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Transfection of the Human Sodium/Iodide Symporter(NIS) Gene with Liposomes and the Expression of the NIS Protein in Human Lung A549 Cancer Cells 被引量:1
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作者 严煜 张宏飞 +1 位作者 张裕东 王晓谭 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2008年第1期30-34,共5页
OBJECTIVE To examine the possibility of human sodium iodide symporter (hNIS) protein expression in lung cancer cells. METHODS Human lung A549 cancer cells were thawed and cultured in vitro. The cells were divided in... OBJECTIVE To examine the possibility of human sodium iodide symporter (hNIS) protein expression in lung cancer cells. METHODS Human lung A549 cancer cells were thawed and cultured in vitro. The cells were divided into an experimental group transfected with a recombinant pcDNA3-hNIS plasmid and a control group transfected only with a pcDNA3 plasmid. The recombinant plasmid vector encoding the hNIS gene (pcDNA3-hNIS) was amplified, purified and identified. The hNIS gene was followed by DNA sequencing. A Western blot and an immunohistochemical assay were applied to detect the hNIS protein expression in the transfected human lung A549 cancer cells. RESULTS Restriction enzyme digestion and DNA sequencing results showed the size and direction of the inserted gene in the recombinant pcD- NA3-hNIS plasmid was correct. The Western blot method and immunohistochemical analysis showed a positive NIS protein expression in the experimental group. The NIS protein was detected mainly in the cell membranes showing a positive rate up to 70.6% with no expression of the NIS protein in the control group. There was a significant difference between two groups (P=0.000). CONCLUSION The hNIS gene was transfected effectively into human lung A549 cancer cells mediated by Lipofectamine 2000, and was expressed with its protein in vitro. 展开更多
关键词 human sodium/iodide symporter (SIN) non-small-cell-lung cancer (NSCLC) gene transfection LIPOSOME radioiodide therapy
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Radioiodine therapy for castration-resistant prostate cancer following prostate-specific membrane antigen promoter-mediated transfer of the human sodium iodide symporter 被引量:7
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作者 Xiao-Feng Gao Tie Zhou Guang-Hua Chen Chuan-Liang Xu Ye-Lei Ding Ying-Hao Sun 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期120-123,共4页
Radioiodine therapy, the most effective form of systemic radiotherapy available, is currently useful only for thyroid cancer because of the thyroid-specific expression of the human sodium iodide symporter (hNIS). He... Radioiodine therapy, the most effective form of systemic radiotherapy available, is currently useful only for thyroid cancer because of the thyroid-specific expression of the human sodium iodide symporter (hNIS). Here, we explore the efficacy of a novel form of gene therapy using prostate-specific membrane antigen (PSMA) promoter-mediated hNIS gene transfer followed by radioiodine administration for the treatment of castration-resistant prostate cancer (CRPC). The androgen-dependent C33 LNCaP cell line and the androgen-independent C81 LNCaP cell line were transfected by adenovirus. PSMA promoter-hNIS (Ad.PSMApro-hNIS) or adenovirus.cytomegalovirus-hNIS containing the cytomegalovirus promoter (Ad.CMM-hNIS) or a control virus. The iodide uptake was measured in vitro. The in vivo iodide uptake by C81 cell xenografts in nude mice injected with an adenovirus carrying the hNIS gene linked to PSMA and the corresponding tumor volume fluctuation were assessed. Iodide accumulation was shown in different LNCaP cell lines after Ad.PSMApro-hNIS and Ad.CMV-hNIS infection, but not in different LNCaP cell lines after adenovirus.cytomegalovirus (Ad.CMV) infection. At each time point, higher iodide uptake was shown in the C81 cells infected with Ad.PSMApro-hNIS than in the C33 cells (P 〈 0.05). An in vivo animal model showed a significant difference in 1311 radioiodine uptake in the tumors infected with Ad.PSMApro-hNIS, Ad.CMV-hNIS and control virus (P 〈 0.05) and a maximum reduction of tumor volume in mice infected with Ad.PSMApro-hNIS. These results show prostate-specific expression of the hNIS gene delivered by the PSMA promoter and effective radioiodine therapy of CRPC by the PSMA promoter-driven hNIS transfection. 展开更多
关键词 genetic therapy prostate-specific membrane antigen (PSMA) prostatic neoplasms sodium-iodide symporter
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Human sodium/iodide symporter gene induced iodine uptake in human lung adenocarcinoma via baculovirus
3
作者 GUO Rui ZHANG Yifan LIANG Sheng ZHANG Miao JIANG Xufeng LI Biao 《Nuclear Science and Techniques》 SCIE CAS CSCD 2010年第2期99-105,共7页
To investigate human sodium/iodide symporter (hNIS) induced iodine uptake in human lung adenocarcinoma via baculovirus, a recombinant baculovirus encoding hNIS gene was constructed under the control of CMV promoter (B... To investigate human sodium/iodide symporter (hNIS) induced iodine uptake in human lung adenocarcinoma via baculovirus, a recombinant baculovirus encoding hNIS gene was constructed under the control of CMV promoter (Bac-CMV-hNIS). In vitro, baculovirus infected A549 cells accumulated about 27 times more 125I than that of noninfected cells. The 125I uptake was maximal after 30-min incubation of the cells, and efflux of the radioactivity was rapid, with 50% lost during the first 2 min after 125I-containing medium had been replaced by nonradioactive medium. Competition experiments in the presence of sodium perchlorate revealed a dose-dependent decrease of 125I uptake. Bac-CMV-hNIS infected tumor cells were selectively killed by exposure to 131I, as revealed by clonogenic assays. In nude mice, Bac-CMV-hNIS infected A549 cells accumulated more 131I than that of the control monitored by 1-h scintigraphy after 131I administration. The transduction of hNIS gene through baculovirus is sufficient to induce iodine transporting in A549 cells in vitro and in vivo, outlining the potential of this novel tumor gene imaging approach. But a rapid efflux of radioactivity from the tumor was shown in vivo and the in vivo therapy test showed no sign of effect. 展开更多
关键词 重组杆状病毒 基因编码 吸收剂量 肺腺癌 转运体 诱导 125I标记 巨细胞病毒
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Radiofrequency induction on sodium/iodide symporter expression of thyroid cancer
4
作者 Youxin Tian Qinjiang Liu Yaqiong Ni 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2013年第11期516-520,共5页
Objective; The aim of this study was to investigate the effects of radiofrequency treatment on sodium/iodide symporter expression of thyroid cancer ceils. Methods: In 29 thyroid cancer patients with low or no express... Objective; The aim of this study was to investigate the effects of radiofrequency treatment on sodium/iodide symporter expression of thyroid cancer ceils. Methods: In 29 thyroid cancer patients with low or no expression of soda / iodide symporter, the radio frequency combined 1311 therapy was used, the whole-body scintigraphy and serum Ig were detected before and after the radiofrequency treatment. Results: The whole-body scintigraphy showed that 4 cases (4/29) before radiofrequenc_y treatment had positive iodine uptake, 19 cases (19/29) two weeks after radiofrequency treatment had the positive iodine uptake, 12 cases (12/29) four weeks after radiofrequency treatment had the positive iodine uptake. Four weeks after radiofrequency treatment, 5 cases had increased serum Ig levels, 17 cases had decreased serum Ig levels, 7 cases showed no change. 25 cases (25/29) were effective, 15 cases (15/29) were cured. Conclusion: The radiofrequency induced the non-expressed the sodium/iodide symporter of thyroid cancer cells regain the iodine intake ability, it improved the clinical efficacy of 131I therapy in dedifferentiated thyroid cancer. 展开更多
关键词 thyroid carcinoma radiofrequency ablation sodium/iodide symporter
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Correlation analysis between serum β2-MG and sodium/iodide symporter in patients with thyroid carcinoma
5
作者 Xiaofeng Hou Qinjiang Liu Shihong Ma 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2013年第2期65-67,共3页
Objective: The aim of our study was to investigate the correlation between the expression of sodium/iodide symporter, serum levels of β2-MG and prognosis of thyroid carcinoma patients. Methods: Ninty-five cases wit... Objective: The aim of our study was to investigate the correlation between the expression of sodium/iodide symporter, serum levels of β2-MG and prognosis of thyroid carcinoma patients. Methods: Ninty-five cases with thyroid carcinoma, using enzyme-linked immunosorbent assay with double-antibody sandwich to detect the serum β2-MG levels and immunehistochemistry to detect NIS expression of thyroid cancer tissue. Results: Thirty-seven cases showed positive expression of sodium/iodide symporter (38.9%) and 30 cases showed positive expression of β2-MG (31.57%). There were significant differences of NIS expression (X2 = 8.207, P = 0.017) and β2-MG expression (X2 = 10.121, P = 0.006) between different pathological types of thyroid carcinoma, but there was no correlation between the positive rate of the two research groups (r = -0.546, P = 0.633). The significant differences was observed in expression of sodium/iodide symporter (X2 = 9.272, P=0.002) and expression of β2-MG (X2 = 4.441, P = 0.035) between the group with neck lymph node metastasis and the group without neck lymph node metastasis and both positive rate was significantly negatively correlated (r = -1.000, P = 0.000). The significant differences was observed in expression of sodium/iodide symporter (X2 = 9.272, P = 0.002) and expression of β2-MG (X2 = 3.867, P = 0.043) between the group with distant organ metastasis and the group without distant organ metastasis (X2 = 11.985, P = 0.001) and both positive rate was significantly negatively correlated (r = -1.000, P = 0.000). Conclusion: There are significantly negatively correlated between neck lymph node metastasis, distant organ metastasis and expression of sodium/iodide symporter and expression of β2-MG. Thyroid cancer lymph node and distant organ metastasis, the tumor tissue NIS expression and serum levels of β2-MG is significantly negatively correlated. The detection of serum β2-MG provides clinical reference value for the effects on radionuclide therapy and prognosis assessment of thyroid carcinoma. Serum β2-MG levels is negatively correlated with prognosis in thyroid cancer patients. 展开更多
关键词 thyroid carcinoma sodium/iodide symporter Β2-MICROGLOBULIN
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甲状腺癌NIS和TSHR表达的矛盾性及非相关性 被引量:7
6
作者 王志峰 刘勤江 +2 位作者 廖世奇 葛廷 杨荣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期909-913,共5页
目的研究钠/碘转运蛋白(sodium/iodide symporter,NIS)和促甲状腺激素受体(thyroid stim-ulating hormone receptor,TSHR)在甲状腺癌中的表达和相关性。方法收集正常甲状腺组织18例、甲状腺癌23例,通过荧光定量分析和免疫组织化学SP法对... 目的研究钠/碘转运蛋白(sodium/iodide symporter,NIS)和促甲状腺激素受体(thyroid stim-ulating hormone receptor,TSHR)在甲状腺癌中的表达和相关性。方法收集正常甲状腺组织18例、甲状腺癌23例,通过荧光定量分析和免疫组织化学SP法对NIS和TSHR的表达进行研究。结果甲状腺癌NIS和TSHR mRNA的表达显著低于正常甲状腺组织(P<0.005),正常甲状腺组织NIS和TSHR的表达呈显著正相关(r=0.667,P=0.000),而在甲状腺癌中无相关性(r=0.222,P=0.376)。免疫组织化学结果表明甲状腺癌NIS阳性产物主要定位于细胞质,TSHR阳性产物定位于细胞质和细胞膜,甲状腺癌NIS及TSHR蛋白阳性表达率显著高于正常组(P<0.05);甲状腺癌NIS mRNA表达下降同时伴有细胞质NIS蛋白表达升高的有17例(74%)。结论甲状腺癌NIS和TSHR表达具有非相关性以及在转录和翻译水平上具有矛盾性,NIS蛋白非功能定位于细胞质,因而不能发挥正常的运输及聚碘功能,我们推测这可能是造成甲状腺癌患者放射性碘治疗失败的重要原因。 展开更多
关键词 甲状腺癌 钠/碘转运蛋白 促甲状腺激素受体 荧光定量分析 免疫组织化学
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携带人NIS基因的重组腺病毒的构建 被引量:2
7
作者 黄蕤 匡安仁 +2 位作者 余海放 马超 唐恭顺 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期765-768,共4页
利用RT-PCR技术从Graves甲亢病人的甲状腺组织中扩增得到甲状腺钠/碘同向转运体(NIS)可编码区片段,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pAdTrack-CMV上,再与含有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183同源重组,经293细胞包装... 利用RT-PCR技术从Graves甲亢病人的甲状腺组织中扩增得到甲状腺钠/碘同向转运体(NIS)可编码区片段,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pAdTrack-CMV上,再与含有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183同源重组,经293细胞包装并扩增得到重组腺病毒AdNIS。结果显示重组腺病毒质粒经PmeI酶切鉴定,电泳中出现了诊断性片段;感染的293细胞出现了明显的细胞病变效应;PCR产物电泳证实了重组病毒的存在。病毒滴度为2.5~3×109efu/ml。表明成功构建了携带人NIS基因的重组腺病毒,这为基因转移NIS介导131I治疗非甲状腺肿瘤提供实验研究基础。 展开更多
关键词 甲状腺钠/碘同向转运体 重组腺病毒 放射性碘 nis基因 钠/碘同向转运体 ^131I治疗 甲状腺组织 293细胞 Graves 细胞病变效应
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hNIS转基因介导^(131)碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:5
8
作者 钟兴 弓健 +1 位作者 曾祥凤 徐浩 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期387-392,共6页
目的:克隆人的甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)基因,研究其转导在鼻咽癌细胞内的功能,以及131碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到hNIS的可... 目的:克隆人的甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)基因,研究其转导在鼻咽癌细胞内的功能,以及131碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到hNIS的可编码区基因,并克隆到pcDNA3.1(+)-FLAG载体,获得重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hNIS-FLAG。采用脂质体转染的方法,将pcDNA3.1(+)-hNIS-FLAG质粒导入到鼻咽癌细胞株CNE2,G418筛选得到稳定表达hNIS鼻咽癌细胞系CNE2-hNIS,体外培养条件下检测其对放射性碘的摄取和外流情况。CCK8试剂盒检测131碘对鼻咽癌细胞增殖的作用,AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞技术(FCM)检测131碘作用后鼻咽癌细胞凋亡情况。结果:成功克隆hNIS基因,并建立能稳定表达hNIS的鼻咽癌细胞系CNE2-hNIS。CNE2-hNIS对125碘的吸收量比CNE2高约15倍,但在无碘的环境中,细胞内滞留的碘外流迅速,有效半衰期约8min。131碘在72 h后对CNE2-hNIS的增殖产生抑制作用,细胞早期凋亡率增加,并随着131碘浓度的增加,作用逐渐增强(P<0.01)。结论:从Graves病人的甲状腺组织中克隆的hNIS基因转染鼻咽癌细胞后,能使鼻咽癌细胞发挥高水平吸碘功能,131碘能够抑制转染hNIS的鼻咽癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 人钠/碘同向转运体 基因转染 碘放射性同位素
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杆状病毒介导NIS基因放射治疗甲状腺癌的实验研究 被引量:6
9
作者 张一帆 李彪 +4 位作者 赵龙 尤蓓 尹桂芝 贾世海 朱承谟 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期264-267,i001,共5页
目的探讨重组钠碘同向转运体(NIS)基因杆状病毒介导甲状腺癌细胞放射性碘治疗的可行性。方法构建杆状病毒载体质粒(pFBNIS)并制备重组NIS杆状病毒(BacNIS),体外感染甲状腺癌细胞,通过免疫荧光检测NIS蛋白的表达,通过动态摄碘及NaClO4摄... 目的探讨重组钠碘同向转运体(NIS)基因杆状病毒介导甲状腺癌细胞放射性碘治疗的可行性。方法构建杆状病毒载体质粒(pFBNIS)并制备重组NIS杆状病毒(BacNIS),体外感染甲状腺癌细胞,通过免疫荧光检测NIS蛋白的表达,通过动态摄碘及NaClO4摄碘抑制实验观察表达蛋白的功能和特性;进行131I杀伤细胞的克隆形成实验。结果成功构建了重组NIS杆状病毒,受巨细胞病毒(CMV)极早期基因启动子调控;BacNIS体外感染的甲状腺癌细胞表达的NIS蛋白具有摄碘功能和NaClO4抑制的特性;BacNIS感染的肿瘤细胞可被131I有效杀伤。结论BacNIS是介导肿瘤细胞摄碘的有效方法,为杆状病毒介导NIS基因治疗失分化甲状腺癌转移灶提供依据。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 肿瘤细胞 培养的 杆状病毒 钠碘转运体 放射疗法 基因疗法 碘放射性同位素
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重组pDC316-MCMV/hNIS真核表达质粒的构建及在肿瘤细胞的功能 被引量:4
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作者 周泉波 陈汝福 +3 位作者 李志花 周嘉嘉 唐启彬 陈积圣 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期383-386,407,共5页
【目的】克隆人的钠/碘同向转运体(hNIS)基因可编码序列,并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达。【方法】利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(又称Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因,并克隆... 【目的】克隆人的钠/碘同向转运体(hNIS)基因可编码序列,并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达。【方法】利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(又称Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pDC316载体上,获得重组真核表达质粒载体pDC316-MCMV/hNIS。采用脂质体转染的方法,把pDC316-MCMV/hNIS重组质粒(实验组)或pDC316空质粒(对照组)分别导入到胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞和卵巢癌细胞株SK-OV-3细胞,转染后48h采用RT-PCR方法检测转染细胞内的hNIS mRNA水平,转染后第2、3、4天分别检测肿瘤细胞对125I的吸收功能。【结果】序列分析结果证实克隆片段与文献报道的hNIS基因cDNA序列完全一致。实验组转染后48h,在CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞及SK-OV-3细胞内均能检测到hNIS mRNA高水平表达,对照组基本无hNIS mRNA表达。转染后第3天细胞吸碘达到高峰,实验组CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞和SK-OV-3细胞对125I的吸收量分别比对照组高24倍、17倍和13倍。【结论】从Graves病人的甲状腺组织中克隆的hNIS基因转染肿瘤细胞后,能使肿瘤细胞发挥高水平吸碘功能,为进一步运用放射性核素体内靶向治疗非甲状腺肿瘤奠定了基础。 展开更多
关键词 人钠/碘同向转运体 逆转录聚合酶链反应 基因转染 碘放射性同位素
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hTERT核心启动子调控的hNIS重组腺病毒的构建与鉴定 被引量:3
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作者 张俊 王爱东 +4 位作者 申咏梅 石怡珍 崔学军 刘增礼 欧阳松应 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期549-553,共5页
目的:构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠碘转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并初步鉴定。方法:将hTERT核心启动子从hTERT/pcDNA3.1(+)质粒中切出,亚克隆至含全长hNIS cDNA序列的质粒载体FL*-hNIS/pcDNA3,应用限制性内切酶... 目的:构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠碘转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并初步鉴定。方法:将hTERT核心启动子从hTERT/pcDNA3.1(+)质粒中切出,亚克隆至含全长hNIS cDNA序列的质粒载体FL*-hNIS/pcDNA3,应用限制性内切酶将hTERT-hNIS片段切出后连入穿梭质粒载体pAdTrack,应用AdEasy系统构建出重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS。同时,构建CMV启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV-hNIS作为阳性对照。应用RT-PCR方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性。结果:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS并经PCR验证正确。RT-PCR证实hNIScDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来。结论:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS;hTERT核心启动子在转染的肺癌A549细胞中具有转录活性。为下一步的碘治疗实验提供了实验依据。 展开更多
关键词 钠碘转运体(hnis) 端粒酶逆转录酶(hTERT) 重组腺病毒 核心启动子
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siRNA沉默survivin增强hNIS转染的鼻咽癌细胞株对^(131)碘的敏感性 被引量:2
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作者 钟兴 弓健 +1 位作者 郭斌 徐浩 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期246-250,共5页
目的:研究Survivin特异性小片段干扰RNA(siRNA)能否增强人钠碘同向转运体(hNIS)转染的鼻咽癌细胞株(CNE-2-hNIS)对131碘的放射敏感性.方法:设计并合成针对survivin基因的特异性siRNA,利用脂质体法转染CNE-2-hNIS细胞,通过实时荧光定量... 目的:研究Survivin特异性小片段干扰RNA(siRNA)能否增强人钠碘同向转运体(hNIS)转染的鼻咽癌细胞株(CNE-2-hNIS)对131碘的放射敏感性.方法:设计并合成针对survivin基因的特异性siRNA,利用脂质体法转染CNE-2-hNIS细胞,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Westernblot方法检测细胞survivin基因沉默效果.CCK-8、克隆形成实验和Annexin VFITC/PI双染流式细胞仪检测131碘孵育后对细胞增殖和凋亡的影响.结果:SurvivinsiRNA转染CNE-2-hNIS细胞72h后,细胞的survivin基因mRNA和蛋白表达明显降低,Si-survivin组较SiRNA-NC组细胞增殖率降低,131碘孵育后,Si-survivin组较SiRNA-NC组细胞增殖率降低,凋亡率增高,差别有统计学意义(P<0.05).结论:Survivin特异性siRNA能显著沉默CNE-2-hNIS细胞的survivin基因的表达,增加CNE-2-hNIS对131碘的放射敏感性. 展开更多
关键词 SURVIVIN RNA干扰 鼻咽癌 钠/碘同向转运体 碘放射性同位素
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甲状腺乳头状癌NIS蛋白表达对^(131)I疗效的预测及与BRAF基因突变的关系 被引量:4
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作者 崔邦平 代文莉 +2 位作者 胡涛 严凯 胡伟 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第4期746-748,共3页
目的:探讨甲状腺乳头状癌钠碘转运体(sodium/iodide symporter,NIS)蛋白表达对131I疗效的预测及与BRAF基因突变的关系。方法:收集甲状腺乳头状癌根治术后行131I治疗的患者60例,临床随访131I疗效分为完全缓解和不完全缓解,不完全缓解组... 目的:探讨甲状腺乳头状癌钠碘转运体(sodium/iodide symporter,NIS)蛋白表达对131I疗效的预测及与BRAF基因突变的关系。方法:收集甲状腺乳头状癌根治术后行131I治疗的患者60例,临床随访131I疗效分为完全缓解和不完全缓解,不完全缓解组再分为摄碘和不摄碘。免疫组化法对患者肿瘤原发灶NIS蛋白表达进行分析,根据表达强弱分为0,1,2,3分。应用Pyrosequencing焦磷酸测序技术对肿瘤原发灶BRAF基因突变进行分析。对131I疗效各组和BRAF突变两组的NIS蛋白表达水平进行统计分析。结果:甲状腺乳头状癌NIS蛋白染色阳性颗粒主要定位于细胞浆,阳性评分为1.45±0.77。131I治疗完全缓解患者29例,其NIS蛋白水平(1.62±0.86)与不完全缓解组(1.29±0.64)无统计学差异(P=0.100)。但对不完全缓解组进一步研究发现,不摄碘组NIS蛋白水平(1.00±0.60)显著低于摄碘组(1.47±0.61),P=0.043。伴BRAF基因突变患者检出47例(78.3%),其NIS蛋白评分(1.34±0.73)与携带野生型基因患者(1.85±0.80)比较差异有统计学意义,P=0.035。结论:131I疗效与肿瘤原发灶NIS蛋白表达水平没有明显关系,但不摄碘的持续不缓解患者常伴有肿瘤NIS蛋白表达降低和缺失;伴BRAF基因突变患者其NIS蛋白表达降低,分化程度更差。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 钠碘转运体 BRAF基因突变 131^I治疗
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高临床分期甲状腺乳头状癌组织中ITGB4与NIS表达的相关性及其对肿瘤细胞摄碘功能的影响 被引量:3
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作者 欧慧婷 李剑 +3 位作者 廖梦颖 石晓欣 杨红杰 闫德文 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第6期995-1000,共6页
目的:探讨高临床分期甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中整合素β4(integrinβ4,ITGB4)与钠碘同向转运体(sodium iodide symporter,NIS)表达的相关性,评价ITGB4对乳头状癌细胞NIS表达及摄碘功能的影响。方法:收集5... 目的:探讨高临床分期甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中整合素β4(integrinβ4,ITGB4)与钠碘同向转运体(sodium iodide symporter,NIS)表达的相关性,评价ITGB4对乳头状癌细胞NIS表达及摄碘功能的影响。方法:收集55例高临床分期PTC切除标本(Ⅲ期45例,Ⅳ期10例),通过免疫组化与RT-qPCR方法,分析组织中ITGB4与NIS表达的相关性。利用慢病毒RNA干扰方法敲减乳头状癌K1细胞中ITGB4水平,检测细胞NIS膜蛋白表达水平的变化,并通过细胞摄碘率实验,观察细胞摄碘率的变化。结果:55例高临床分期PTC标本组织中,ITGB4蛋白高表达组NIS阳性表达率为0%,ITGB4蛋白低表达组NIS阳性表达率为26.67%,两组间有显著差异(P=0.006)。Pearson相关分析显示,ITGB4与NIS mRNA表达水平呈负相关(r=-0.31,P=0.03)。ITGB4敲减组(shRNA-β4)与阴性对照组(shRNA-scr)比较,敲减组K1细胞NIS膜蛋白的表达水平显著升高(P=0.003);自10 min观察点起至70 min观察点止,敲减组K1细胞的摄碘率均显著高于阴性对照组。结论:ITGB4对NIS具有潜在的负向调控作用。阻遏ITBG4水平能促进NIS表达,提升PTC摄碘效能,有望成为碘难治性甲状腺癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 整合素β4 钠碘同向转运体
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hNIS基因的组织特异性表达介导肝癌细胞摄取^(99)Tc^m 被引量:2
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作者 陈立波 罗全勇 +4 位作者 余永利 袁志斌 陆汉魁 郭礼和 朱瑞森 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期77-81,共5页
目的探讨人钠/碘同向转运体(hNIS)基因在肝癌细胞中的组织特异性表达介导^(99)Tc^m摄取的可行性。方法构建鼠白蛋白基因启动子/增强子(mAlb)引导下 hNIS 和潮酶素共同表达的逆转录病毒载体,该重组逆转录病毒感染大鼠肝癌细胞 MH3924A ... 目的探讨人钠/碘同向转运体(hNIS)基因在肝癌细胞中的组织特异性表达介导^(99)Tc^m摄取的可行性。方法构建鼠白蛋白基因启动子/增强子(mAlb)引导下 hNIS 和潮酶素共同表达的逆转录病毒载体,该重组逆转录病毒感染大鼠肝癌细胞 MH3924A 建立稳定表达细胞系,用^(125)I 摄取实验证实 hNIS 基因的功能表达。建立肝癌移植瘤大鼠模型。在体内和体外水平评价重组肝癌细胞对^(99)Tc^m的摄取和流出。绘制时间-放射性曲线和体内外放射性分布图。结果重组质粒构建成功。体外培养条件下,hNIS 基因稳定转染细胞系摄取^(99)Tc^m高出野生型肝癌细胞254倍。50 μmol/L NaClO_4和500μmol/L 哇巴因(Ouabain)可分别使 MHmAlbhNIS6细胞摄取^(99)Tc^m降低97.56%和88.20%(P 均<0.01)。而^(99)Tc^m流出迅速,有效半减期不足2 min,应用^(99)Tc^m/γ相机系统获得了转染肿瘤的清晰图像及定量数据,注射^(99)Tc^m O_4^-后30 min,MHmAlbhNIS6细胞形成的移植瘤摄取^(99)Tc^m比对照组高4倍。结论证实 hNIS 基因在肝癌细胞中的组织特异性表达介导^(99)Tc^m摄取;利用^(99)Tc^m/γ相机系统可无创、简单、定量检测 hNIS 基因的表达。 展开更多
关键词 钠/碘同向转运体 基因表达 肝肿瘤 实验性 肿瘤细胞 培养的 99m锝高锝酸盐 大鼠
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hNIS基因转导黑色素瘤细胞介导放射性碘摄取的实验研究 被引量:1
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作者 陈立波 朱瑞森 +2 位作者 黄芳 费俭 郭礼和 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期124-127,共4页
目的 获取人钠 /碘同向转运体 (hNIS)基因cDNA ,研究其转导黑色素瘤细胞在体外和体内能否介导放射性碘摄取 ,从而探索该策略用于黑色素瘤放射性碘治疗的可能性。方法 运用逆转录聚合酶链反应从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA ... 目的 获取人钠 /碘同向转运体 (hNIS)基因cDNA ,研究其转导黑色素瘤细胞在体外和体内能否介导放射性碘摄取 ,从而探索该策略用于黑色素瘤放射性碘治疗的可能性。方法 运用逆转录聚合酶链反应从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA ,将其克隆至真核载体pc DNA3 中 ,电转化法分别将重组质粒pc DNA3 hNIS及空质粒pc DNA3 转导黑色素瘤细胞 (B16 ) ,分别建立了细胞系B16 A和B16 B。在体外培养条件下检测其对放射性碘的摄取及外流情况 ,继而将三种细胞系接种C5 7小鼠行13 1I显像和肿瘤摄取12 5I动态定量测定。结果 成功克隆到hNIS基因 ,并建立了能稳定表达hNIS的新型细胞系B16 A。B16 A细胞的摄碘能力较B16细胞高 17倍 ,较B16 B细胞高 19倍。碘的外流过程迅速 ,T1/ 2eff仅 10min。体内实验发现B16 A细胞所形成肿瘤能摄取放射性碘 ,腹腔注射12 5I后 1、2、4、12、2 4h肿瘤组织的 %ID/ g平均为 12 .2 2、10 .91、8.73、1.2 4、0 .19,12 5I在肿瘤组织内的生物半衰期约为 6h。B16 A细胞系所成肿瘤摄碘量与对照组相比较 ,P <0 .0 1,差别具有高度统计意义。结论 hNIS基因转导黑色素瘤细胞足以介导放射性碘摄取 ,但有效半衰期较短 ,难以产生足够的治疗剂量 ,有必要进一步研究如何增加放射性碘的摄取? 展开更多
关键词 hnis基因 黑色素瘤 放射性碘 逆转录聚合酶链反应 细胞培养 基因转导
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重组NIS基因腺相关病毒的制备及其在甲状腺癌细胞系表达 被引量:1
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作者 张一帆 李彪 +4 位作者 尤蓓 尹桂芝 贾世海 杨卉 朱承谟 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期209-211,i0004,共4页
目的探讨钠碘同向转运体(NIs)基因介导的甲状腺癌基因治疗的可行性。方法构建腺相关病毒载体质粒pGA—NIS,并采用磷酸钙沉淀法制备重组NIs基因的腺相关病毒rAAV—NIs,体外感染甲状腺癌细胞系FTc—133、8505(:后,通过免疫荧光检测被感染... 目的探讨钠碘同向转运体(NIs)基因介导的甲状腺癌基因治疗的可行性。方法构建腺相关病毒载体质粒pGA—NIS,并采用磷酸钙沉淀法制备重组NIs基因的腺相关病毒rAAV—NIs,体外感染甲状腺癌细胞系FTc—133、8505(:后,通过免疫荧光检测被感染细胞的NIs蛋白表达,并通过摄碘实验及Na(;10。摄碘抑制实验验证其表达的NIs蛋白功能和特性。结果成功制备了重组NIs基因的rAAV—NIs,其感染肿瘤细胞所表达的NIS蛋白位于细胞膜上,且具有介导碘摄取的功能,以及被Na(:10。抑制的特性,表明与正常甲状腺细胞的NIS具有相同的功能和特性。感染细胞的碘摄取较未感染细胞明显增高。结论rAAV—NIs能介导甲状腺癌细胞的碘摄取.为甲状腺癌NIS基因介导的基因治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 肿瘤细胞 培养的 钠碘转运体 基因疗法 碘放射性同位素 nis基因 甲状腺细胞 腺相关病毒 癌细胞系 制备
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hTPO和hNIS共转染肺癌细胞系H460介导放射性碘摄取的研究 被引量:1
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作者 李玮 谭建 龙雷 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第6期575-579,共5页
背景与目的肺癌严重危害人类生命和健康,目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lungcacer,NSCLC)治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶(hTPO)基因及人钠碘转运体... 背景与目的肺癌严重危害人类生命和健康,目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lungcacer,NSCLC)治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶(hTPO)基因及人钠碘转运体(hNIS)基因共转入肺癌细胞系后研究其摄碘能力的变化。方法克隆,重组,包装并扩增纯化得到重组腺病毒(AdTPO),测定病毒滴度,Western blot检测重组腺病毒的表达。使用脂质体转染法将hNIS基因转染入人肺癌细胞系H460中,经G418抗生素筛选获得稳定表达hNIS的细胞系hNIS-H460,为hNIS-H460组;使用重组腺病毒将hTPO基因转导入hNIS-H460中,使肺癌细胞系获得hTPO基因,为AdTPO-hNIS-H460组;未转入hTPO和hNIS的细胞为对照组(H460)。然后进行三组稳定表达细胞系的体外摄125I实验。三组间两两比较用q检验(Newman-Keuls法)。结果AdTPO-hNIS-H460细胞、hNIS-H460细胞和H460细胞所摄取125I分别为(59637.67±1281.13)、(48622.17±2242.28.)和(1440.17±372.86)计数·min-1。三组间总体具有统计学差异(P<0.01)。AdTPO-hNIS-H460组较对照组(H460)摄125I能力增高约41倍(P<0.01),hNIS-H460组较对照组(H460)摄碘能力增高约34倍(P<0.01)。AdTPO-hNIS-H460组较hNIS-H460组高约1.2倍(P<0.01)。结论将hTPO和hNIS基因共转染至肺癌细胞系H460后,可有效提高H460的摄碘能力。 展开更多
关键词 钠/碘同向转运体 甲状腺过氧化物酶 重组腺病毒 基因治疗 放射性核素治疗
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^(131)I照射对分化型甲状腺癌细胞摄碘水平及NIS mRNA表达的影响 被引量:1
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作者 侯英萍 李志刚 邓敬兰 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第9期1609-1611,共3页
目的:探讨131I不同时间照射后分化型甲状腺癌细胞摄取放射性碘(125I)水平的变化以及检测是否影响NIS mRNA表达。方法:分化型乳头状甲状腺癌细胞株(GTHW3)培养在DMEM培养基中,应用同一活度(20μCi)的131I对培养癌细胞进行不同时间(6h、12... 目的:探讨131I不同时间照射后分化型甲状腺癌细胞摄取放射性碘(125I)水平的变化以及检测是否影响NIS mRNA表达。方法:分化型乳头状甲状腺癌细胞株(GTHW3)培养在DMEM培养基中,应用同一活度(20μCi)的131I对培养癌细胞进行不同时间(6h、12h、24h、48h)的照射。γ计数仪测定放射性碘(125I)摄取率。采用RT-PCR法检测甲状腺癌细胞的NIS mRNA表达。结果:不同时间的放射性131I照射使甲状腺癌细胞摄取125I降低;凝胶电泳显示放射性131I照射24h后GTHW3细胞NIS mRNA表达降低;照射组各时间点的125I摄取率及24h和48h的NIS mRNA表达与未照射对照组比较均有显著性差异。结论:131I照射可使DTC细胞的NIS mRNA表达降低,提示131I照射致DTC细胞失分化及其摄碘能力降低可能与DTC细胞NIS mRNA表达降低有关。 展开更多
关键词 甲状腺癌 肿瘤细胞 照射 放射性碘 钠/碘转运体
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靶向性启动子携带报告基因NIS介导提高胶质瘤摄碘能力 被引量:1
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作者 李承霞 李玮 谭建 《生物医学工程与临床》 CAS 2011年第4期374-376,共3页
目的在细胞实验中探讨靶向性人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子携带人类钠碘转运体(hNIS)基因能否提高胶质瘤的摄碘能力。方法检测在hTERT启动子引导下表达hNIS基因的腺病毒,使用该腺病毒转染U87和U251细胞系,然后使用γ记数仪检测转染后... 目的在细胞实验中探讨靶向性人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子携带人类钠碘转运体(hNIS)基因能否提高胶质瘤的摄碘能力。方法检测在hTERT启动子引导下表达hNIS基因的腺病毒,使用该腺病毒转染U87和U251细胞系,然后使用γ记数仪检测转染后细胞的摄碘能力。结果实验组肿瘤细胞在转染Ad-hTERT-hNIS后,相对于对照组细胞摄碘率提高约30~40倍。结论实验证明hTERT启动子能引导胶质瘤细胞系表现出肿瘤特异性的碘摄取。 展开更多
关键词 胶质瘤 nis基因 人端粒酶逆转录酶启动子 放射性碘
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