试管固相RIA和IRMA技术的实验研究

本文报告一种新型试管固相RIA和IRMA技术。先后建立了固相二抗测定β2-mG,固相一抗法测定AFP和双位点夹心法测定CEA。实现了分析技术一步法。本法操作十分简便,不加分离剂和离心程序,不受温度影响,便于组装试剂盒及临床大量样品的检测。这一技术的改进成功为我国放免试剂盒的更新换代提供了条件。

固相RIA法测定血浆孕酮监测黄牛产后卵巢机能

应用１２５Ｉ固相放射免疫分析法，对２２头鲁西母黄牛产后期血浆孕酮（Ｐ４）的变化作了测定，以监测黄牛产后卵巢机能。结果表明，产后（１３．６±４．４）ｄ以前，母牛血浆Ｐ４浓度仍处于基础水平〔（０．３４±０．０４）～（０．５５±０．０６）μｇ／Ｌ〕，随后，Ｐ４开始升高，出现卵巢活动。代表卵巢活动的Ｐ４曲线可分为４种类型：Ⅰ型，产后（１０．６±３．９）ｄ后，曲线呈现３个正常的黄体周期；Ⅱ型，产后（１３．６±４．４）ｄ后，首先出现１个８．５ｄ左右的短黄体周期，接着出现２个正常的黄体周期；Ⅲ型，于产后（１２．５±３．９）ｄ后，先出现１个正常的黄体周期，继之出现１个短黄体周期和１个正常黄体期；Ⅳ型，产后（１２．５±２．５）ｄ后，出现不规则的黄体周期中，最低Ｐ４水平为（０．４５±０．１５）～（０．６０±０．３８）μｇ／Ｌ，最高浓度为（２．６５±１．９５）～（４．１７±２．３５）μｇ／Ｌ。试验表明，每隔４ｄ测定１次血浆Ｐ４浓度。

应用固相RIA监测黄牛产后卵巢机能

用^(125)Ⅰ固相放射免疫分析法测定了22头母鲁西黄牛的产后血浆孕酮(P_4)浓度。结果表明,在产后13.6±4.4天以前,母牛的血浆P_4浓度处于基础水平(0.34±0.04—0.55±0.06ng/ml,P<0.05),此后开始升高,母牛出现卵巢话动。代表卵巢活动的P_4曲线可分为4种类型:Ⅰ型,在产后10.6±3.9天以后,曲线呈现3个正常的黄体周期;Ⅱ型,在产后13.6±4.4天以后,首先出现一个8.5天左右的短黄体周期,然后出现两个正常的黄体周期;Ⅲ型,在产后12.5±3.9天以后出现一个正常的黄体周期,接着出现一个短黄体周期;Ⅳ型,在产后12.5±2.5天以后,出现不规则的黄体周期。在黄体周期中,最低P_4水平为0.45±0.15—0.60±0.38ng/ml。最高为2.65±1.95—4.17±2.35ng/ml。本试验表明,间隔4天测定1次血浆P_4浓度,可准确地判定母牛的发情周期。固相RIA灵敏度高,准确性和重复性好、操作简便。

雌二醇和孕酮的试管固相RIA技术实验研究

本文报告了雌二醇（E2）和孕酮（PROG）的试管固相RIA技术。此两者的灵敏度分别为2.5Pg／mL和0.05ng／mL。，准确性分别为（99±9）％和（90±9）％，批内精密度小于10％，批间精密度小于15％。

固相微球法人IgG放射免疫分析试剂盒的研制

采用氯胺 T法标记的人 12 5I- Ig G与人 Ig G(标准品或样品中人 Ig G)竞争结合人 Ig G微球抗体 ,直接离心分离 ,用于测定样品中的人 Ig G含量。经方法学鉴定 ,其灵敏度为 0 .3mg/ L,回收率为 10 0%～ 110 % ,零管结合率为 60 %～ 80 % ,非特异结合率 <2 .5% ,测量范围为 1.0～ 50 .0 mg/ L,批内变异系数为 3.1%～ 5.4 % ,批间变异系数为 4 .5%～ 7.2 % ,温育时间为 1h。

C－反应蛋白固相放射免疫分析法的改进及初步应用

建立一种竞争性固相放射免疫分析法（ＳＰ－ＲＩＡ），用于定量测定人体血清或脑脊髓液（ＣＳＦ）中的Ｃ－反应蛋白（Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅＰｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＰ）。最小可测量为５ｎｇ／ｍｌ；批内ＣＶ为４．９％，批间ＣＶ为１２．６％。６８份健康人血清的ＣＲＰ含量为０．０２８～３．４００μｇ／ｍｌ（中位数０．１６６μｇ／ｍｌ）；１６份新生儿脐带血清的ＣＲＰ含量为０．０１３～９．０００μｇ／ｍｌ（中位数０．０９５μｇ／ｍｌ）；６３份“流脑”病人血清ＣＲＰ为０．１５０～５２０．０００μｇ／ｍｌ（中位数７７．５００μｇ／ｍｌ），相当于健康人的４００～５００倍。ＧＳＦ中也可检出低水平的ＣＲＰ（中位数２．０７０μｇ／ｍｌ）。“流脑”急性期血清的ＣＲＰ含量，比恢复期高出３００多倍，而婴幼儿轮状病毒性腹泻病人的急性血ＣＲＰ含量不高（中位数５．５８０μｇ／ｍｌ），且同恢复期血清ＣＲＰ含量之比，仅为２～３∶１，提示此种病毒性感染的急性相应答（Ａｃｕｔｅｐｈａｓｅｒｅｓｐｏｎｓｅ）不如细菌性脑膜炎显著。

血清白介素8固相放射免疫法的建立及应用

本方法将兔抗人白介素8（IL-8）特异性抗体IgG包被塑料试管内壁,建立了一种快速、简便、高灵敏、特异的固相竞争放射免疫分析法（RIA）测定人血清中的IL-8。标准曲线范围为0.2～9.6ng/mL,最小检出值和正常值分别为0.16 ng/mL和0.30±0.05ng/mL。批内CV%为6.8%,批间CV%为9.6%。本文所建的固相RIA法与液相RIA法平行测定58份样品的IL-8浓度（0.26～3.56 ng/mL）,经统计学处理,两者之间具有良好的直线相关（r=0.954,P〈0.001,Y=0.994X）。表明本文建立的固相RIA法可以代替液相RIA法测定血清IL-8浓度,并适用于大批样品和自动化检测。