Sprouty2蛋白在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达及增殖情况研究

目的探究Sprouty2蛋白在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达及增殖情况。方法回顾性选取2019年1月至2021年12月间就诊于海南省人民医院肿瘤内科的80例乳腺癌患者临床资料,收集乳腺癌组织标本,对Sprouty2蛋白表达的乳腺癌MCF-7细胞进行培养,根据培养方法的不同分为观察组与对照组,观察组应用Sprouty2蛋白特异性抗体孵育,对照组应用DPBS孵育。对比两组Sprouty2蛋白表达情况;利用siRNA技术对MCF-7细胞Sprouty2基因表达进行干预,根据结果分为siRNA干扰组与未干扰组;应用MTT法对细胞增殖活力予以检测,根据划痕试验结果分为沉默组、DMSO对照组;并采用蛋白质印迹法检测MMP-2、MMP-9、MMP-13表达。结果观察组患者MCF-7细胞中Sprouty2蛋白免疫细胞百分数及平均荧光强度为(31.56±0.55)%、3.21±0.16,均明显低于对照组[(37.31±1.32)%、3.29±0.06],差异均有统计学意义(P<0.05)。siRNA干扰组的Sprouty2相对变化量为0.19±0.05,明显低于未干扰组(1.00±0.14),差异有统计学意义(P<0.05)。MTT试验结果显示,经过siRNA干扰,MCF-7细胞活力较对照组显著升高,沉默组细胞迁徙能力明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。沉默Sprouty2基因的MCF-7细胞中MMP-2、MMP-9、MMP-13表达量为2.53±0.27、0.89±0.12、2.64±0.26,均明显高于对照组(1.26±0.17、0.48±0.11、1.72±0.13),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Sprouty2蛋白表达失调与乳腺癌的发生密切相关,基因下调会提升MCF-7细胞增殖与侵袭能力。

Sprouty2蛋白与人乳腺癌MCF-7细胞增殖与迁徙的研究

目的探讨Sprouty2蛋白与人乳腺癌MCF-7细胞增殖与迁徙的关系。方法通过siRNA技术干扰MCF-7细胞Sprouty2基因的表达,通过Real time PCR、Western blotting以及细胞免疫荧光检测Sprouty2基因的干扰效果,划痕实验以及Transwell实验观察细胞迁移和侵袭的能力,Western blotting检测MMP-2、MMP-9和MMP-13的表达。结果通过siRNA干扰,有效地干扰了Sprouty2基因的表达,建立了Sprouty2基因低表达的细胞株;Sprouty2基因沉默后,细胞的迁移和侵袭能力明显增强;沉默Sprouty2基因的MCF-7细胞中MMP-2、MMP-9和MMP-13蛋白较对照组均升高。结论 Sprouty2基因下调后,MCF-7细胞的迁移和侵袭能力明显提高,可能与MMP-2、MMP-9和MMP-13蛋白有关。

Sprouty2与肿瘤的研究进展

Sprouty2蛋白对受体酪氨酸激酶(RTK)等信号通路起着重要的抑制作用,其表达在多种肿瘤组织中发生明显下降,并可进一步引起细胞异常增殖、转化及新生血管形成,从而促进肿瘤的发生及发展。现就其与肿瘤发生及发展关系的研究进展进行综述。

miR-122抑制Sprouty2促进肾癌细胞增殖

目的研究miR-122在肾癌中的作用及其与Sprouty2的相互关系。方法使用Western blot检测4个肾癌组织和相邻正常组织中Sprouty2的表达水平,RT-qPCR检测42个肾癌组织和相邻正常组织中的miR-122表达水平。下调miR-122或敲低Sprouty2后通过CCK-8实验检测肾癌细胞增殖情况,并使用双荧光素酶基因实验明确miR-122和Sprouty2之间的关系。结果肾癌组织中Sprouty2表达水平低于正常组织(P<0.05),miR-122表达水平高于正常组织(P<0.05)。miR-122下调后肾癌细胞的增殖能力下降(P<0.05)。敲低Sprouty2表达水平能促进肾癌细胞的体外增殖(P<0.05)。miR-122抑制剂能与Sprouty23′-UTR结合,共转染后增强Sprouty2基因的活性。结论Sprouty2基因是miR-122的靶基因。miR-122可以通过抑制Sprouty2基因的活性,促进肾癌的发生、发展。