基于线粒体自噬PINK1/Parkin信号通路的枳实、麸炒枳实和烫枳实对功能性消化不良大鼠治疗作用比较

目的基于线粒体自噬PINK1/Parkin信号通路对比枳实、麸炒枳实和烫枳实对功能性消化不良(FD)大鼠的治疗作用。方法将36只大鼠随机分为正常组、模型组、多潘立酮组、枳实组、麸炒枳实组、烫枳实组。除正常组外其他各组采用碘乙酰胺灌胃结合夹尾刺激法制作FD大鼠模型。造模结束后各给药组给予相应药液灌胃,模型组和正常组给予等体积生理盐水灌胃,持续14 d。造模和给药时,记录大鼠饮食量、饮水量和体质量。给药结束后,测定大鼠小肠推进率,苏木-伊红(HE)染色观察胃组织损伤情况,Western blot检测自噬相关蛋白PINK1、Parkin、Beclin-1、p62的表达。结果与模型组比较,各给药组小肠推进率提高。在造模期间,与正常组比较,各组大鼠的体质量增长减慢,平均日饮食量降低,模型组大鼠平均日饮水量降低。在给药期间,与模型组比较,多潘立酮组、麸炒枳实组和烫枳实组平均日饮食量增加;与模型组比较,麸炒枳实组PINK1、Parkin蛋白表达增加,烫枳实组p62蛋白表达提高、Beclin-1蛋白表达降低,枳实组Beclin-1蛋白表达降低。结论枳实、麸炒枳实和烫枳实治疗FD的作用机制可能与抑制PINK1/Parkin信号通路激活有关,麸炒枳实对FD大鼠的治疗效果优于枳实和烫枳实。

基于课程思政探讨中药炮制学教学设计——以麸炒枳壳为例

以麸炒枳壳为例,根据中药炮制学学科特色,结合课程思政“立德树人”教学理念,通过挖掘思政元素,探讨中药炮制学课程思政的教学设计,建立具有中药炮制专业特点的育人体系,发挥专业课程育人作用。主要包括教学目标、学情分析、教学预测、教学方法、教学内容、教学反思与改进等,以期为中药炮制学其他章节思政元素挖掘的教学设计提供参考。

枳壳及其炮制品色差值与化学成分的相关性

目的考察枳壳Aurantii Fructus、麸炒枳壳、制枳壳(枳壳发酵后蒸制)色差值与化学成分的相关性。方法色差计测定样品的颜色亮度(L*)、红绿色品坐标(a*)、黄蓝色品坐标(b*),HPLC法测定柚皮苷、新橙皮苷含有量,通过SPSS20.0软件进行相关性分析。结果各色差值与枳壳炮制程度均呈显著相关性,以L*最明显。枳壳L*与柚皮苷含有量呈显著正相关关系,a*与其呈显著负相关关系,而各色差值与新橙皮苷含有量均无显著相关性。2种炮制品与柚皮苷含有量呈显著负相关关系,以制枳壳更明显,而与新橙皮苷含有量均无显著相关性。结论枳壳炮制前后颜色明显变化可能与柚皮苷含有量有关。

不同产地枳壳麸炒品HPLC指纹图谱研究

目的:建立枳壳麸炒品HPLC指纹图谱分析方法。方法:用HPLC测定,以醋酸乙酯超声法提取样品,梯度洗脱,紫外检测波长320 nm,柱温30℃,流速1 mL.min-1。以柚皮苷为参照物分析了10批不同产地的枳壳麸炒品,采用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并以10批枳壳麸炒品相关系数评价指纹的相似性。结果:枳壳麸炒品液相色谱指纹图由11个特征峰构成指纹图谱的特征。所建立的指纹图谱具有稳定、重复的特点。结论:该方法准确、简单,适用于枳壳麸炒品分析,色谱指纹图谱可用于枳壳麸炒品的鉴别和质量控制。

枳壳麸炒品挥发油成分的GC指纹图谱研究

目的建立枳壳麸炒品挥发油成分的GC指纹图谱分析方法。方法采用气相色谱法测定,以水蒸气蒸馏法提取挥发油,FID检测器,采用程序升温,以α-蒎烯为参照物分析了10批不同产地的枳壳麸炒品,采用计算机辅助相似性评价系统对10批枳壳麸炒品指纹图谱的相似度进行评价。结果枳壳麸炒品气相色谱指纹图由12个特征峰构成,所建立的指纹图谱具有稳定、重现性好的特点。结论该方法准确、简单,适用于枳壳麸炒品挥发油成分分析,色谱指纹图谱可用于枳壳麸炒品的鉴别和质量控制。

多指标正交优选枳壳麸炒工艺

目的用正交实验法优选并确立枳壳麸炒工艺。方法以新橙皮苷含量、柚皮苷含量、醇溶性浸出物含量、挥发油含量、性状为指标,采用正交实验法对温度、时间、加麸量三因素,每个因素取三个水平,进行枳壳麸炒工艺优选考察。结果温度、加麸量对实验结果有显著影响,时间对实验结果无显著影响,确定最佳枳壳麸炒工艺为温度190°C,时间150s,加麸量15%麸炒枳壳。结论该工艺合理、稳定性好,可适合枳壳工业化生产和质量控制。

气质联用法分析麸炒对枳实生、鲜品挥发油成分的影响

目的:比较研究枳实生、鲜品及其麸炒品挥发油化学成分及含量的变化。方法:采用GC-MS联用技术分析样品的挥发油化学成分,归一法分析挥发油各成分的相对含量。结果:枳实生、鲜品经麸炒后,挥发油含量及主要组分含量均有一定变化,其中柠檬烯的含量较生品增加了10.4%。共鉴定出26个化合物,各样品主要成分均为柠檬烯,β-芳樟醇,β-蒎烯,1R-α-蒎烯,左旋-β-蒎烯。结论:枳实生、鲜品麸炒前后挥发油化学成分大部分相似,由于加热及辅料影响,挥发油部分组分消失。

枳实生品与麸炒品中4个黄酮类成分表观油水分配系数的比较研究

目的：比较枳实生品和麸炒品中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷4个黄酮类成分油水分配系数。方法：采用摇瓶法和高效液相色谱相结合方法，比较枳实和麸炒枳实水煎液中4个黄酮类成分芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷在正辛醇-水／缓冲盐溶液中的油水分配系数。结果：各个pH点，枳实生品和麸炒品水煎液中4个黄酮类成分的油水分配系数的大小没有规律性变化。但是4个黄酮类成分在pH5、pH7等条件下，麸炒品中的油水分配系数高于生品。结论：枳实麸炒后除新橙皮苷外均有利于其他3个黄酮类成分的分布吸收，这一结果也在一定程度上说明了枳实麸炒后健脾和胃作用增强的机制。

中药枳壳炮制研究进展

目的对枳壳现代炮制的研究进展作一综述。方法采用文献研究法,全面分析枳壳炮制前后化学成分与药理作用的变化,总结出枳壳现代炮制研究进展。结果麸炒法为枳壳的主流炮制方法,但其炮制研究较为单一片面,各研究报道间差异较大,炮制前后化学成分与药理作用变化尚需进一步深入全面的研究。结论以枳壳主要活性成分柠檬烯、柚皮苷、新橙皮苷和辛弗林为指标,建立科学的动物模型,以期找出枳壳炮制前后化学成分含量变化与药理作用的相关性,为枳壳麸炒的规范化研究提供科学依据。

HPLC法测定麸炒枳壳中柚皮苷的含量及其临床用量分析

目的研究麸炒炮制后枳壳中橙皮苷含量的变化并确定其临床用量。方法含量测定采用HPLC法,使用Agilent 1200高效液相色谱仪,Agilent SB C_(18)色谱柱(4.6×250,5μm),甲醇-0.2%冰醋酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min^(-1),柱温25℃,进样量10μL,检测波长320nm;根据测得麸炒枳壳中柚皮苷含量及相应批次药材含量计算转移率及临床用量。结果 10批麸炒枳壳中,橙皮苷的含量在0.980～1.928mg·g^(-1)范围内,对应转移率分别为45.36～89.06%,即每g饮片相当于1.33g生品。结论本研究所用方法能够准确、高效地分析麸炒枳壳中柚皮苷的含量并计算转移率,临床用量分析结果显示,麸炒炮制后枳壳较生品橙皮苷含量存在显著变化。

不同炮制工艺对枳壳质量影响研究

目的:研究不同炮制工艺对枳壳质量的影响。方法:用冷浸法测定枳壳饮片及不同炮制品中水溶性浸出物的含量,用紫外分光光度法测定枳壳饮片及不同炮制品中总黄酮的含量。结果:麸炒枳壳、麸烘枳壳水溶性浸出物的含量均明显高于枳壳饮片,但总黄酮含量均略有下降。比较麸炒枳壳和麸烘枳壳发现,两种炮制工艺对枳壳的有效成分含量影响无显著差异。结论:炮制可增加枳壳有效成分溶出量,麸烘可代替传统麸炒工艺。

麸炒枳壳标准汤剂质量研究

目的为麸炒枳壳标准汤剂的质量控制提供可靠方法。方法依照标准汤剂的制备要求,制备13批麸炒枳壳标准汤剂,采用HPLC法测定标准汤剂中柚皮苷和新橙皮苷含量,计算其转移率,测定汤剂的出膏率,并建立麸炒枳壳标准汤剂的HPLC特征图谱。结果13批麸炒枳壳标准汤剂中柚皮苷和新橙皮苷转移率分别是21.1%~37.1%、25.2%~40.9%,出膏率为19.0%~30.5%。特征图谱中标定了6个共有峰,通过与对照品比较,分别为新北美圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和枳属苷,对13批麸炒枳壳标准汤剂进行相似度评价,其相似度均大于0.99。结论麸炒枳壳标准汤剂制备规范,测定方法精密度、稳定性和重复性良好,特征图谱相似度高,可为麸炒枳壳标准汤剂的质量控制提供参考。

枳实生制品提取液中黄酮类成分及其单体在Caco-2细胞模型中的吸收转运研究

目的比较研究枳实和麸炒枳实中黄酮类成分橙皮苷、新橙皮苷及其单体在Caco-2细胞模型中的吸收转运机制,从而解析炮制原理。方法利用Caco-2细胞模型研究枳实和麸炒枳实中黄酮类成分橙皮苷、新橙皮苷及其单体的双向跨膜转运特征,通过高效液相色谱法测定和分析枳实炮制前后橙皮苷、新橙皮苷经细胞转运后的含量变化,计算表观渗透系数(Papp),考察时间对二者吸收和转运的影响。结果麸炒枳实的橙皮苷和新橙皮苷双侧表观渗透系数值总体上大于枳实,各药液双侧转运速率均在60 min较高,之后随着时间的延长,呈现降低趋势。结论枳实和麸炒枳实中的黄酮类成分橙皮苷、新橙皮苷及其单体具有良好的肠吸收特性,麸炒能够增加枳实内这两种黄酮类成分口服后的肠吸收,且在麸炒后橙皮苷的变化较为明显。

麸炒枳实炮制工艺研究及质量分析

目的多指标优选麸炒枳实最佳炮制工艺。方法以特征图谱为定性指标,饮片性状为炮制程度判断指标,辛弗林、柚皮苷、新橙皮苷的质量分数为定量指标,选取炒制时间、炒制温度、加麸量为麸炒枳实炮制主要因素,采用正交实验设计与主成分分析法优选麸炒枳实炮制工艺。结果对15批麸炒枳实建立特征图谱,标定共有峰7个,并指认了柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林4个化合物。通过正交方差分析与主成分分析,确定麸炒枳实最佳炮制工艺为:每100 kg麸炒枳实用麦麸量为10 kg,炒制温度为220℃,炒制时间为5 min。不同产地生品与其炮制品特征色谱概貌一致,整体分离度较好。结论优选的麸炒枳实炮制工艺切实可行。

麸炒枳壳标准汤剂质量标准研究

目的建立麸炒枳壳标准汤剂的质量标准。方法依据《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》,取道地及主产区江西、湖南等地的枳壳药材,制备12批麸炒枳壳标准汤剂,计算出膏率;采用超高效液相色谱(UPLC)法测定标准汤剂中指标成分的含量、转移率,建立特征图谱。色谱柱为Agilent SB C18柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.4 mL/min,检测波长为320 nm,柱温为30℃,进样量为2μL。结果12批麸炒枳壳标准汤剂的平均出膏率为26.01%。共标定11个共有峰,指认8个成分,分别为芸香柚皮苷(峰1)、柚皮苷(峰2)、橙皮苷(峰3)、新橙皮苷(峰4)、川陈皮素(峰10)、橘红素(峰11)、水合橙皮内酯(峰5)、马尔敏(峰9)。12批饮片中,8个指标成分含量测定的相对偏差(SD)波动范围为0.12~11.68 mg/g;12批标准汤剂中,8个指标成分含量测定的SD波动范围为0.11~19.97 mg/g,转移率的SD波动范围为6.69%~21.96%,芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、水合橙皮内酯、马尔敏、川陈皮素、橘红素的平均转移率分别为50.66%,50.13%,14.98%,53.04%,65.90%,27.00%,37.94%,19.97%。结论不同产地枳壳样品中柚皮苷含量和芸香柚皮苷提取率差异大,可能与不同产地样品的质地有关。所建立的方法可为麸炒枳壳标准汤剂的质量标准制订提供参考。

石斛夜光丸质量研究

目的:基于石斛夜光丸的标准和检验,考察石斛夜光丸的质量情况,分析中药材及中成药的问题。方法:结合标准和市场中药材使用情况,从真实性和安全性两方面对石斛夜光丸质量及生产投料情况进行分析。结果:个别成分存在掺伪或替代投料的情况。结论:建议药品质量控制应从源头开始,加强源头控制,严格把关,保证中药材、中药饮片及中成药的疗效和质量。

HPLC-MS/MS法同时测定更年宁中11个成分

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定更年宁中哈巴苷、红景天苷、特女贞苷、党参炔苷、蟛蜞菊内酯、哈巴俄苷、王不留行黄酮苷、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ共11个成分的含量。方法:采用C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为25℃,进样量为1μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI),电离模式为ESI-(哈巴苷、红景天苷、特女贞苷、党参炔苷、蟛蜞菊内酯、哈巴俄苷)和ESI+(王不留行黄酮苷、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ),多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果:11个成分的线性范围分别为1.485~29.71、1.620~32.40、7.801~156.0、0.518~10.35、0.167~3.333、0.359~7.179、1.455~29.10、1.520~30.40、0.160~3.205、0.143~2.864、0.157~3.136μg·mL^(-1),r均≥0.9980;平均回收率(n=6)在95.9%~102.6%,RSD在0.90%~3.0%。5个企业生产的10批更年宁样品中上述11个成分的含量分别为14.8~104.5、37.6~288.5、335.8~1332.8、6.2~10.1、6.6~61.8、13.7~75.1、57.4~132.8、16.9~70.6、11.8~33.9、3.4~15.4、6.5~12.9μg·g^(-1)。结论:本方法灵敏、准确,可用于更年宁的质量控制。

中药枳壳“宽中除胀”作用及炮制增效机制分析

目的:明确枳壳"宽中除胀"的作用机制。方法:将SD大鼠均分为空白组,生品枳壳高(10g/kg,下同)和低(1g/kg,下同)剂量组,麸炒枳壳高、低剂量组,蜜麸枳壳高、低剂量组,功能性消化不良(FD)模型组以及多潘立酮片组,每组6只,采用蛋白质免疫印迹(Western Blot)与免疫组化(IHC)法检测组织中胃泌素(GAS)和生长抑素(SS)的蛋白表达水平与阳性细胞分布情况。结果:Western Blot和IHC结果均显示模型组大鼠下丘脑和胃窦GAS表达较空白组显著降低(P<0.01),SS表达较空白组显著增加(P<0.01);各剂量给药组下丘脑和胃窦GAS、SS表达较之模型组均有不同程度上调和下调;与模型组比较,多潘立酮组下丘脑GAS、SS表达无显著性变化,而胃窦GAS、SS表达显著上调和下调(P<0.01)。枳壳各炮制品中,均以蜜麸枳壳对于FD大鼠下丘脑和胃窦GAS、SS的调节作用最佳,且低剂量组调节作用优于高剂量组。结论:枳壳经炮制后可增强宽中除胀作用,其机制可能与药物能调节下丘脑和胃窦GAS、SS蛋白表达,恢复外周胃肠激素分泌紊乱有关;麸炒品与蜜麸炒品均能有效增强生品枳壳对FD的治疗作用,且以蜜麸炒品炮制作用为佳。

基于调控大鼠胃肠c-kit和SCF mRNA表达的枳壳燥性及炮制减燥机制分析

目的：明确枳壳燥性的产生机制,并比较不同炮制品对正常大鼠胃窦、结肠c-kit和干细胞因子（SCF）mRNA表达的影响。方法：将SD大鼠分为空白组,生品枳壳高（10 g·kg（-1）,下同）和低（1 g·kg（-1）,下同）剂量组,麸炒枳壳高、低剂量组,蜜麸枳壳高、低剂量组及慢传输型便秘（STC）模型组,各给药组大鼠灌服相应药液1次/d,模型组大鼠灌服复方地芬诺酯片溶液,空白组大鼠灌服同等体积生理盐水,所有实验动物均连续给药30 d。在第30 d处死大鼠并迅速剖取胃窦与结肠组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应扩增仪检测组织中c-kit和SCF mRNA的表达水平。结果：与空白组比较,生品枳壳组胃窦与结肠的c-kit和SCF mRNA表达均显著降低（P〈0.01）。与模型组比较,生品枳壳高剂量组所有检测指标均无显著性差异;麸炒枳壳组、蜜麸枳壳组胃窦与结肠的c-kit和SCF mRNA表达有显著增加（P〈0.05,P〈0.01）。结论：长期高剂量服用枳壳生品能显著抑制正常大鼠胃肠道c-kit和SCF mRNA的表达,进而影响胃肠道Cajal间质细胞的数量和功能,从而造成肠燥便秘;麸炒枳壳与蜜麸枳壳均能有效缓和生品所产生的肠道燥性效应,且蜜麸炒品炮制减燥作用优于麸炒品。

枳壳麸炒前、后主要活性成分的含量变化

目的:考察枳壳饮片麸炒前、后主要活性成分的含量变化。方法:采用RP-HPLC测定柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、川陈皮素、橘皮素、水合橘皮内酯、橘皮内酯、马尔敏和葡萄内酯的含量,考察10批枳壳饮片麸炒前、后主要活性成分的含量变化。结果:麸炒后枳壳饮片中柚皮苷、新橙皮苷、辛弗林、川陈皮素、橘皮素、水合橘皮内酯、橘皮内酯和马尔敏含量均略微下降,而葡萄内酯含量明显上升。葡萄内酯小剂量(0.6 mg·kg-1)对正常小鼠小肠运动具有促进作用,高剂量(9 mg·kg-1)则具有抑制作用。结论:麸炒后葡萄内酯含量的升高是枳壳炮制的目的,可通过主要活性成分的变化规律阐述枳壳饮片的炮制机制。