姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用

应用细胞培养、细胞计数、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst33258染色、苏木精-伊红(HE)染色、透射电镜观察等技术研究姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用。实验结果显示,姜黄素可明显诱导MG-63细胞的凋亡,经7.5mg/L姜黄素诱导处理后,人成骨肉瘤MG-63细胞的增殖活动受到显著的抑制,细胞生长抑制率达63.14%;细胞周期检测出现亚二倍体(亚G1期)细胞峰值,细胞凋亡率达21.8%;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA"梯状"条带;细胞核经Hoechst33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光;光镜和电镜观察结果显示,姜黄素处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,染色质凝聚、线粒体肿胀、有凋亡小体形成等显著的凋亡特征。研究结果表明,姜黄素对人成骨肉瘤MG-63凋亡的诱导具有显著作用,从而为进一步研究细胞凋亡机制和多种骨骼疾病的研究提供重要基础和研究依据。

miRNA-132抑制人骨肉瘤细胞的增殖和侵袭能力

目的观察miRNA-132在不同骨肉瘤细胞系中的表达及对骨肉瘤细胞生物学行为的影响,探讨miRNA-132在人骨肉瘤发生发展中的作用。方法通过荧光定量PCR技术检测不同骨肉瘤细胞系U2OS、MG63、143B中miRNA-132的表达情况,使用pRFP-miRNA-132-down质粒转染U2OS细胞、pRFP-miRNA-132-up质粒转染143B细胞,使用EdU检测肿瘤细胞增殖状态,Transwell小室检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力。结果在3种骨肉瘤细胞系U2OS、MG63、143B中,miRNA-132的表达依次下降(U2OS>MG63>143B);降低miRNA-132在U2OS细胞中的表达促进细胞的增殖和侵袭能力,增加miRNA-132在143B细胞中的表达抑制细胞的增殖和侵袭能力。结论miRNA-132可能通过抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭调节骨肉瘤的发生发展。

抑癌基因Rb与P16蛋白在骨肉瘤中的表达及其相互关系

为了研究Ｒｂ与Ｐ１６蛋白在骨肉瘤中的表达及其相互关系，作者应用免疫组织化学方法检测了Ｒｂ与Ｐ１６蛋白在４０例骨肉瘤、１８例正常骨组织中的表达。结果发现Ｒｂ蛋白在骨肉瘤标本中的表达低于正常骨组织中的表达；Ｐ１６蛋白在骨肉瘤标本中的表达却高于正常骨组织中的表达，其差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０１）。而在骨肉瘤标本中Ｒｂ与Ｐ１６蛋白的表达之间还存在着负相关关系（ｙｓ＝－０．３５５，Ｐ＜０．０５）。且还发现Ｒｂ与Ｐ１６蛋白表达情况与骨肉瘤病人的肿瘤转移无关，而与肿瘤的直径大小有关。作者认为Ｒｂ与Ｐ１６蛋白表达的改变可能与骨肉瘤的发生、发展有关。

蛋白质组学技术在人骨肉瘤血清标志物的应用研究

目的:比较骨肉瘤患者与正常人血清的差异蛋白质,为对骨肉瘤的诊断、治疗、预后的判断等提供依据。方法:应用cleanup试剂盒分别对骨肉瘤患者血清及正常人血清进行浓缩,然后去高丰度蛋白质,2D clean-up kit试剂对蛋白质纯化后进行双向凝胶电泳,银染扫描后用Image Master 2DE软件分析寻找差异蛋白,切除差异蛋白质点酶解后进MALDI TOF/TOF(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)质谱鉴定,获取肽指纹图谱并查询SwissProt数据库寻找匹配蛋白质。结果:获得重复性较好的双向电泳银染图谱。蛋白质点经质谱分析并检索SwissProt数据库后,发现11个差异蛋白质,其中5个上调,6个下调。结论:骨肉瘤患者血清与正常人血清蛋白质组存在明显差异,角蛋白、生长激素、内质网蛋白29等差异蛋白质有望成为诊断治疗骨肉瘤的分子标记物或者治疗靶点,为进一步对骨肉瘤的研究提供理论依据。