影响桑树茎尖组培快繁效率的关键因素

以桑树茎尖为外植体,研究了影响桑树组培快繁的关键因素.结果表明,采用低pH、软琼脂培养基加不沉滤纸托的方法,可较好地解决外植体褐变对分化的不良影响;在培养基中去掉肌醇、提高BA浓度(1.5mg/L)并配以黄化处理,可提高继代增殖率;采用“驯化+选择”的方法以食用蔗糖代替果糖,可大幅度降低培养成本;IAA与IBA配合使用使试管苗生根率达100%;移植前“增光降温”炼苗,结合在全光喷雾苗床上过渡,使移栽成活率稳定在95%以上,且可大大提高效率.

EMS诱变甘蔗茎尖分生组织的初步研究

为探索EMS对离体培养的甘蔗茎尖进行化学诱变的合适浓度和时间组合,以‘新台糖22’和‘粤糖93-159’甘蔗茎尖分生组织为材料,研究不同浓度(24、48、72μmol/L)、不同时间(2、4 h)诱变处理对茎尖分生组织的成活率、鲜重增重量、分化率及分化成苗情况的影响。结果表明:诱变处理后2个基因型的甘蔗茎尖分生组织成活率、每克鲜重增重量、分化率以及成苗的数量和质量都随着EMS处理浓度的升高和处理时间的延长而下降,2个基因型甘蔗茎尖经诱变处理后半分化EMS浓度均小于半致死浓度。综合成活和分化情况,适合‘新台糖22’茎尖分生组织的EMS诱变处理为48μmol/L处理2 h或24μmol/L处理4 h;适合‘粤糖93-159’茎尖分生组织的EMS诱变处理为72μmol/L处理2 h或48μmol/L处理4 h。

野葛(Pueraria lobata)愈伤组织诱导及组织培养

以野葛茎尖分生组织为外植体,通过不同激素与MS培养基配比试验,筛选出野葛茎尖分生组织愈伤组织诱导与植株再生的最适培养基,建立野葛植株再生体系。试验结果表明:茎尖分生组织在MS+2,4-D 0.5 mg/L培养基上启动诱导愈伤组织,再转移到MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L继续诱导,愈伤组织诱导率高,繁殖能力旺盛。在MS+6-BA 1 mg/L培养基上愈伤组织分化率100%,生长能力较强。在MS+NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导生根率达到60%。

百子莲茎尖分生组织蛋白双向电泳体系的建立

以‘蓝色大花’百子莲（Agapanthus praecoxssp.orientalis‘Big blue’）茎尖分生组织为材料,对比研究了不同提取与裂解方法制备蛋白样品以排除多酚、多糖及核酸物质对蛋白双向电泳体系（Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）的干扰。提取过程采用TCA/丙酮沉淀法和超声波破碎法;蛋白裂解过程中分别使用苯甲基磺酰氟（Phenylmethanesulfonyl Fluoride,PMSF）和乙二胺四乙酸（Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA）、Cocktail（广谱性）蛋白酶抑制剂、核酸酶Nuclease Mix和2-D Clean-Up蛋白纯化试剂盒。制备的各蛋白样品经过7cm IPG（pH 3~10）胶条上样、电泳后发现,使用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白,裂解液中加入Cocktail蛋白酶抑制剂裂解后,用2-D Clean-Up试剂盒所制备的样品其双向凝胶电泳图谱效果最好,获得蛋白点数量最多,且蛋白等电点pI主要分布于4~8之间。随后,应用分辨率更高的24cm IPG（pH 4~7）胶条进行电泳效果的验证,蛋白点在凝胶的2个方向上均得到了较好地分离,经过ImageMaster 2-D Platinum5.0软件分析后共检测到有效蛋白点820个。本研究初步建立了百子莲茎尖分生组织蛋白双向凝胶电泳体系,为后续开展百子莲属植物蛋白质组学研究提供了重要的技术保障。

甘薯茎尖分生组织培养及快繁技术的研究

以甘薯品种豫薯12的茎尖分生组织为材料,研究了不同培养基对其组培快繁的影响.结果表明:豫薯12最适基本培养基为MS培养基;在诱导茎尖成苗单因子实验中,最适宜的6-BA浓度为0.5 mg/L,最适宜的NAA浓度为0.01mg/L;在双因子实验中,诱导成苗最适宜培养基是MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.01mg/L;在茎段增殖实验中,最适宜的增殖培养基是MS+GA30.1mg/L+NAA 0.5mg/L.

马铃薯茎尖组织培养方法优化研究

提高马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。以克新1号为材料,研究了不同茎尖大小、不同浓度和配比的激素对马铃薯茎尖诱导的效果。结果表明:茎尖越小,脱毒率越高,但成活率和成苗率越低,以叶原基数为2的茎尖脱毒效果最好。通过对6种培养基的对比,筛选出MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.1 mg/L为茎尖诱导分化成苗的最优培养基。

豫薯品种茎尖组织培养脱毒技术研究

以豫薯4号、豫薯5号、豫薯7号、豫薯12号、豫薯14号为材料,以M S为基本培养基对甘薯茎尖分生组织进行不同激素种类和浓度试验,结果表明,最佳诱导分化培养基为:M S+6-BA l.0m g/L+NAA 0.1m g/L+GA30.05m g/L;继代培养与生根培养用.M S+NAA 0.2m g/L为好。在28℃、光照14h/d条件下培养效果好。试管苗株系经指示植物、NCM-EL ISA法检测,获得了5个品种的脱毒苗。

一种延长马铃薯脱毒试管苗使用年限的方法研究

[目的]介绍一种新的延长马铃薯脱毒试管苗使用年限的方法。[方法]以马铃薯为试验材料,研究通过剪取生长良好的脱毒试管苗顶端带芽茎段来延长试管苗使用年限的新方法,并同传统茎尖脱毒培养的试管苗在成苗时间、移栽成活率和结薯率上进行了比较。[结果]新的方法免去了传统的每年剥茎尖更换脱毒苗的环节,并使脱毒苗的使用年限增加到3-5年;该方法在成苗时间上较常规茎尖脱毒方法提前50 d,成苗率提高25%,且试验苗长势良好;与传统茎尖脱毒繁殖2年的试管苗比较,该方法得到的试管苗移栽成活率提高5个百分点,结薯率提高20%以上。该方法培养的马铃薯脱毒试管苗成苗时间快,成苗率高,且能有效延长试管苗的使用年限和降低生产成本。[结论]为马铃薯试管苗的规模化生产提供了新的思路,是一种值得借鉴和参考的新方法。