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srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析
被引量:
1
1
作者
罗寿青
郑德先
+3 位作者
刘彦信
李董
饶青
吴克复
《中国生物化学与分子生物学报》
CSCD
2000年第4期443-447,共5页
从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9...
从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9.经过 2轮筛选 ,获得了纯化的重组病毒 ,再用重组病毒感染昆虫细胞 ,Western印迹检测证明 srh M- CSFR得到了表达 ,它是分泌到上清液中的糖基化蛋白 .Western印迹分析了不同时间点的 srh M- CSFR表达情况 ,结果表明 srh M- CSFR的表达在 96~ 1 2 0 h时达到最大 .srh M- CSFR的产量约为 1 mg/L,EIA法进行配基结合活性分析表明 ,srh M- CSFR与 M- CSF结合的解离常数为 5nmol/L.
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关键词
srhm-csfr
杆状病毒表达系统
配基
综合活性
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职称材料
题名
srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析
被引量:
1
1
作者
罗寿青
郑德先
刘彦信
李董
饶青
吴克复
机构
中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室
中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CSCD
2000年第4期443-447,共5页
基金
863高科技项目资助! ( 12 0 110 10 3 )
文摘
从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9.经过 2轮筛选 ,获得了纯化的重组病毒 ,再用重组病毒感染昆虫细胞 ,Western印迹检测证明 srh M- CSFR得到了表达 ,它是分泌到上清液中的糖基化蛋白 .Western印迹分析了不同时间点的 srh M- CSFR表达情况 ,结果表明 srh M- CSFR的表达在 96~ 1 2 0 h时达到最大 .srh M- CSFR的产量约为 1 mg/L,EIA法进行配基结合活性分析表明 ,srh M- CSFR与 M- CSF结合的解离常数为 5nmol/L.
关键词
srhm-csfr
杆状病毒表达系统
配基
综合活性
Keywords
srhM CSFR
EIA
Binding activity
Baculovirus
Insect cells
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析
罗寿青
郑德先
刘彦信
李董
饶青
吴克复
《中国生物化学与分子生物学报》
CSCD
2000
1
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职称材料
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参考文献
引证文献
统计分析
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