照组分别为 ( 4 9.9± 2 0 .6)min和 ( 56.4± 2 4 .1)min。结论 :强化苦丁茶可提高热暴露果蝇及小鼠的热耐受能力 。

苦丁茶黄酮提取物对D-半乳糖致小鼠衰老的改善作用

针对苦丁茶黄酮提取物对D-半乳糖致小鼠衰老的改善作用进行了研究。以注射D-半乳糖(120 mg/kg)致衰老模型小鼠为实验对象,以其体质量、脏器指数、血清和组织指标为评价指标,使用试剂盒和RT-PCR法检测苦丁茶黄酮提取物(50和100 mg/kg)对衰老小鼠的血清和组织的影响,全面考察苦丁茶黄酮提取物的抗衰老作用。实验结果表明,苦丁茶黄酮提取物能显著(p<0.05)改善D-半乳糖造成的小鼠体质量下降及胸腺和脑器官指数下降。苦丁茶黄酮提取物可以提高D-半乳糖致衰老小鼠血清和肝组织中的总抗氧化能力(T-AOC)和降低丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平;同时苦丁茶黄酮提取物也提高了衰老小鼠血清和肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的酶活力。苦丁茶黄酮提取物还可以显著(p<0.05)上调衰老小鼠肝组织中神经型一氧化氮合酶(n NOS)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Gu/Zn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)的mRNA表达和下调诱导型一氧化氮合酶(i NOS)表达,且高浓度苦丁茶黄酮提取物(100 mg/kg)的效果优于同浓度的维生素C。

广西苦丁茶老叶提取物抗炎作用实验

目的:研究广西苦丁茶老叶提取物的抗炎作用。方法:采用小鼠巴豆油性耳肿胀、醋酸致毛细血管通透性增加及角又菜胶致小鼠关节肿胀等急、慢性炎症模型,观察苦丁茶提取物的抗炎作用。结果:苦丁茶提取物能明显抑制小鼠巴豆油性耳肿胀,降低醋酸所致毛细血管通透性增加,显著抑制角叉莱胶性足肿胀。结论:苦丁茶提取物具有显著的抗炎作用。

采用GC法分析苦丁茶中可溶性单糖的研究

通过恒温水浸泡,干燥后利用二甲基亚砜(DMSO)作溶剂,六甲基二硅胺烷(TMDS)和三甲基氯硅烷(TMCS)作硅烷化试剂,将单糖衍生化为三甲基硅醚衍生物,以肌醇为内标物,用SE-30毛细管色谱柱,测定了苦丁茶中单糖的组成及含量。同时对比了二甲基酰胺及吡啶的溶解能力和N,O-双三甲基硅烷基乙酰基(BSA)的衍生化效果。方法的相对标准偏差小于8.0%,测得的苦丁茶中单糖含量分别为:葡萄糖0.355%,果糖0.440%,半乳糖4.000%,核糖0.035%,木糖0.150%,阿拉伯糖0.006%。

紫鹃茶和苦丁茶中功效成分的提取分离

优选降压效果显著的紫鹃茶和苦味特征明显的苦丁茶为原料,采用微波辅助有机溶剂提取法对紫鹃茶和苦丁茶中的功效成分进行分离提取获得茶提取物,通过添加茶提取物解决整米苦荞茶热加工过程中特征风味和部分功效成分严重缺失的技术难题。结果表明,不同贮藏期的紫鹃茶除茶黄素含量差异不显著外,其余功效成分差异显著(P<0.05)。苦丁茶老叶、嫩叶及其超微粉营养成分存在显著性差异(P<0.05)。通过正交试验优化,紫鹃茶提取最佳工艺条件为乙醇体积分数65%、微波功率540W、提取时间50s、液料比为10:1,其提取物富含花青素(ΔA示差值0.925),茶多酚27.709%,茶黄素0.707%,茶红素15%,儿茶素259.735mg/g,咖啡碱7.053%;苦丁茶提取最佳工艺条件为乙醇体积分数55%、微波功率360W、提取时间120s、液料比25:1,其提取物苦味浓烈,含黄酮30.79%、叶绿素0.699mg/g、茶多酚13.619%、咖啡碱4.812%、儿茶素26.161mg/g。紫鹃茶和苦丁茶提取物均可作为苦荞茶风味与功能强化用基料。

硒对苦丁茶品质的影响

为探讨硒对苦丁茶品质的影响机制,采用国际上通用的营养液配方对苦丁茶进行了砂培盆栽试验。结果表明:Na2SeO3对苦丁茶硒、锰、VC等品质的提高和改善都非常有利。硒处理苦丁茶30d后,各品质含量均随着硒浓度的增加呈先增加后降低的变化。浓度为3.0mg·L-1时苦丁茶叶片中可溶性蛋白、维生素C、黄酮、皂苷、茶多酚及儿茶素含量最高,此浓度对提高这几种品质含量较好;Na2SeO3浓度为1.0mg·L-1时,苦丁茶叶片中硒含量最高,为1.516μg·g-1,锰含量随着硒浓度的增加而增加,且呈正相关;同时硒浓度为1mg·L-1时游离氨基酸和水浸出物的含量最高,比对照提高20.11%和17.65%,酚氨比的比值最低(9.83),降低为对照的87.35%,作为苦丁茶饮用口感和品质较好。