Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对膀胱尿路上皮癌T24细胞钙黏附蛋白E表达的影响

【目的】探讨Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对膀胱移行细胞癌T24细胞Src蛋白下游信号钙黏附蛋白E（E-Cadherin）的作用。【方法】应用半定量RT—PCR法检测0μmol／L、0．2μmol／L、1．0μmol／L、5．0μmol／L Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后的人膀胱癌T24细胞各浓度组的E—Cadherin表达情况。【结果】Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后，E-Cadherin表达呈上调趋势；人膀胱癌T24细胞E-Cadherin mRNA表达水平随加入Src Kinase Inhibitor Ⅱ浓度增加呈上调趋势，0．2μmol／L、1．0μmol／L、5．0μmol／L浓度组OD比值显著高于0μmol／L浓度组，组间比较差异均具有统计学意义（P〈0．05）。【结论】Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对C-Src蛋白下游信号E-Cadberin具有上调作用，进一步证实了c-Src蛋白及其下游信号E-Cadherin作为膀胱移行细胞癌分子靶向治疗的可能性。

Src激酶抑制剂-1对人软骨肉瘤细胞生物学行为的影响

目的探讨Src激酶抑制剂-1对人软骨肉瘤SW1353细胞生长、凋亡和迁移等生物学行为的影响及其机制。方法体外培养人软骨肉瘤SW1353细胞,分为对照组和实验组,分别采用MTT法、流式细胞术和细胞迁移实验观察Src激酶抑制剂-1对人软骨肉瘤SW1353细胞生长、凋亡和迁移等生物学行为的影响,并通过Western-blot检测Src激酶抑制剂-1作用后Src及下游信号通路蛋白的影响。结果 0.5、1、5、10μmol/L的Src激酶抑制剂-1均能明显抑制SW1353细胞的增殖(P<0.01);1、5、10μmol/L的Src激酶抑制剂-1均能明显促进SW1353细胞的凋亡(P<0.01);Src激酶抑制剂-1能明显限制SW1353细胞的迁移;Src激酶抑制剂-1能明显抑制SW1353细胞Src(Tyr416)及下游信号ERK1/2、Akt和FAK(Y397)的磷酸化。结论 Src激酶抑制剂-1具有抑制人软骨肉瘤SW1353细胞生长和迁移的能力,可能对软骨肉瘤具有一定的治疗效果,这是通过直接抑制Src酪氨酸激酶的活性,进而抑制其下游信号通路的激活来实现的。

牛精子蛋白激酶C抑制剂逆转KB/VCR的作用及其机理

目的 :研究牛精子蛋白激酶C抑制剂 (PKCI)对肿瘤细胞多药耐药性的逆转作用及机理。方法 :选用KB细胞及其耐长春新碱的耐药株 (KB VCR)测定其蛋白激酶C活性及PKCI的影响 ,用MTT法测药敏 ,用流式细胞仪测定细胞对罗丹明 1 2 3的蓄积及外排。结果 :耐药细胞细胞膜的蛋白激酶C活性是亲本细胞的 2 9倍 ,耐药性是亲本细胞的 1 72倍。经PKCI作用后 ,罗丹明 1 2 3的蓄积量增加了 6 8倍 ,外排明显延缓 ,外排后潴留增加了 4 3倍 ,耐药性被逆转了 1 0倍。PKCI对亲本株的蛋白激酶C活性和耐药性影响不大。结论 :PKCI可明显地逆转耐药细胞的多药耐药性 。

视网膜新生血管中受体酪氨酸激酶及其抑制剂的开发利用

目的:视网膜血管性疾病的发生是多生长因子相互作用的结果,细胞内的酪氨酸激酶级联反应可调控基因表达、调节细胞的有丝分裂和增殖分化。为此本文就视网膜血管性疾病与受体酪氨酸激酶进行综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED 1997-01/2006-05期间的相关文章,检索词为“retina,neovascularization,growthfactor,receptor,inhibitor,receptor tyrosine kinase”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库2000-01/2006-05期间的相关文章,检索词为“视网膜,新生血管,受体酪氨酸激酶,信号传导,生长因子,抑制剂”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与视网膜血管性疾病或受体酪氨酸激酶相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到198篇相关文献,31篇文献符合纳入标准,排除的167篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的31篇文献中,2篇涉及视网膜新生血管与酪氨酸激酶的相关性,2篇涉及酪氨酸激酶信号传导途径,15篇涉及视网膜血管性疾病中生长因子及其受体的表达,14篇涉及视网膜新生血管与生长因子间的相互作用及酪氨酸激酶抑制剂的研究。资料综合:在视网膜血管性疾病中,视网膜中表达多种血管生长因子及酪氨酸激酶受体,通过细胞内的受体酪氨酸激酶的信号传导途径,调控基因表达、调节细胞的有丝分裂和增殖分化,从而参与视网膜新生血管的生成。从阻断多种生长因子的酪氨酸激酶信号传导途径着手,开发了一系列酪氨酸激酶抑制剂。结论:对受体酪氨酸激酶信号传导机制的深入研究及开发利用受体酪氨酸激酶抑制剂,将为视网膜新生血管疾病的治疗提供一种新的、安全、有效的途径。

p38MAPK抑制剂SB203580抑制人绒癌JAR细胞的体外侵袭作用

目的 研究 p38MAPK通路在人绒癌 JAR细胞体外侵袭中的作用。方法 用细胞 EL ISA法测定 JAR细胞中 p38MAPK的活性变化 ;用 Transwell细胞侵入系统检测细胞的侵袭作用。结果 PMA呈浓度依赖性地激活 JAR细胞中 p38MAPK。 PMA能促进人绒癌 JAR细胞的体外侵袭作用 ,而 p38特异性抑制剂 SB2 0 35 80抑制了JAR细胞的侵袭能力。结论 p38MAPK通路在人滋养细胞的侵袭行为以及人绒癌的形成中具有重要作用。p38抑制剂可能会为人绒癌的防治提供新的途径。

氯氧喹通过下调Rho/Rho激酶信号通路抑制乳腺癌细胞转移

目的:通过观察氯氧喹对乳腺癌细胞系细胞骨架的聚合状态及其对Rho/Rho激酶信号通路相关靶点蛋白磷酸化的作用,明确氯氧喹治疗乳腺癌的作用机制。方法:以不同浓度氯氧喹处理乳腺癌Bcap37和MDA-MB--453细胞系,划痕试验检测细胞迁移,Transwell试验检测细胞侵袭,罗丹明标记鬼笔环肽染色法观察F肌动蛋白的聚解状态,免疫荧光法观察α微管蛋白的表达,蛋白质印迹法检测Rho/Rho激酶信号通路关键蛋白磷酸化水平。结果:氯氧喹可剂量依赖性地抑制细胞迁移和侵袭;Bcap37和MDA-MB-453细胞经氯氧喹处理后其细胞形态发生改变,细胞体积减少;F肌动蛋白和α微管蛋白染色形态不规则,荧光染色聚集成团,且呈现剂量依赖性;氯氧喹可下调Rho/Rho激酶信号通路中肌动蛋白解聚因子Cofilin、磷酸化蛋白激酶(Limk)、Rho关联卷曲蛋白激酶2(Rock2)磷酸化表达(均P<0.01)。结论:氯氧喹可抑制乳腺癌细胞骨架聚合从而抑制细胞迁移,该作用可能与抑制Rho/Rho激酶信号通路相关。

ER+乳腺癌中CDK4/6抑制剂疗效预测生物标志物的研究进展

细胞周期失调是肿瘤的基本特征。目前,新型细胞周期依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6)高度选择性抑制剂已被FDA批准联合内分泌治疗用于雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性、人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阴性乳腺癌患者的治疗。随着CDK4/6抑制剂应用的推广,研究者发现其并非对所有ER+乳腺癌患者有效,缺乏可靠的生物标志物以预测疗效或筛选患者群体是限制其临床应用的主要挑战。随着二代测序技术的进步,通过组学信息预测治疗策略的敏感性和实现个体化治疗对减轻患者负担和提高治疗效率具有重要意义。本文回顾近期对CDK4/6抑制剂生物标志物的研究,旨在为今后的深入研究提供思路,也为CDK4/6抑制剂的临床应用提供参考。

Src酪氨酸激酶抑制剂dasatinib对人食管鳞癌细胞KYSE180生长及凋亡的影响

目的:探讨Src酪氨酸激酶抑制剂dasatinib对人食管鳞癌细胞生长和凋亡的影响及其相关机制。方法:采用蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞株KYSE180、EC109、KYSE30和人永生化食管上皮细胞株SHEE中总Src和磷酸化Src激酶的表达。用不同剂量的Src酪氨酸激酶抑制剂dasatinib作用KYSE180细胞后,分别采用MTT法、FCM法、蛋白质印迹法和裸鼠皮下移植瘤实验观察dasatinib对KYSE180细胞Src激酶的抑制作用,以及对细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和裸鼠皮下移植瘤的影响。结果:KYSE180、EC109和KYSE30细胞中Src激酶显著活化,而在SHEE细胞中未见活化Src激酶。Dasatinib可显著抑制KYSE180细胞增殖,阻碍细胞G1/S期转换,促进细胞凋亡,并上调caspase3、cytochrome C和Bax等凋亡相关蛋白的表达。另外,dasatinib可显著抑制裸鼠皮下KYSE180细胞移植瘤的生长。结论:Dasatinib可通过抑制食管鳞癌细胞增殖、促进细胞凋亡以及影响细胞周期等机制,抑制食管鳞癌细胞皮下移植瘤的生长,因此其可望成为治疗食管鳞癌的一个有效药物。

3种MAPK抑制因子对HepG2细胞中Smad2/3磷酸化的影响

目的研究3种MAPK抑制因子对TGF-β1活化的HepG2细胞中Smad2/3磷酸化的影响。方法采用MTT方法检测TGF-β1(9pmol)与HepG2共培养0·5、1、2、4、8、16h后,HepG2细胞增殖,TGF-β1(9pmol,0·5h)诱导HepG2细胞活化,在细胞活化前2h分别加入p38、ERK及JNK抑制因子(PD163169、SP600125、PD98059)与HepG2细胞共培养,Westernblot方法检测3种抑制因子对HepG2细胞内Smad2和Smad3磷酸化的影响。结果TGF-β1(9pmol)作用0·5、1h时无明显促进HepG2细胞增殖作用,但作用2、4、8、16h均明显促进HepG2细胞增殖。TGF-β1(9pmol,0·5h)均可诱导Smad2C、Smad2L、Smad3L磷酸化;JNK抑制因子(3、10μmol)与p38抑制因子(1、3、10μmol)可明显抑制Smad2C、Smad3L磷酸化,ERK抑制因子(1、3、10μmol)对Smad2/3磷酸化无明显影响。结论在HepG2细胞中,TGF-β1可能通过JNK、p38途径促进Smad2/3磷酸化。

PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)双靶向抑制剂PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,裸鼠成瘤后随机分为3组,每组10只,分别为PP242组(PP242灌胃10 mg/kg,1天1次)、雷帕霉素组(雷帕霉素灌胃1 mg/kg,1天1次)和对照组(生理盐水灌胃10 m L/kg,1天1次),用药2周,期间测量裸鼠移植瘤的体积变化。给药结束后,切取肿瘤组织采用TUNEL法检测肿瘤组织凋亡情况,Western blot检测肿瘤组织中VEGF的表达。结果给药结束后,PP242组的移植瘤体积为(893.01±31.22)mm3,雷帕霉素组为(1 519.01±32.61)mm3,对照组为(2 341.98±23.07)mm3,3组间差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL结果表明,PP242组的肿瘤组织细胞凋亡率高于雷帕霉素组,雷帕霉素组细胞凋亡率高于对照组(均P<0.05)。Western blot结果表明,PP242组肿瘤组织的VEGF表达低于雷帕霉素组,而雷帕霉素组低于对照组(P<0.05)。结论 m TORC1/C2复合体双靶向抑制剂PP242对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并可有效降低肿瘤组织中VEGF的表达,其作用强于m TORC1抑制剂雷帕霉素。

低剂量阿帕替尼联合XD化疗方案治疗晚期乳腺癌患者临床研究

目的探究低剂量阿帕替尼联合XD化疗方案(多西他赛+卡培他滨)对晚期乳腺癌患者的疗效。方法选取该院2014年10月至2017年9月收治的晚期乳腺癌患者62例,依据治疗方式不同分为对照组和研究组,各31例。对照组患者采取XD化疗方案治疗,研究组患者采取低剂量阿帕替尼联合XD化疗方案治疗。统计比较2组疗效、不良反应发生情况,对比2组治疗前后生活质量(FACT-B)评分。结果研究组患者总缓解率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),研究组患者不良反应总发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组患者治疗后FACT-B评分较对照组高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论晚期乳腺癌患者采取低剂量阿帕替尼联合XD化疗方案治疗,效果确切,能有效提升其生活质量,且具有安全性。

Rho激酶抑制剂对实验性变态反应性神经炎发病的影响

目的观察ROK抑制剂对EAN发病的影响。方法54只Lewis大鼠随机分为EAN模型组、EAN＋ROK抑制剂干预组和完全弗氏佐剂对照组（CFA）组。观察各组大鼠体重变化、发病率、开始发病时间、最高临床评分和组织病理学改变。结果EAN组大鼠在抗原免疫后第17天达到发病高峰；EAN＋ROK抑制剂组大鼠与EAN组相比，有体重增加、发病率降低、开始发病时间延迟的趋势，其平均最高临床评分明显降低（P〈0．01），坐骨神经炎性细胞浸润和脱髓鞘减轻，CFA组大鼠无症状。结论ROK抑制剂可以减轻EAN发病程度，抑制Rho／ROK信号通路可能是其作用机制之一。

转移性肾癌靶向治疗研究新进展

肾细胞癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，居泌尿系统肿瘤的第2位，其发生率以每年2％～3％的频率增加[1]。

分子靶向抗肿瘤药物的毒性研究进展

目的：药物治疗是肿瘤治疗的重要手段，传统的化疗药物疗效欠佳、副作用大，因此以酪氨酸激酶抑制剂为代表的分子靶向抗肿瘤药物得到大力发展。分子靶向抗肿瘤药物具有靶向性强、疗效显著等特点，但在临床应用的过程中会对心、肝、肺等重要脏器造成不同程度的损伤以及引发手足综合征等不良反应，极大地限制其在临床的应用和发展。因此，分析分子靶向抗肿瘤药物的毒性反应临床现状，研究其作用机制及保护干预措施已成为药物毒理学研究的重要任务。

PP2可增强乳腺癌Hs578T细胞缝隙连接功能

目的：探讨Src激酶抑制剂PP2对乳腺癌细胞Hs578T缝隙连接功能的影响.方法：MTT法检测PP2对乳腺癌细胞生长的影响;细胞接种荧光示踪法观察PP2对乳腺癌细胞之间荧光传递功能的影响;Westem blot法检测PP2对乳腺癌细胞Sre激酶表达的影响.结果：1～8μmol/L浓度的PP2对乳腺癌细胞生长几乎无影响;细胞接种荧光示踪结果显示,1～8μmol/L的PP2能显著增强细胞荧光传递功能（P＜0.01）,8μmol/L的PP2作用6、12和24 h后细胞荧光传递功能亦明显增强（P＜ 0.01）;Western blot结果显示,PP2（1～8 μmoL/L）可显著降低Src激酶表达（P＜0.05 ～0.01）,8μmol/L PP2作用6、12和24 h后Src激酶的表达亦明显降低（P＜0.01）.结论：PP2能增强乳腺癌细胞Hs578T的缝隙连接功能,这种增强作用可能与其降低Src激酶表达有关.

预后营养指数对接受靶向治疗的晚期肺腺癌患者的预后评估研究

目的探讨预后营养指数(prognostic nutritional index,PNI)对接受靶向治疗的晚期肺腺癌患者的预后意义。方法回顾性分析77例接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)治疗的晚期肺腺癌患者的临床资料,计算PNI值,采用Kaplan-Meier生存曲线和Cox比例风险回归模型分析不同PNI水平对晚期肺腺癌预后的影响。结果全组患者PNI值为(46.17±8.83)。低PNI组(PNI<46.17)39例(50.6%),高PNI组(PNI≥46.17)38例(49.4%)。两组在患者的年龄、PS评分和吸烟状况方面比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。高PNI组疾病控制率(disease control rate,DCR)为82.6%(31/38),与低PNI组的64.1%(25/39)比较,差异无统计学意义(P=0.085)。两组中位OS分别为25.7个月(95%CI:21.5~29.1)和19.1个月(95%CI:16.7~22.9),差异具有统计学意义(P=0.011)。Cox多因素分析显示,PNI值和PS评分为影响晚期肺腺癌靶向治疗预后的独立因素(均P<0.05)。结论治疗前PNI水平可作为晚期肺腺癌靶向治疗的一项预后评估指标。

厄洛替尼治疗NSCLC致急性间质性肺疾病的临床分析

报道1例厄洛替尼治疗非小细胞肺癌导致急性间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD),并通过文献检索收集到24例病例报道。在这24例病例中,急性间质性肺疾病发生于服用厄洛替尼后的5天-1年,75.0%(18/24)的病例在服药后5-39天出现ILD。ILD的危险因素包括高龄、男性、吸烟史、基础肺疾病史、放化疗史。11例死于呼吸衰竭,合并高危因素的患者死亡率更是高达50%。

非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药机制研究进展

晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的一线治疗正由传统的化疗向分子靶向治疗发展。根据肿瘤组织癌变驱动基因的改变,选择相应的靶向药物已成为晚期NSCLC一线治疗的发展方向。

阿法替尼在NSCLC治疗中的研究进展

全球每年有100万例死于肺癌,在癌症相关病死率中居于首位。肺癌中约85%为非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer,NSCLC）,其中80%的患者在确诊时已属晚期（Ⅲb或Ⅳ期）。自2004年表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor,EGFR）突变发现以来,酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）的快速发展彻底改变NSCLC患者的治疗模式。

MK-2206联合顺铂对乳腺癌4T1/DDP移植瘤耐药性的影响

目的探讨蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)抑制剂MK-2206联合顺铂对三阴性乳腺癌4T1顺铂耐药(4T1/cisplatin,4T1/DDP)移植瘤耐药性的影响。方法采用顺铂(cisplatin,DDP)低剂量诱导及体内外交叉致瘤相结合的方法建立三阴性乳腺癌4T1/DDP耐药小鼠移植瘤模型,给予DDP腹腔注射(0.3 g/L,1次/d)单独或联合MK-2206灌胃(12 g/L,1次/周)治疗。给药28 d后处死小鼠,小动物成像检测观察肿瘤生长情况;Western blot法检测肿瘤组织中磷酸化Akt(phosphorate-Akt,p-Akt)和总Akt(total-Akt,t-Akt)蛋白水平变化;免疫组织化学法分析耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)、基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinase 7,MMP7)表达差异。结果建立的三阴性乳腺癌耐药小鼠模型达中等耐药程度。建立非耐药小鼠与耐药小鼠肿瘤组织生长速度未见明显区别(P>0.05)。分别给予这两种模型小鼠相同剂量(0.3 g/L)的DDP治疗后,耐药小鼠对DDP的敏感性低于非耐药小鼠(P<0.01)。将MK-2206(12 g/L)与DDP(0.3 g/L)联合应用后小鼠肿瘤较单独应用DDP缩小,且可降低P-gp、BCRP、MMP7蛋白的表达(均P<0.05),并降低Akt蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论 MK-2206联合顺铂能够逆转4T1/DDP移植瘤耐药性,且与抑制Akt蛋白磷酸化相关。