Study on Extraction and Properties of Gelatin from Squid Skin

A kind of aquatic gelatin was prepared from squid skin. The technological parameters for extracting gelatin were optimized by the method of orthogonal design. The fundamental properties of the raw material and gelatin were analyzed. The results showed that the optimal extraction conditions were as follows： pH val- ue of 8, temperature at 70 ℃, material-to-liquid ratio at 1：4, and extraction time of 1.5 h. under such conditions, the highest yield of gelatin and the purity were 5.94% and 96.73%, respectively. The physicoehemical properties of squid skin gelatin were coincided with standards of edible gelatin. In addition, the contents of amino acids were similar to many kinds of aquatic gelatin.

响应面法优化鱿鱼皮蛋白肽的制备工艺及其理化性质分析

为实现鱿鱼加工下脚料鱿鱼皮的高值化利用,本研究采用酶法制备鱿鱼皮蛋白肽。以多肽浓度和三氯乙酸可溶性氮指数(Trichloroacetic acid-nitrogen soluble index,TCA-NSI)为评价指标,采用单因素和响应面试验优化酶解工艺参数,并对所制备蛋白肽的氨基酸组成、分子量分布、蛋白肽序列、抗氧化活性及其体外模拟消化特性进行表征。结果表明,最佳酶解工艺条件为酶解温度43.50℃、酶解时间100 min、酶解pH7.50、胰蛋白酶与碱性蛋白酶比例2:1、加酶量4000 U/g,在此条件下其TCA-NSI可达89.02%±0.66%。所制备的鱿鱼皮蛋白肽其氨基酸组成均衡,必需氨基酸指数(Essential amino acid index,EAAI)可达0.90。此外,鱿鱼皮蛋白肽含有43个多肽序列,其中38个肽段的分子质量低于1800 Da,其DPPH自由基、ABTS^(+)自由基和羟自由基清除率的IC_(50)分别为0.61、0.28和1.95 mg/mL,且经体外模拟胃肠消化后仍能维持较好的抗氧化活性。本研究结果为鱿鱼加工下脚料的开发利用和精深加工提供了理论依据。

复合酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白抗冻肽的工艺研究

为了获得具有较高活性的抗冻肽,提高水产加工副产物的综合利用率,本试验以水解度和过氧化氢酶低温保护活性为指标,优化鱿鱼皮胶原蛋白酶解工艺,并对水解产物进行分离纯化及结构鉴定。结果表明,最佳酶解条件为:当底物浓度为4%、加酶量为4000 U·g^(-1)时,先由碱性蛋白酶于pH值8、50℃条件下酶解2 h;灭酶后由木瓜蛋白酶于pH值6、45℃条件下酶解3 h。在此条件下所得酶解产物分子量主要在1000~5000 Da之间,经G-25凝胶柱分离后得到具有较高抗冻活性的F2组分,其主要成分的氨基酸序列可能为Gly-Pro-Try-Pro-Ala-Ala-Asn-Ser-Pro-Glu或Glu-Pro-Ser-Asn-Ala-Ala-Pro-Try-Pro-Gly。本研究为鱿鱼皮的精深加工和新型抗冻剂的开发提供了一定的理论依据。

鱿鱼皮胶原蛋白肽的脱色及其对风味影响的研究

为探究脱色工艺及其对鱿鱼皮胶原蛋白肽风味的影响,本试验在酶解制备的基础上,研究了不同活性炭和树脂对鱿鱼皮酶解液的脱色效果及最优工艺,并采用电子舌、电子鼻、氨基酸分析及感官评价等方法对鱿鱼皮胶原蛋白肽风味变化进行了分析。结果表明,粉末状活性炭的脱色效果较好,最佳脱色工艺为:pH值2.0,添加量0.1%(m/v),30℃下脱色30 min,该条件下鱿鱼皮酶解液的脱色率和蛋白损失率分别为82.91%和24.81%。分子量分布与游离氨基酸分析结果表明,与脱色前相比,脱色后样品的分子量分布变化不大,游离氨基酸及苦味氨基酸含量下降,鲜味氨基酸占比上升。电子舌、电子鼻及感官评价结果表明,脱色前后样品的风味差异较大,脱色后,样品的风味有显著改善,表现为苦味下降,鲜、酸、咸味提升。本研究结果为鱿鱼皮高附加值产品的开发及胶原蛋白肽的应用提供了一定的理论依据。

鱿鱼皮明胶水解物降血压活性研究

探讨了秘鲁鱿鱼(Dosidicus eschrichitii Steenstrup)皮明胶水解物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性以及其降血压作用。采用超滤法对明胶水解液进行初步分离;采用比色法检测不同分子量范围鱿鱼皮明胶水解物组分的ACE抑制活性;采用两肾一夹型建立肾血管性高血压大鼠(RHR)模型,经口服预防给药30 d后,测定大鼠血压和血液中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。试验结果表明鱿鱼皮明胶水解物体外均能明显抑制ACE的活性,其中UC-2和UF-2的半抑制浓度(IC50)分别为0.71和0.79 mg/mL。UF-2组分经口服预防给药可显著降低肾血管性高血压大鼠的动脉血压和大鼠血浆中的AngⅡ水平,具有较好的降血压效果。

鱿鱼皮胶原蛋白的测定与回收

为回收鱿鱼皮中胶原蛋白等有益成分 ,首先对胶原蛋白的定量方法进行了考察 ,确立了适宜于鱿鱼皮中胶原蛋白含量测定 (以羟脯氨酸计 )的方法。结果表明 ,在测定鱿鱼皮中胶原蛋白的含量时 ,宜先将鱿鱼皮进行脱脂处理 ,然后再直接水解测定羟脯氨酸。就水解条件而言 ,可分别采用 12 0℃水解 12h或 130℃水解 6h代替ISO 3496E方法中的 10 5℃水解 16h ,以缩短水解时间。其次 ,采用酶法促溶和热水提取的方法对鱿鱼皮中胶原蛋白进行回收利用 ,以胶原蛋白回收率为依据 ,得出胃蛋白酶 5℃酶解 72h和 10 0℃水提 6h分别为酶法提取和热水提取的最佳条件 ,将提取液调配后进行感官鉴定 ,统计结果表明 ,胃蛋白酶提取液显著优于 10 0℃水提液。对胃蛋白酶酶提温度的选择说明 ,胃蛋白酶促溶温度宜控制在 15℃以下 。

酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺的条件优化

研究了鱿鱼皮胶原蛋白肽的酶解加工工艺条件。在单因素试验基础上,通过正交试验的方法对碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及风味蛋白酶制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺进行优化。优化的提取工艺条件如下:先用0.3%蛋白酶在p H10.5、温度47.5℃条件下水解4 h,再用0.4%木瓜蛋白酶复合风味蛋白酶按1∶2(质量比)的比例在p H 7.5、温度50℃的条件下继续水解4.5 h,结果酶解液的水解度可达28.89%、DPPH·清除率为88.24%,多肽转化率为49.74%,同时84.56%的胶原蛋白肽分子量分布介于180 Da^2 000 Da之间。在优化的酶解条件下,可以得到较好品质的胶原蛋白肽产品。

鱿鱼皮胶原蛋白的功能特性

测试了鱿鱼皮胶原蛋白的特征吸收光谱和分子量分布,比较了胶原蛋白的溶解性、保水性、湿润性、吸油性、乳化性及乳化稳定性、起泡性及泡沫稳定性等应用功能特性。结果表明:(1)3种方法(热水法、酸法和酶法)提取的鱿鱼皮胶原蛋白均在220 nm处有最大吸收,胶原蛋白的分子量为220 ku左右;(2)热水法和酶法提取的胶原蛋白的溶解性能要好于酸法胶原蛋白;(3)提取的3种胶原蛋白均具有一定的保水性,分别为0.54%、0.52%和0.55%;(4)热水法和酶法提取的胶原蛋白的润湿性较好;(5)3种胶原蛋白均具有良好的吸油性,分别为2.7、3.0和3.3 mL/g;(6)3种胶原蛋白拥有较好的乳化性和乳化稳定性,其中酸法提取的胶原蛋白的即时乳化性最好,但酶法提取的胶原蛋白的乳化稳定性最好;(7)3种胶原蛋白具有良好的起泡性和泡沫稳定性,其中酸法提取的胶原蛋白的起泡性和泡沫稳定性最好,分别为83%和67%。

酶法水解鱿鱼皮制备多肽工艺的研究

分析了阿根廷鱿鱼皮的一般化学组成,并以其为原料,研究了酶的种类、加酶量、pH、温度及酶解时间对水解度(DH)的影响。采用正交实验对酶解工艺进行了优化,研究结果表明,复合蛋白酶水解鱿鱼皮制备多肽工艺的最适条件为:加酶量14000u/g、pH8.5、酶解温度50℃、酶解时间4h。在此条件下水解度可达20.7%。

鱿鱼皮胶原蛋白肽生理功能的研究进展

鱿鱼是世界上三大未被充分开发利用且极具潜力的海洋生物资源之一,鱿鱼皮是一种高蛋白低脂肪物质,它的蛋白组成与鱿鱼本体基本一致,鱿鱼皮干物质中80%左右是胶原蛋白,鱿鱼皮胶原蛋白具有良好的保水性、湿润性、吸油性及乳化性,使得它在化妆品、摄影用的明胶等方面有良好的应用前景。

鱿鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白部分生化性质研究

从SDS-PAGE电泳看出,鱿鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白(PSC)中至少含有2条不同的α链(α1和α2),初步确定为I型胶原蛋白。黏度测定的结果显示,鱿鱼PSC的变性温度为22.8℃,比鲤鱼鱼皮和牛皮胶原蛋白变性温度低,而且变性曲线具有明显的阶段性。蛋白酶K对鱿鱼皮PSC分解速度很快,10min就可将α、β链分解完全。层析结果显示,鱿鱼鱼皮PSC的亚基和构成复杂。

鱿鱼皮胶原蛋白制备技术研究

测定了鱿鱼皮的基本组成成分,探索热水法、酸法和酶解法从鱿鱼皮中提取胶原蛋白的制备技术。结果表明,鱿鱼皮中含有丰富的蛋白质,粗蛋白含量为75.35%(干基),胶原蛋白的含量53.96%(干基),胶原蛋白占总蛋白的71.61%;热水法提取胶原蛋白的提取率为90.26%,酸法提取胶原蛋白的提取率为95.16%,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶法提取胶原蛋白的提取率分别为95.16%和97.56%,木瓜蛋白酶酶解法的提取效果最好;木瓜蛋白酶酶解法的提取胶原蛋白的最佳条件是底物浓度1:20(g/mL),温度50℃、pH6.0、加酶量3200U/g、时间6h。

酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白工艺条件的研究

研究了酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白的工艺条件。根据5种蛋白酶水解液中羟脯氨酸(HYP)的含量,确定了胰蛋白酶和木瓜蛋白酶这2种提取率高的酶为水解用酶,采用L16(45)正交试验确定了这2种酶水解鱿鱼皮以制备胶原蛋白的最佳酶解条件。结果表明,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶水解鱿鱼皮以制备胶原蛋白的最佳温度、加酶量、底物浓度、pH、时间分别为55℃、1200U.g-1、1:20、pH8.0、4h和50℃、3200U.g-1、1:20、pH6.0、6h。2种蛋白酶提取的胶原蛋白含量分别为11.08%和11.36%,提取率分别为95.16%和97.56%。

鱿鱼皮胶原蛋白多肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响

目的研究不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽SP1(Mr>10000u)、SP2(6000u<Mr<10000u)、SP3(2000u<Mr<6000u)对小鼠B16黑素瘤细胞黑素含量、酪氨酸酶活性及酪氨酸酶基因表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖活性,NaOH裂解法测定黑素含量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶mRNA表达。结果不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽均能明显降低B16黑素瘤细胞黑素含量(P<0.05,P<0.01),抑制酪氨酸酶活性(P<0.01),并下调酪氨酸酶mRNA表达(P<0.05,P<0.01),且剂量效应关系明显。结论不同分子量鱿鱼皮胶原蛋白多肽均具有明显抑制B16黑素瘤细胞黑素合成的作用,其中SP2的抑制效果较SP1、SP3明显(P<0.05)。

鱿鱼皮胶原蛋白提取前处理的条件优化

试验测定了鱿鱼皮的基本组成成分,探索了酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白时前处理的最佳条件。选定了4个因素3,个水平,采用L9(34)正交试验确定了最佳条件。结果表明4,个因素NaOH浓度,NaOH作用时间、异丙醇浓度、活性炭浓度的最佳选择分别为0.15 mol/l、6 h、12%、0.8%,此时提取的胶原蛋白含量为11.08%,提取率为93.6%。

鱿鱼皮酶促水解液Maillard反应合成肉类香味料的研究

研究以鱿鱼皮酶水解液为基料结合其它前体物质进行Maillard反应,产生肉类香味料。研究结果表明,在经胰蛋白酶水解(水解度为20%)后的水解液中添加0.5%L-半胱氨酸盐酸盐、3%食盐、0 5VB1、(1 875%葡萄糖、0.5%Vc等物质后于120℃、80min、pH6.0条件下可产生理想的肉类香味料。

鱿鱼皮酶促水解液Maillard反应合成肉类香味料的研究

研究以鱿鱼皮酶水解液为基料结合其它前体物质进行Maillard反应 ,产生肉类香味料。研究结果表明 ,在经胰蛋白酶水解 (水解度为 2 0 % )后的水解液中添加 0 .5 %L -半胱氨酸盐酸盐、3%食盐、0 .5 %VB1、1.875 %葡萄糖、0 .5 %Vc等物质后于 12 0℃、80min、pH6 .

利用鱿鱼下脚料生产鱿鱼粉的工艺研究

利用鱿鱼皮和鱿鱼内脏两种鱿鱼下脚料生产鱿鱼粉。经实验确定了酶解最佳工艺为:鱿鱼皮酶解添加风味蛋白酶1‰、复合蛋白酶1‰,酶解时间为3.5 h;鱿鱼内脏酶解添加风味蛋白酶1‰、复合蛋白酶1‰,酶解时间为4.5 h。美拉德反应最佳工艺为:鱿鱼皮酶解液添加量20%、木糖添加量0.6%、鱿鱼内脏酶解液添加量25%、美拉德反应温度110℃、反应时间40 min。喷雾干燥工艺中变性淀粉的最佳添加量为3%。按照上述工艺制作的鱿鱼粉香气浓郁,风味纯正,颜色自然浓郁,颗粒细腻,流动性强,水溶性好,可以广泛用于膨化食品、方便食品、香精香料中,对鱿鱼资源的再利用和提高附加值有重要意义。

响应面法优化鱿鱼(Ommastrephes bartrami)皮胶原蛋白提取液脱色工艺

采用活性炭吸附法脱除鱿鱼(Ommastrephes bartrami)皮胶原蛋白提取液中色素,优化脱色条件,以进一步利用鱿鱼皮胶原蛋白。在确定该色素特征吸收波长为420 nm条件下,分别研究了活性炭添加量、脱色时间、溶液p H值和脱色温度对鱿鱼皮胶原蛋白液色素脱除效果影响。在单因素实验基础上,选择脱色时间30 min,进行活性炭添加量、溶液p H值、脱色温度三因素三水平BoxBehnken中心组合响应面分析试验。结果表明,活性炭吸附鱿鱼皮胶原蛋白液色素最佳条件为活性炭添加量4.2%,溶液p H值2.27,脱色温度35°C,该条件下鱿鱼皮胶原蛋白液的脱色率为45.6%,蛋白质和氨基酸损耗率分别为19.65%和22.93%。脱色后鱿鱼皮胶原蛋白的甘氨酸含量最高(136.02 mg/g,相对含量23.05%),谷氨酸、精氨酸和脯氨酸含量也较高,而半胱氨酸和蛋氨酸总量不到1%,符合水产蛋白氨基酸和I型胶原蛋白氨基酸特点。