防控花生白绢病的根际放线菌分离鉴定及防效评价

花生白绢病是由齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.引起的发生在花生茎基部的真菌病害,严重制约花生的品质与产量。本研究利用稀释涂布法从怀牛膝根际土壤中分离纯化了116株放线菌,并从中筛选鉴定了能够防控花生白绢病的菌株。通过平板对峙试验筛选得到两株抑菌活性较好且稳定的菌株Soil-1-5和Soil-3-28,它们对齐整小核菌的抑制率分别为80.43%和92.34%。根据形态学观察、生理生化试验及16S rRNA基因序列分析鉴定,两株菌分别被鉴定为疮痂链霉菌Streptomyces scabiei和藤黄灰链霉菌Streptomyces luteogriseus。采用菌丝生长速率法测定了拮抗菌株无菌发酵滤液对植物病原菌的抑制作用。结果表明,菌株Soil-1-5和Soil-3-28的无菌发酵滤液稀释5倍后对齐整小核菌的抑制率分别为73.67%和57.11%,且对禾谷镰孢菌等6种植物病原菌均有不同程度的抑制作用。此外,两菌株的无菌发酵滤液对齐整小核菌菌核萌发和菌核形成也有较好拮抗作用。盆栽试验结果表明,菌株Soil-1-5和Soil-3-28对花生白绢病的防治效果分别为51.92%和31.74%,其中菌株Soil-3-28对花生生长有促进作用。综上,菌株Soil-1-5和Soil-3-28对花生白绢病有较好的防治效果,具有潜在应用价值。

花生白绢病菌拮抗细菌的分离鉴定及其温室抑菌促生效果

由齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.侵染引起的土传真菌性病害——花生白绢病,严重威胁花生的生产。为挖掘对花生白绢病有较好防治效果的拮抗细菌,利用稀释涂布法从感染S.rolfsii的植株根际土壤中分离得到570株细菌,采用平板对峙法筛选出32株S.rolfsii拮抗细菌,结合16S rRNA基因序列、形态学及生理生化特征,确定细菌的分类学地位。通过S.rolfsii与拮抗细菌的发酵液共培养和盆栽试验结果表明:在所筛选的32株拮抗细菌中,4株细菌HNZZ23、HNKF5、HNXX14和HNXX169对S.rolfsii的抑制时间长,抑制效果好,其发酵液对S.rolfsii菌丝生长的抑制率分别为85.30%、85.88%、85.16%和91.00%,对S.rolfsii菌核萌发的最大抑制率分别为100%、85.33%、82.67%和93.33%。菌株HNZZ23和HNXX14的发酵液对盆栽花生白绢病的防治效果分别为30.50%和25.73%,且菌株HNZZ23对花生植株的生长具有显著的促进作用。经分类学鉴定,菌株HNZZ23、HNKF5、HNXX14和HNXX169分别为萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeuse、短小芽孢杆菌B.pumilus、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa和枯草芽孢杆菌B.subtilis。本研究结果表明,感病花生根际细菌HNZZ23、HNKF5、HNXX14和HNXX169对花生白绢病原菌S.rolfsii具有良好的拮抗作用和生防潜力,可为花生白绢病的生物防治提供优质菌种资源。

霍山石斛2种真菌病害病原菌分离鉴定及抑菌药剂筛选

为了提高霍山石斛Dendrobium huoshanense品质和产量,通过对霍山县多地进行田间调查,发现霍山石斛茎部病害主要为白绢病,叶部病害主要为炭疽病。采集发病典型的新鲜病株作为样本,通过柯赫氏法则验证、形态学观察以及分子生物学鉴定证明了白绢病的致病菌为齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.的有性态罗氏阿太菌Athelia rolfsii;炭疽病的致病菌为胶孢炭疽菌复合种下的Colletotrichum cameliae。同时测定了12种防治药剂对白绢病及炭疽病的室内抑菌效果,发现25%吡唑嘧菌酯悬浮剂2000倍液、37%苯醚甲环锉水分散粒剂3000倍液、80%乙蒜素乳油2000倍液对白绢病病原菌菌丝生长的抑制效果最好,37%苯醚甲环锉水分散粒剂3000倍液、80%乙蒜素乳油2000倍液对炭疽病病原菌菌丝生长的抑制效果最好。目前,关于霍山石斛病害病原菌种类鉴定及防控药剂的研究未见任何报道,本文通过试验为霍山石斛种植过程中绿色防控提供了理论基础。

广东省花生白绢病菌的分布和生物学性状研究初报

采用一般调查和定点调查相结合的方法,对广东省花生白绢病的发生危害与分布情况进行了调查,并对花生白绢病菌的形态、生物学性状及其对杀菌剂的敏感性进行了测定。结果表明,广东省各花生产区均有花生白绢病的发生分布,发病率在10%左右,严重的超过50%,对花生生产造成严重损失;花生白绢病菌的菌丝宽度为6.1-8.2μm,菌丝生长速率介于0.8-1.1 mm/h之间,每培养皿(直径9 cm)产生菌核的数量为55-378个,菌核大小范围为0.89-3.54 mm×0.80-2.40 mm,平均大小范围为1.13-2.12 mm×1.06-1.80 mm;每菌核干重为0.4-2.7 mg。杀菌剂离体毒力测定结果表明,己唑醇和戊唑醇对花生白绢病菌具有较好的抑制作用。

枯草芽孢杆菌等益生菌对白术白绢病的防治研究

前期工作中发现蚕沙发酵肥能有效缓解白术的连作障碍,并从发酵肥中筛选到4株可能缓解白术连作障碍的益生菌。为进一步探讨蚕沙有机肥缓解杭白术连作障碍的微生物作用机制,从致病白术根际分离并培养白绢病致病菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii),利用平板对峙实验将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、荧光性假单胞菌(Psdeuomnoda fluoerncnet)、类芽孢杆菌(Paenibacillus Ash)和黄杆菌(Flavobacterium mizutaii)4种菌与齐整小核菌进行拮抗,并通过盆栽实验验证。对峙实验结果表明,黄杆菌对齐整小核菌的抑菌率为43.6%;枯草芽孢杆菌的抑菌率为67.6%;荧光性假单胞菌的抑菌率为52.5%,而类芽孢杆菌的抑菌率为12.4%其中枯草芽孢杆菌的抑菌效果最为显著,说明黄杆菌、枯草芽孢杆菌和荧光性假单胞菌能够有效拮抗白绢病病菌,而类芽孢杆菌效果不佳。在致病白术土壤中添加这3种有效益生菌,也能够有效提高白术存活率,而且存活率随着益生菌浓度增加而增加,高浓度(2×108CFU/m L)枯草芽孢杆菌效果最明显,达到100%,另外2种益生菌均为80%。结论:从蚕沙发酵肥中筛选出的3种益生菌均能抑制白绢病病原菌的生长,且枯草芽孢杆菌的防治效果最好,可提高病株的存活率及改善病株生长,提示可以用于生物菌肥的开发。

草莓白绢病的病原鉴定及生物学特性

在实验室条件下对病原菌的形态特征、致病性和生物学特性进行了初步的研究。结果表明,引起草莓白绢病的病原物是齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.;病菌在偏酸性环境下生长较好,菌丝最适生长pH为5.08,在所测试的碳源中,S.rolfsii Sacc.对淀粉的利用最好,对乳糖利用效果最差;在供试氮源中,对硝酸钙和硝酸钠的利用最好,对尿素的利用最差;菌丝致死温度为50℃10 min,菌核萌发的抑制温度为55℃10 min。室内PDA平板药剂筛选结果表明,10%世高对病原菌菌丝生长的抑制效果最好。

杭白菊白绢病的研究

杭白菊白绢病是浙江省杭白菊上的一种严重病害。常年发病率达29.6％～84.1％。该病主要危害杭白菊茎基部,引起皮层腐烂,进而全株青枯死亡。病原菌经鉴定为罗氏白绢小菌核菌Sclerotium rolfsii Saccardo.菌核在10～40℃内生长,以25～30℃生长最好;菌核萌发的pH值范围为2～12。杭白菊产区桐乡县白绢病从6月中旬开始发生,一直持续到11月中旬的收获期,其中8月上旬和8月下旬至9月上旬的压条摘心时期为发病高峰期。压条、摘心和后期偏施氮肥等栽培措施是病害严重的重要因素,高温高湿有利于白绢病发生。防治试验表明:植物生长前期用3％井冈霉素或20％稻脚青,中后期用3％井冈霉素或50％多菌灵防治能控制病害蔓延,在杭白菊生长季节应防治4～6次。

四川省烟草白绢病病原菌的分离鉴定及其生物学特性

烟草白绢病是近年来在四川烟区发现的新病害,为明确其病原特征,进而有效防治该病害,在烟田采集了烟株根部菌丝,进行分离、纯化,并命名为B1。并进行了病原菌形态观察,18S rRNA鉴定及致病性测定。结果表明,B1为半知菌亚门,丝孢纲,无孢目,小菌核属的齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc。生物学特性研究表明,白绢病菌B1菌丝和菌核致死温度为50℃处理10 min,且菌丝更适合在偏酸性条件下生长,最适pH为5.0。

茉莉白绢病菌的生物学特性研究

对茉莉白绢病病菌齐整小核菌（Sclerotium rolfsiiSacc．）的生物学特性进行了研究。结果表明，28℃、pH5.0～6.0、蔗糖作为碳源、硝酸钾作为氮源及黑暗等条件适合菌丝的生长；28-34℃、pH4．0～6．0、光照、相对湿度100％加水等条件适合菌核萌发。

一株从金钱树上分离的产纤维素降解酶的菌株的分离及特性鉴定

本研究从金钱树(Zamioculcas zamiifolia)白绢病(Southern blight)病株上分离到一株产纤维素酶菌株SM,经形态观察和rDNA-ITS序列分析鉴定为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc),经以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基培养和刚果红染色测定,证明SM菌株可产生高活性纤维素降解酶。本文对SM菌株产纤维素降解酶的液态发酵条件进行了研究,结果表明:在起始pH6.0,无机氮:有机氮:纤维素碳源之比为0.07g:1.4g:1.6g,温度为30℃,摇床转速为160r/min,发酵培养时间为5d的条件下,该菌株发酵液的CMC酶活性达到11.7U/mL,滤纸酶活性达到2.156U/mL,β-葡萄糖苷酶活性达到3.911U/mL。

铁皮石斛茎基部2种主要病害病原菌的分离与鉴定

铁皮石斛茎基部病害是铁皮石斛的重要病害,严重影响铁皮石斛的产量和质量。为了明确引起浙江铁皮石斛茎基部主要病害的病原菌,采集具典型症状的发病植株进行病原菌的分离、纯化、病原菌形态学特征观察、rDNAITS序列分析、致病性试验结合田间症状,明确浙江铁皮石斛茎基部主要病害是由齐整小核菌Sclerotiumrolfsii引起的白绢病和由尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum引起的枯萎病。两种病害都侵染茎基部和茎,并最终导致整株死亡,区别是白绢病发病初期病部通常呈水渍状、褪绿、略肿大、有时伴有黄色液体渗出,后腐烂枯死;枯萎病初期茎秆褪绿、萎蔫,后缢缩干枯而死。湿度大时,前者病部遍布白色绢状菌丝体;后者病部出现白色及粉红色霉状物。

白术白绢病发病规律与药剂防治研究

通过田间系统观察和发病高峰期的取样调查发现 :气候、前季作物种类、白术品种、基肥施用、土壤排水条件及土表覆盖措施对白术白绢病SclerotiumrolfsiiSacc .的影响大 ,在高温、降雨多、前季作物为花生、用牛粪作基肥、尖顶窄叶高秆品种、土表覆盖稻草或不覆盖等条件下发生更严重 ,而白术生育期对此没有影响。绿亨一号和多菌灵在室内条件下对白绢病菌的菌丝有很强的抑制作用 ,其EC50 分别为 5 4 9mg/L和 8 84mg/L ,而井岗霉素为 4 6 77mg/L。绿多混合或绿井混合主要表现出相加作用 ,其共毒系数CTC分别是 10 9 0 5和 10 2 0 1。田间小区药效试验也表明绿亨一号和多菌灵都显著有效 ,井岗霉素很差 ,其药效分别为 98 81%、 92 4 8%和2 6 2 4 %。绿多混合和绿井混合的防效分别是 93 6 7%和 5 4 0 4 %。

工业大麻花提取物对3种植物病原真菌的抑菌活性

为了探究工业大麻雌花和雄花提取物对植物病原真菌的抑制作用,采用乙醇浸提法,对工业大麻云麻7号、云麻8号、云麻10号3个品种的雌花和雄花分别进行提取,采用菌丝生长速率法测定工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌、稻瘟病菌3种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:浓度为1、2、4、8、16 mg/mL的工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌和稻瘟病菌均有抑制效果。从对辣椒白绢病抑菌浓度来看,云麻7号雄花提取物的最低EC_(50)值为4.6601 mg/mL,而云麻8号雄花提取物的最高,EC_(50)值达到32.3770 mg/mL;对辣椒炭疽病,云麻7号雌花提取物的浓度最低,EC_(50)值为3.1149 mg/mL,而云麻7号雄花的最高,EC_(50)值达到6.5135 mg/mL;对稻瘟病菌,云麻7号雌花提取物浓度最低,EC_(50)值为4.6310 mg/mL,而云麻8号雄花提取物浓度最高,EC_(50)值达到8.2520 mg/mL。因此,3个品种的工业大麻花提取物对辣椒白绢病菌、辣椒炭疽病菌、稻瘟病菌3种植物病原真菌均具有抑菌活性。

花生白绢病病原菌致病力分化的研究进展

花生白绢病是由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)侵染引起的一种重要的土传真菌性病害,在世界各花生产区都有发生,近10年来在我国花生主要种植省份流行危害,造成较大经济损失,成为制约花生产业发展的重要因素。本文对花生白绢病病原菌的特点、致病力分化、致病因子及引起致病力分化的原因等方面进行综述,期望为这一病害的防控提供参考。

白术两种主要土传病害的分离、鉴定及杀菌剂的室内活性筛选

立枯病和白绢病是白术生产种植中的两种主要土传病害,在苗期和生长期都有发生,危害严重。本研究从浙江省磐安县采集具有典型病症的白术植株,对病原进行了分离、纯化和致病性测定。综合形态学特征及rDNA-ITS序列分析表明,白术上的病害是由立枯丝核菌Rhizoctonia solani Kühn引起的立枯病和由齐整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.引起的白绢病。室内毒力测定结果表明,10种供试杀菌剂对立枯病菌的毒力从大到小为:噻呋酰胺>咯菌腈>戊唑醇>四氟醚唑>吡唑醚菌酯>丙硫菌唑>嘧菌酯>啶酰菌胺>苯醚甲环唑>咪鲜胺;对白绢病菌的室内毒力从大到小为:吡唑醚菌酯>噻呋酰胺>嘧菌酯>戊唑醇>咯菌腈>苯醚甲环唑>丙硫菌唑>啶酰菌胺>四氟醚唑>咪鲜胺,其中噻呋酰胺对两种病菌都具有很高的活性,EC_(50)分别为0.06和0.03mg/L,可用于两种病害的防治。

多种杀菌剂对辣椒白绢病防效的综合评价

为了评价防控辣椒白绢病的化学杀菌剂杀菌效果,对7种杀菌剂原药、14种杀菌剂制剂及复配组合的室内生物活性、盆栽和田间防效进行了综合评价。室内生物活性测定结果表明:97%咪鲜胺粉剂、98%咯菌腈粉剂、96%吡唑醚菌酯粉剂原药单剂对辣椒白绢病菌的抑菌效果比较明显,EC50值为0.0006~24.4884 mg·L^(-1);97%恶霉灵粉剂+96%吡唑醚菌酯粉剂原药复配具有明显的增效作用;42%肟菌·戊唑醇悬浮剂、25%吡唑醚菌酯悬浮剂、15%三唑酮可湿性粉剂等8种制剂的EC50值较小,能明显抑制菌丝生长;25%吡唑醚菌酯悬浮剂+42%肟菌·戊唑醇悬浮剂等6种复配剂对辣椒白绢病菌的抑制作用较好,均表现为明显的增效作用。通过盆栽试验筛选得到防效较好的42%肟菌·戊唑醇悬浮剂、15%三唑酮可湿性粉剂、25%吡唑醚菌酯悬浮剂3种制剂及25%吡唑醚菌酯悬浮剂+42%肟菌·戊唑醇悬浮剂、43%戊唑醇悬浮剂+40%五氯硝基苯可湿性粉剂2种复配组合防效最好,防治效果为97.58%~100.00%。经田间试验验证,15%三唑酮可湿性粉剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂+42%肟菌·戊唑醇悬浮剂复配具有明显的防治效果,防效分别为85.81%和82.02%。试验获得防治辣椒白绢病的最优杀菌剂类型为甲氧基丙烯酸酯类和三唑类杀菌剂,其中15%三唑酮可湿性粉剂、25%吡唑醚菌酯悬浮剂+42%肟菌·戊唑醇悬浮剂复配可用于大面积的辣椒白绢病综合防控。

花生白绢病互作研究进展

为更好地防治花生白绢病以及加速抗病育种进程,须加强花生与白绢病互作过程研究。笔者从花生白绢病致病机理入手,详细阐述了花生白绢病菌遗传多样性、致病性及毒力因子等;对目前花生白绢病的防治情况,包括病状表现、生防菌的筛选等做出分析;总结了包括接种方法、已发掘的抗性资源等在内的花生白绢病抗病育种研究;最后做出展望,建议从摸清白绢病菌底细、建立病害防治专家系统等方面入手,从整体上提高中国花生对白绢病的抵御能力。

河南省花生白绢病菌群体多样性及对萎锈灵敏感性研究

花生白绢病是由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)引起的土传真菌病害,目前已成为花生生产的主要限制因子。为了解河南省花生白绢病菌群体多样性及其对常用防治药剂萎锈灵的敏感性,采用五点取样法,调查了河南省南阳、驻马店、商丘、郑州、新乡5个花生主产区花生白绢病的发生率,在室内离体条件下分析了采自5个主产区的28株花生白绢病菌株的形态学特征和菌丝亲和群(MCG),并采用菌丝生长速率抑制法测定了这些菌株对萎锈灵的敏感性。结果表明,河南省南阳、驻马店、商丘、郑州和新乡花生白绢病的发病率为3.6%~50.4%;28株花生白绢病菌株在菌落形态、菌丝生长速率和菌核在PDA平板上的分布及菌核的数量、干质量、直径上均存在差异,且菌株的菌核数量、干质量和直径三者之间存在显著相关性;28株菌株被划分为5个MCG,最大的MCG1包含来自4个主产区的15株菌株,除商丘外,其他主产区出现的MCG与菌株的地理来源无相关性;28株菌株的香农-威纳多样性指数(H)为1.13。28株菌株对萎锈灵均表现为敏感,EC50平均值为0.1828 mg/L,且不同主产区菌株对萎锈灵的敏感性均无显著差异。该研究表明,河南省花生白绢病菌群体具有相对较低的多样性,萎锈灵可作为防治花生白绢病的有效药剂。

温郁金白绢病菌的生物学特性及药剂毒力测定

为明确温郁金白绢病菌(Sclerotium rolfsii)的生物学特性及对杀菌剂的敏感性,本实验研究了不同培养条件对病原菌菌丝生长和菌核形成的影响,并测定了10种杀菌剂对病原菌的抑制作用。结果表明,该菌菌丝生长和菌核形成的最适温度范围为30~32℃,适宜p H范围为5~7,适宜培养基为燕麦和玉米培养基;持续黑暗有利于菌丝生长,光暗交替有利于菌核形成;不同碳源和氮源对菌丝生长和菌核形成的影响差异显著,其中蔗糖和硝酸钠分别为最适碳源和氮源;菌丝和菌核致死温度分别为50℃和55℃。烯唑醇对该菌的抑制作用最强,EC50为0.1412 mg/L;其次是吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑和氟硅唑;而代森锌和百菌清的抑制作用最差,不适合用于防治温郁金白绢病。

黑曲霉xj粗提物的拮抗机制及其抗氧化活性

为探究黑曲霉Aspergillus niger xj菌株粗提物SE对魔芋白绢病病原菌——齐整小核菌Sclerotium rolfsii R-67的拮抗机制及其抗氧化活性,采用菌丝生长速率法,研究了SE对R-67的抑制作用,进而通过测定处理后菌株的电导率、核酸蛋白泄露、三羧酸循环关键酶[琥珀酸脱氢酶(SDH)及苹果酸脱氢酶(MDH)]比活力、胞内活性氧(ROS)水平及核酸含量,对SE的拮抗机制进行了研究,并通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法及2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法测定了其抗氧化活性。通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)方法,从粗提物SE中共检测到12种化合物,其中主要成分为5-羟甲基糠醛(质量分数97.96%)。生物试验结果表明:SE能够抑制R-67菌丝的生长,其IC50值为0.46 mg/mL;SE处理可导致R-67菌液的电导率升高及核酸蛋白含量增加,抑制其三羧酸循环中关键酶SDH与MDH的活力,增加菌体细胞内ROS含量,使细胞核4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色的荧光强度减弱,据此初步推测其作用机制是通过影响R-67菌体细胞膜完整性、损伤细胞结构、抑制三羧酸循环及核酸合成等途径而发挥抑菌作用。研究表明,黑曲霉xj粗提物SE在魔芋白绢病的生物防治中具有良好的应用前景,此外SE对DPPH及ABTS自由基有一定的清除能力,有望应用于抗氧化功能性产品中。