金属螯合亲和色谱固定相合成及应用进展

金属螯合亲和色谱因具有高稳定、强金属螯合性能等优点,在重金属的检测与吸附、蛋白质的识别与鉴定、分离纯化中有着重要的研究价值。自金属螯合亲和色谱概念提出以来,该技术得到了极大的发展与应用。基于目前的研究文献报道,本文综述了金属螯合亲和色谱固定相合成及应用等方面的研究进展。

Trace analysis of anions in organic matrices by ion chromatography coupled with a novel reversed-phase column for on-line sample pretreatment

An ion chromatography（IC） system coupled with on-line column-switching technique was used to determine anions ofμg/g levels in organic chemicals of analytical reagent grade.A novel polystyrene-divinylbenzene-carbon nanotube（PS-DVB-CNT） stationary phase was utilized for matrix elimination.A calibration study was conducted by preparing and analyzing eight concentrations（between 10 and 5000μg/L） of eight standards in deionized water.The linearity was between 0.9978 and 1.And the detection limits ranged from 1.54μg/L to 10.02μg/L.A spiking study was performed on two representative organic chemicals.The recoveries were between 84.3%and 119.6%.

活性蓝F3GA固载的无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯亲和色谱填料的制备与应用

以3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质,与三嗪染料活性蓝F3GA(Cibacron Blue F3GA)反应,制备出一种固定化染料聚合物高效亲和色谱填料。考察了应用该填料时流动相中的盐离子浓度、有机溶剂及流速等对牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(Lys)保留行为的影响。实验结果表明,该染料亲和填料具有良好的色谱性能。利用前沿色谱法测定了染料与溶菌酶之间的表观解离常数为5.26×10-5mol/L。使用该填料成功地从鸡蛋清和小牛血清中分别分离纯化了Lys和BSA,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示Lys和BSA的纯度分别为95%和92%。

脱氧核糖核酸-聚胺基酰胺树状间隔臂-(二氧化锆-脲醛树脂)亲和色谱固定相的合成及其应用

报道了一种高效液相亲和色谱固定相的合成方法。以３－５μｍ的非多孔二氧化锆与脲醛树脂（ＵＴＲ）复合物微球用作高效液相亲和色谱固定相的基体，并用扫描电子显微镜检验该基体的结构和粒径。用此基体末端的酸胺基团为核心，分别与丙烯酸甲酯、乙二胺重复进行三次马氏加成反应和胺化反应，就形成末端为胺基的聚胺基酰胺（ＰＡＭＡＭ）星型树状间隔臂。用１３Ｃ固体核磁共振检测了树状间隔臂的拓扑结构。此间隔臂用丁二酸进行丁二酰化，并在１－乙基－３－（３－二甲基氨丙基）碳化二胺（ＥＤＡＣ）的存在下用Ｎ－羟基丁二酰亚胺（ＮＨＳ）活化，最后与配位体脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）键合，并用紫外分光光度法测定了配位体容量。从而制备了一种［ＤＮＡ（ＰＡＭＡＭ）－（ＺｒＯ２－ＵＦＲ）］高效液相亲和色谱固定相。通过优化色谱柱操作参数，其已用于蛋白质的分析和核糖核酸（ＲＮＡ）碎片的分离。

用作亲和色谱固定相基体的二氧化锆与脲醛树脂复合物微球的合成

文中研究了一种用作生物大分子亲和色谱基体的二氧化锆与脲醛树脂复合物微球的制备方法。以水合氯化氧锆为起始原料 ,六次甲基四胺和尿素作为沉淀剂 ,在正庚烷乳液中生成 3～ 5μm的二氧化锆与脲醛树脂复合物微球。探讨了乳化剂和乳化助剂的种类、比例、搅拌速度等对复合物微球球径的影响。

亲和标记-基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱用于蛋白质相对定量方法的研究

将亲和标记技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱联用,建立了蛋白质相对定量方法,以牛血清白蛋白为实验对象,考察了该方法的准确度、重现性等指标;又以数种标准蛋白混合物为研究对象,考察了该方法的动态范围及相应的标准偏差,为实际生物样品中差异蛋白质分析奠定了基础。

Sinopak-s-DEAE高效弱阴离子交换色谱填料的研究

以多孔硅胶为基质，用改进的合成方法制备了Ｓｉｎｏｐａｋ－ｓ－ＤＥＡＥ型高效弱阴离子交换色谱填料。考察了反应条件对填料合成的影响，并以标准蛋白为样品进行了色谱行为的研究。结果表明，所制备的填料对蛋白质的分离性能良好，且对蛋白质的非特异性吸附小。以胰蛋白酶为样品，活性回收率大于９８％。

亲和色谱应用于天然活性成分筛选的研究进展

亲和色谱法(affinity chromatography)是一种利用固定相的结合特性来分离分子的色谱方法。利用化合物和固定相表面之间的某种特异性亲和力,将目标化合物从大量无亲和活性的化合物中分离出来。该方法可同时进行色谱分离和活性筛选,作为一种高通量筛选方法广泛应用于各种活性药物的筛选。该文主要针对亲和色谱的发展历史、筛选技术类型及其在天然活性成分筛选中的应用进行了综述。并就其应用前景进行讨论,以期更好地发挥亲和色谱在药物筛选中的应用。