大豆肽超滤分离纯化过程的研究

用板框型超滤器以全回流的方式对大豆肽粗品进行处理 ,通过测定不同浓度的大豆肽溶液在不同循环时间内滤出液的膜通量变化及截留液中固形物的含量 ,对超滤膜效能及其选择性进行了评价和分析。试验结果表明 ,超滤技术不仅能直接从发酵产物中分离出纯度较高的大豆肽 。

大豆肽的分级膜分离研究

利用截留不同分子质量 (30 0 0 0u、1 0 0 0 0u和 5 0 0 0u)的切向流超滤膜将水解度为 1 4 .5 %的大豆肽按分子质量分为 4级 ,利用凝胶过滤色谱研究了大豆肽的分子质量分布及分级膜分离的效果 ,以及大豆肽膜分离时膜的通量和分离效能变化 ,并对不同分子质量段大豆肽的功能特性进行了研究 .结果表明 :分级膜分离方法对大豆肽能进行有效的分离 ;水解度为 1 4 .5 %的大豆肽中大多数的分子质量小于 5 0 0 0u ;不同分子质量大豆肽的溶解性、粘度、起泡性和乳化性不同 .采用全回流方式处理大豆肽粗品时 ,随着大豆肽浓度的提高 ,膜通量有所下降 。

超滤在大豆多肽分离纯化中应用

本试验应用超滤技术对大豆多肽进行分离,研究了超滤系统几个主要参数对膜通量的影响。研究结果表明:截留分子量30000Da的超滤膜应在压力0.12MPa、温度40℃、pH值7.0下运行40min为一个周期,膜通量为19L/m2·h左右;截留分子量10000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度<45℃、自然pH值下运行60min为一个周期,膜通量为25L/m2·h左右;截留分子量5000Da的超滤膜应在压力0.10MPa、温度<45℃、自然pH值下运行80min为一个周期,膜通量为22L/m2·h左右;经分离得到分子量>30000Da的大豆多肽约占13.21%,分子量10000～30000Da的大豆多肽约占4.05%,分子量5000～10000Da的大豆多肽约占6.41%,分子量<5000Da的大豆多肽约占76.11%。

猪皮胶原蛋白抗氧化肽的分离纯化及体外抗氧化活性研究

采用碱性蛋白酶对猪皮胶原蛋白进行酶解，制备抗氧化肽。为了得到抗氧化活性高且纯度高的抗氧化肽，本实验采用多种体外抗氧化评价体系研究超滤获得的各分子质量段猪皮胶原蛋白抗氧化肽的体外抗氧化活性；依次采用离子交换色谱、凝胶色谱对猪皮胶原蛋白酶解液进行分离纯化。结果显示：超滤分离获得5～10ku的抗氧化肽较其他分子量范围的抗氧化肽具有较好的抗氧化活性；采用离子交换色谱、凝胶色谱两种分离方法分步分离能达到较好的分离纯化效果，离子交换色谱分离得到7个组分，其中组分P1对O2-·清除率最高，多肽浓度为0．85mg／mL时，清除率为46．30％，IC50值为1．24mg／mL；该组分经过凝胶色谱分离后得到2个组分，其中组分P1-B对O2-·清除率最高，多肽浓度为0．9mg／mL时，清除率为49．43％，IC50值为0．98mg／mL。

超滤法分离纯化沙丁鱼肽

用板式超滤装置以全回流方式对沙丁鱼粗肽溶液进行处理 ,通过测定不同水解度的沙丁鱼粗肽溶液在超滤过程中组分的透过速率、截留液和透过液中肽的含量 ,及SDS 聚丙烯酰胺电泳检测组分分子质量的分布 ,对超滤膜的选择性及分离效果进行了评价和分析。试验结果表明 ,超滤膜对沙丁鱼粗肽溶液中不同分子质量的组分具有分离纯化作用 ,超滤技术可以作为一种初步检测沙丁鱼粗肽溶液组分分子质量分布的手段。

DA201-C大孔吸附树脂对乳铁蛋白抗菌肽的分离纯化

该研究以吸附量、树脂动态吸附和不同乙醇浓度(体积分数)梯度洗脱为考察指标,优化了DA201-C大孔树脂对超滤处理后的乳铁蛋白抗菌肽溶液(分子质量<3000 Da)分离纯化的工艺条件。静态吸附结果表明,当树脂吸附12 h后,吸附量为479.7 mg/g、吸附率为95.94%;对吸附饱和的树脂使用不同浓度的乙醇静态解吸,结果显示,75%(体积分数)乙醇解吸率达到95.35%。该研究还确定了最优吸附条件:NaCl浓度0.6 mol/L、上样流速1.5 mL/min和上样质量浓度20 mg/mL。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌率为指标,用不同浓度乙醇对乳铁蛋白抗菌肽进行梯度洗脱,结果表明,75%乙醇洗脱组分抑菌活性最强,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率分别达到80.95%和74.42%,与未纯化前相比提高了12.2%左右。对不同洗脱组分的氨基酸分析,结果显示,抗菌肽的疏水性及正电荷性越大,抗菌活性越强。

海洋生物活性肽的制备、分离纯化及构效关系研究进展

海洋生物活性肽是一类结构多样且具有多种功能和活性的肽类,其制备、分离纯化和生物活性受到了广泛关注。已有不少相关研究证明海洋生物活性肽是一类很具开发潜力的新型药物来源。然而,整合海洋生物活性肽制备技术和生物应用的研究还较缺乏,为此本文综述了近年来海洋生物活性肽制备、分离纯化的方法,并阐述了其原理、优缺点、适用对象和未来发展趋势,介绍了海洋生物活性肽的抗氧化、抗糖尿病、降血压、抗菌、抗癌等功能活性,并深入探讨了其构效关系和未来发展方向,以便为开发新型海洋药物提供有力理论依据。

酶解大豆蛋白抗氧化肽的分离纯化与鉴定

对前期优化的碱性蛋白酶最优酶解条件下的大豆蛋白抗氧化肽进行进一步分离、纯化及鉴定。采用高效强阴离子交换柱(HiTrap Q HP)、快速弱阴离子交换柱(HiTrap DEAE-FF)和制备液相色谱方法,对酶解液进行分离纯化,获得高纯度的抗氧化肽SHP-1。通过液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定抗氧化肽SHP-1的分子质量,为741.41 Da;采用氨基酸分析仪对抗氧化肽SHP-1的组成进行分析,表明抗氧化肽SHP-1是由5种氨基酸组成。通过LC-MS/MS对抗氧化肽SHP-1氨基序列进行解析并与大豆蛋白数据库比对,确定抗氧化肽SHP-1氨基酸序列为IPPGVPY,来自于大豆球蛋白G4亚基。