鲟鱼皮GPC的制备及其对PC12细胞的保护作用

目的:对比热解和酶解法所得明胶-肽复合物(GPC)的制备效率和活性。方法:以鲟鱼皮为原料,以GPC得率为指标,优化鲟鱼皮预处理条件及热解法制备GPC的条件。以热解法所得最大分子质量的GPC为底物,以三氯乙酸可溶性寡肽(TCA-SP)为指标,研究几种蛋白酶对该底物的水解效率。比较TCA-SP得率最高的热解法和酶解法制备GPC对正常和D-半乳糖致氧化损伤PC12细胞活力的影响。结果:碱处理对鲟鱼皮GPC提取无明显贡献,酸处理对GPC提取率影响较大,最适条件为0.25 mol/L HCl处理鲟鱼皮6 h。高温热解法制备GPC的最适条件为100℃提取2 h,此时GPC和TCA-SP得率最高,分别为34.72%,31.22%。低温热解法以60℃提取1 h所得GPC的黏度最大,TCA-SP最低,提示该产物分子质量最大,结构最完整。以GPC-60℃-1 h为底物,分别用几种蛋白酶单独水解,其中中性蛋白酶水解0.5 h所得GPC中的TCA-SP含量最高(28.74%)。GPC-100℃-2 h和GPC-N-0.5 h底物在质量浓度为50~1000μg/mL范围,对正常PC12细胞活力均无影响。在质量浓度为12.5~200μg/mL范围对D-半乳糖所致PC12细胞氧化损伤均有一定的保护作用,且两者间无明显差异。结论:高温热解法和中性蛋白酶水解法所得GPC中的TCA-SP含量及对PC12的保护作用相近。

鲟鱼鱼皮胶原蛋白的提取及其理化性能分析

从鲟鱼鱼皮中分别提取、纯化酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对鲟鱼鱼皮胶原蛋白分子结构组成及理化性能进行测定和分析,并与哺乳动物来源的牛跟腱胶原进行比较研究。结果表明:提取所得的鲟鱼鱼皮胶原和牛跟腱胶原均为典型的Ⅰ型胶原;鲟鱼鱼皮胶原ASC和PSC的氨基酸组成和蛋白二级结构基本一致,但与牛跟腱胶原有较明显的差异性;胶原蛋白的理化性能分析结果表明:鲟鱼鱼皮胶原蛋白ASC和PSC的热变性温度(28.04、28.13℃)明显低于牛跟腱胶原蛋白的变性温度(42.81℃);在溶液状态下,牛跟腱胶原蛋白更容易形成分子间的聚集体且展现出比鲟鱼鱼皮胶原蛋白更好的耐酶降解能力。

酸处理对酶法提取鲟鱼皮胶原多肽的影响

以人工养殖的鲟鱼鱼皮为研究对象,通过单因素实验比较乳酸、柠檬酸、乙酸对酶法提取鲟鱼皮胶原多肽的影响,并考察了酸溶胀浓度、溶胀固液比、溶胀时间及溶胀温度对其的影响。在此基础上利用正交实验对提取鲟鱼皮胶原蛋白肽的酸处理工艺进行优化。结果表明,采用溶胀酸为乳酸,在质量浓度为3%,溶胀固液比为1∶5,溶胀时间为2h,溶胀温度为30℃的条件下,鲟鱼皮胶原蛋白肽的水解度为43.58%,短肽得率为55.84%,水解度比不经酸溶胀的要高出23.08%。

超滤纳滤在鲟鱼皮胶原蛋白肽精制中的应用

利用聚砜卷式超滤、纳滤膜,对鲟鱼鱼皮胶原蛋白肽酶解液精制、脱盐处理,优化其超滤、纳滤条件,以达到脱盐和精制的效果。结果表明,利用3 000 Da超滤膜对鲟鱼胶原蛋白肽精制最优工艺条件为:底物浓度为20 g/L,pH为7,压力为0.2 MPa,温度为20℃;纳滤膜对鲟鱼胶原蛋白肽脱盐最优工艺条件为:底物浓度25 g/L,pH为7,压力为0.5 MPa,温度为20℃。在此条件下,超滤蛋白得率达到80%,纳滤脱盐率达到95.9%以上,短肽回收率高达96.2%,冻干后,蛋白质含量为91%,通过HPLC检测,分子量1 000 Da以下的含量高达97.89%。

施氏鲟皮肤的组织学观察

利用石蜡切片和H E染色技术,观察了体质量50~100 g 1龄施氏鲟Acipenser schrenckii头部、下颌部、背部和腹部皮肤的组织结构。结果显示:施氏鲟各部位皮肤组织结构基本相似,均由表皮层和真皮层组成。表皮层主要由腺层和生发层组成,真皮层由疏松层和致密层组成。不同部位皮肤厚度不同,下颌部表皮层和真皮层最厚,分别为57.70μm和214.38μm;头部最薄分别为29.26μm和126.38μm。不同部位表皮层的分泌细胞种类比较单一,均为球形的黏液细胞;棒状细胞为单层的长柱状细胞,整齐规则紧密地排列在基底层细胞之上。头部黏液细胞数量少于下颌、背部和腹部,但各部位黏液细胞的数量均显著多于其他鱼类。施氏鲟表皮层粘液细胞的数量多与其抗菌感染和寄生虫侵袭、调解皮肤渗透作用及保持身体润滑等作用有关。

真空贴体包装对鲟鱼片冷藏过程中品质变化的影响

本研究旨在探究4℃冷藏过程中真空贴体包装鲟鱼片的品质变化规律。以普通真空包装、托盘包装作对比,测定了冷藏过程中鲟鱼片菌落总数、硫代巴比妥酸反应产物(thibarbituric acid reactive substances,TBARS)值、挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)含量、生物胺含量、ATP及其关联物含量与K值等化学指标,pH值、感官得分、色泽、质构等物理指标,以及微生物菌落总数。结果表明:与普通真空包装(6 d)和托盘包装(3 d)相比,真空贴体包装可将鲟鱼片在4℃冷藏条件下的货架期延长至9 d,并可有效抑制鲟鱼片TBARS值、TVB-N含量、总生物胺含量、次黄嘌呤含量、K值、b*值等指标的上升和弹性、硬度、鲜味物质肌苷酸含量的下降速度。此外,真空贴体包装可增加产品美观性,提高消费者购买欲,因此具有广泛应用于水产品包装的前景。

鲟鱼皮的组织学研究及其在皮革中的应用

主要对鲟鱼皮和硬鳞进行了组织学研究,探讨了鲟鱼皮中胶原纤维、弹性纤维、纤维间质以及鱼硬鳞的结构与分布状况,最后对其应用前景进行了展望。

鲟鱼皮研究现状及其发文统计分析

提高鲟鱼皮利用率、降低鲟鱼加工成本的研究日益受到关注.以鲟鱼皮发文为主题,统计分析了科学引文索引、工程索引和中国知网中有关鲟鱼皮文献的发文数量、研究方向、热点和研究国家等,并从文献计量学角度对该领域的研究进行整理归纳.发现鲟鱼皮研究文献在2006～2009年期间有一个明显的上升趋势;涉及到的主要研究方向是渔业、海洋淡水生物学和兽医学;从鲟鱼皮中提取胶原蛋白成为目前研究热点.结合近年来鲟鱼皮开发利用现状,认为我国鲟鱼皮研发利用具有非常广阔的前景,旨在给鲟鱼养殖业发达的区域提供参考.

熬胶工艺对鲟鱼鱼皮胶冻品质的影响

为充分利用鲟鱼皮资源,创新鲟鱼皮食品种类,采取热水提取的方法,开发鲟鱼鱼皮胶冻产品,确定最佳加工工艺并探究加工过程中的变化情况。结果表明,最佳熬胶条件为:熬胶温度80℃,熬胶料液比1∶4,熬胶时间2h。在此条件下得到的鲟鱼鱼皮胶冻的凝胶强度为168.16g;色泽L^*为19.3,a^*为8.71,b^*为2.25;胶液中胶原蛋白的回收率为32.63%,可溶性固形物含量为4.90%;上述条件下胶冻的微观网络结构清晰,孔隙较均匀;成冻完整,弹性好,硬度适中,色泽明亮,感官接受度好。

鲟鱼皮中二肽基肽酶-IV抑制肽的分离纯化与鉴定

为从鲟鱼皮中分离提取出二肽基肽酶-IV(dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV)抑制活性肽,以鲟鱼皮胶原蛋白为主要材料,利用蛋白酶进行酶解,以DPP-IV抑制率为主要考察指标,在单因素试验的基础上,进一步利用响应面法优化了鲟鱼鱼皮中DPP-IV抑制肽的制备工艺条件,确定最佳酶解条件为:酶解温度50℃、料液比1∶100(g/mL)、pH 6.12、加酶量10170.35 U/g、酶解时间12.12 h。在此基础上,通过超滤、凝胶层析及反相高效液相色谱的方法对酶解产物进行分离纯化;采用液相色谱-串联质谱法对多肽进行鉴定,结果显示纯化后具有DPP-IV抑制活性肽氨基酸组成为:甘氨酸-脯氨酸-丝氨酸-甘氨酸-亮氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-丙氨酸-赖氨酸(GPSGLDGAK),IC_(50)值可达(61.27±1.16)μmol/L。本研究结果可为利用鲟鱼皮生产新型的生物活性成分提供参考。

鲟鱼皮软包装冷冻调理食品加工工艺

试验以鲟鱼皮为原料,通过试验确定了鲟鱼皮软包装冷冻调理食品的脱腥工艺、调料配方、灭菌条件,以及适于工业化生产的配方与工艺条件。筛选得出最佳脱腥工艺条件:碳酸氢钠1%,氯化钠1.8%,乙醇5%;最佳调味料配方:食盐2.5%,味精1.5%,白砂糖2.0%,黄酒2.5%,芝麻油3.0%;最佳灭菌条件:温度100℃,时间15 m in。

6种鲟鱼鱼皮营养评价与组织学分析

以西伯利亚鲟、俄罗斯鲟、达氏鳇、欧洲鳇、大型杂交鲟(达氏鳇♀×史氏鲟[QX(Y12]♂[QX)])以及小型杂交鲟(西伯利亚鲟♀×史氏鲟[QX(Y12]♂[QX)])的鱼皮为研究对象,对其基本营养成分、矿物质含量、氨基酸和脂肪酸组成以及组织学特性进行分析,比较和评价这6种鲟鱼鱼皮营养成分和组织学特性的异同。试验结果显示,6种鲟鱼鱼皮中均富含胶原蛋白(21.85%~30.47%),且呈味氨基酸所占比例高达52.19%~53.04%,脂肪酸和矿物质元素种类丰富。欧洲鳇的粗蛋白含量(37.21%)最高;达氏鳇的不饱和脂肪酸含量(27287.63μg/g)最高且呈味氨基酸占比(53.04%)最高;俄罗斯鲟的矿物质元素含量丰富,其中钙元素含量(18101.08 mg/kg)最高。组织学分析表明,达氏鳇、欧洲鳇及大型杂交鲟的胶原纤维束紧密粗大,而西伯利亚鲟、俄罗斯鲟和小型杂交鲟的胶原纤维束细小疏松。试验结果可为促进鲟鱼鱼皮的高值化利用和开发应用提供科学依据。

超声波对鲟鱼皮酸溶性胶原蛋白提取及理化特性的影响

以鲟鱼皮为原料,研究超声波辅助酸提取对鲟鱼皮酸溶性胶原蛋白提取率和理化特性的影响。结果显示,超声波辅助酸法制备的胶原蛋白(UASC)提取率(27.527%±0.65%,干重)明显高于常规酸提法制备的胶原蛋白(ASC)提取率(7.330%±0.42%,干重)。SDS-PAGE和紫外-可见光谱显示ASC和UASC均为I型胶原蛋白;傅里叶变换红外光谱、酰胺I带的光谱拟合分析以及X射线衍射分析结果显示ASC和UASC均保持较完整的三螺旋结构,UASC的结构稳定性高于ASC;胶原蛋白黏度分析和差示扫描量热分析结果显示UASC的热稳定性高于ASC;扫描电镜结果显示ASC和UASC微观结构均呈现多孔结构。结论:超声波辅助酸提取法可有效提高鲟鱼皮胶原蛋白的提取率,超声波对鲟鱼皮胶原蛋白结构没有造成破坏,反而提高了其结构稳定性和热稳定性。本研究结果对超声波辅助用于鲟鱼皮胶原蛋白的提取提供了理论参考。

体重规格对杂交鲟肌肉与皮组织中营养成分的影响

为了给杂交鲟(达氏鳇♀×史氏鲟♂)深加工利用提供基本借鉴,以三种不同规格(1500.05±1.50)g、(3002.25±2.55)g和(4505.25±4.15)g的杂交鲟为研究对象,测定其肌肉及鱼皮组织的营养成分。结果显示,(3002.25±2.55)g杂交鲟鱼的肌肉和鱼皮占体重比例在三组为最高,且显著高于(1500.05±1.50)g组(P<0.05)。随着取样鱼体质量的增大,肌肉及皮组织的胶原蛋白、必需氨基酸、鲜味氨基酸和氨基酸总和均呈先升后降趋势,中等规格(体质量为(3002.25±2.55)g)的杂交鲟中最高。测得肌肉的第一限制性氨基酸为蛋氨酸(methionine,Met)+半胱氨酸(cysteine,Cys),而缬氨酸(valine,Val)为鱼皮的第一限制性氨基酸;根据WHO/FAO和CS模式对各组进行计算结果表明,体质量为(3002.25±2.55)g规格下的杂交鲟氨基酸均衡性最好且营养价值最适合食品加工利用。从杂交鲟的肌肉和皮组织中检测出的脂肪酸种类数量相同,肌肉的饱和脂肪酸含量低于皮组织,皮组织的单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量低于肌肉。三种鲟鱼的肌肉和皮组织中所测必需矿物质元素含量均随体重规格增大呈先升后降趋势但均不显著(P>0.05),其中钠、镁和钾的含量在两个组织中均为前三位。研究结果表明,体重规格影响杂交鲟肌肉及鱼皮的营养成分组成,(3002.25±2.55)g体质量的杂交鲟鱼营养成分品质最平衡适合深度加工利用。

鲟鱼皮浸水工序烂面的原因及其影响

以人工养殖杂交鲟鱼皮为原料进行制革时,浸水工序有时会出现烂面事故,并且在浸灰和无盐浸酸时皮的柔软度变化不明显,理解这些现象发生的原因有助于改善鲟鱼皮制革工艺。用制革理论分析出可能的因素有浸水工序的碱性蛋白酶的加入量、水洗工序使用30℃温水浸泡和用6%戊二醛溶液涂刷皮面、浸灰工序厄灰特的用量,通过设计单因素对比实验的方法来寻找每个问题对应的原因。结果表明,碱性蛋白酶的用量超过了0.6%且作用时间超过了15 h是导致烂面的主要原因,也间接导致了浸灰和无盐浸酸过程皮的柔软度变化不明显。建议在水温6℃左右时,鲟鱼皮制革浸水工序的碱性蛋白酶的使用量最好不超过0.6%且作用时间不超过15小时。

酶法制备鲟鱼皮胶原蛋白多肽及其抗氧化活性研究

该研究以鲟鱼皮为原料利用碱性蛋白酶水解制备胶原蛋白肽,进行了鲟鱼皮基本成分分析,酶解条件优化和酶解产物抗氧化活性研究。结果表明,最佳酶解条件为pH 9,温度55℃,添加酶质量分数3%,酶解时间5 h时水解度为22.0%。酶解液经超滤分离得到4种不同分子质量范围的胶原蛋白肽组分SSCP-I(分子质量>10 000 Da)、SSCP-II(分子质量=5 000~10 000 Da)、SSCP-Ⅲ(分子质量=1 000~5 000 Da)和SSCP-IV(分子质量<1 000 Da)。其中(分子质量=1 000~5 000 Da)SSCP-Ⅲ对超氧阴离子自由基的清除能力最高,其半抑制清除浓度IC 50为5.938 g/L。该研究为鲟鱼皮的综合加工和高值化利用提供了理论指导。

酶解法制备鲟鱼皮活性肽条件优化及抗氧化能力

为提高从鲟鱼皮中提取的生物活性肽含量,以鲟鱼皮胶原蛋白为主要材料,以蛋白酶酶解后的肽得率为主要考察指标,在单因素试验基础上利用正交试验分析加酶量、酶解温度、酶解时间对鲟鱼皮活性肽得率的影响,并优化酶解条件。在此基础上以新鲜猪肉为模型,考察鲟鱼皮活性肽溶液处理对猪肉组织抗氧化酶(总超氧化物歧化酶(total-superoxide dismutase,T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase,GST))活力的影响。结果表明:酶解鲟鱼皮胶原蛋白的最适酶为碱性蛋白酶,最佳工艺条件为加酶量12000 U/g、酶解温度60℃、酶解时间4 h,在此条件下,肽得率为(12.59±0.98)%;鲟鱼皮活性肽可以提高猪肉组织T-SOD、GSH-Px和GST活性,具有抗氧化功效。

鲟鱼皮二肽基肽酶-Ⅳ抑制肽咀嚼片的制备工艺优化

针对市场上含有鲟鱼皮二肽基肽酶-Ⅳ(Dipeptidyl peptidase Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制肽咀嚼片的相关产品较少的问题,采用湿法造粒技术和模糊数学法分析方法及单因素实验、响应面试验及正交试验,对咀嚼片配方及制备工艺进行优化。结果表明:咀嚼片最优配方为肽粉添加量46.52%,木糖醇添加量23.94%,CMC-Na添加量7.88%,硬脂酸镁添加量7.00%,奶粉及微晶纤维素添加量分别为10%与4.66%;在转台速度20 r/min,充填深度11 mm,充填压力28 kN,原料粒度350目的制备条件下,制得的咀嚼片硬度适中,表面光滑且色泽均匀,模糊数学分析法综合得分为69.75分。本研究通过辅助加料配合湿法造粒技术,对鲟鱼皮DPP-Ⅳ抑制肽咀嚼片的配方及制备工艺进行优化,旨在为咀嚼片产品的制备提供理论支持。

NaHCO_(3)胁迫下杂交鲟皮肤的转录表达特征

为了探明碱胁迫对杂交鲟鲟龙1号皮肤生理功能的影响,采用转录组测序的方法和皮肤组织学切片研究观察了碱胁迫与正常养殖水质条件下杂交鲟皮肤组织的分子特征和组织结构。结果发现,对照组与胁迫组差异表达基因总数量(DEGs)为1849个,其中1302个基因在胁迫组的皮肤组织中上调,547个基因下调。对差异表达基因进行GO聚类,主要富集在胞浆钙离子浓度的调节、肌肉收缩、肌钙蛋白复合物、肌钙蛋白T结合、肌钙蛋白C结合等7个GO term上。KEGG富集分析发现,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,蛋白质的消化和吸收,淀粉和蔗糖代谢等为显著富集通路。代谢通路互作网络分析发现,碱胁迫下鲟龙1号皮肤核心代谢途径为黏着斑、蛋白质消化吸收和血小板活化、补体和凝血级联及缺氧诱导因子-1信号通路等途径为主效途径。组织切片结果显示,杂交鲟在碱胁迫下皮肤组织和肾脏组织受到严重损伤,肾小球和肾小管发生明显皱缩,远曲小管萎缩尤为明显,肾小球上皮细胞体积减小,管壁变薄甚至脱落;皮肤组织的黏液细胞数量随碱度的升高而增多,棒状细胞细胞核发生固缩现象,在碱胁迫下排列更加紧密。揭示了鲟龙1号皮肤组织碱胁迫响应相关基因的总体表达特征,同时可为鲟鱼盐碱驯养提供参考。

响应面法优化鲟鱼皮胶原蛋白多肽的酶解工艺

为了解决胶原蛋白多肽制备得率低的问题,以鲟鱼-甲骨板皮胶原蛋白多肽得率为主要指标,在单因素试验基础上,进一步利用响应面模型试验确定加酶量、提取时间、液料比3个因素的最优条件,并建立了关系模型。试验结果表明:影响鲟鱼鱼皮胶原蛋白多肽得率的3个因素主次顺序为:液料比>酶解时间>加酶量,最优提取工艺为:0.5 mol/L的乙酸与原料之间的液料比为14.02,加酶量为1.69%,提取时间为8.51 h。在此条件下胶原蛋白多肽得率为78.86%,且产物主要为小分子胶原蛋白,峰值分子量为3719 u。