速尿引起的小鼠耳蜗血管纹缺血缺氧性病变

目的观察腹腔注射速尿引起的小鼠耳蜗血管纹缺血缺氧病变过程,探讨速尿破坏蜗管外壁开放血-迷路屏障的最佳时机。方法选择42只听力正常的健康CBA小鼠用于本实验。其中24只小鼠被平均分为3组,全麻下分别按照每公斤体重400毫克或200毫克或100毫克的剂量腹腔注射速尿,同时监测注射速尿前后的听性脑干反应的变化,在用药后1周终止实验并记录各组动物的存活数量,以确定不同剂量速尿对听觉功能的影响及其安全性。另外18只小鼠被平均分为6组,分别在注射速尿前和注射速尿后10分钟,30分钟,1小时,3小时和6小时随机处死3只小鼠,用于观察腹腔注射速尿后引起的血管纹缺血缺氧性病理改变过程。受试动物的一侧耳蜗制作成全耳蜗螺旋韧带铺片并用伊红染色,观察血管纹毛细血管内的红血球充盈情况以评估血管纹的供血在注射速尿后不同时间的缺血程度,另一侧耳蜗用环氧树脂法包埋后切片,观察血管纹上皮细胞因组织缺血缺氧而引起的病理学改变。结果按照每公斤体重400毫克的剂量腹腔注射速尿引起的小鼠死亡率约为75%,按照每公斤体重100毫克剂量腹腔注射速尿引起的小鼠听性脑干反应仅发生短时间的中等程度阈移,而按照每公斤体重200毫克剂量腹腔注射速尿的小鼠死亡率小于15%,但可造成较长时间的严重耳聋,因此按照每公斤体重200毫克的剂量腹腔注射速尿是实现小鼠暂时性耳聋的安全有效剂量。耳蜗螺旋韧带铺片结果显示按照每公斤体重200毫克的剂量腹腔速尿注射后10分钟即开始发生供血减少;用药后30分钟和1小时,血管纹呈现许多空血管;用药后3小时,毛细血管内的红细胞数量开始有所增加;但直到用药后6小时仍未完全恢复。血管纹切片结果显示,用药后10分钟,血管纹上皮细胞已经开始因缺氧而发生肿胀;用药后30分钟和1小时,血管纹细胞内出现许多空泡;用药后3小时和6小时,血管纹上皮细胞的积水肿胀仍然十分严重。结论腹腔注射速尿后可在数分钟内阻断供应耳蜗外侧壁的血流,血管纹的供血在用药后6小时逐渐趋向于恢复,但因缺血引起的血管纹细胞缺氧性肿胀和破坏还可持续一段更长的时间。从腹腔注射速尿后1小时至少到6小时可能都是蜗管外壁血-迷路屏障因缺氧变性而暂时性开放的重要时机。