骨复活汤配合介入对兔SANFH股骨头局部VEGF表达的影响

目的:观察骨复活汤配合股动脉药物灌注治疗实验性SANFH股骨头局部VEGF的表达。方法:用Shwartzman反应和大剂量甲基强的松龙造成兔股骨头坏死模型,造模后第2周随机分为3组,介入组经左侧股动脉注射尿激酶和丹参注射液;骨复活汤配合介入组在介入组基础上,同时骨复活汤灌胃给药;对照组经股动脉注射生理盐水。在治疗后4周,对股骨头标本进行VEGF免疫组化染色。计数VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,并进行统计学分析。结果:骨复活汤配合介入组比介入组能提高VEGF阳性成骨细胞率、阳性软骨细胞率和阳性血管率,改善骨坏死。结论:骨复活汤配合介入能改善骨坏死,其机理在于促进VEGF等细胞因子的分泌从而加速股骨头的再血管化和再骨化进程。

华山壮骨散治疗SANFH作用机制的实验研究

目的:从BMP/Smad通路出发探讨华山壮骨散治疗实验大鼠糖皮质激素性股骨头坏死作用机制的实验研究。方法:将SD大鼠分成5组:A组为正常组,正常喂养不做任何处理,B、C、D、E组均注射醋酸泼尼松龙20 mg/kg,每周两次,复制糖皮质激素性股骨头坏死动物模型,B组为模型组;A、B组给予生理盐水灌胃;C组为阳性对照药壮骨关节丸组;D、E组为华山壮骨散高剂量组、低剂量组(实验高剂量组、实验低剂量组),给药10周。取材,分别取大鼠股骨头和肾脏,采用Real-time PCR法和Elisa法进行mRNA和蛋白表达测定。结果:各组大鼠股骨头、肾组织BMP2、Smad2和26S-PSM均有表达,与正常组比较,模型组股骨头中BMP2和Smad2表达显著降低(P <0. 05),26S-PSM表达有所增加(P <0. 05);与模型组比较,实验高剂量组、壮骨关节丸组股骨头中BMP2 mRNA、Smad2 mRNA表达明显上调(P <0. 05),高、低剂量组股骨头中26S-PSM表达均明显减少(P <0. 05);与壮骨关节丸组相比较,实验高剂量组股骨头中BMP2 mRNA、Smad2 mRNA表达明显上调(P <0. 05),26S-PSM的表达增加(P <0. 05)。结论:华山壮骨散防治糖皮质激素性股骨头坏死的作用机制之一为通过调整BMP/Smad通路的BMP2 mRNA、Smad2 mRNA以及26S-PSM活性而实现。

健脾活骨方对糖皮质激素致血管内皮细胞功能损伤的干预作用

旨在观察健脾活骨方(JPHGF)对激素所致血管内皮细胞功能损伤的干预作用,并通过PI3K/Akt和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号轴探索其相关作用机制。实验采取离体和体外实验相结合的方法,先取正常SD大鼠胸主动脉环,用血管内皮细胞生长因子(VEGF,20μg·L^(-1))和/或甲泼尼龙琥珀酸钠(MPS,0.04 g·L^(-1))进行体外干预,然后加入JPHGF 8、16、32μg·L^(-1)连续作用5 d,统计血管环芽处的微生血管数目、长度和面积;此外,以0.04 g·L^(-1)MPS加入有20μg·L^(-1)VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),再加入JPHGF 8、16、32μg·L^(-1),分别进行迁移、侵袭及管腔形成实验,以观察HUVEC细胞的迁移、侵袭及管腔形成能力,利用蛋白免疫印迹法检测细胞中PI3K、p-Akt、p-ERK、p-JNK的蛋白表达量。结果显示,JPHGF能剂量依赖地改善由MPS诱导降低的大鼠胸主动脉环微血管数目、长度和面积,提高MPS诱导降低的HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成能力,提高HUVEC中PI3K、p-Akt、p-JNK、p-ERK蛋白表达量。证明了JPHGF能通过激活PI3K/Akt和MAPK信号轴发挥对激素所致血管内皮细胞血管生成能力损伤的保护作用,为研究JPHGF治疗激素性股骨头坏死的机制提供合理的借鉴作用,为进一步丰富“健脾活血”治法科学内涵提供实验依据。