同源重组法构建枯草杆菌spo0 A基因缺失突变株

从枯草杆菌(Bacillussubtilis)168的衍生菌株1094的基因组DNA中分别扩增了孢子形成的早期因子基因spo0A的上、下游片段spo0A front和spo0A back,并以大肠杆菌(E.coli)质粒pBluescriptⅡks(+)为骨架,以来自pBEST501质粒上的新霉素抗性基因(neor)为枯草杆菌中的筛选标记,构建了基于枯草杆菌spo0A基因位点的整合载体pYZQ 1.线性化后转化枯草杆菌,从新霉素和壮观霉素双抗性平板上挑取两株转化子,通过基因组的PCR鉴定,孢子形成率测定,孢子染色镜检,确定转化子为枯草杆菌的孢子形成spo0A基因缺失突变株(spo0A∶∶neor).