Studies of Hepatitis B Virus-Specific Transfer Factor reparation

制备一种乙型肝炎病毒特异性转移因子制剂 (HBV STF) ,为临床应用提供有价值的实验依据。从人HBsAg阳性胎盘中制备了HBV STF ,并对其理化性质、免疫学活性进行了检测和初步的临床试用。每批样品经无菌试验、热原质检查、动物安全性试验等均符合药典要求。本品最大紫外吸收光谱在 2 5 6± 2nm处 ,E2 60nm/E2 80nm比值大于 2 7。其水解氨基酸含 17种。对人T淋巴细胞E受体的激活试验结果显示 ,HBV STF的Ea RFc平均增高率在 83 47%～ 10 3 48%之间 ,抗原特异性皮肤试验表明HBV STF能刺激小鼠体内T淋巴细胞增殖 ,诱导小鼠跖趾部皮肤的迟发性变态反应。对HBV STF的初步临床试用也取得明显效果 ,显示HBV STF是一种可用于治疗乙肝的安全。

卵巢癌特异性转移因子的临床疗效研究

目的:探讨卵巢癌特异性转移因子(STF)治疗卵巢癌的临床疗效。方法:将121例卵巢癌患者随机分成实验组和对照组,两组分别为52例和69例。对照组给予手术、化疗等常规治疗,实验组则在常规治疗的同时加用卵巢癌STF。结果:实验组的生存率高于对照组,但差异尚无统计学意义(P>0.05).其中使用≥2疗程卵巢癌STF组的生存时间明显高于使用1个疗程组及对照组(P<0.05),而使用1个疗程组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卵巢癌STF对提高卵巢癌患者的生存率、延长其生存时间可能有效,且其疗效具有量—效关系。

抗乙肝胎盘转移因子的特异免疫活性观察

本研究由ＨＢＶＭ－Ａｂ阳性胎盘提取的抗乙肝胎盘转移因子（ＰＳＴＦ）的特异免疫活性证明，经注射，小鼠外周血淋巴细胞明显增多，胸腺重量和指数亦显著增加，酯酶染色证明７５％属Ｔ－样淋巴细胞，２５％属Ｔｈｙ－样淋巴细胞，人白细胞或小鼠白细胞体外转移ＰＳＴＦ特异免疫活性、或豚鼠和小鼠体内转移ＰＳＴＦ特异免疫活性，再取其白细胞作白细胞粘附抑制、白细胞移动抑制、特异淋巴细胞转化、小鼠足掌注射和诱生干扰素试验，均可得到明显稳定阳性结果，说明ＰＳＴＦ对ＨＢＶ具有特异免疫活性，阳性供体可将ＰＳＴＦ的特异免疫活性转移给阴性受体。

胎盘特异转移因子治疗慢性乙型肝炎200例临床探讨

试自乙型肝炎病毒血清标志(HBVM)阳性胎盘提取特异转移因子(PSTF)治疗慢性乙型肝炎(慢性活动型167例、慢性迁延型16例、慢性活动性肝炎有硬变趋势者11例、肝炎肝硬变6例)200例,平均疗程82天,来见毒副反应,临床治愈率83.0％、进步11.0％、无效6.0％;近期HBsAg、HBeAg阴转率为9.9％和32.8％;出院后平均随访5 1/2月,病情波动者13.9％,出院时进步和无效者,复查时转临床治愈分别为40.0％和50.0％。本文认为PSTF对慢乙肝有较好疗效,值得进一步研究提高。

特异性转移因子对肺癌的免疫治疗

报告应用特异性肺癌转移因子(SPTF)对肺癌患者进行免疫治疗的效果观察。肺癌患者50例分为两组,一组化疗加用SPTF(35例),一组单纯化疗作为对照(15例)。结果化疗反应SPTF组比对照组明显减轻。用OKT单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群,发现SPTF组治疗前后OKT_4、OKT_8、OKT_4/OKT_8比值差别非常显著(P<0.001),对照组治疗前后差别不显著(P≥0.05)。以上结果提示SPTF能提高肺癌患者的免疫功能,对肺癌的转归发生良好作用。本组采用的SPTF具有取材来源充足,有抗原特异活性及无毒副作用等优点。

禽流感特异性转移因子的制备及其免疫作用

目的制备禽流感病毒特异性转移因子并探讨其对禽流感灭活疫苗的免疫增效作用。方法用禽流感病毒H5N1血清亚型灭活疫苗免疫鸡,用国标血凝抑制方法检测病毒特异性血凝抑制抗体效价。当抗体效价达到高峰时,翅静脉采取外周血,分离淋巴细胞并制备细胞单层、传代后获得禽流感病毒H5N1血清亚型特异性转移因子。用所获得的特异性转移因子进行疫苗免疫增效试验。结果采用本法可获得禽流感病毒特异性转移因子。免疫增效试验表明,在进行禽流感病毒灭活疫苗免疫的同时使用禽流感病毒特异性转移因子,可在一定幅度内提高禽流感病毒抗体水平并能延长抗体维持时间。不同给药途径比较试验表明,口服途径给药的疫苗增效作用优于注射途径给药。结论通过淋巴细胞体外培养可以制备禽流感病毒特异性转移因子。禽流感病毒H5N1血清亚型特异性转移因子对禽流感病毒灭活疫苗具有明显的增效作用,且口服途径给药的疫苗免疫增效作用优于注射途径给药。

拉米夫定联合抗乙肝转移因子和强肝胶囊治疗慢性乙型肝炎的疗效观察

目的观察拉米夫定联合抗乙肝转移因子和强肝胶囊治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法将160例慢性乙型肝炎患者随机分为拉米夫定联合抗乙肝转移因子及强肝胶囊治疗组(80例)和单用拉米夫定组(80例)。拉米夫定100mg/d口服,疗程12个月,抗乙肝转移因子4mg/d皮下注射,前1个月每日1次,以后隔日1次,疗程6个月,强肝胶囊2.0,每日2次,每服6日停1日,疗程6个月。结果治疗6个月、12个月及随防6个月时联合治疗组ALT复常率、HBeAg转阴率,HBeAg/抗HBe血清转换率均显著高于拉米夫定组(P<0.01),两组HBVDNA转阴率则无显著性差异(P>0.05);两组治疗12个月及随防6个月联合组HA、LN及IV-C水平显著低于对照组(P<0.05),联合治疗组肝组织学纤维化好转率为86.6%(13/15),与拉米夫定组的60.0%(6/10)有显著性差异(P<0.01)。结论拉米夫定与抗乙肝转移因子及强肝胶囊联合治疗慢性乙型肝炎可提高抗病毒和抗肝纤维化疗效。

鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子的制备及鉴定

目的制备鸡卵黄乙肝病毒特异性转移因子(EYHBV-TF),并检测其免疫活性。方法用乙肝疫苗免疫母鸡,收集鸡蛋,取卵黄进行透析,制备EYHBV-TF,参照药典要求,采用光谱法、高效液相色谱法(HPLC)、Lowry法等检测其理化性质。采用白细胞粘附抑制法(LAI)和迟发型皮肤超敏试验(DTH)检测特异免疫活性。结果EYHBV-TF是一种可透析、含有18种氨基酸、相对分子质量小于12000的小分子物质,其多肽含量为1·2mg/ml,核糖含量为152·94μg/ml,pH6·9±0·5,蛋白反应阴性,最大紫外吸收光谱在270nm处。该EYHBV-TF能明显抑制小鼠白细胞粘附(P<0·01),并能诱导小鼠跖趾部皮肤的迟发型超敏反应(P<0·01),与猪脾淋巴细胞制取的乙肝特异性转移因子(PSHBV-TF)检测结果接近(P>0·05)。而正常卵黄提取液组、非特异性转移因子和甲肝抗原(HAAg)对照组均不能表现出这两种效应(P>0·05)。结论EYHBV-TF与PS-TF主要理化性质和作用相类似,均具有乙肝抗原特异性细胞免疫活性。

抗乙肝特异胎盘转移因子治疗慢性乙型肝炎的Ⅱ期临床对比观察

应用抗乙肝特异胎盘转移因子治疗慢性乙型肝炎28例。结果发现抗乙肝特异胎盘转移因子治疗组的HBeAg、HBV－DNA阴转率及抗HBe阳转率在治疗结束时分别为53．6％、50．0％和42.9％，均显著高于正常胎盘转移因子治疗组（9．1％，P＜0．05）和空白对照组（6．3％，P＜0．01）；随访3个月均为46．2％，均显著高于空白对照组（8.7％，P＜0.01）。正常胎盘转移因子治疗组和猪苓多糖加乙肝疫苗治疗组与空白对照组相比均无显著性差异（P＞0．05）。提示抗乙肝特异胎盘转移因子是一种有效、价廉、使用方便的抗乙型肝炎病毒药物。

胃癌特异性转移因子的研制及活性检测

该项研究用3mKCl提取胃癌抗原（GCaAg），免疫小鼠制备特异性转移因子（STF），应用巨噬细胞（MΦ）移动抑制试验（MIT），测得GCaAg致敏动物淋巴细胞加GCaAg和加STF＋GCaAg试验组，MΦ移动面积明显小于对照组（P＜0．001和P＜0．01）。移动指数（MI）在0．8以下，均为阳性。在MTT比色中加GCaAg和加STF组OD值明显大于空白对照组（P＜0．05和P＜0．001）；淋转指数STF组最高（1．73）。两项试验提示STF确有激活淋巴细胞的作用，并显示抗原依赖的特异性活性。在MIT中显示STF作用无种属特异性限制。这一点为动物来源的STF治疗人类肿瘤提供了依据。

特异性转移因子治疗流行性出血热的研究

用流行性出血热病毒(EHFV)76-118株免疫猪制备特异性转移因子(STF),对流行性出血热(EHF)62例早期患者进行临床疗效观察。其中,STF组(STF+综合疗法)37例,对照组(综合疗法)25例,两组有可比性。经临床使用证明,STF配合综合疗法,对EHF早期病人有显著疗效。STF可以提高EHF患者的细胞免疫功能,在退热、促进血小板复常、减少出血倾向及预防肾脏损害等方面有较好的作用。在提高越期率、缩短治愈时间等方面的效果较对照组更为明显。

卵巢癌特异性转移因子的制备与鉴定

目的：为了卵巢癌手术后免疫治疗的需要，我们用透析法从用癌组织免疫的山羊脾及淋巴结制备了卵巢癌特异性转移因子（ＳＴＦ）。方法：按中国药典及白细胞粘附抑制试验（ＭＴＴ法）对ＳＴＦ的理化性质和免疫学性质进行了检测和鉴定。结果：所制备的卵巢癌ＳＴＦ符合转移因子质量标准，具有对卵巢癌细胞抗原的特异性。在１５例卵巢癌病人的临床应用中，未发现任何毒副反应。结论：用该法制备的卵巢癌ＳＴＦ，可以安全地应用于卵巢癌的免疫治疗。

甲型副伤寒特异性转移因子的制备和检定

目的初步制备甲型副伤寒特异性转移因子(PA-STF),为临床提供紧急预防或辅助治疗甲型副伤寒的新型生物制剂。方法体内免疫法制备PA-STF,采用紫外分光光度计对PA-STF进行多波长扫描,以苔黑酚法和改良Lowry法分别检测PA-STF的核糖及多肽含量,并进行无菌试验、热原质试验和安全试验等,以免疫保护性试验检定其免疫学活性。结果 PA-STF的理化性状符合《中国生物制品》(2000版)的要求标准;免疫保护性试验中,灌服PA-STF的小鼠存活率均明显高于灌服nTF和NS的小鼠的存活率(P<0.05)。结论成功制备了PA-STF,该制剂可转移针对甲型副伤寒沙门菌的特异性免疫应答,增强小鼠抗甲型副伤寒沙门菌的免疫力。

胃癌特异性转移因子诱导淋巴细胞表面IL-2受体表达

目的 观察胃癌特异性转移因子 (GSTF)对淋巴细胞进行诱导刺激后 ,淋巴细胞表面的 IL- 2受体 (IL- 2 R)表达的变化 .方法 应用流式细胞仪检测异硫氰基荧光素 (FITC)标记的淋巴细胞表面 IL - 2 R抗体的荧光强度 ,以观察其受刺激前后表面 IL- 2 R的表达 .结果 GSTF在与其特异性抗原共同存在下诱导刺激淋巴细胞 ,可使其表面的 IL- 2 R表达量增加 ,且 GSTF的这种作用具有抗原特异性 ,GSTF或胃癌抗原单独存在时此作用则不明显 .结论 为肿瘤特异性转移因子的活性检测建立了一种新型快速、客观科学的检测方法 ,也为今后肿瘤特异性转移因子的分离纯化及进一步研究转移因子的作用机制打下了基础 .

猪脾转移因子的制备和生物学活性研究

目的:采用冻融-透析法制备猪脾转移因子,并对其理化性质以及免疫学生物学活性、生物安全性进行初步检定。方法:采用低温匀浆反复冻融新鲜的猪脾脏、无菌离心匀浆脾脏组织液,取上清液透析制备转移因子;以改良Lowry法分别检测多肽含量,并进行理化指标、无菌试验、热原质试验及其生物学活性检测。结果:冻融-透析法制备猪脾转移因子的理化性状符合《中国生物制品》的要求;无菌试验、热原质试验均为阴性;安全试验合格;淋巴细胞转化试验和E花环形成试验证实其具有刺激淋巴细胞增殖生物学活性。结论:成功制备了猪脾脏转移因子,其各项理化指标符合生物制品规程的要求,同时具有较好的非特异性免疫学的生物学活性。

乙肝特异性转移因子的制备及鉴定

从HBsAg阳性患者血清中提取纯化的HBsAg和Dane颗粒,经灭活后免疫猪,从猪脾脏和白细胞透析物中制备出乙肝特异性转移因子(TF_(HBV))。经一系列理化性状及药典规定项目的检测均符合生物制品标准,用^(51)Cr白细胞粘附抑制实验(^(51)Cr-LAI)证实该TF_(HBV)具有抗原特异性,体外能转移对HBV的免疫性。

甲胎蛋白特异性转移因子的制备和鉴定

目的 制备甲胎蛋白 (AFP)特异性转移因子并鉴定其理化和生物学性质。方法 以基因重组AFP纯化后免疫猪 ,从猪脾脏离心超滤物中制备出AFP特异性转移因子 (TFAFP)。按《中国生物制品规程》规定检测理化性质 ,以Et RFc试验和白细胞移动抑制实验检测生物活性。结果 TFAFP各理化性质及生物活性均符合生物制品标准 ,并具有AFP抗原特异性。结论 TFAFP体外能转移对AFP的免疫性 ,可尝试用于肝癌治疗。

猪瘟特异性转移因子的制备及免疫活性鉴定

为制备猪瘟特异性转移因子(CSFV-STF)并鉴定其免疫学活性,用猪瘟兔化弱毒和石门系强毒(CSFV-Shimen)配合免疫健康猪,取猪的脾脏,制备猪瘟特异性转移因子,并采用改良白细胞黏附抑制试验检测其免疫活性。结果显示,猪瘟特异性转移因子的LAI%为76.0%,显著高于对照组(P<0.01)。表明猪瘟特异性转移因子具有特异性免疫活性。

特异性转移因子免疫活性检测

目的检测及探讨特异性转移因子的免疫活性。方法免疫保护性试验检测甲型副伤寒特异性转移因子对甲型副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌攻击小鼠的不同保护作用,计算存活率。结果甲型副伤寒特异性转移因子对甲型副伤寒沙门菌攻击的小鼠的保护作用明显高于其它细菌攻击的小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。结论特异性转移因子的免疫活性既具有区别于非特异性转移因子的相对特异性,又具有针对特定抗原的绝对特异性。

特异性转移因子对人宫颈癌细胞的生长抑制作用

目的 :观察宫颈癌特异性转移因子 (STF)在人外周血单个核细胞 (PBMC)介导的对人宫颈癌细胞系 (Hela细胞 )的细胞毒实验中的作用。方法 :应用 MTT法 ,比较在不同浓度下的 STF诱导下 ,PBMC对 Hela细胞杀伤作用的浓度依赖关系和最佳效靶比。结果 :在 STF诱导下的 PBMC对 Hela细胞的杀伤作用在一定范围内随着 STF浓度的增高而增高 ,其最佳效靶比为8∶ 1。结论 :体外实验的结果提示应用