小鼠金属硫蛋白在聚胞藻中的金属诱导表达与纯化

应用蓝藻类金属硫蛋白基因启动子（ｓｍｔＯＰ）的金属诱导性，在单细胞的聚胞藻ＰＣＣ６８０３中表达小鼠金属硫蛋白结构基因（ｍＭＴ１ｃＤＮＡ）。在大肠杆菌ＨＢ１０１中构建含有ｓｍｔＯＰ和ｍＭＴ１ｃＤＮＡ的穿梭表达载体ｐＫＴＭＲＥ，经质粒转移，链霉素筛选，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交分析鉴定得稳定的转基因工程藻落。同时，做小批量锌诱导表达，并纯化了外源蛋白，５Ｌ培养液含鲜藻重５０ｇ，得到３５ｍｇｍＭＴ１；转基因藻在高金属浓度下的耐受性测定表明，外源基因的表达提高了蓝藻对金属离子的抗性，约为野生藻的２倍。