盐泽螺旋藻对染料的吸附性能研究

本文研究了经过一定处理后失活的盐泽螺旋藻(Spirulina subsala)对七种染料的吸附行为;同时探讨了不同重金属对失活的盐泽螺旋藻吸附染料的影响.结果表明失活盐泽螺旋藻对七种染料的吸附行为均能较好地符合Freundlich及Langmuir等温吸附方程;对七种染料的吸附能力由强到弱依次为:碱性艳蓝BO>活性艳蓝KN-R>酸性大红4BS>深棕MM>黑G>湖蓝SB>黑ATT;重金属Cu,Ni的存在可显著促进染料的生物吸附.

高纯度藻蓝蛋白分离纯化及光谱特性研究

藻蓝蛋白（ＰＣ） 具有特征性吸收光谱和荧光光谱， 是一种新颖的荧光分子探针． 为了获取高纯度ＰＣ， 经过反复探索研究建立了ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００ 、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｄｅｘＡ２５、ＨＡ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００ 的分离纯化程序。此法效果理想： ＰＡＧＥ显示为单条电泳带； 纯度值（ Ａ６１５／ Ａ２８０） 高达１４，

百草枯和H_2O_2预处理提高盐泽螺旋藻对铅的耐受性

用 10μmol· L-1的百草枯 ( Paraquat)和 2 mmol· L-1的 H2 O2 对盐泽螺旋藻( Spirulina subsalsa)作预处理 ,以诱导提高藻细胞内超氧物歧化酶 ( SOD) ,过氧化氢酶 ( CAT)和过氧化物酶 ( POD)的活性 ,随后用 4 0 mg· L-1的 Pb2 +进行胁迫试验 .实验结果表明 ,预处理组的藻细胞生长量和光合速率的下降幅度明显较未预处理组小 ;预处理组的 SOD,CAT活性虽有衰减 ,但与未预处理组相比仍保持较高的水平 ,有效地抑制了藻细胞内 O-·2 和丙二醛 ( MDA)的积累 ;预处理组 POD活性的升幅介于未预处理组和正常生长的藻细胞之间 .可以推断 ,诱导提高藻细胞抗氧化的能力 ,有利于减轻 Pb2

酚类化合物的生物吸附特征与其结构关系

选用经处理过的盐泽螺旋藻为吸附剂，研究其对１０种酚类化合物的吸附行为。结果表明：盐泽螺旋藻对苯酚、邻苯二酚、对苯二酚、邻氨基酚、对氯酚和２，４二氯酚６种酚均有不同程度的吸附，用Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ和Ｌａｎｇｍｕｉｒ吸附等温方程描述时，均呈现良好的线性关系；该６种酚的吸附常数ｋ的对数值与其分子连接性指数（２Ｘｖ）呈良好的线性关系；盐泽螺旋藻对其余４种酚（邻甲酚、间羟基酚、间氨基酚、间乙酰氨基酚）均不产生吸附。

盐泽螺旋藻藻蓝蛋白的分离纯化

固体硫酸铵沉淀盐泽螺旋藻藻胆蛋白,羟基磷灰石(HA)柱分离纯化具光敏效应的藻蓝蛋白(C-PC),光谱、电泳鉴定其纯度。体外细胞实验表明C-PC经光敏作用能更有效的抑制肿瘤细胞的生长。

盐泽螺旋藻藻胆蛋白的分离和特性研究

盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)的水溶性色素粗提物经过硫酸铵沉淀和羟基磷灰石(HA)柱层析后可以分出两种藻胆蛋白,即藻蓝蛋白(c-PC)和别藻蓝蛋白(APC)。它们的纯度(指其在可见光部分的最大吸收与280nm处吸收之比)可分别达到7.27(c-PC)和6.55(APC)。而一般认可的纯度标准,PC为5,APC为6。纯化后的c-PC和APC在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中仅见一条色带,其最大吸收峰分别在620_(nm)和650_(nm),其室温荧光发射峰分别为642_(nm)和657_(nm)。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),无论胶浓度在11.5％或是在7—15％的梯度中,c-PC均可分为α和β两个亚单位,而APC除α和β两个亚单位外,在7—15％梯度SDS-PAGE中还偶见一个14kD左右的无色多肽,它可能与APC结合较紧密,为藻胆体“核”亚结构的组分,类似于Glazer(1985)报道的聚胞藻(Synechocystis)6701中的10kD多肽。盐泽螺旋藻的c-PC和APC的亚单位分子量分别为:c-PC-α,16.0kD;c-PC-β,19.5kD;APC-α,15.5kD;APC-β,18.0kD。依此推算该藻的c-PC和APC的最小分子量应为35.5kD和33.5kD。它与钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)相比显得稍低,但又略高于其它几种蓝藻。经等电电泳法测定,其c-PC和APC的等电点分别在4.4和4.6,它与以往报道的一些蓝藻大抵相当。盐泽螺旋藻的藻胆蛋白占细胞干重的28.4％左右,可望成为人类优良的蛋白源。

盐泽螺旋藻培养用于染料脱色

研究了在含有结晶紫、亚甲基兰和番红花红T的培养液中，盐泽螺旋藻的生长状况和盐泽螺旋藻对这三种染料的脱色能力。当结晶紫浓度为20mg·L^-1时，盐泽螺旋藻在实验的第2天开始黄化失绿，并且逐渐死亡；当亚甲基兰和番红花红T浓度为20mg·L^-1时，盐泽螺旋藻的第8天生长速率分别是对照组的85％和89％。当亚甲基兰的浓度为15mg·L^-1时，盐泽螺旋藻对亚甲基兰的8天脱色率为98．9％。当番红花红T浓度为5mg·L^-1时，盐泽螺旋藻对番红花红T的8天脱色率为95．6％。经紫外光谱分析，当结晶紫、番红花红T的浓度为5mg·L^-1和亚甲基兰浓度为15mg·L^-1时，盐泽螺旋藻对这三种染料都存在降解作用。当亚甲基兰浓度为2．5mg·L^-1时，盐泽螺旋藻对亚甲基兰脱色效果最好的pH范围为6．2～8．

盐泽螺旋藻的生长及放氢的实验研究

对影响盐泽螺旋藻生长的因素以及放氢情况进行了实验研究.结果表明盐泽螺旋藻也具有放氢的现象,而且相对钝顶螺旋藻而言放氢量较大;同时也给出了盐泽螺旋藻生长的合适条件.

三丁基锡对螺旋藻的毒性作用

研究了氯化三丁基锡（ＴＢＴ）对盐泽螺旋藻（Ｓｐｉｒｕｌｉｎａｓｕｂｓａｌｓａ）的毒性作用．结果表明，ＴＢＴ对盐泽螺旋藻的半数生长抑制浓度ＩＣ５０为５．０９μｇ／Ｌ．

盐泽螺旋藻多糖SP抑制肿瘤细胞的研究

热水抽提法提取盐泽螺旋藻多糖,DE-52柱层析纯化,Sephadex G-100柱层析鉴定其纯度,获得纯化组分SP。通过体外细胞实验发现纯化的多糖可以选择性的抑制肿瘤细胞的生长。通过对肿瘤细胞形态的观察,发现在SP作用下,细胞出现凋亡小体;结合Hochest-33342染色,初步认为多糖是通过促进肿瘤细胞的凋亡来抑制肿瘤细胞的生长。

含亚甲基兰的印染废水培养螺旋藻的研究

在含 2 5mg·L- 1 的亚甲基兰的正常和无氮培养液中培养盐泽螺旋藻 ,观测盐泽螺旋藻的生长、叶绿素含量、藻胆素含量及其对亚甲基兰的脱色率。结果表明 ,盐泽螺旋藻可由染料亚甲基兰提供唯一氮源 ,但不能提供唯一碳源。在培养 8d后 ,无氮培养液中的螺旋藻液吸光度达到 0 2 1 0 ;在正常培养液下螺旋藻液吸光度为 0 32 1。盐泽螺旋藻对染料的脱色效果也比较好 ,在培养 8d后 ,无氮培养液下亚甲基兰脱色率为 85 %;正常培养液下亚甲基兰脱色率为 86%。

五氯酚对盐泽螺旋藻的毒性研究

研究了五氯酚对盐泽螺旋藻(Spirulina subsa]sa)的毒性作用,结果表明,五氯酚对盐泽螺旋藻的生长量、叶绿素含量和藻胆素含量的ICSD分别是4二6、0639、1二32ffig/L。实验结果还显示,五氯酚在实验浓度范围内,刺激盐泽螺旋藻的硝酸还原酶的活性,并有随浓度增高,活性增强的趋势。

螺旋藻培养及在染料废水中的应用

选择盐泽螺旋藻进行培养,比较其在正常培养液与含亚甲基兰培养液中的生长曲线、叶绿素a含量以及对染料脱色率的不同.将悬浮藻和固定化藻加入到染料废水中,测定处理前后染料废水的吸光度,并计算脱色率.结果表明:固定化盐泽螺旋藻对染料废水的脱色率明显高于悬浮藻,实验数据显示了藻类的固定化提高了它的合成代谢活性.

盐泽螺旋藻多糖的最佳获取条件

盐泽螺旋藻多糖具有提高机体免疫力的活性,为了提高盐泽螺旋藻多糖的获得率,笔者考察了生物量,培养时间,光照强度及光周期,不同浓度的C、N、P,不同浓度的NaCl对盐泽螺旋藻多糖积累的影响。结果表明:光强为4000lx以上,光暗周期为14h/10h,NaHCO3为5g/L,NaNO3为2.5g/L,K2HPO4为0.38g/L,NaCl为4g/L,稳定后期收获藻体为盐泽螺旋藻多糖最佳获取条件。

盐泽螺旋藻变种的生长和生化特性

采用1984年在美国加利福尼亚大学研究和培育成功的盐泽螺旋藻变种，经扫描电镜、生物量测定和生化分析，进一步研究其基本特性。结果表明，其藻丝呈紧密的逆时针向等宽螺旋结构、它在36℃的平均生长速率（K）=0．12,产量可达48．4g／（m2·d）（干重）；蛋白质含量平均为50.47％；氨基酸17种；铁超氧物歧化酶含量为0.05mg／g（鲜重）；β-胡萝卜素含量为3.5mg／g（干重）。以上结果证明，盐泽螺旋藻变种具有优良的性状，可以应用于大规模生产开发。

常见废水与螺旋藻生长的适配性研究

分别利用中水、淡水养殖废水、海水养殖废水、污水处理厂处理后的电厂废水，培养盐泽螺旋藻351、极大螺旋藻438、纺锤螺旋藻TJSD、钝顶螺旋藻834和分离自内蒙古天然湖泊的螺旋藻（NMG），以生物量和藻体颜色为指标，研究螺旋藻在各种废水中生长情况。发现淡水养殖废水培养盐泽螺旋藻351的效果最好。在此基础上通过单因子试验，研究小苏打、硝酸钠、光照度及温度等对盐泽螺旋藻351生长的影响。试验结果表明，在淡水养殖废水中添加小苏打3．0～13．5g／L、温度25～40℃、光照度6000～12000lx的条件下，该藻种能快速生长。在小苏打9．0g／L，硝酸钠1．0g／L，光照度10000lx，温度32℃条件下培养，干藻粉产量达3．15g／L；光照度9000lx，温度25℃条件下培养，蛋白质含量达31．7％。因此，利用淡水养殖废水培养盐泽螺旋藻351具有可行性。

盐泽螺旋藻变种Fe—SOD的分离纯化及其分子特征

从盐泽螺旋藻变种(Spirulina subsalsa var. )中分离出Fe—SOD(含铁的超氧化物歧化酶),并研究了其分子特征。结果表明,这种藻类仅含Fe—SOD,无同功酶形式,分子量约35000道尔顿。酶分子为二聚体,两个亚基共用一个铁原子。

应用气-质联用仪测定三种螺旋藻中的甾醇成分

应用GLC/MS联用仪对室内培养的钝顶螺旋藻(Spirulina platensis (Nordstedt) Geitler)、极大螺旋藻(S.maxima (Stechell & Gardiner) Geitler)和盐泽螺旋藻(S.subsalsa Oerst)的甾醇成分进行了测定。从钝顶螺旋藻和盐泽螺旋藻中共分出11个相同的甾醇组分:胆甾醇、胆甾烷醇、芸苔甾醇、麦角甾醇、海绵甾醇、菜子甾醇、豆甾醇、24-乙基-Δ^(5,7,22)-胆甾醇、β-谷甾醇、异岩藻甾醇和4α,23,24-三甲基Δ^(5,22)-胆甾醇;从极大螺旋藻中只分离出8个甾醇组分。其中胆甾醇含量最高。4α,23,24-三甲基-Δ^(5,22)-胆甾醇为蓝藻中首次报导。

藻菌混合固定化及其对亚甲基兰的脱色研究

将盐泽螺旋藻和细菌混合固定化,比较对亚甲基兰的脱色情况.结果表明:单独固定化藻对亚甲基兰作用4 d,脱色率达到80.9%,而在混合固定化条件下,24 h即超过了单一固定化藻的脱色效果,脱色率达到83%,作用4 d后脱色率达到92.9%.可以认为细菌的加入提高了盐泽螺旋藻对亚甲基兰的抗毒性,并在较大程度上提高了固定化盐泽螺旋藻对亚甲基兰的脱色能力.

盐泽螺旋藻藻蓝蛋白裂合酶CpcS的分子克隆及功能研究

为研究盐泽螺旋藻(Spirulina subsalsa)藻蓝蛋白裂合酶CpcS的催化功能,首先通过PCR技术从S. subsalsa FACHB351基因组DNA中扩增藻蓝蛋白裂合酶的编码基因SscpcS,构建表达质粒pCDFDuet-SscpcS,然后再与脱辅基蛋白和色素合成酶表达质粒pETDuet-SscpcB-Ssho1::SspcyA共同转入大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG(Isopropyl β-D-Thiogalactoside,异丙基硫代半乳糖苷)诱导重组合成藻蓝蛋白。PCR产物测序表明SscpcS扩增成功;双酶切检测和SDS-PAGE电泳分析表明质粒pCDFDuet-SscpcS构建成功,且能表达目的蛋白。重组藻蓝蛋白PCB-CpcB细胞产物为深蓝色;纯化后的色素蛋白展现620 nm的最大吸收峰和646 nm的最大荧光发射峰;色素蛋白通过锌离子染色,在紫外线照射下展现明显荧光。该研究成功克隆源自盐泽螺旋藻的藻蓝蛋白裂合酶SsCpcS的编码基因,其表达产物SsCpcS能有效催化藻蓝蛋白的生物合成。此研究为S. subsalsa藻蓝蛋白的重组合成及抗氧化试剂的研制奠定基础,也为探明盐泽螺旋藻中CpcS的催化机理提供科学依据。