脊髓提取液对体外培养的神经细胞在缺气损伤环境中的作用

本实验目的在于研究小鼠胚胎脊髓提取液对损伤环境中的体外培养脊髓和背根节神经细胞的保护作用。神经细胞取自１２～１４ ｄ 胚胎小鼠脊髓和背根节，接种于２４ 孔板中。培养第５ ｄ 时在培养板中加入２５０ ｍ ｇ／Ｌ 脊髓提取液，对照组不加；培养第１０ ｄ 在液体表面加入液体石蜡造成缺气损伤。继续培养４、８、１２、２４ ｈ，然后去除液体石蜡，观察细胞形态和Ｋ＋ 、ＬＤＨ 的变化，用Ｍ ＴＴ 方法检测细胞活性，通过ＮＳＥ免疫组化反应显示神经元存活状况。结果表明：损伤神经元出现细胞肿胀、失去折光性、核偏位以及ＮＳＥ 染色变弱；而在培养液中加入脊髓提取液，可以减轻这种“缺气”造成的损伤，提高体外培养神经元在损伤环境中的生存率，保持细胞的活性和细胞膜的通透性。