双酶分步酶解盐津乌骨鸡肉工艺及其氨基酸组成分析

以云南盐津乌骨鸡肉为原料,蛋白水解度为指标,采用响应面分析法优化盐津乌骨鸡肉酶解条件;用氨基酸分析仪及凝胶渗透色谱法检测酶解液的氨基酸组成和多肽分子量分布。结果表明,双酶分步酶解最佳工艺条件为动物蛋白酶酶解时间5 h、酶添加量2.6%、酶解pH值6.5,灭酶后,再加入木瓜蛋白酶酶解3 h、酶添加量2.5%、酶解温度60℃。在该条件下,盐津乌骨鸡肉水解度为(32.62±0.79)%;酶解液中含有17种氨基酸,总游离氨基酸含量可达6.02 mg/mL,且亮氨酸、精氨酸等呈味氨基酸含量较高,其中多肽的相对分子质量主要集中分布在1 kDa以下。该研究结果可为后续盐津乌骨鸡相关新型调味制品的开发提供一定的理论依据。

超声波辅助分步酶解法制备菜籽肽及复合酶筛选

以反胶束法萃取得到的菜籽粕蛋白液为原料,以酶解产物的水解度、三氯乙酸氮溶解指数和肽得率为评价指标,并参照酶解液肽的分子量分布,考察超声波辅助分步酶解法对原料水解的影响。从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、复合风味酶、胰蛋白酶组成的6个复合酶中,筛选出制备优质小分子量菜籽肽的适宜复合酶。结果表明,木瓜蛋白酶与复合风味酶、胰蛋白酶与复合风味酶组成的两种复合酶均比较适合酶解此种菜籽粕蛋白,它们的酶解产物水解度和多肽得率较高,所含小分子量肽也较多。

酶法提取亮菌多糖的研究

以液体发酵培养的亮菌菌丝体为原料,利用纤维素酶和中性蛋白酶复合酶法提取菌丝体胞内多糖。结果表明,复合酶法提取可以提高亮菌多糖的提取率,通过单因素试验和正交试验,复合酶提取多糖的最适条件是料液比为1∶40加酶量为2%,pH值为5.5,提取温度为45℃,提取时间是1h,然后加中性蛋白酶,加酶量为1.2%,pH值为7.2,酶解温度为55℃,酶解时间是2.5h。紫外光谱分析表明,亮菌多糖经过3次脱蛋白在波长200nm～400nm处没有明显的吸收峰。

双酶分步水解制备花生多肽工艺优化

为了开发和利用花生蛋白资源,生产高附加值蛋白产品,以花生分离蛋白为原料,采用Alcalase和Flavourzyme分步水解法制备花生多肽。通过单因素试验和响应面中心组合设计试验,研究Flavourzyme水解花生分离蛋白过程中加酶量、底物质量分数、酶解温度、酶解时间和酶液pH值等因素对水解的影响。建立水解液中可溶性氮质量浓度与各种影响因素的回归模型;确定Flavourzyme酶解反应的最佳工艺参数为pH7.0、加酶量1714U/g底物、底物质量分数5%、酶解温度55℃、酶解时间90min。在此条件下,酶解产物中可溶性氮质量浓度为19.44mg/mL。

酶法提高芋头浆中淀粉水解率的工艺条件研究

针对芋头浆中被粘多糖蛋白质和果胶等粘性物质包裹的淀粉难以水解的难题,研究采用复合纤维素酶-果胶酶和中性蛋白酶分步酶解法对芋头浆进行前处理,以提高α-淀粉酶酶解芋头浆淀粉的水解率。通过单因素实验和正交实验优化,结果表明,复合纤维素酶-果胶酶酶解最佳条件为:添加量0.2%,酶配比1∶1,pH5.8,酶解时间40min;中性蛋白酶酶解最佳条件为:添加量0.8%,pH7.3,酶解温度48℃,作用时间7.0h,该条件下,芋头浆出汁率和蛋白质水解率分别达到74.67%和40.46%。对经上述酶法预处理后的芋头浆中的淀粉进行酶水解,其水解率高达87.39%,与芋头原浆直接酶解相比提高了33.07%。

酶解牛肉工艺的研究

目的研究木瓜蛋白酶和风味酶对牛肉进行分步酶解的最佳工艺参数。方法本实验以木瓜蛋白酶和风味酶为水解酶对牛肉进行分步酶解,在单因素的基础上采用了正交试验对水解条件进行优化。结果先用木瓜蛋白酶在加酶量为0.1%、料液比为3:1、温度为65℃、pH=7.0的条件下酶解1 h,再用风味酶在加酶量为0.4%、温度为55℃、pH=6.0的条件下酶解5h。结论在此方法下的牛肉水解物经美拉德反应生成的反应物肉香味更加浓郁,游离氨基酸含量较高。

乌骨鸡黑色素的分步酶解法制备及其性能研究

为有效提取乌骨鸡黑色素,采用复合蛋白酶和酸性蛋白酶联用法分步酶解提取得到乌骨鸡黑色素。探讨复合蛋白酶水解乌骨鸡肉糜的最佳条件,对不同的酶提方法获得的黑色素的得率、蛋白质含量、紫外图谱、抗油脂氧化性质、对VC的保护作用进行了比较。结果表明:复合蛋白酶水解乌骨鸡肉糜的最佳条件为酶解温度50℃、酶解时间3h、pH6.5、加酶量3.5%;复合蛋白酶和酸性蛋白酶联用法分步酶解法获得的乌骨鸡黑色素得率高,蛋白质含量低,对VC的保护作用强。

类胡萝卜素裂解酶催化不同底物生成非香气物质的条件及优化

利用高效液相色谱研究类胡萝卜素裂解酶催化不同底物生成的非香气物质随酶解时间、p H、温度的变化规律,结果表明非香气物质生成量会随着酶解时间的增加、p H的降低和温度的升高出现先增加后减少的趋势。另外发现β-胡萝卜素在不同反应p H下可生成不同的裂解产物。利用二次多项式逐步回归得到酶解的最佳工艺条件,β-胡萝卜素、玉米黄质、β-阿朴-8'-胡萝卜醛、角黄质和虾青素的酶解条件分别为p H4.5、温度30℃、时间15 min,p H4.5、温度30℃、时间13 min,p H4.5、温度33℃、时间45 min,p H4.0、温度30℃、时间41 min,p H4.5、温度50℃、时间7 min。按上述条件进行酶解反应,得到产物β1、z1和z2、a1、c1和c2、x1和x2的生成量分别为定义条件下的1.74、1.80、1.39、1.66和1.75倍。该方法有效提高了非香气物质的生成量,并节约了时间。

复合酶分步水解鸭血工艺的研究

鸭血是家禽屠宰业的主要副产物之一,富含蛋白质和血红素铁等多种营养成分,开展鸭血的综合利用研究具有重要意义。本实验确定了先木瓜蛋白酶水解再风味酶水解的复合酶分步水解工艺。其最佳工艺参数为:先用木瓜蛋白酶在温度60℃、加酶量6000 U/g底物、底物浓度6%(w/v)、pH 6.0的条件下水解1 h,再用风味酶在加酶量6000 U/g底物、温度40℃、pH 6.0的条件下水解2 h,风味酶分两次加入,前1 h加入一半的酶,后1 h加入另一半的酶,在此条件下水解液中氨基酸百分含量可达16.23%。

鮰鱼骨胶原多肽的制备工艺研究

鱼骨中胶原蛋白含量丰富,本研究采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶对鮰鱼骨进行分步酶解制备骨胶原多肽。通过单因素和正交优化实验,确定碱性蛋白酶水解鮰鱼骨胶原蛋白的最佳工艺条件为:料液比(w/v)4∶50,酶解温度45℃,加酶量4%,pH值8,酶解时间3h,在此条件下,水解度达到39.49%。风味蛋白酶分步酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃,加酶量4%,pH值7.5,酶解时间3h,在此条件下,水解度达到47.2%,水解产物的风味在一定程度上也得到了改善。

双酶分步水解制备甜杏仁多肽的工艺优化及体外抗氧化评价研究

以冷榨杏仁饼为原料,采用Alcalase和Flavourzyme分步水解法制备甜杏仁多肽。通过单因素试验和响应面中心组合设计试验,得到最佳工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 7、加酶量6%,在此条件下,甜杏仁的水解度为26.86%。酶解后的甜杏仁多肽具有良好的体外抗氧化活性,当酶解液质量浓度为12mg/m L时,O_2^-·、·OH、DPPH·的清除率分别高达71.87%、31.26%、55.27%,明显优于酶解前的抗氧化能力。

双酶分段水解制备紫花芸豆肽工艺优化及抗氧化测定

研究紫花芸豆蛋白双酶分段水解的最佳工艺及产物的抗氧化特性。以水解度和抗氧化能力为测定指标,筛选酶种类及双酶组合方式,采用正交实验优化双酶分段水解工艺参数,提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。最终确定胰蛋白酶+碱性蛋白酶分段水解为最佳水解工艺,参数为胰蛋白酶添加量7%、pH 10、温度50℃、时间4.5 h;碱性蛋白酶添加量7%、pH 9、温度60℃、时间3 h,水解度达到58.58%;对水解产物进行抗氧化性分析得到:当水解时间分别为6.5 h、7.0 h时,抑制脂质过氧化能力、超氧阴离子清除能力达到最大为46.53%、44.25%。结果均表明胰蛋白酶+碱性蛋白酶双酶分段水解工艺能显著提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。

响应面法优化脱酚棉籽蛋白双酶水解的工艺条件

为研究Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶分步水解脱酚棉籽蛋白的最佳条件,以水解度为评价指标,采用Plackett-Burman(PB)设计和Box-Behnken响应面分析法对影响双酶分步水解棉籽蛋白的9个工艺条件进行筛选优化。双酶分步水解脱酚棉籽蛋白的最优操作条件为:先用Alcalase水解蛋白酶在底物浓度(w/v)9.66%,温度60.5℃、pH8.0、酶用量25000U/g的条件下水解150min,灭酶后再用Flavourzyme风味蛋白酶在温度50℃、pH6.0、酶用量26576U/g的条件下水解120min。在此条件下水解液的水解度可达到42.73%。试验结果可为棉籽蛋白多肽的开发利用提供依据。

动物皮胶原蛋白肽的制备及其对体育运动员的影响研究

对以动物皮为原料的胶原蛋白肽制备方法进行总结,通过双酶分步水解法制备了一种动物皮胶原蛋白肽,对该成分影响运动员的肌肉重量与收缩力、减缓运动性疲劳伤害等进行试验分析。结果表明,动物皮胶原蛋白肽的使用能够显著促进运动员大臂围增长且增肌的同时不会对人体肾脏形成代谢压力;使用动物皮胶原蛋白肽能够显著降低人体短时间内尿酸氮的含量,有助于缓解运动员身体疲劳。

超声辅助酶解促进草鱼鳞胶原肽水解进程的内在机制解析

为探究超声辅助酶解促进草鱼鳞胶原肽水解进程的内在原因,分别研究了超声对底物蛋白(草鱼鳞)的分子结构、表面疏水性、粒径等理化特性和蛋白酶酶解能力的影响机制,在此基础上,对超声酶解进程进行了动力学拟合,从酶解动力学角度进一步评估了促进草鱼鳞胶原肽水解进程的“超声-酶”耦合效应。结果表明,适当的超声强度(300 W、20 min)可以使底物蛋白的结构展开,此时其表面疏水性最大、粒径最小,使之更适合后续酶解,但当超声功率大于300 W时,底物蛋白会重新聚集,其中的部分疏水基团被掩埋,不利于酶解的进行。同时,当超声功率为300 W、时间为20 min时,单酶酶解组和分步酶解组的酶解能力从2.35×105、3.41×10^(5) U/g分别提高至3.44×10^(5)、3.86×10^(5) U/g,且表现出显著性差异(P<0.05)。通过动力学模型对超声辅助单酶酶解(r^(2)=0.9888)和分步酶解进程(r^(2)=0.9607)进行了动力学拟合,依据建立的反应动力学方程,证实了超声辅助分步酶解进程更快,研究结果为超声辅助酶解工艺制备胶原肽提供了一定理论基础。

酶法制备火麻肽及其血管紧张素转化酶抑制活性研究

以火麻蛋白为原料,在碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味酶和木瓜蛋白酶4种单酶酶解火麻蛋白的基础上,再优选碱性+中性蛋白酶、碱性+风味酶、碱性+木瓜蛋白酶双酶分步对火麻蛋白进行酶解,酶解物(HPH)及其超滤组分的体外血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性采用高效液相检测法(HPLC)进行测定。结果得到火麻蛋白最佳酶解组合为碱性+中性蛋白酶,最佳工艺条件为:碱性蛋白酶加酶量8000 U/g,pH10.0,酶解温度50℃,酶解时间4 h;中性蛋白酶加酶量8000 U/g,pH7.0,酶解温度45℃,酶解时间4 h,分步酶解物水解度(DH)和ACE抑制活性分别达74.52%和82.14%,但其与超滤各组分对ACE抑制活性差异并不显著。该研究为产业化制备火麻降血压肽提供理论依据。

风味蛋白酶酶解制备中国对虾调味料风味前体物质工艺优化

以中国对虾下脚料为原料,在碱性蛋白酶酶解基础上利用风味蛋白对中国对虾下脚料进行二次酶解,制备中国对虾调味料风味前体物质——酶解液,并考察温度、初始pH、风味蛋白酶用量等单因素对水解度的影响,再通过响应面分析法优化风味蛋白酶酶解工艺。结果表明,最佳酶解工艺条件为:料水比1∶9、风味蛋白酶用量2.2%、初始pH6.4、酶解温度59℃、酶解时间3 h。在此条件下,中国对虾下脚料水解度为54.79%。酶解液中氨基酸含量为33.6862 mg/mL,其中必需氨基酸(如:苏氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸等)含量为27.2543 mg/mL。谷氨酸和赖氨酸的含量有明显提高,极大的增强了鲜味强度。采用分步酶解法制备的酶解液具有诱人、浓郁虾风味,可作为调味基料。

分步酶解酪蛋白制备小分子ACE抑制肽

通过模拟胃肠道消化,采用单酶和复合酶分步水解酪蛋白获得小分子的血管紧张素转化酶(angiotensin-con-verting enzyme,ACE)抑制肽。首先通过胃蛋白酶水解条件的优化获得具有高ACE抑制活性肽。然后以此为底物通过胰蛋白酶和胰凝乳蛋白复合酶水解条件优化获得具有高ACE抑制活性的小分子肽。结果表明:第一步的胃蛋白酶水解最优条件为:[E]/[S]=6%、[S]=0.015g/mL、pH=1.8、t=37℃、t=2h,水解产物稀释10倍后ACE抑制率为84.5%,分子质量集中在2000D以下;第二步的复合酶水解最优条件为:m胰蛋白酶(6%):m胰凝乳蛋白酶(3%)=2:1、pH=7.8、t=48℃、t=5h,水解产物稀释10倍后ACE抑制率为85.9%,分子质量集中在500D以下。研究表明,通过分步酶解选择合适的酶解条件可以获具有较高ACE抑制活性的小分子肽。

蛋白酶分步水解制取金华火腿水解液工艺研究

为进一步提高金华火腿利用率及经济价值,采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶分步水解金华火腿,制备金华火腿酶解液,然后在碱性蛋白酶初步水解金华火腿的基础上,通过响应面分析法对风味蛋白酶酶解工艺条件进行优化。结果表明,优化后的风味蛋白酶第二步酶解条件为料水比1∶5(w/v)、风味蛋白酶用量2.90%、初始pH值5.70、酶解温度45℃、酶解时间3 h。在此条件下,金华火腿的水解度为22.00%。酶解产物中氨基酸含量为干物质重量的48.19%,其中谷氨酸和天门冬氨酸含量明显提高,极大地增强了酶解产物的鲜味强度。分步酶解工艺可制备出高品质的金华火腿风味基料,这对提高金华火腿的利用率和整体价值具有重要意义,同时,本研究结果也为金华火腿风味调味料的开发利用提供了理论基础。

分步酶解法制备黄浆水活性肽

黄浆水是传统豆制品点脑成型过程压榨出的废弃物,富含低聚糖、蛋白质等营养成分。该研究通过比较酶种类及用量、酶解温度、酶解时间对黄浆水蛋白质水解度的影响,采用正交试验优化获得黄浆水短肽最佳分步酶解工艺:(1)酸性蛋白酶加酶量2 000 U/g,pH 4.0,温度55℃,水解2 h;(2)中性蛋白酶8 000 U/g,pH 6.0,温度50℃,水解6 h。在此条件下进行验证,水解度可达25.95%,血管紧张素转化酶体外抑制活性达92.0%。采用酸性蛋白酶和中性蛋白酶分步酶解黄浆水制备短肽,制备条件温和,水解度高,可为豆制品加工废弃物的高值化利用奠定基础。