泛素连接酶WWP1和Smurfs在前列腺癌组织中的表达及其与骨转移的关系

目的探讨泛素连接酶E3 WWP1(WW domain containing E3 ubiquitiin pProtein ligase 1)、Smurf1(smad ubiquitination regulatory factor 1)、Smurf2在前列腺癌骨转移中的作用。方法采用免疫组织化学法和实时定量PCR法分别对良性前列腺增生(对照组)、前列腺癌不伴骨转移患者(无转移组)及前列腺癌伴骨转移患者(转移组)前列腺癌组织中泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2进行检测。结果与对照组相比,前列腺癌患者肿瘤组织中泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2免疫组织化学染色累积光密度值及mRNA表达显著增高,且具有统计学意义(P<0.05);与无转移组相比,转移组患者前列腺癌肿瘤组织中泛素连接酶E3WWP1、Smurf1、Smurf2免疫组织化学染色累积光密度值及mRNA表达显著增高,且具有统计学意义(P<0.05)。结论泛素连接酶E3 WWP1、Smurf1、Smurf2表达增高是前列腺癌发生发展及侵袭转移过程中的可能机制之一。

初诊系统性红斑狼疮患者血清Smad特异性E3泛素蛋白连接酶1及Smad1水平分析

目的通过观察初诊系统性红斑狼疮(SLE)患者血清Smad特异性E3泛素蛋白连接酶1(Smurf1)及Smad1的水平变化,初步探讨Smad1、Smurf1与SLE发生发展的关系。方法选择初诊SLE患者36例纳入病例组,健康体检者36例纳入对照组。采用ELISA法检测两组血清Smurf1、Smad1。分析病例组血清Smurf1、Smad1水平与炎症相关指标[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)6、红细胞沉降率(ESR)]、血常规指标(WBC、Hb、PLT)、肾功能指标(血肌酐、尿素氮)、免疫功能指标(补体C3、C4和免疫球蛋白IgG、IgA、IgM)、自身抗体指标(抗核抗体、抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA、抗SSB)及疾病活动指数(SLEDAI)的相关性。结果病例组血清Smurf1、Smad1水平高于对照组(P均<0.05)。病例组血清Smurf1、Smad1与SLEDAI评分、CRP、IL-6、ESR、WBC、Hb、血肌酐、尿素氮、补体C4、IgG、IgA、IgM均无相关性,血清Smurf1与补体C3、PLT呈负相关(r分别为-0.529、-0.625,P均<0.05),与血清Smad1呈正相关(r=0.719,P<0.05);血清Smad1与PLT呈负相关(r=-0.673,P<0.05)。血液系统受累的SLE患者血清Smurf1水平高于无血液系统受累者(P<0.05)。结论初诊SLE患者血清Smurf1、Smad1异常增高,与PLT、补体水平相关;Smurf1、Smad1可能参与了SLE的发生发展过程,Smurf1、Smad1水平增高可能有助于预测SLE患者血液系统受累。

去泛素化酶USP10通过稳定Smurf1抑制TGF-β/BMP信号通路

目的 探究生理条件下去泛素化酶USP10调控的关键信号通路及分子机制。方法 利用GEO2R和Metascape对Usp10+/+和Usp10-/-新生小鼠肾组织基因芯片(GSE198574)差异表达基因和通路富集分析,使用免疫印迹实验和免疫组化技术检验核心转录因子的表达情况;进一步利用免疫印迹检测该信号通路,并通过基因芯片和免疫组化分析候选分子的表达情况;使用免疫共沉淀(Co-IP)和GST-pull down实验验证USP10与候选分子的相互作用,通过泛素化实验明确USP10对底物分子的调控机制;利用免疫印迹检测细胞增殖、凋亡相关蛋白p21、Cleaved-caspase 3的表达情况,使用CCK-8和克隆形成实验分析USP10对细胞增殖的影响。结果 Usp10-/-新生小鼠肾组织中TGF-β/BMP通路激活,USP10在小鼠体内缺失后导致Smad泛素相关因子1 (Smurf1)蛋白质水平降低,Smad1/5蛋白质水平上调,却不影响它们的转录水平;机制上,USP10与Smurf1存在相互作用,并依赖其去泛素化酶活性去除Smurf1多聚泛素化。Usp10敲除后促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达上调,并抑制细胞的增殖能力。结论 USP10通过去泛素化并稳定Smurf1,抑制TGF-β/BMP信号通路,从而维持小鼠组织器官和细胞增殖稳态。

miR-148a-3p靶向SMURF2调节牙髓干细胞和口腔上皮细胞共培养体系成骨分化及牙釉质发育的作用机制

目的探讨miR-148a-3p在体外牙齿发生中成骨分化和牙釉质发育中的作用,揭示其分子机制。方法获取人牙髓干细胞和口腔上皮细胞。将人牙髓干细胞转染miR-148a-3p mimics、miR-148a-3p抑制剂或阴性对照。通过在Matrigel基质凝胶上接种人牙髓干细胞并覆盖口腔上皮细胞,建立三维共培养系统。采用MTT实验评估miR-148a-3p对共培养细胞增殖和蛋白表达的影响,采用Western blotting实验检测成骨细胞分化(RUNX2)和牙釉质发育标志物(E-cadherin)蛋白表达水平,采用荧光素酶报告实验验证SMURF2(SMAD特异性E3泛素蛋白连接酶2)与miR-148a-3p的相互作用。结果在人牙髓干细胞中使用抑制剂下调miR-148a-3p后,3D共培养中的细胞活力降低(P<0.05)。使用模拟物上调miR-148a-3p后,共培养中成骨标志物RUNX2和牙釉质发育标志物E-cadherin的表达增加(P<0.05)。TargetScan软件预测miR-148a-3p在SMURF2的3’-UTR中有结合位点。荧光素酶报告实验表明miR-148a-3p mimics抑制野生型载体的荧光素酶活性(P<0.05),同时Western blot结果显示miR-148a-3p mimics下调SMURF2的表达(P<0.05)。结论miR-148a-3p可能通过靶向SMURF2,调控RUNX2和E-cadherin的表达,参与了人牙髓干细胞成骨分化和上皮细胞牙釉质发育。为牙齿修复和治疗提供了潜在的治疗靶点。

miR-20a-3p基因干扰对人牙髓干细胞成牙本质分化的影响及信号通路调控机制

目的:探讨miR-20a-3p基因干扰对人牙髓干细胞(hDPSCs)成牙本质分化的影响及信号通路调控机制。方法:对hDPSCs转染miR-20a-3p-mimic和miR-20a-3p-inhibitor来上调或下调其表达,然后对hDPSCs进行成牙本质分化诱导培养。通过茜素红染色观察细胞钙基质的矿化程度并检测ALP活性。通过双荧光素酶报告基因测定实验验证miR-20a-3p与mothers against decapentaplegic homolog(SMAD)特异性E3泛素蛋白连接酶1(SMURF1)的靶向调节关系。通过RT-qPCR检测hDPSCs中miR-20a-3p以及SMURF1、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙蛋白(OCN)和牙本质涎磷蛋白(DSPP)mRNA水平。结果:与Control组相比,miR-20a-3p-mimic组的茜素红相对染色强度升高了67.09%,miR-20a-3p-inhibitor组降低了46.13%(P<0.05)。与Control组相比,miR-20a-3p-mimic组的相对ALP活性升高了52.89%,miR-20a-3p-inhibitor组降低了53.32%(P<0.05)。与Control组相比,miR-20a-3p-mimic组的RUNX2、OCN和DSPP mRNA相对表达量分别升高了2.19倍、1.86倍和2.35倍,miR-20a-3p-inhibitor组分别降低了63.26%、58.84%和68.12%(P<0.05)。双荧光素酶报告基因测定显示miR-20a-3p靶向抑制SMURF1(P<0.05)。过表达SMURF1抑制了miR-20a-3p对成牙本质分化的影响(P<0.05)。结论:miR-20a-3p通过靶向抑制SMURF1及其下游基因促进hDPSCs的成牙本质分化。

Smurf攻击及其对策研究

Smurf攻击为DDoS攻击中较为常见的一种。该攻击方式利用TCP/IP协议自身的缺陷 ,结合使用IP欺骗和ICMP回复方法 ,使网络因响应ICMP回复请求而产生大量的数据流量 ,导致网络严重的拥塞或资源消耗 ,引起目标系统拒绝为合法用户提供服务 ,从而对网络安全构成重大威胁。该文在分析了这种攻击实施的原理的基础上 ,提出这种攻击的检测方法和防范技术。

脂溢性角化病皮损区Smurf1和Smurf2表达增强

目的探讨脂溢性角化病皮损区Smad泛素化调节因子1和2(Smad ubiquitination regulatory factor1 and 2,Smurf1,2)的表达及其意义。方法采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative Real-time PCR,RT-PCR)和免疫组织化学技术分别检测脂溢性角化病皮损和对照正常皮肤中Smurf1和2的表达情况。结果与对照正常皮肤相比,脂溢性角化病皮损中Smurf1和2表达水平上调。结论脂溢性角化病皮损中Smurf1和2的过度表达可干扰转化生长因子β(transfor-ming growth factor-β,TGF-β)信号转导通路,可能使TGF-β抑制上皮增生的作用不能有效发挥,促进了脂溢性角化病表皮的过度增生。

补肾填精中药对骨质疏松症模型大鼠股骨中Smurf1信号转导蛋白表达影响的实验研究

目的通过观察去卵巢骨质疏松症模型大鼠股骨中Smurf1的表达变化,探索骨质疏松症的发病机理。方法实验采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,同时应用补肾填精作用的纳米钙补肾填精中药低、高剂量组,对模型大鼠给药干预12周,用骨疏康颗粒剂、盖天力作为阳性对照组,以及正常对照组、假手术对照组和模型空白组,并与补脾中药补中益气汤作比较;免疫组化SABC法检测股骨中的Smurf1蛋白活性表达。结果与正常组相比较,模空组Smurf1阳性表达显著下降,P<0.01;用药12周后,与模空组相比较,各用药组均可上调其表达情况,P<0.01。结论骨组织中Smurf1阳性表达降低可能是骨质疏松症发生的机制之一,补肾填精中药可能通过改善和调控股骨中Smurf1的表达,而起到防治骨质疏松症的作用。

基于标签速度和滑动子窗口的RFID数据清洗算法

为提高非匀速RFID(Radio Frequency Identification)数据流情形下的数据清洗准确性,在传统数据清洗算法SMURF(statistical SMoothing for unreliable RFID data)的基础上,提出了一种基于标签速度和滑动子窗口的RFID数据清洗方法。该方法考虑到标签速度对滑动窗口调整的影响,依据标签速度动态调整置信度δ,同时进一步划分滑动窗口,对子窗口中的标签数据进行统计采样,并将其与整个滑动窗口的统计采样处理结果联合起来,以及时检测出标签的跃迁现象,从而准确判断标签的运动情况。实验表明,该方法有效地降低了平均错误率和积极读现象的出现频度,提高了数据准确性。

Smurf2与肿瘤关系的研究进展

Smad 泛素化调节因子2(Smurf2)属于泛素蛋白水解酶途径中的一种E3泛素连接酶。研究发现Smurf2与肿瘤的发生、发展密切相关,其在肿瘤中的作用并不单纯依赖于泛素连接酶活性,亦可通过其他方式参与细胞增殖、凋亡、衰老、迁移等过程,从而调控肿瘤的发展。本文就Smurf2与肿瘤关系的研究进展作一综述。

甘草酸二胺对输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及机制

目的:探讨甘草酸二胺对肾间质纤维化的作用及其机制。方法:以Wistar大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)为模型,在不同的时间点(7d、14d、28d)观察梗阻侧肾间质纤维化指数;致纤维化的转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况;肾皮质中与肾脏纤维化相关的Smurf2、Smad7信号蛋白等的mRNA及蛋白表达。结果:(1)随着梗阻时间的延长,肾间质纤维化程度逐渐加重,Smurf2基因和蛋白质明显上调,呈时间依赖性(P<0.01);Smad7蛋白呈时间依赖性下调(P<0.01),Smad7基因在各个时间点无明显变化;TGF-β1基因在UUO后第7d达高峰,此后逐渐下降,但仍然高于假手术组(P<0.01)。(2)甘草酸能改善UUO所致的肾间质纤维化程度(P<0.01),下调肾脏组织TGF-β1基因的表达(P<0.01);减少Smurf2基因和蛋白质的表达,同时上调TGF-β1信号传导中抑制性因子Smad7的表达(P<0.01)。结论:甘草酸二胺能保护UUO所致的肾间质纤维化损伤。其可能的作用机制为减少Smurf2核酸和蛋白质的表达,增加抗纤维化作用的Smad7蛋白表达;减少TGF-β1表达,阻止TGF-β信号传导,从而阻断肾间质的纤维化。

Smurf2在梗阻性肾病小鼠肾小管上皮细胞转分化形成中的作用

目的:探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在小鼠单侧输尿管梗阻所致肾间质纤维化进展中的作用机制。方法:采用结扎雄性CD-1小鼠单侧输尿管(UUO)的方法建立肾间质纤维化动物模型,设假手术为对照组(Sham组)。术后3、7、14 d处死小鼠。用常规病理染色法观察两组小鼠肾组织形态和肾间质纤维化程度;以免疫蛋白印迹及免疫组织化学染色法检测两组小鼠肾组织中Smurf2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接素(FN)的表达和分布。结果:与Sham组相比,UUO术后7 d小鼠出现部分肾小管扩张、萎缩和肾间质纤维化。同时,UUO术后肾组织中Smurf2、α-SMA和FN表达呈时间依赖性升高,E-cadherin表达则明显下降。并且,Smurf2蛋白主要分布于肾小管上皮细胞核内;α-SMA分布于肾小管上皮细胞和肾间质中;FN则分布于肾间质中。相关回归分析表明:UUO术后小鼠肾组织内Smurf2表达与α-SMA(r=0.765,P<0.001)和FN蛋白水平呈正相关(r=0.773,P<0.001);与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.656,P<0.001)。结论:梗阻性肾病小鼠肾组织中Smurf2可能通过诱导肾小管EMT形成促进肾间质纤维化的进展。

Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用

骨形态发生蛋白(BMP)是明确具有诱导成骨作用的生长因子。其通过结合靶细胞表面受体,活化细胞内一系列Sm ad蛋白,经Sm ad蛋白介导,将信号转导至细胞核内,在一系列辅助因子的作用下,启动成骨基因的表达。细胞内源性Smurf1对这一整个过程起抑制作用。本文就Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用做一综述。

Smad泛素化调节因子2在转化生长因子β1诱导人肺成纤维细胞活化中的作用及其分子机制

目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞活化中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,10μg·L-1 TGF-β1作用1、2和6h(分别为TGF-β1 1h组、TGF-β1 2h组和TGF-β1 6h组),并设对照组(不加TGF-β1),RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Smurf1和Smurf2mRNA和蛋白的表达水平。MRC-5细胞随机分为对照组(未加入TGF-β1或siRNA)、TGF-β1组(10μg·L-1 TGF-β1)、Control siRNA转染组(10μg·L-1 TGF-β1+Control siRNA)和Smurf2siRNA转染组(10μg·L-1 TGF-β1+Smurf2siRNA)。Western blotting法检测各组细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α1(COL1A1)的表达水平;RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Smad7、核转录共抑制因子SnoN、TGF-βⅠ型受体(TβRⅠ)、Smad2和Smad3mRNA和蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,各TGF-β1组细胞中Smurf2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且随着TGF-β1作用时间的延长,其表达水平呈逐渐增加的趋势;与对照组比较,各TGF-β1组细胞中Smurf1表达水平无明显变化(P>0.05)。与TGF-β1组比较,Smurf2siRNA组细胞中Smurf2蛋白表达水平下降(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中α-SMA和COL1A1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与TGF-β1组比较,Smurf2siRNA组细胞中α-SMA和COL1A1蛋白表达水平均下降(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组和Smurf2siRNA组细胞中Smad7和SnoN mRNA表达水平均升高(P<0.05),而Smurf2siRNA组和TGF-β1组细胞中Smad7和SnoN mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中Smad7和SnoN蛋白表达水平均明显下降(P<0.05);与TGF-β1组比较,Smurf2siRNA组细胞中Smad7和SnoN蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组和Smurf2siRNA组细胞中TβRⅠmRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而Smurf2siRNA组和TGF-β1组细胞中TβRⅠmRNA和蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞中Smad2和Smad3mRNA和蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Smurf2可能通过泛素化降解Smad7和SnoN,参与调控TGF-β1/Smads信号通路,从而发挥其促进TGF-β1活化肺成纤维细胞的作用。

转化生长因子β1对大鼠血管平滑肌细胞Smurf2和Ⅰ型胶原表达的影响

目的探讨体外条件下转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)Smad泛素调节因子2(Smurf 2)以及Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达的影响。方法应用RT-PCR法检测Smurf2 mRNA的表达,Western印迹法检测Smurf2蛋白的表达,ELISA检测ColⅠ的表达。结果不同浓度TGF-β1(1、5、10μg/L)作用于VSMCs后,细胞中Smurf2的表达量均低于对照组(P<0.05),且5、10μg/L组同对照组相比差异显著(P<0.01),ColⅠ的浓度高于对照组(P<0.05),且5μg/L组同对照组相比差异显著(P<0.01)。结论 TGF-β1呈浓度依赖性抑制Smurf2的表达,促进ColⅠ的产生。

SHP和Smurf2在大鼠肝纤维化中的动态表达及意义

目的观察小异二聚体伴侣(small heterodimer partner,SHP)和Smad泛素化调节因子-2(Smad ubiquitin regulatoryfactor-2,Smurf2)在大鼠肝纤维化进展过程中的动态变化及二者之间与TGF-β1的关系的探讨。方法清洁级SD大鼠分两组:正常对照组6只,模型组24只,二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型。造模后分别在第2、4、6、8周取大鼠静脉血及肝脏标本,HE和Masson染色并光镜下观察各组大鼠肝组织病理变化;RT-PCR检测SHP、Smurf2、TGF-β1 mRNA在造模过程中的动态变化。结果模型组第4、6周肝纤维化明显;模型组血清ALT、AST、HA升高,并于4周时达高峰;Alb逐步下降,6周时最低,各时间点与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。造模后,SHP mRNA表达逐渐增加,第4周达到高峰(0.397±0.016),随后在第6、8周逐渐降低,且明显低于对照组,各模型组与对照组相比有统计学差异(P=0.019,P<0.001,P<0.001,P<0.001);Smurf2 mRNA在肝纤维化的过程中表达呈进行性增高,8周达到高峰(0.408±0.054),与对照组(0.229±0.024)相比有统计学差异(P<0.001);TGF-β1 mRNA表达水平逐步增高,于4周时达高峰(0.656±0.036),各模型组与对照组(0.304±0.037)相比具有统计学差异(均P<0.01)。直线相关分析提示SHP与TGF-β1 mRNA呈正相关(r=0.674,P<0.01)。结论 SHP、Smurf2在肝纤维化过程中呈升高趋势,分别在第4、8周达到高峰,提示二者可能在肝纤维化发生发展过程中起到重要作用。

SnoN蛋白在慢性同种移植肾病大鼠肾组织中的表达及作用

目的:观察Smad核转录共抑因子(SnoN蛋白)在慢性移植肾病(CAN)大鼠肾组织的表达及其与CAN大鼠肾脏功能改变、病理学改变、Smad泛素化调节因子2(Smurf2)之间的关系,探讨SnoN蛋白在CAN中的作用。方法:实验组采用近交系大鼠的同种异基因动物间的左肾原位移植,雄性F344大鼠40只为供体,雄性LEW大鼠40只为受体,移植手术后第10天行右肾切除术,对照组采用单肾切除术的雄性大鼠25只。分别于4周、8周、12周、16周及24周处死大鼠,做肾功能、移植肾组织学检测,并借助免疫组织化学与免疫印迹、逆转录-多聚酶联反应方法检测肾组织中snoN蛋白、snoNmRNA的表达;免疫组织化学与免疫印迹方法检测肾组织smurf2的表达,免疫印迹方法检测肾组织p-smad2/3蛋白的表达水平,逆转录-多聚酶联反应方法检测肾组织TGF-β1mRNA的表达。结果:移植组大鼠尿蛋白定量、血清肌酐水平于移植后16周时显著增高,24周时更为显著。snoN蛋白在移植组逐渐降低,24周时降至最低,为对照组的13%。snoNmRNA在移植组和对照组差异无统计学意义;p-smad2/3、smurf2在移植后随疾病进展逐渐升高,24周时达高峰。免疫组织化学结果显示snoN蛋白表达部位、表达时相与smurf2是一致的。相关分析显示,肾移植大鼠snoN蛋白表达水平与24h尿蛋白定量、血清肌酐水平、肾间质纤维化程度呈负相关(P<0.05,P<0.01)。与smad2/3、smurf2水平呈显著负相关(P<0.01)。结论:SnoN蛋白表达下调在CAN发病机制中起作用,同时Smurf2介导SnoN蛋白降解可能参与了这个过程。

SMURF1、RUNX3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨SMURF1、RUNX3蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及其与患者临床病理特征的相关性。方法采用免疫组化SP法检测60例PTC组织及20例正常甲状腺组织中SMURF1、RUNX3蛋白的表达,分析两者在PTC与正常甲状腺组织中的表达差异及其与PTC患者临床病理特征的相关性。结果 PTC组织中SMURF1蛋白阳性表达率高于正常甲状腺组织,而RUNX3阳性表达率低于正常甲状腺组织(均P<0.01);SMURF1、RUNX3蛋白的表达与PTC患者的TNM分期、病理分级及淋巴结转移均相关(均P<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤大小等因素均无关(均P>0.05)。PTC组织中SMURE1的蛋白表达与RUNX3蛋白表达呈负相关(r=-0.564,P<0.05)。结论 SMURF1、RUNX3蛋白在PTC组织中表达异常,并呈负相关,提示两者可能相互作用,共同促进PTC发生、发展,两者可作为PTC分类和分期的辅助指标。

泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病大鼠视网膜上Smurf2及Smad7表达的影响

目的探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜上Smurf2及Smad7的表达的影响。方法选择健康雄性Wistar大鼠60只,按随机数字表法分为正常对照组、DM组和MG132干预组各20只。MG132干预组与DM组给予一次性腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),正常对照组一次性给予等体积的柠檬酸三钠-柠檬酸缓冲液(pH 4.5)腹腔注射。自第三天起,MG132干预组大鼠每天给予0.1 mg/kg MG132 DMSO液腹腔注射,正常对照组和DM组每天给予0.1 mg/kg DMSO液腹腔注射。分别于给药后第8周和第12周处死各组大鼠,完整摘除大鼠的左眼球制成眼杯,采用免疫组织化学的方法检测各组大鼠视网膜上Smurf2及Smad7蛋白的表达。结果正常对照组大鼠视网膜上Smurf2无表达或弱表达,Smad7蛋白高表达。MG132干预组和DM组大鼠视网膜上Smurf2的表达均较正常对照组明显增加(P<0.01),Smad7的表达均较正常对照组明显降低(P<0.01);MG132干预组大鼠视网膜上Smurf2的表达较DM组明显降低(q分别为20.37和40.96,均P<0.01),Smad7的表达较DM组明显增加(q分别为67.20和187.00,均P<0.01)。结论泛素-蛋白酶体抑制剂MG132能够通过抑制Smurf2的表达使DM大鼠视网膜上Smad7的降解减少,对DR的防治具有重要意义。

Smad泛素化调节因子与组织修复及器官纤维化的研究进展

泛素(ubiquitin)因其在整个生物界广泛存在而得名。泛素依赖性的蛋白质降解系统通过降解缺陷无用的蛋白质和失活的各种细胞器,影响着机体的染色体结构与功能、遗传信息的复制与表达、细胞信号传导与调节等常见生命现象。转化生长因子β(transforming growth factor β)及TGF-β/Smad信号传导通路在组织修复及器官纤维化过程中起重要作用。TGF-β/Smad信号传导调节机制复杂,其中探讨TGF-β/Smad信号传导通路的终止机制是近年研究热点。随着泛素-蛋白水解酶复合体可阻断TGFB/Smad信号分子作用的发现,一类特异性介导Smads泛素化降解的关键泛素酶—Smads泛素化调节因子(Smad ubiquitination regulatoryfactors,Smurfs)逐渐为学者所重视。本文对Smurfs与组织修复、纤维化过程中的生理及病理研究进展作如下综述。