工频均匀强磁场促进体外培养SNU细胞凋亡及其相关机理的研究

观察50Hz工频均匀强磁场(0.097T)对人低分化胃腺癌细胞株-SNU细胞凋亡的影响,并通过检测Bax、Bcl-2和Caspase-3三种蛋白表达的变化探讨其可能机制。体外培养SNU细胞,给予50Hz工频均匀强磁场(0.097T)处理后应用流式细胞定量检测和透射电镜超微结构观察,研究该磁场对SNU细胞凋亡的影响,并应用流式细胞定量检测、免疫细胞化学染色和蛋白免疫印迹相结合的方法,检测三种凋亡相关蛋白的表达。给予工频均匀强磁场处理后SNU细胞的凋亡率明显升高,此外,SNU细胞内Bax和Caspase-3蛋白的表达量随处理时间延长逐渐增加,而给予磁场处理后Bcl-2蛋白的表达量随处理时间延长逐渐下降。工频均匀强磁场处理可以促进体外培养SNU细胞凋亡,其可能机理为上调Bax和Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。

一种高性能低功耗的双节点翻转加固锁存器

随着半导体工艺尺寸的发展,时钟频率越来越高,临界电荷变得越来越小,电路节点之间的电荷共享效应变得愈加严重,因此导致多节点翻转(multiple node upsets,MNU)的几率变大。为了解决MNU的问题,文章提出了一种高性能低功耗的双节点翻转加固锁存器(HLDRL),当受到单粒子效应影响时,具有单节点翻转(single node upset,SNU)和双节点翻转(double node upsets,DNU)的自恢复能力。该锁存器由18个异构输入反相器组成,仿真实验结果显示该锁存器具有优良的容错性能,可以实现DNU的完全自恢复,而且对高阻态不敏感。与其他容忍DNU的锁存器相比,该锁存器具有较小的开销,延迟和功耗延迟积分别减小了46.83%和45.85%。

工频磁场对离体细胞胞浆钙离子浓度的影响

研究了50 Hz工频均匀强磁场(0.097 T)对人低分化胃腺癌细胞株—SNU细胞和人淋巴细胞胞浆钙离子浓度的影响.将体外培养的SNU细胞和人淋巴细胞,施加50 Hz工频均匀强磁场(0.097 T),处理不同时间后,应用共聚焦显微镜检测胞浆内钙离子浓度.实验表明,给予工频均匀强磁场处理后,SNU细胞和人淋巴细胞胞浆内钙离子浓度均升高.

构建稳定表达pLVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU719细胞系

目的:构建稳定表达pLVshRNA-EGFP-EBVsponge的SNU719细胞系。方法:合成能与EB病毒(EBV)编码的EBV-miR-BART16、EBV-miR-BART4-5p、EBV-miR-BART5-5p及EBV-miR-BART22 miRNAs特异结合的miRNA海绵(miRNA sponge)序列,用PITA软件预测构建的sponge是否结合非特异性miRNAs;构建pLVshRNA-EGFP-EBVsponge载体,与慢病毒包装质粒pH1、pH2共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,感染SNU719细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞株;Real-time PCR检测细胞中EBV-miR-BART16、EBV-miRBART4-5p、EBV-miR-BART5-5p及EBV-miR-BART22表达水平。结果:成功构建pLVshRNA-EGFP-EBVspong(命名为pEGFP-EBV-sp);与对照组相比,pEGFP-EBV-sp组中4种microRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建稳定表达pEGFP-EBV-sp的SNU719细胞系。

禾谷镰刀菌剪接体蛋白FgSnu114上的自发突变部分恢复Fgprp4的生长缺陷

由剪接体催化的前体mRNA剪接是一个重要的生物过程。Prp4作为剪接体组分中唯一的蛋白激酶,在剪接体的组装及激活过程中发挥关键作用。禾谷镰刀菌的Fgprp4突变体生长缺陷严重,易角变。本研究以251株Fgprp4突变体的角变子为着入点,鉴定了U5蛋白FgSnu114上的4个角突变位点。通过对角变子和模拟角变子(FgSNU114引入角突变并敲除FgPRP4的突变体)的表型比较验证了角突变D222N和ΔK695,明确FgPrp4和FgSnu114间的遗传互作。RNA-Seq分析发现角变子S172中约有23%的内含子具有剪接缺陷,解释了其有性生殖和侵染小麦的缺陷。进一步的磷酸化位点鉴定和模拟磷酸化实验证明FgSnu114的S451位点可能不是FgPrp4的磷酸化位点或关键磷酸化位点。本研究首次探讨了Prp4与Snu114之间的关系,有助于今后进一步揭示禾谷镰刀菌前体mRNA剪接的调控机制。

姜黄素对人肝癌细胞SNU475增殖及凋亡的影响

目的：探讨姜黄素对人肝癌细胞SNU475增殖及凋亡的影响机制。方法：MTT法测定姜黄素对肝癌肿瘤细胞SNU475的增殖抑制率,进一步的利用Western blot法检测相关蛋白的表达,并利用荧光染色法检测姜黄素存在下,肝癌细胞SNU475形态的变化,最后对肝癌细胞凋亡蛋白Caspase 3活性进行了探讨。结果：姜黄素（0.5-1.5μmol/L）能够诱导了肝癌细胞SNU475的凋亡,且存在时间和剂量依赖性;Western blot法检测相关蛋白的表达结果表明,姜黄素（0.5、1.0μmol/L）能够诱导肝癌细胞SNU475中Akt、Bcl-2、组蛋白H3、H4和Cyclin D1的表达下降,有显著性差别,p21WAF1/CIP1蛋白表达水平显著上调;荧光染色法检测结果显示,在姜黄素（1.0μmol/L）药物作用后24h、48h、72h,肝癌细胞SNU475的形态均可见明显改变;Caspase 3活性检测结果表明,姜黄素（0.5、1.0μmol/L）能显著提高肝癌细胞SNU475中凋亡蛋白Caspase 3活性。结论：姜黄素作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂能够诱导肝癌细胞SNU475的凋亡,并对相关蛋白的表达和Caspase 3活性造成影响,最终对肝癌细胞SNU475的凋亡起到重要作用。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对体外培养胃癌细胞SNU凋亡的影响

目的探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对胃癌细胞SNU凋亡的影响。方法体外培养的胃癌细胞株SNU经不同浓度（50、100、1000、2000μg／L）DON处理12h，以流式细胞术（FCM）和免疫蛋白印记（Western blotting）法检测细胞凋亡和凋亡相关蛋白bax、bcl-2、Caspase-3的表达情况。结果FCM榆测结果表明，DON处理12h后，各处理组SNU细胞凋亡率均高于对照组。在50～2000μg／L浓度范同内随着DON浓度升高凋亡率亦相应升高，两者呈明显剂量依赖关系（r=0．940，P〈0．01）。FCM和Westrn blotting法检测结果显示，DON作用12h后，SNU细胞bax和Caspase-3表达升高，bcl-2表达降低．结论DON可剂量依赖地诱导体外培养的胃癌细胞SNU凋亡，上调bax蛋白的表达，下调bcl-2蛋白的表达，进而激活Caspase-3，可能在SUN细胞凋亡过程中发挥作用。