Identification of Stellaria media by PCR

Aim To provide a rapid and reliable method for identifying the fork medicine Stellaria media （Linn. ） Cyr. （Herba Stellariae mediae） （Caryophyllaceae） from its adulterant Myosoton aquaticure （L.） Fries （Herba Myosoti aquatici） （Caryophyllaceae） by polymerase chain reaction （PCR） technology. Methods A molecular genetic approach has been developed to identify S. media for the first time. 5S-rRNA spacer domain was amplified by PCR from the isolated genomic DNA, and the PCR products were then sequenced. Results The nucleotide sequences of S. media and M. aquaticum were measured to determine their identity. Furthermore, the nucleotide sequences of three Stellaria species, S. vestita, S. longifolia and S. radians, were also measured for the sake of providing the evidence of the biological phylogeny of SteUaria. Diversity between DNA sequence and restriction enzyme mapping among a variety of the species was found in their 5S-rRNA spacer domains. Conclusion The 5S-rRNA spacer domains can be used as a molecular marker for differentiating S. media from M. aquaticum and in phylogenetie studies of Stellaria.

繁缕(Stellaria media (L.) Vill.)种子萌发特性的研究

对繁缕进行温度、光照、低温贮藏、赤霉素和破种皮处理实验,研究不同条件对种子萌发的影响。结果表明,繁缕种子萌发对温度敏感,对光照不敏感,最适宜的萌发温度为12℃,最适光照条件为8 h。低温贮藏处理可有效促进种子萌发,-70℃贮藏后种子萌发率达到93.25%。赤霉素对种子萌芽影响较显著,最适浓度为500 mg/L。破种皮处理后种子萌发效果最好,萌发率达到96.75%,并于5 d萌发完毕。

从中药繁缕中几个黄酮碳苷成分的分离和分析看LC-MS-MS技术的优势与不足

繁缕[Stellaria media(L)Cyr.]为石竹科植物繁缕的茎、叶,具有活血、去瘀、下乳、催生作用,主要含皂苷、黄酮、酚酸、氨基酸等成分[1～3].贵州民间作为降血脂药物应用,效果很好.文献调研表明,其活性成分可能为黄酮苷类化合物[4].……

繁缕中的水溶性化学成分

目的:研究繁缕Stellariamedia(L.)Cyr.的水溶性化学成分.方法:运用多种层析分离方法进行分离纯化,并用波谱数据和理化常数进行对照,确定化合物的结构.结果:从繁缕新鲜药材的汁液中分离并鉴定了21个化合物,分别为:环(亮-异亮)二肽(1),环(缬-酪)二肽(2),α-乙基-D-吡喃半乳糖苷(α-ethyl-D-pyranogalactoside,3),尿嘧啶(uracil,4),胸腺嘧啶(thymine,5),胸苷(thymidine,6),鸟苷(guanosine,7),2-氯-腺苷(2-chloroadenosine,8);另外还分离并鉴定了13个氨基酸(化合物9～21),包括11个常见氨基酸和2个特殊氨基酸,分别为:天冬氨酸,谷氨酸,丙氨酸,丝氨酸,缬氨酸,亮氨酸,甘氨酸,苏氨酸,酪氨酸,赖氨酸,组氨酸,γ-氨基丁酸及d-氨基-y-羟基-戊二酸.结论:此21个化合物均为首次从该植物中分离得到.

繁缕和鹅肠菜的花维管束系统比较解剖学研究及其系统学意义

运用石蜡制片技术,对繁缕(Stellaria media)和鹅肠菜(Myosoton aquaticum)的花维管束系统进行了比较解剖观察,为其系统分类提供了一定的科学依据。研究结果表明,两者维管系统有以下特征:(1)花梗部维管束以3束不封闭成环形式分布在中央区。(2)花梗顶部维管束形成一个封闭的分生组织环。(3)分生组织环最先呈辐射状分离出的外层10束,每相隔一个束的那个束向外分裂出2束。其中15束是通往花萼的维管束,5束是通往花瓣的维管束。通往花瓣的5束维管束又一分为二,变成10束花瓣维管束。(4)分生组织环再呈辐射状分裂出10束,形成雄蕊维管束。(5)在子房室区分生组织环再呈辐射状分裂出4子房隔膜束,每束分裂出3束,形成胎座维管束,其数目为12束,每一束均与一个胚珠相连,从而使子房壁维管束数目增加到16束。鉴于繁缕和鹅肠菜花维管束系统的高度一致,将鹅肠菜置于繁缕属比较恰当。

基于ITS和trnL-F序列碱基差异的繁缕及其近缘种的亲缘关系分析

应用PCR产物直接测序法分析了繁缕〔Stellaria media（L.）Villars〕及其近缘种和鹅肠菜〔Myosoton aquaticum（L.）Moench〕的ITS和trnL-F序列的碱基差异,并以孩儿参〔Pseudostellaria heterophylla（Miq.）Pax〕为外类群构建N-J系统树,分析了这些种类的种间亲缘关系。结果表明,供试的繁缕属（Stellaria L.）种类及鹅肠菜的ITS和trnL-F序列长度分别为521-784和788-951 bp,各有变异位点77和59个,其中信息位点分别为18和11个,种间碱基差异百分率分别为6.5%和3.1%。ITS的碱基组成为A22.1%、T20.9%、G28.5%和C28.5%,G＋C含量57.0%;trnL-F的碱基组成为A 35.9%、T33.7%、G 15.7%和C 14.8%,G＋C含量30.5%。繁缕、雀舌草（S.alsine Grimm）和箐姑草（S.vestita Kurz）的ITS和trnL-F序列一致;鹅肠菜的ITS序列中有4个位点与前述种类不同,但trnL-F序列则相同;中国繁缕（S.chinensis Regel）的ITS和trnL-F序列与孩儿参较相似。在N-J系统树中,鹅肠菜与繁缕、雀舌草和箐姑草聚为一支,表明它们的亲缘关系相对较近,支持将鹅肠菜重新归入繁缕属的分类处理。研究结果显示,ITS和trnL-F序列分析均可用于繁缕及其近缘种的鉴别,且ITS是更为适宜的分子标记。

MS/MS技术快速发现和分析繁缕中的黄酮碳苷成分

目的 :快速发现和分析繁缕中的黄酮碳苷类成分 ,为今后的活性成分研究提供依据 ;同时 ,探讨天然活性成分研究的思路与方法。方法 :采用植化中的粗分离方法处理药材 ,进而以制备TLC与电喷雾串联质谱 (MS/MS)技术离线连接 ,获得目标成分并进行结构分析。结果 :从繁缕中分离得到并鉴定了三个黄酮碳苷类化合物。化合物I为 6 ,8 二葡萄糖基芹菜素 ;化合物II的苷元为芹菜素 ,苷元分别以碳苷键与两个糖连接 ,一个为五碳糖 ,一个为六碳糖 ;化合物III的苷元也是芹菜素 ,分别以碳苷键与两个糖连接 ,一个为五碳糖 ,一个为六碳糖 ,但六碳糖在A环上 ,五碳糖在B环上。在繁缕中 ,尚无这种黄酮碳苷的研究报道。结论 :制备TLC与串联质谱技术离线连接 ,可以较为快速地发现和分析天然活性成分。在苷类化合物的ESI MS/MS中 ,如果不首先出现脱糖基的碎片峰 ,而是有规律地产生脱去 6 0 ,90 ,1 2 0质量单位的碎片峰 ,就基本可以判断为六碳糖的碳苷类化合物。如果是五碳糖 ,则只能产生脱去 6 0 ,90质量单位的碎片峰 ,不产生脱1 2 0质量单位的碎片峰。

繁缕叶蛋白提取工艺研究

以鲜繁缕为材料,采用酸化和加热相结合的方法,研究了提取繁缕叶蛋白的最佳工艺条件。在考虑料液比、滤布层数、加热温度和加热时间等单因素对叶蛋白提取率影响的基础上,进行了正交试验,最终确定叶蛋白最佳提取工艺条件为:料液比1:5、5层滤布过滤、加热到75℃并在此温度下持续11min,繁缕叶蛋白的提取率为52.08%,得率为27.17%。

冬季农田杂草繁缕对镉的积累特性研究

为进一步筛选出更多的镉超富集植物作为植物修复的材料，本文以冬季农田杂草作为研究对象，采用土壤种子库-金属筛选法进行筛选，以期从冬季农田杂草中筛选出镉超富集植物，为镉污染农田土壤的冬季植物修复提供材料。通过土壤种子库-金属筛选法初步研究发现，冬季农田杂草繁缕（Stellaria media）地上部分镉含量接近超富集植物的临界值（100 mg·kg^-1），但转运系数（TF）小于1，可能是镉富集植物。为此，采用盆栽试验进行了进一步的浓度梯度鉴定。结果表明，随土壤镉含量的增加，繁缕根系生物量、地上部分生物量、主枝长度、根系长度、抗性系数及耐性系数均随土壤镉含量的增加而下降，但繁缕根系及地上部分镉含量呈显著增加的趋势。与对照相比，在土壤镉质量分数为25、50、75、100和125 mg·kg^-1时，繁缕总生物量分别下降了17.31%、34.87%、44.79%、52.12%和59.32%，但各个处理均没有表现出明显毒害症状。土壤镉含量为75-125 mg·kg^-1时，繁缕地上部分镉含量均大于100 mg·kg^-1，最大值为135.79 mg·kg^-1，地上部分富集系数（BCF）大于1，但转运系数（TF）小于1。在土壤镉含量为100 mg·kg^-1时，繁缕地上部分镉提取量达到最大值，为87.42μg·plant-1。这些结果表明繁缕是一种镉富集植物。虽然繁缕的单株镉提取率较低，但繁缕具有分蘖力强、繁殖力强、生长密度大、耐荫性强等特点，因此适用于冬季农田镉污染的修复。

繁缕中的黄酮碳苷类化合物(英文)

目的:研究繁缕中的黄酮类化合物。方法:95%的乙醇提取物的水混悬液依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,各种柱层析进行分离纯化,UV,NMR等波谱数据进行结构鉴定。结果:从中分离得到14个黄酮碳苷类化合物,其结构鉴定为:芹菜素(apigenin)(1),芹菜素-6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),即新西兰牡荆苷-2[vicenin-Ⅱ(6,8-二-C-β-D-glucopyranosylapigenin)],芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-8-C-β-D-半乳糖苷(8-C-β-D-galactopyranosylisovitexin(6-C-β-D-glucopyra-nosyl-8-C-β-D-galactopyranosylapigenin)(3),芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-β-D-葡萄糖苷(6-C-β-D-galactopyranosylvitexin6-C-β-D-galactopyranosyl-8-C-β-D-glucopyranosylapigenin)(4),芹菜素-6,8-二-C-α-L-阿拉伯糖苷(6,8-di-C-α-L-arabinopyranosylapi-genin)(5),芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-8-C-α-L-阿拉伯糖苷[schaftoside(6-C-β-D-glucopyranosyl-8-C-α-L-arabinosylapigenin)](6),芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-葡萄糖苷[isoschaftoside(6-C-α-L-arabinosyl-8-C-β-D-glucopyranosylapigenin)](7),芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-α-L-阿拉伯糖苷(6-C-β-D-galactopyranosyl-8-C-α-L-arabinosylapigenin)(8),芹菜素-8-C-β-D-半乳糖(8-C-β-D-galactosylapigenin)(9),牡荆素[vitexin(8-C-β-D-glucopyranosylapigenin)](10),异牡荆素[isovitexin(6-C-β-D-glucopyra-nosylapigenin)](11),麦黄酮-6,8-二-C-β-D葡萄糖苷(tricetin6,8-di-C-β-D-glucopyranoside)(12),麦黄酮-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-葡萄糖苷[tricetin6-C-α-L-arabinosyl-8-C-β-D-galactopyranoside](13),7-O-β-D-葡萄糖基-6-C-β-D-葡萄糖(6″-乙酰基)芹菜素[7-O-β-D-glucopyranosyl-6-C-β-D-6″-acetyl-glucopyranosylapigenin](14)。结论:9个化合物(3～8及12、13)为首次从该植物中分离得到,化合物14为新化合物。

小麦提取物对反枝苋、繁缕生长的化感效应研究

接受抽穗期小麦提取物进行化感效应测定的１０种作物和杂草中，反枝苋和繁缕的生长受到显著影响：提取物浓度５００ｍｇ／ｋｇ时，反枝苋种子发芽率为１４％。用小麦提取物５０ｍｇ／ｍ２进行土壤处理，２个月后反枝苋干重抑制率达８２％，用同样剂量对繁缕进行了茎叶处理。

繁缕的黄酮类化学成分研究

目的对繁缕Stellariamedia(L.)Cyr.的化学成分进行研究。方法运用多种层析分离手段,通过1H,13C NMR等波谱技术及理化数据确定化合物的结构。结果分离并鉴定了5个化合物,其中4个为黄酮类化合物,分别为芹菜素(apigenin)(1),芹菜素6,8二CβD吡喃葡萄糖苷(6,8di C glucopyrano sylapigenin)(2),槲皮苷(Quercitrin)(3),槲皮素(quercetin)(4)和β胡萝卜苷(daucosterol)(5)。结论化合物3,4,5系首次从该植物中分离得到。

繁缕化学成分研究Ⅰ

目的:研究繁缕的化学成分。方法:用各种色谱方法进行分离纯化,根据化学方法及光谱数据鉴定结构。结果:分离并鉴定了5个化合物,分别为芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-α-L-阿拉伯糖苷(apigenin 6-C-β-D-galacto- pyranosyl-8-C-α-L-arabinopyranoside,1)、芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-半乳糖苷(apigenin 6-C-α-L-arabinopyr- anoeyl-8-β-D galaetopyranoside,2)、芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-β-L-阿拉伯糖苷(apigenin 6-C-β-D-galactopyranosyl- 8-C-β-L-arabinopyranoside,3)、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-8-C-β-D-半乳糖苷(apigenin 6-D-β-D-glucopyranosyl-8-C-β-Dga- lactopyranoside,4)、芹菜素-6,8-二-C-α-L-阿拉伯糖苷(apigenin 6,8-di-C-α-L-arabinopyranoside,5)。结论:化合物1～5均为首次从繁缕属植物中分离得到。

贵阳市3种野生叶菜的部分功能性成分及其理化特性研究

以产自贵州地区的繁缕、灰灰菜和野苋菜野生蔬菜为试验材料,测定了其部分功能性成分及其理化特性。结果表明:不同野生蔬菜间功能性成分的含量存在差异,灰灰菜中的蔗糖、蛋白质及膳食纤维含量较高,繁缕中的淀粉含量较高,野苋菜中黄酮含量较高;野苋菜的持水率和膨胀力显著高于灰灰菜和繁缕;3份野生蔬菜对不饱和脂肪的吸附能力总体在2.00 g/g左右,对饱和脂肪的吸附能力以灰灰菜最低;当3份野生蔬菜材料用量为0.1 g时,其对胆固醇的吸附能力最大,野生蔬菜材料间差异不显著。

繁缕和无瓣繁缕六个居群的数值分析

对繁缕 (Stellariamedia)和无瓣繁缕 (S apetala)的 6个居群的 5 7个性状进行Q -聚类和R -聚类的研究。结果表明 :(1)Q -聚类中 ,用一条结合线 ,可以把繁缕的 4个居群聚为一类 ,无瓣繁缕的 2个居群聚为一类。这一结果支持把繁缕和无瓣繁缕划分为两个物种 ;(2 )R -聚类中 ,发现了呈现完全正相关、极大正相关和极大负相关的性状 ,并根据R-聚类的结果 ,运用一条适当的结合线 ,把繁缕和无瓣繁缕的 5 7个性状划为 5个类群 ,并分析了各性状的分类学意义。

繁缕核糖体失活蛋白基因克隆及序列分析

采用同源克隆结合RACE法,克隆了繁缕核糖体失活蛋白的全长cDNA,命名为q3(GenBank accession GQ870262)。序列分析结果表明,q3的开放阅读框(ORF)长780 bp,编码259个氨基酸。序列G+C含量为41.5%,与大部分Ⅰ型RIP基因相近。q3编码的蛋白质命名为Q3,理论分子量为28.16 kD,pI为9.44,均与Ⅰ型核糖体失活蛋白相近;包含由23个氨基酸组成的信号肽。功能结构域分析发现,该蛋白含有3个蛋白激酶磷酸化位点、4个络氨酸蛋白激酶磷酸化位点和7个N-肉豆蔻酰化位点。三级结构预测发现,有35.52%的氨基酸残基参与了α螺旋,24.32%的氨基酸残基组成延伸链,40.15%的氨基酸残基随机缠绕其中。基于繁缕及其近缘种核糖体失活蛋白的氨基酸序列构建的系统发育树显示,其结构与经典分类结果基本一致。

繁缕种质资源研究进展

从种的考证出发,综述了繁缕近年来在形态学、植物化学、分子系统学、孢粉学和生态学方面的研究进展,并就繁缕作为资源植物的利用和作为杂草的防除方法进行了总结。同时指出了繁缕研究中存在的不足,为更好地利用繁缕种质资源提供了借鉴。

繁缕化学成分研究(Ⅱ)

目的对繁缕的化学成分进行研究。方法用色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质及光谱数据鉴定结构。结果分离并鉴定了7个化合物,分别为大黄素(Ⅰ),大黄素甲醚(Ⅱ),大黄素-8-甲醚(Ⅲ),二十六烷醇(Ⅳ),β-谷甾醇(Ⅴ),胡萝卜苷(Ⅵ),山奈酚-3,7-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅰ～Ⅳ和Ⅶ均为首次从该植物中分得,并为繁缕属植物中首次分离得到。

响应面法优化繁缕中总黄酮提取工艺及体外抗氧化作用研究

用响应面法优化繁缕[Stellaria media(L.)Cyr.]中总黄酮类化合物的提取工艺,通过羟自由基、超氧阴离子自由基、总还原力试验测定繁缕中总黄酮的体外抗氧化作用,并与抗坏血酸和叔丁基对苯二酚的抗氧化能力进行比较。结果表明,提取工艺最佳条件为提取温度86℃、提取时间2.5 h、液料比V乙醇∶m繁缕粉为31.5∶1(mL∶g)、提取2次,该条件下总黄酮提取率预测值为3.907%,验证值为3.879%。繁缕中总黄酮的还原能力、对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力均表现出较好的效果,清除超氧阴离子自由基和羟自由基的IC50分别为0.583 mg/mL和0.626 mg/mL,其抗氧化能力高于维生素C和叔丁基对苯二酚。

设施萝卜田繁缕发生动态及对萝卜产量性状的影响

繁缕(Stellaria media)在天津设施蔬菜地发生危害日趋严重,给萝卜、芹菜和番茄等蔬菜生产造成了严重威胁。为明确繁缕的发生规律,对天津市西青区辛口镇沙窝萝卜田繁缕发生情况进行了2年田间调查。结果表明从9月中旬至萝卜收获前均有繁缕发生,11月中旬出苗达到高峰(20.83株/m^2),占整个生育期总出苗量(145.67株/m^2)的14.3%,随后出苗量逐渐减少。随着温度的降低,繁缕出苗量逐渐增加,最适生长温度为8~15℃。繁缕的发生量与萝卜产量性状呈极显著负相关(P<0.01)。