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Effect of high temperature on the expressions of genes encoding starch synthesis enzymes in developing rice endosperms 被引量:7
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作者 CAO Zhen-zhen PAN Gang +5 位作者 WANG Fu-biao WEI Ke-su LI Zhao-wei SHI Chun-hai GENG Wei CHENG Fang-min 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期642-659,共18页
High temperature is the major environmental factor affecting grain starch properties of cooking rice cultivars. In this study, two non-waxy indica rice genotypes, cv. 9311 and its mutant with extremely high amylose ph... High temperature is the major environmental factor affecting grain starch properties of cooking rice cultivars. In this study, two non-waxy indica rice genotypes, cv. 9311 and its mutant with extremely high amylose phenotype(9311eha) were used to study the differential expressions of genes in starch synthesis and their responses to high temperature(HT). Significant increase in apparent amylose content and hot-water-soluble starch content in mutant 9311 eha were genetically caused by a substitution from AGTTATA to AGGTATA at the leader intron 5′ splice site in Wx gene. This mutation resulted in different m RNA transcript levels, m RNA splicing efficiencies and protein levels of Wx between the two rice genotypes, which also lead to the genotype-dependent alteration in the temporal pattern of Wx transcription and granule-bound starch synthase(GBSS) activity in response to HT. However, changes in the activities of other starch synthesizing enzymes and their expressions of distinct isoform genes were not significant with the Wx gene mutation, thus only minor difference in the particle size of starch granule, chain-length distribution and gelatinization enthalpy were found between the two genotypes. The temporal-specific expression of multiple isoform genes responsive to different temperature regiments indicated that the reduction of GBSS transcript expression under HT was generally accompanied by the decreased expressions of SSSIIa, SSSIIIa and SBEIIb. Consequently, high temperature-ripened grains in 9311 eha showed high proportion of intermediate and long B chains and somewhat lower level of short A chain compared to the wildtype. The temperature-dependent alteration of amylose content was not only attributed to the reduced expression of GBSS, but also associated with the complimentary effect of SSSIIa and SBEIIb. 展开更多
关键词 rice starch synthesis gene expression amylopectin strucrute high temperature
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Temperature Stress at Grain Filling Stage Mediates Expression of Three Isoform Genes Encoding Starch Branching Enzymes in Rice Endosperm 被引量:3
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作者 WEI Ke-su CHENG Fang-min ZHANG Qi-fang Liu Kui-gang 《Rice science》 SCIE 2009年第3期187-193,共7页
An early-maturity indica rice variety Zhefu 49, whose grain quality and starch structure are sensitive to environmental temperature, was subjected to different temperatures (32℃ for high temperature and 22℃ for opt... An early-maturity indica rice variety Zhefu 49, whose grain quality and starch structure are sensitive to environmental temperature, was subjected to different temperatures (32℃ for high temperature and 22℃ for optimum temperature) at the grain filling stage in plant growth chambers, and the different expressions of three isoform genes (SBEI, SBEIII and SBE/V) encoding starch branching enzyme (SBE) in the endosperms were studied by the real-time fluorescence quantitative PCR (FQ-PCR) method. Effects of high temperature on the SBE expression in developing rice endosperrns were isoform-dependent. High temperature significantly down-regulated the expressions of SBEI and SBEIII, while up-regulated the expression of SBEIV. Compared with SBEIV and SBEIII, the expression of SBEI gene in Zhefu 49 rice endosperms was more sensitive to temperature variation at the grain filling stage. This study indicates that changes in weather/climate conditions especially temperature stress influence rice grain formation and its quality as evidenced by isoform expression. 展开更多
关键词 RICE high temperature starch branching enzyme ISOFORM gene expression real-time fluorescence quantitative PCR rice quality
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Diurnal Changes in the Transcription Profiles of Genes Encoding Starch Synthesis-related Enzymes in Wheat Grains under Field Conditions
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作者 Lina WANG Qiaoxia HAN +2 位作者 Xianghong XIAO Tiancai GUO Guozhang KANG 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第4期565-569,574,共6页
[Objective] During the filling stage of plant growth and development, storage starch is diurnally synthesized and accumulated in the grains from cereal crops, but the underlying molecular mechanism is unclear. [Method... [Objective] During the filling stage of plant growth and development, storage starch is diurnally synthesized and accumulated in the grains from cereal crops, but the underlying molecular mechanism is unclear. [Method] In this study, grains from the bread wheat cultivar Zhoumai 18 grown in fields were harvested at 15 d after anthesis, and quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction(qPCR) was used to measure the transcriptional levels of 26 genes encoding starch synthesis-related enzymes at 2 h intervals throughout a diurnal cycle. [Result] Our findings indicated that storage starch was persistently synthesized in wheat grains throughout a 24 h period. The diurnal patterns of the transcriptional levels of 26 genes in wheat grains were classified into two groups. The 13 genes in Group 1 were temporally and highly expressed in wheat grains,and their encoded proteins could play crucial roles in starch synthesis. The other 13 genes in Group 2 were characterized by low or no transcription in wheat grains throughout a diurnal cycle, suggesting their function in the synthesis or degradation of transitory starches in wheat grains. [Conclusion] These results provide information on the molecular mechanism of storage starch synthesis in higher plants. 展开更多
关键词 Diurnal change gene expression starch synthesis Transcriptional level Triticum aestivum L.
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Expression Regulation of Starch and Storage Protein Synthesis Related Genes in Rice Grains
4
作者 Bo PENG Dongyan KONG +18 位作者 Yu PENG Lulu HE Yue JIANG Jingbo YU Mengshi SUN Qin DAI Yuchen LIU Qingqing XIN Ruihua PANG Yanfang SUN Xiaohua SONG Huilong LI Juan PENG Qiying ZHOU Jintao LI Quanxiu WANG Bin DUAN Shizhi SONG Hongyu YUAN 《Asian Agricultural Research》 2019年第1期47-53,共7页
Starch and the storage proteins are the main nutritious substances in crop grains,and their composition and content in grains play a decisive role in the grain quality of rice and other staple food crops.This review h... Starch and the storage proteins are the main nutritious substances in crop grains,and their composition and content in grains play a decisive role in the grain quality of rice and other staple food crops.This review has mainly summarized the new advances in the expression regulation of starch and storage protein synthesis related genes in rice grains.Moreover,the challenges of the starch and storage protein synthesis substances in rice genetic improvement were also discussed.This review will provide important information for genetic improvement of grain quality in rice and,potentially,other staple cereals. 展开更多
关键词 RICE starch Storage PROTEIN synthesis gene expression REGULATION
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山药块茎膨大期淀粉积累及淀粉合成相关基因表达分析 被引量:3
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作者 索宁宁 张艳芳 +4 位作者 高圆丽 赵令敏 葛明然 刘杰才 霍秀文 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2023年第3期69-76,共8页
为探讨山药块茎膨大期淀粉的积累机制,以大和长芋山药为试验材料,测定了块茎膨大期各类淀粉含量、淀粉合成关键酶活性以及淀粉合成相关基因的表达水平。结果表明,山药块茎膨大期总淀粉、直链淀粉及支链淀粉的积累呈先增加后降低的趋势,... 为探讨山药块茎膨大期淀粉的积累机制,以大和长芋山药为试验材料,测定了块茎膨大期各类淀粉含量、淀粉合成关键酶活性以及淀粉合成相关基因的表达水平。结果表明,山药块茎膨大期总淀粉、直链淀粉及支链淀粉的积累呈先增加后降低的趋势,种植后150 d支链淀粉占总淀粉含量的88.35%,总淀粉含量的增加主要是支链淀粉的积累;ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、淀粉分支酶(SBE)与支链淀粉的积累呈极显著正相关,是直接参与支链淀粉积累的重要功能酶。AGPase、SSⅡ、SSⅢ、SBEⅡ基因的表达量与支链淀粉含量呈极显著正相关,是支链淀粉积累的关键因素。SBE对淀粉积累表现为直接正效应,AGPase和束缚态淀粉合成酶(GBSS)在直链淀粉积累中体现为直接正效应。这些研究对揭示山药块茎淀粉合成的分子机制具有重要意义。 展开更多
关键词 山药块茎 淀粉积累 淀粉合成关键酶 基因表达
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土壤水分胁迫对马铃薯块茎淀粉合成关键酶基因表达及酶活性的影响
6
作者 潘念 苏旺 +1 位作者 周云 王舰 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2023年第2期78-85,共8页
为探讨马铃薯块茎淀粉合成对土壤水分胁迫的响应机制,以马铃薯品种‘青薯9号’和‘闽薯1号’为材料,采用盆栽试验,设置3个水分胁迫处理:正常供水(保持土壤田间持水量的75%)、中度水分胁迫(保持土壤田间持水量的50%)、重度水分胁迫(保持... 为探讨马铃薯块茎淀粉合成对土壤水分胁迫的响应机制,以马铃薯品种‘青薯9号’和‘闽薯1号’为材料,采用盆栽试验,设置3个水分胁迫处理:正常供水(保持土壤田间持水量的75%)、中度水分胁迫(保持土壤田间持水量的50%)、重度水分胁迫(保持土壤田间持水量的25%),研究了土壤水分胁迫对马铃薯块茎淀粉合成关键酶基因表达及酶活性的影响。结果表明:在块茎形成过程中,土壤水分胁迫显著提高了马铃薯块茎AGPase、GBSSI、SBEI、SBEII、SSII、SSIII基因表达量,随土壤水分胁迫程度的提高,马铃薯块茎SBEI、SBEII、SSII基因表达量上调;土壤水分胁迫显著降低了马铃薯块茎AGPase、GBSS、SBE、SSS酶活性,其中GBSS、SBE酶活性下调;而AGPase、GBSSI、SSIII基因表达量及AGPase、SSS酶活性在马铃薯青薯9号、闽薯1号品种间表现出相反的上、下调趋势。 展开更多
关键词 马铃薯块茎 土壤水分胁迫 淀粉合成关键酶 基因表达 酶活性
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马铃薯块茎淀粉合成相关基因在脱落酸和蔗糖诱导下的表达分析 被引量:1
7
作者 李晨晓 艾菊 +1 位作者 杨梅宏 高冬丽 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第3期361-367,共7页
【目的】在马铃薯块茎中确定能够促进淀粉合成基因表达的脱落酸(abscisic acid,ABA)和蔗糖处理体系。【方法】利用不同的溶液和条件,对马铃薯幼嫩块茎进行ABA、蔗糖和ABA+蔗糖处理;采用实时荧光定量PCR检测处理块茎中直链淀粉合成关键酶... 【目的】在马铃薯块茎中确定能够促进淀粉合成基因表达的脱落酸(abscisic acid,ABA)和蔗糖处理体系。【方法】利用不同的溶液和条件,对马铃薯幼嫩块茎进行ABA、蔗糖和ABA+蔗糖处理;采用实时荧光定量PCR检测处理块茎中直链淀粉合成关键酶(granule-bound starch synthaseⅠ,GBSSⅠ)基因、支链淀粉合成关键酶(starch branching enzymeⅢ,SBE3)基因和淀粉合成限速酶大亚基(ADP-glucose pyrophosphorylase large subunit 3,APL3)基因的表达,确定处理体系能否诱导基因表达;确定处理体系后,进一步检测其他9个淀粉合成基因的表达。【结果】实时荧光定量PCR检测表明:当处理溶液中包含氯化钙、琥珀酸钠和氯霉素等试剂,且马铃薯块茎置于处理溶液中28℃黑暗处理36 h时,与对照相比,ABA或蔗糖处理可明显升高GBSSⅠ和APL3的表达。对其他9个淀粉合成相关基因表达的检测结果显示:大部分合成基因正向响应ABA或蔗糖处理。【结论】本研究利用马铃薯块茎确定了能够促进淀粉合成基因表达的ABA和蔗糖处理体系,研究结果为进一步解析淀粉合成基因的转录调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 马铃薯 淀粉合成基因 脱落酸 蔗糖 表达
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不同类型玉米籽粒淀粉积累、相关酶活及基因表达差异分析 被引量:17
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作者 陈江 王燕 +7 位作者 黄斌全 胡玉峰 刘应红 顾勇 李炀平 张军杰 刘汉梅 黄玉碧 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期217-230,共14页
为探究不同类型玉米淀粉形成机理,对普通玉米、甜玉米、糯玉米淀粉积累、相关酶活及基因表达进行测定,分析不同类型玉米淀粉积累、相关酶活及基因表达之间的差异及相互关系。结果表明,不同类型玉米总淀粉和直链淀粉百分含量为:普通玉米&... 为探究不同类型玉米淀粉形成机理,对普通玉米、甜玉米、糯玉米淀粉积累、相关酶活及基因表达进行测定,分析不同类型玉米淀粉积累、相关酶活及基因表达之间的差异及相互关系。结果表明,不同类型玉米总淀粉和直链淀粉百分含量为:普通玉米>糯玉米>甜玉米,支链淀粉百分含量为:糯玉米>普通玉米>甜玉米,灌浆期间总淀粉和直链淀粉含量3个玉米类型间差异显著;灌浆期间,普通玉米各淀粉合成相关酶活性最高,甜玉米淀粉合成相关酶活性最低,糯玉米则介于普通玉米和甜玉米之间,但其GBSS酶活性很小。灌浆期间3个类型玉米除GBSS酶活性差异不显著外,其他淀粉合成相关酶活性差异显著;普通玉米淀粉合成相关基因表达量总体均高于甜玉米和糯玉米,甜玉米和糯玉米相关突变基因仍存在表达。表明不同类型玉米淀粉含量和组成上差异明显;普通玉米淀粉的形成需要淀粉合成相关酶相互作用,淀粉合成相关酶活性的缺失会改变淀粉组成;不同类型玉米淀粉合成相关基因表达差异显著,但都存在转录活性。对普通玉米进行相关性分析同时发现,淀粉的合成不仅受到转录调控,还受到转录后调控,淀粉的合成是淀粉合成各酶之间相互协调的结果。 展开更多
关键词 玉米 淀粉合成 淀粉 酶活 基因表达 差异
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氮肥对水稻胚乳淀粉品质、相关酶活性及基因表达量的影响 被引量:23
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作者 孙涛 同拉嘎 +4 位作者 赵书宇 王海微 韩云飞 张忠臣 金正勋 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期475-484,共10页
【目的】旨在为阐明灌浆成熟期氮素营养对水稻淀粉品质影响机理以及建立优质高产水稻栽培技术提供理论依据。【方法】选用4个籽粒直链淀粉含量差异显著的粳稻品种,通过盆栽试验研究氮素营养对稻米淀粉组分和蛋白质含量及稻米蛋白质水解... 【目的】旨在为阐明灌浆成熟期氮素营养对水稻淀粉品质影响机理以及建立优质高产水稻栽培技术提供理论依据。【方法】选用4个籽粒直链淀粉含量差异显著的粳稻品种,通过盆栽试验研究氮素营养对稻米淀粉组分和蛋白质含量及稻米蛋白质水解对淀粉黏滞特性的影响,并分析氮素营养对灌浆过程中籽粒蔗糖合酶(SuSy)、蔗糖磷酸合酶(SPS)、蔗糖酸性转化酶(AI)活性及OsGBSSⅠ、Os ISAⅠ、OsSBEⅠ、OsSBEⅡ基因转录表达量的影响。【结果】结果表明,籽粒支链淀粉含量对氮素营养很敏感,灌浆成熟期氮素营养能改变籽粒淀粉组分含量;施氮条件下,高直链淀粉含量品种蒸煮食味品质下降更加明显,去除稻米蛋白质可明显提高稻米黏滞特性,蛋白质对淀粉黏滞特性的影响很大;增加灌浆成熟期氮素营养能显著或极显著提高籽粒Su Sy和AI活性,显著抑制籽粒SPS活性;灌浆成熟期氮素营养能改变灌浆不同时期籽粒OsGBSSⅠ、OsISAⅠ和OsSBEⅡ基因转录表达量,以致灌浆过程中这些基因的转录表达量变化动态发生改变,但OsSBEⅠ基因转录表达量不因氮素营养而发生改变;受氮素营养的影响,灌浆起始期籽粒OsGBSSⅠ基因表达量明显上调,而灌浆中后期明显下调;氮素营养明显抑制灌浆成熟期籽粒OsI SAⅠ基因和灌浆中后期的OsS BEⅠ基因转录表达,显著提高灌浆前期和中期的籽粒OsSBEⅠ基因转录表达量;氮素营养能抑制灌浆起始期籽粒OsSBEⅡ基因的转录表达,而提高灌浆中后期的基因转录表达。【结论】灌浆成熟期氮素营养除了通过蛋白质含量对淀粉品质产生影响外,还通过调控淀粉合成相关的酶活性和基因表达量等生理环节对淀粉含量和精细结构起作用,最终改变稻米黏滞特性和食味品质。 展开更多
关键词 水稻 氮素营养 淀粉合成关键酶基因 转录表达量
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小麦籽粒胚乳淀粉合成酶基因表达及酶活性分析 被引量:14
10
作者 王自布 李卫华 +5 位作者 齐军仓 银永安 曹连莆 王泽民 侯睿睿 王亮 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1117-1123,共7页
为研究小麦籽粒淀粉合成酶基因表达与酶活性的特征,选用4个淀粉含量差异较大的普通六倍体小麦新春24、E28(高淀粉含量组)和宁春16、安农9912(低淀粉含量组)为试验材料,采用实时荧光定量RT-PCR,对灌浆期籽粒淀粉合成酶相关基因的表达进... 为研究小麦籽粒淀粉合成酶基因表达与酶活性的特征,选用4个淀粉含量差异较大的普通六倍体小麦新春24、E28(高淀粉含量组)和宁春16、安农9912(低淀粉含量组)为试验材料,采用实时荧光定量RT-PCR,对灌浆期籽粒淀粉合成酶相关基因的表达进行研究,并对其表达量与相应酶活性的相关性做了分析。结果表明,束缚态淀粉合成酶基因(GBSS)、可溶性淀粉合成酶基因(SSS)、淀粉分支酶基因(SBE)、淀粉去分支酶(DBE)基因均呈单峰曲线变化。利用实时荧光定量PCR技术检测9个基因在不同淀粉含量的4个供试品种花后不同时期的相对表达量,结果表明,花后6d这些基因开始表达,在灌浆的中期(花后12~18d不等)有表达的小高峰,但在不同时期,2个高淀粉含量的品种中各种酶活性及其酶基因的相对表达量均比2个低淀粉含量的品种相对较高;这些基因表达谱与酶活性相关分析显示,除GBSS外其他几种淀粉合成酶基因均与相应酶活性呈显著或极显著正相关,而且GBSS酶活性到达峰值时间稍迟于DBE、SSS、SBE等酶,说明DBE、SSS、SBE基因可能主要通过转录水平来控制籽粒淀粉的合成,而GBSS基因可能主要通过转录后水平来控制籽粒淀粉的合成。 展开更多
关键词 小麦 淀粉合成酶基因 实时荧光定量PCR 酶基因表达
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木薯淀粉合成相关酶基因的克隆及表达分析 被引量:8
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作者 许娟 罗兴录 赵德征 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期101-109,共9页
根据核苷酸同源性设计简并引物,克隆了一段大小为665 bp的木薯腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶小亚基基因(sAGP)片段,并根据已知序列设计特异引物,克隆分离得到GBSS基因和SBE基因的cDNA片段。半定量RT-PCR分析结果表明,在木薯不同生长时期,... 根据核苷酸同源性设计简并引物,克隆了一段大小为665 bp的木薯腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶小亚基基因(sAGP)片段,并根据已知序列设计特异引物,克隆分离得到GBSS基因和SBE基因的cDNA片段。半定量RT-PCR分析结果表明,在木薯不同生长时期,3种淀粉合成相关酶基因的时空表达规律不同,GBSS基因表达有时期特异性和组织特异性,只在块根形成期和块根成熟期表达,在组织部位茎中表达最多,并且在这3种基因中表达水平相对较低。而sAGP基因在这3种基因中表达水平最高,在木薯块根成熟期竟达超量表达水平,并且在华南124和辐选01中有品种差异,差异明显,在辐选01中的表达要优于华南124的表达。SBE基因表达较平稳,在各个时期表达水平都处于中间水平,在4个时期中,块根成熟期时的表达水平相对较高,块根形成期和苗期其次,收获期最低,也具有品种间差异,在辐选01中的表达要优于华南124的表达。 展开更多
关键词 木薯 淀粉合成相关酶基因 克隆 半定量RT-PCR 基因表达
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农杆菌介导的sbe2a基因RNAi载体对玉米遗传转化的研究 被引量:8
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作者 关淑艳 赵丽娜 +2 位作者 刘慧婧 刘广娜 王丕武 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期36-40,共5页
将淀粉分支酶基因sbe2a的RNAi表达载体转入玉米自交系H99和丹598胚性愈伤组织。探讨了不同菌浓度、不同侵染时间和不同的共培养时间对玉米转化率的影响,确定了最佳转化条件:菌液浓度OD600值为0.5~0.7,侵染时间为25min,共体培养时间为3... 将淀粉分支酶基因sbe2a的RNAi表达载体转入玉米自交系H99和丹598胚性愈伤组织。探讨了不同菌浓度、不同侵染时间和不同的共培养时间对玉米转化率的影响,确定了最佳转化条件:菌液浓度OD600值为0.5~0.7,侵染时间为25min,共体培养时间为3d。对转化的愈伤组织分化诱导出苗后进行PCR检测,获得了2株阳性植株,初步证明外源基因已经整合到玉米的基因组中。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 淀粉分支酶基因sbe2a RNAi表达载体 玉米
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高温胁迫下水稻胚乳淀粉分支酶各同工型基因的表达特征 被引量:8
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作者 韦克苏 程方民 +1 位作者 张其芳 刘奎刚 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-24,共6页
以稻米品质温度敏感型的早籼稻品种浙辐49为材料,利用人工气候箱控温处理试验和实时荧光定量PCR技术,探讨了水稻发育胚乳中淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE)的3种主要同工型基因(SBEⅠ、SBEⅢ和SBEⅣ)在不同温度处理下的相对表... 以稻米品质温度敏感型的早籼稻品种浙辐49为材料,利用人工气候箱控温处理试验和实时荧光定量PCR技术,探讨了水稻发育胚乳中淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE)的3种主要同工型基因(SBEⅠ、SBEⅢ和SBEⅣ)在不同温度处理下的相对表达量差异及动态变化特征。结果表明,高温处理对水稻胚乳中SBE基因的表达调控因其同工型的种类而异,SBEⅣ基因在高温处理下呈上调表达,而SBEⅠ和SBEⅢ基因在高温处理下的相对表达量则明显降低,表现为下调表达;与SBEⅣ等同工型相比,水稻胚乳中SBEⅠ基因对高温胁迫的表达响应相对更敏感。 展开更多
关键词 水稻 高温 淀粉分支酶 同工型 基因表达 实时定量聚合酶链式反应
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不同生育时期大豆异黄酮合成相关酶基因表达的分析 被引量:8
14
作者 王艳 武林 +4 位作者 孙梦阳 韩英鹏 赵雪 滕卫丽 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期887-893,共7页
通过Real-time PCR分析了不同生育时期7个大豆异黄酮合成相关酶基因(PAL,C4H,4CL,CHS,CHI,IFS和F3H)的相对表达情况。并利用高效液相色谱法测定了籽粒发育过程中豆荚(含籽粒)中异黄酮及其组分的含量,同时利用SAS 8.2分析了F5∶11重组自... 通过Real-time PCR分析了不同生育时期7个大豆异黄酮合成相关酶基因(PAL,C4H,4CL,CHS,CHI,IFS和F3H)的相对表达情况。并利用高效液相色谱法测定了籽粒发育过程中豆荚(含籽粒)中异黄酮及其组分的含量,同时利用SAS 8.2分析了F5∶11重组自交系群体(RILs)豆荚中异黄酮含量与部分基因相对表达量间的相关性。结果表明:从营养生长进入生殖生长阶段,部分基因(PAL,CHI,IFS和F3H)的相对表达量普遍有显著提高;PAL,C4H,CHS和IFS基因在叶片中的相对表达量高峰出现在R1期,大部分基因在2个品种豆荚中相对表达量差异显著的时期为R6期。在R6期,豆荚中PAL基因的相对表达量与染料木素(GT)和总异黄酮含量(TI)呈显著正相关。CHS基因的相对表达量与大豆黄素(DZ)、染料木素(GT)和总异黄酮含量(TI)呈显著正相关,但是与黄豆黄素(GC)呈显著负相关,IFS基因的相对表达量与大豆黄素(DZ)含量呈显著正相关;F3H基因的相对表达量与所有异黄酮成分均呈显著负相关。研究明确了相应基因的表达情况,对于理解异黄酮含量变异的遗传机制具有重要意义。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 异黄酮合成相关酶基因 REAL-TIME PCR 相对表达量
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不同糖及糖水平对松浦镜鲤养殖过程中糖代谢相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 李晋南 王常安 +3 位作者 王连生 赵志刚 罗亮 徐奇友 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期766-776,共11页
为探讨在养殖不同阶段,不同糖及糖水平对松浦镜鲤肝脏糖酵解酶(GK和HK)、糖异生酶(G6Pase和PEPCK)和糖代谢相关基因(IGF-Ⅰ和GHR)m RNA表达水平的影响,实验采用2×2双因素设计实验,选择淀粉和葡萄糖2种糖源,2个糖水平(25%和50%),共... 为探讨在养殖不同阶段,不同糖及糖水平对松浦镜鲤肝脏糖酵解酶(GK和HK)、糖异生酶(G6Pase和PEPCK)和糖代谢相关基因(IGF-Ⅰ和GHR)m RNA表达水平的影响,实验采用2×2双因素设计实验,选择淀粉和葡萄糖2种糖源,2个糖水平(25%和50%),共4个实验组,分别为低淀粉组(LS)、高淀粉组(HS)、低葡萄糖组(LG)和高葡萄糖组(HG)。选用初始体质量为(8.30±0.15)g的松浦镜鲤420尾,随机分为4组,每组3个重复,每个重复35尾鱼。实验周期为7周。结果显示,不同养殖阶段,HK基因和IGF-Ⅰ基因在不同实验组中的表达趋势基本一致,HK基因在养殖1周时表达量显著升高,之后开始降低,IGF-Ⅰ基因在养殖3周时表达量显著升高。在不同养殖阶段,GK、PEPCK、G6Pase和GHR基因的表达趋势受糖水平和糖种类的影响。在低糖水平下(LS组和LG组),这些基因表现了相同的变化趋势,GK和GHR基因在1周时表达量最高,之后开始下降;PEPCK基因在3周时表达量最高;G6Pase在1周时表达量升高,之后下降,在7周时表达量又有上升趋势。在高糖水平下,HS组的GK基因的表达量在各个养殖阶段差异不显著,而HG组的GK基因则在1周时表达量显著升高;HS组和HG组的PEPCK基因的表达量在各个养殖阶段差异不显著;HS组的G6Pase基因的表达量在各个养殖阶段差异不显著,而HG组的G6Pase基因则在3周时表达量显著升高;HG组的GHR基因的表达量在各个养殖阶段差异不显著,而HS组的GHR基因则在3周时表达量显著升高。在养殖初期(1周),高糖饲料显著促进了HK基因的表达,并抑制了PEPCK、G6Pase和GHR基因的表达。 展开更多
关键词 松浦镜鲤 葡萄糖 淀粉 糖酵解酶 糖异生酶 基因表达
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糯玉米SW70和SW22是一类新的淀粉合成酶基因功能缺失多突变体 被引量:3
16
作者 丁向真 杨明明 +3 位作者 王蓓果 闫桂琴 段可 黄剑华 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期403-411,共9页
糯玉米是一类相对于粮食玉米的重要天然突变体,其淀粉合成的遗传机制复杂而又多样。以糯玉米自交系SW22、普通玉米自交系5003、SW22(♀)和5003(♂)的杂种定向选育的糯玉米自交系SW70(自交4代)为材料,研究了自交系授粉后1、2、4周时,SW22... 糯玉米是一类相对于粮食玉米的重要天然突变体,其淀粉合成的遗传机制复杂而又多样。以糯玉米自交系SW22、普通玉米自交系5003、SW22(♀)和5003(♂)的杂种定向选育的糯玉米自交系SW70(自交4代)为材料,研究了自交系授粉后1、2、4周时,SW22、SW70和5003籽粒中ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、淀粉合酶(SS)、淀粉分支酶(SBE)和淀粉去分支酶(DBE)共4个家族21个成员编码基因表达水平的变化。结果表明:1)SW22中多个淀粉合成酶编码基因的表达动态与SW70及5003中有显著差异,差异主要存在于淀粉合酶SS和淀粉去分支酶DBE基因家族;2)SW22及SW70籽粒中有明显的Wx转录产物累积,但累积水平均显著低于5003籽粒中;3)SW22及SW70中颗粒结合淀粉合成酶编码基因GbssIIb和异淀粉酶型去分支酶编码基因Iso2完全不表达,意味着SW22胚乳中GbssIIb基因和Iso2基因的功能完全缺失。目前,有关玉米籽粒中GbssIIb和异淀粉酶型DBE Iso2同时突变或单个基因突变均未见报道。推测淀粉合成酶基因GbssIIb和异淀粉酶型DBEIso2功能缺失以及Wx功能部分缺失,共同导致了SW22和SW70籽粒中直链淀粉合成部分缺陷。 展开更多
关键词 糯玉米 淀粉合成相关酶 RT—PCR 基因表达 突变
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玉米淀粉分支酶sbe2a基因反义载体的构建及其转基因初步研究 被引量:4
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作者 关淑艳 王丕武 +3 位作者 刘广娜 刘慧婧 赵丽娜 郭树成 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期360-363,共4页
应用PCR技术克隆了玉米淀粉分支酶sbe2a基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并进行序列比对。结果表明:克隆片段长度为562 bp。将该基因反向插入到pWGLL载体Actin-pro启动子下游,构建高效反义表... 应用PCR技术克隆了玉米淀粉分支酶sbe2a基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并进行序列比对。结果表明:克隆片段长度为562 bp。将该基因反向插入到pWGLL载体Actin-pro启动子下游,构建高效反义表达载体,通过花粉管通道法将其导入玉米自交系"铁7922",经PCR检测初步证明外源基因已整合到玉米基因组中。 展开更多
关键词 玉米 淀粉分支酶基因sbe2a 克隆 反义载体
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农杆菌介导淀粉分支酶基因RNAi片段转化玉米的研究 被引量:8
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作者 项艳 江海洋 +3 位作者 马庆 陶芳 朱苏文 程备久 《激光生物学报》 CAS CSCD 2006年第4期399-404,共6页
以玉米自交系“178”和“R18红”的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对潮霉素的敏感性实验,确定了潮霉素15 mg/L^25 mg/L为愈伤组织适宜的选择压。利用农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)介导将淀粉分支酶基因RNA干涉表达载体转入玉米... 以玉米自交系“178”和“R18红”的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对潮霉素的敏感性实验,确定了潮霉素15 mg/L^25 mg/L为愈伤组织适宜的选择压。利用农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)介导将淀粉分支酶基因RNA干涉表达载体转入玉米自交系中,并对农杆菌转化系统的条件进行研究。结果表明:在感染液和共培培养基中分别都加入100μm ol/L乙酰丁香酮和50 mg/L抗坏血酸,农杆菌LBA4404的菌液OD600为0.6、侵染时间20 m in为农杆菌转化的最适条件。对转化的愈伤组织分化诱导出苗后进行PCR检测,证明外源目的基因已整合到玉米基因组中,转化率最高达到2.4%。 展开更多
关键词 玉米自交系 淀粉分支酶基因 RNAi表达载体 农杆菌 遗传转化
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嗜热古菌高温酸性淀粉酶基因合成和大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 柯涛 熊兰 +1 位作者 石晴芳 马向东 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期30-33,39,共5页
BD5088是来源于1种嗜热球菌Thermococcus sp.的高温酸性α-淀粉酶的人工突变体,研究中根据BD5088基因的氨基酸序列,经密码子优化,用2步PCR法合成去信号肽后的成熟肽基因。该基因全长1311bp,由436个氨基酸组成。现将其克隆到大肠杆菌的... BD5088是来源于1种嗜热球菌Thermococcus sp.的高温酸性α-淀粉酶的人工突变体,研究中根据BD5088基因的氨基酸序列,经密码子优化,用2步PCR法合成去信号肽后的成熟肽基因。该基因全长1311bp,由436个氨基酸组成。现将其克隆到大肠杆菌的表达载体pET30a上,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达出的目的蛋白分子量约为48ku,大小与理论值一致,经过Ni+树脂纯化,得到纯化后的重组酶BD5088。重组α-淀粉酶BD5088具有α-淀粉酶的活性,最适反应温度范围为70~85°C,最适反应pH值为5.6~6.0,在100℃下酶活性半衰期约30min。活性不依赖于Ca2+。本研究为该基因在毕赤酵母中的表达和基因的定向进化改造打下了基础。 展开更多
关键词 高温酸性α-淀粉酶 基因合成 表达 酶学性质
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玉米淀粉分支酶SBEⅡb基因RNA干涉表达载体的构建和转化 被引量:7
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作者 项艳 张永凤 +3 位作者 江海洋 韩国民 朱苏文 程备久 《激光生物学报》 CAS CSCD 2006年第3期288-293,共6页
应用聚合酶链式方应技术扩增玉米淀粉分支酶第20外显子155 bp的基因片段,并将其正向和反向克隆到pUCCRNA i载体上。利用pHMW.GUS与pCAMB IA1300作为桥梁载体,构建了含胚乳特异启动子和潮霉素筛选基因的RNA干涉表达载体pCAMB IA1300+HMW... 应用聚合酶链式方应技术扩增玉米淀粉分支酶第20外显子155 bp的基因片段,并将其正向和反向克隆到pUCCRNA i载体上。利用pHMW.GUS与pCAMB IA1300作为桥梁载体,构建了含胚乳特异启动子和潮霉素筛选基因的RNA干涉表达载体pCAMB IA1300+HMW+2F。通过三亲杂交将pCAMB IA1300+HMW+2F表达载体转化到根癌农杆菌LBA4404,对玉米自交系178进行遗传转化,通过抗性筛选和PCR检测,获得了4株PCR阳性苗。 展开更多
关键词 淀粉分支酶基因 小干涉RNA 表达载体的构建 玉米 农杆菌介导
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