活动性肺结核患者血清中SAMD9L水平变化及与巨噬细胞相关细胞因子的关系

目的 探讨血清中无菌α基序域9样蛋白(SAMD9L)和巨噬细胞相关细胞因子在活动性肺结核(APTB)患者诊断中的应用价值。方法 回顾性选取2019年5月至2022年5月就诊的APTB患者84例为APTB组,另选取同期84例潜伏期结核感染(LTBI)患者作为LTBI组,并选取同期84例健康志愿者作为对照组。检测3组患者血清SAMD9L、iNOS和Arg-1表达量。Pearson法分析APTB组血清SAMD9L与iNOS、Arg-1表达水平间的相关性;多因素Logistic回归模型分析发生APTB的影响因素。ROC曲线分析SAMD9L、iNOS和Arg-1表达量对APTB的预测价值。结果 APTB组血清中SAMD9L和Arg-1水平显著高于LTBI组和对照组(P<0.05);iNOS水平显著低于LTBI组和对照组(P<0.05)。iNOS水平分别与SAMD9L和Arg-1水平呈负相关(r=-0.405、-0.585,P<0.05),SAMD9L与Arg-1水平呈正相关(r=0.416,P<0.05)。Logistic回归显示iNOS含量是APTB患者的保护因子(P<0.05),SAMD9L和Arg-1含量是APTB患者危险因子(P<0.05)。SAMD9L、iNOS和Arg-1三者联合诊断APTB的结果优于任何一项单独分析(Z三项联合-SAMD9L=1.730,Z三项联合-iNOS=2.839,Z三项联合-Arg-1=2.086;P<0.05);治疗半年后血清中SAMD9L和Arg-1表达水平下降,iNOS表达量上升(P<0.05)。结论 APTB患者血清中SAMD9L与Arg-1表达水平上调,二者与巨噬细胞相关细胞因子关系密切,且三者联合检测对APTB的诊断具有临床意义。

鸡SAMD9L基因真核表达载体构建及其对ALV-J病毒复制的影响

为分析鸡无菌α基序域蛋白9样(SAMD9L)蛋白的生物学特性,构建SAMD9L基因真核表达载体,并探究其对J亚型禽白血病病毒(ALV-J)复制的影响。利用ProtParam、Uniport、TMHMM和String等在线网站分析SAMD9L序列,获得亲疏水性、保守结构域、信号肽表达及互作蛋白等生物信息。构建携带His标签的SAMD9L重组表达载体并进行测序鉴定。采用qRT-PCR技术检测ALV-J感染对SAMD9L表达水平的影响;采用Western blot技术检测过表达SAMD9L对ALV-J复制的影响。结果表明:鸡SAMD9L无信号肽表达,无跨膜结构域,含有无菌α基序超家族保守结域(55—249位氨基酸),其互作蛋白预测为MX1、DDX60、ISG12-2和IFIT5等天然免疫抗病毒蛋白质。ALV-J感染36 h后显著诱导SAMD9L表达(P<0.001),而过表达SAMD9L则显著抑制ALV-J在DF-1细胞中的复制,推测鸡SAMD9L具有抗ALV-J病毒的能力。该研究成功构建了鸡SAMD9L基因真核表达载体,通过生物信息学分析了蛋白质特性,并初步探究SAMD9L与ALV-J感染之间的关系,为进一步阐明鸡SAMD9L的生物学功能及其抗J亚型禽白血病的分子机制奠定了基础。