非小细胞肺癌LVD、MVD、CEAmRNA及KAI1和Kiss-1的表达与患者预后关系的研究

背景与目的目前对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者预后的研究很多,有些临床病理因素已被公认与预后有关,本研究旨在对淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)、微血管密度(microves-sel density,MVD)及癌胚抗原信使核糖核酸(carcinoembryonic antigen messenger ribonucleic acid,CEAmRNA)和肿瘤转移抑制基因KAI1、Kiss-1的表达与NSCLC患者预后的关系进行探讨。方法选取57例NSCLC患者,采用逆转录巢式聚合酶链反应(nested-RT-PCR)和微流控芯片(micro-fluid chip)技术对外周血CEAmRNA的表达进行检测;采用免疫组织化学技术对肺癌组织LVD、MVD和KAI1、Kiss-1的表达进行检测,并对所有患者进行随访分析。结果全组的5年生存率为18%,中位生存期为34个月;单因素分析显示TNM分期、淋巴结有无转移、CEAmRNA的阳性表达、MVD、LVD和Kiss-1的表达对生存有影响;多因素分析显示TNM分期、淋巴结有无转移和CEAmRNA的表达是影响预后的独立危险因素。结论在NSCLC患者中MVD、LVD和Kiss-1及CEAmRNA的表达可以在一定程度上反映患者的预后。

抑癌基因KAI1对大肠癌细胞生物学特性的影响

目的研究抑癌基因KAI1对大肠癌细胞生物学特性的影响。方法用KAI1 cDNA质粒转染低表达KAI1基因的人大肠癌LoVo细胞。免疫组化和原位杂交检测转染后mRNA和蛋白的表达,利用体外肿瘤同质性粘附、异质性粘附实验和肿瘤侵袭模型等方法,检测KAI1/CD82对大肠癌粘附与侵袭的影响;以空白质粒转染组为对照组。结果体外实验发现转染KAI1质粒的LoVo细胞同质性粘附能力高于对照组,异质性粘附及侵袭能力明显低于对照组。抑癌基因KAI1对肿瘤的增殖能力没有影响。结论KAI1基因表达的减少可以导致大肠癌细胞同质性粘附降低,对基底膜粘附及侵袭转移的能力增加。因此,KAI1基因可以作为大肠癌的一种转移抑制基因。

乳腺癌中KAI1蛋白表达与临床病理特征的相关性

目的:研究KAI1蛋白在人乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法:应用免疫组织化学S-P法检测107例乳腺癌及30例癌旁乳腺组织中的KAI1蛋白表达情况。结果:乳腺癌组中KAI1蛋白高表达率显著低于正常乳腺组织(P<0.05)。正常组织及非侵袭性乳腺癌中,KAI1蛋白呈高表达;反之,在浸润性乳腺癌中KAI1表达减少。伴有腋窝淋巴结转移的61例乳腺癌中,KAI1蛋白高表达率为21.3%(13/61),无腋窝淋巴结转移组46例中,KAI1蛋白高表达率为39.0%(18/46),两者差异有显著性(P<0.05)。同时发现KAI1蛋白表达与肿瘤大小、年龄无相关性。结论:在乳腺癌进展过程中,KAI1蛋白表达降低在乳腺癌浸润和转移过程中起着重要的作用,检测KAI1蛋白表达可能成为监测人乳腺癌进展及临床上判断其预后的重要参考指标。

KISS1、KAI1和FHL1在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤转移的关系

目的研究转移抑制基因KISS1、KAI1和FHL1在淋巴结转移与否的乳腺癌组织中表达的差异及其与雌、孕激素受体的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学EnVision法检测59例乳腺癌组织和31例非癌组织中的KISS1、KAI1和FHL1表达情况及其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果①乳腺癌中KISS1、KAI1和FHL1的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②KISS1、KAI1和FHL1表达与乳腺癌的腋窝淋巴结转移、临床分期呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与患者年龄、肿瘤大小无关,差异无统计学意义(P>0.05)。③KAI1表达与ER、PR呈负相关(P<0.05);FHL1表达与PR呈负相关(P<0.05);差异均有统计学意义。④分析KISS1、KAI1和FHL1之间的关系可以看出:两两之间呈正相关,差异有统计学意义(P<0.01)。结论有淋巴结转移的乳腺癌患者KISS1、KAI1和FHL1的表达明显低于无淋巴结转移的乳腺癌患者。

KAI1基因转染ATRA诱导对小细胞肺癌细胞株恶性特征的抑制作用

背景与目的 :探讨新抑癌基因KAI1与全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)对小细胞肺癌NCI-H446细胞株抑制增殖和诱导分化的作用。材料与方法 :用脂质体介导的基因转染方法 ,借助质粒表达载体(PCMV -NEO -XhoI),将抑癌基因KAI1转入小细胞肺癌NCI-H446细胞中 ,经G418筛选 ,获得稳定表达的细胞克隆。用10-6 mol/LATRA作用于转染及未转染KAI1基因的小细胞肺癌NCI-H446细胞株,集落形成率检测细胞体外增殖能力 ,流式细胞仪进行细胞周期和凋亡分析,间接免疫荧光染色结合流式细胞仪检测转染前后细胞CD82蛋白的表达。免疫组化测定MYC的表达 ,放射免疫测定LN(层连蛋白)表达。结果 :ATRA处理脂质体 -KAI1基因转染的小细胞肺癌细胞CD82表达降低 ,细胞增殖能力下降 ,凋亡增加 ,更多的细胞被阻止于G1/G0 期 ,MYC及LN表达下降。结论 :抑癌基因KAI1与ATRA对抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞株的增殖和促分化有协同作用。

内皮祖细胞携带KAI1/CD82基因对人鼻咽癌细胞裸鼠模型肺转移的影响

目的探讨KAI1/CD82基因在鼻咽癌侵袭转移中的作用,分析转染KAI1/CD82基因的内皮祖细胞在鼻咽癌防治中的应用价值。方法应用过表达KAI1/CD82基因的慢病毒转染血管内皮祖细胞,获得高表达KAI1/CD82基因的稳转细胞(KAI1/CD82-EPCs);构建荷人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,通过裸鼠尾静脉注入KAI1/CD82-EPCs;观察KAI1/CD82-EPCs对裸鼠腋下移植瘤及其转移灶的影响。结果 EPCs组、空白组和KAI1/CD82-EPCs组成瘤时间(天)分别为14.70±3.81、15.05±3.85、14.20±3.55,差异无统计学意义(P=0.771);EPCs组、空白组和KAI1/CD82-EPCs组移植瘤的重量(g)分别为1.388±0.204、1.487±0.223、1.485±0.234,差异无统计学意义(P=0.274);EPCs组、空白组和KAI1/CD82-EPCs组肺转移灶生成率分别为55%、45%和10%,差异具有统计学意义(P=0.005),三组肺脏的转移灶数目分别为34.27±5.35、38.44±9.63、17.50±3.54,差异具有统计学意义(P=0.007);注射KAI1/CD82-EPCs的实验组肺转移灶KAI1/CD82呈阳性,EPCs组和空白组肺转移灶KAI1/CD82呈阴性。结论转染KAI1/CD82基因的EPCs对鼻咽癌裸鼠模型的肺转移具有抑制作用。

KAI1/CD82 mRNA和蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的探讨KAI1/CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测70例鼻咽癌和30例正常鼻咽部组织中KAI1/CD82蛋白的表达情况;逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测28例鼻咽癌和15例正常鼻咽部新鲜组织中KAI1/CD82 mRNA的表达情况。分析KAI1/CD82 mRNA和CD82蛋白的表达与临床病理特征之间的关系。结果 KAI1/CD82 mRNA在鼻咽癌组织中的阳性表达率为42.9%(12/28),低于正常鼻咽部组织中的73.3%(11/15),差异无统计学意义(P>0.05);KAI1/CD82蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率为44.3%(31/70),低于正常鼻咽部组织中的70.0%(21/30),差异有统计学意义(P<0.05)。KAI1/CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中的表达与患者的性别、年龄、病理类型、T分期均无关(P>0.05),而与淋巴结转移有关。KAI1/CD82 mRNA和CD82蛋白在无淋巴结转移组中的阳性表达率分别为85.7%和68.4%,明显高于淋巴结转移组的28.6%和35.3%,差异均有统计学意义(P<0.05)。KAI1/CD82 mRNA和CD82蛋白在N1、N2、N3亚组间表达率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KAI1/CD82 mRNA和CD82蛋白在鼻咽癌组织中表达下调,该基因可以抑制鼻咽癌发生、发展及淋巴结转移,有望作为鼻咽癌诊断和预后判定的一种有效分子标记物。

Kai1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其意义

目的 :探讨Kai1(KangAi 1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义。 方法 :采用免疫组织化学S P法 ,检测 10 8例上皮性卵巢肿瘤和 12例正常卵巢中Kai1的表达情况。结果 :Kai1在卵巢上皮性癌、交界性卵巢肿瘤、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中的阳性表达率分别为 2 6 6 %、71 4 %、73 3%和 83 3% ,在恶性肿瘤中的阳性表达较良性肿瘤明显下降 (P <0 0 5 )。卵巢浆液性囊腺癌较粘液性囊腺癌及子宫内膜样癌Kai1阳性表达率显著下降 (P <0 0 5 ) ,在不同细胞分化等级与临床分期间Kai1表达无明显差异 (P >0 0 5 ) ,但在伴有和不伴有淋巴结转移的卵巢上皮性癌中Kai1的阳性表达率有显著差异 (P <0 0 5 )。结论 :Kai1表达下降可能是上皮性卵巢癌发生、发展中的一个早期事件 ,有望成为预测卵巢癌发生转移及判断患者预后的参考指标。

检测KAI1/CD82蛋白在结肠腺癌中表达的临床意义

目的 KAI1是一种特异性抑制肿瘤转移的基因 ,其蛋白产物为KAI1/CD82。通过检测 6 4例结肠腺癌石蜡切片的KAI1/CD82蛋白表达 ,探讨其与预后等临床因素的相关性。方法 肿瘤经福尔马林固定 ,石蜡包埋。免疫组化方法检测石蜡切片中KAI1/CD82蛋白表达水平。生物学统计采用 χ2 检验法。生存曲线采用Kaplan Meier软件绘制。结果 KAI1/CD82蛋白呈现棕褐色、细颗粒状物 ,弥漫性分布结肠腺癌细胞膜上。KAI1/CD82蛋白在结肠腺癌组织中表达阳性率为 5 1.5 6 %。生物学统计结果表明 ,KAI1/CD82蛋白表达与淋巴结转移、远处转移及肿瘤临床分期等密切相关 ,有统计学意义 ;而与肿瘤患者的年龄和性别、肿瘤大小、分化程度及肿瘤部位等无关。KAI1/CD82蛋白阳性结肠腺癌患者的术后生存期明显高于阴性患者 ,前者平均术后生存期为 5 4 .2 7± 2 1.5 1月 ,而后者仅为 37.5 5± 15 .17月 ,具有统计学意义。结论 KAI1/CD82表达水平与结肠腺癌分期、淋巴结转移及远处转移关系密切 ,可能和其它指标一起作为判断结肠腺癌预后的指标之一 ,对术后进一步治疗具有一定的指导意义。

转移性和非转移性食管癌组织中KAI1基因的表达

目的 :探讨KAI1基因与食管癌转移的关系。方法 :应用原位杂交法分析KAI1基因在有淋巴结转移和无淋巴结转移的食管癌组织中的表达。结果 :在有淋巴结转移和无淋巴结转移的食管癌组织中KAI1mRNA的表达未见显著差异 (P >0 0 5 ) ,且KAI1mRNA表达与食管癌的分化无关 (P >0 0 5 )。结论 :KAI1基因对食管癌转移的发生无抑制作用 ;KAI1基因的表达也与食管癌的分化无关。

KAI1／CD82基因在不同转移习性人鼻咽癌细胞株中的表达

目的体外培养5种不同组织学类型的人鼻咽癌细胞株，探讨不同转移潜能的人鼻咽癌细胞株中KAI1／CD82基因mRNA和蛋白表达水平的差异，为鼻咽癌的基因治疗提供理论和实验依据。方法①应用实时荧光定量PCR法检测5种人鼻咽癌细胞株中KAI1／CD82基因mRNA的表达水平；②Westernblot法检测5种人鼻咽癌细胞株中KAI1／CD82蛋白表达水平。结果①不同转移习性的人鼻咽癌细胞均扩增出KAI1／CD82mR．NA，且随着细胞转移习性增高，KAI1／CD82mRNA表达水平逐渐降低（P〈0．05）；②KAI1／CD82在SUNE-1—6—10B和CNE-1中表达增高，其中在SUNE-1—6—10B中增高明显（P〈0．05）。结论①KAI1／CD82基因在mRNA水平和蛋白水平的表达具有一致性，随着KAI1／CD82基因在不同人鼻咽癌细胞株中mRNA水平表达的增高，在蛋白水平表达也呈增高趋势；②KAI1／CD82基因在低转移性细胞中高表达，而在高转移性细胞中低表达，提示了KAI1／CD82可能在鼻咽癌肿瘤细胞转移机制中发挥重要的抑制作用。

转移性和非转移性乳腺癌组织中KAI1基因的表达

目的 :探讨肿瘤转移抑制基因KAI1与乳腺癌转移的相关性。方法 :运用原位杂交法观察KAI1mRNA在转移性和非转移性乳腺癌组织中的表达。结果 :在无淋巴结转移的 12例乳腺癌病例中KAI1mRNA阳性表达为 9例 ,有淋巴结转移的 8例中阳性表达 1例。前者阳性率显著高于后者 (P <0 0 5 )。结论 :KAI1基因的低表达或不表达可能是某些高转移潜能乳腺癌的特征。

不同转移潜能人肺癌细胞系KAI1基因的表达

目的 :探讨KAI1基因与人肺癌细胞系转移潜能的关系。方法 :利用逆转录 PCR和Northernblot杂交法分析不同转移潜能人肺癌细胞系中KAI1mRNA的表达 ,并用聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)检测与突变的关系。结果 :在高转移潜能细胞系PG中KAI1mRNA表达降低 ,在无转移潜能的PAa细胞中KAI1的表达量比PG细胞高 10倍以上 (积分光密度比值分别为 0 .7313和 0 .0 5 49)。PCR SSCP结果显示在PG细胞KAI1基因第 7外显子出现异常改变。结论 :肺癌细胞的转移潜能可能与KAI1基因表达量有关 ,KAI1基因的低表达可能由基因突变所致。

依托泊苷对卵巢癌细胞3AO肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响

目的 研究依托泊苷（VP16）对人卵巢上皮性癌细胞3AO的生长抑制作用及其对细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响.方法 倒置显微镜下观察3AO细胞在不同浓度的药物作用下形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察药物对3AO细胞的生长抑制作用;运用RT-PCR、免疫细胞化学的方法 分别从转录和蛋白翻译水平检测不同药物浓度作用的3AO细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1的表达情况.结果 药物作用下,3AO细胞体积缩小,核固缩、深染及凋亡小体出现;MTT法结果 显示药物对3AO细胞的生长抑制率呈明显的剂量依赖性;免疫细胞化学染色显示VP16能显著上调肿瘤转移抑制基因KAI1的表达;RT-PCR检测结果 显示VP16能同样增强KAI1mRNA的表达.结论 VP16不仅能抑制卵巢上皮性癌细胞的生长,而且能增强癌细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1的表达,可能为临床上抑制肿瘤转移的药物治疗带来希望.

肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在N_0期声门上型喉鳞状细胞癌颈淋巴结隐匿性转移中的表达及临床研究

目的检测N0期声门上型喉鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)颈部淋巴结中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达,并分析其与临床组织病理学等相关因素的关系,以进一步揭示KAI1/CD82在声门上型喉SCC颈淋巴结隐匿性转移发生、发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法,检测60例N0期声门上型喉SCC颈清扫淋巴结中KAI1/CD82的表达、12例新鲜喉癌组织和同期距癌周至少0.5 cm的正常喉黏膜组织KAI1/CD82的表达,以及KAI1/CD82的表达水平与声门上型喉SCC颈淋巴结隐匿性转移、病理分化类型及浸润程度等临床病理因素的关系。结果 60例N0期声门上型喉SCC患者颈清扫淋巴结327个,进行常规病理检查和KAI1/CD82的免疫组化检测发现84个淋巴结KAI1/CD82表达降低。其中,常规病理检查发现46个淋巴结有转移者,KAI1/CD82检测表达也降低;38个淋巴结常规病理检查未发现转移者,KAI1/CD82表达也降低。检测出KAI1/CD82在N0期声门上型喉SCC有颈淋巴结隐匿性转移组的阳性表达率明显低于无颈淋巴结隐匿性转移组的阳性表达率(P<0.01)。KAI1/CD82在原发灶中的阳性表达显著降低。KAI1/CD82的表达与有无淋巴结隐匿性转移有关,与患者的病理分化类型、浸润程度、原发肿瘤局部淋巴结远处转移(tumor lymph node metastasis,TNM)分期、肿瘤大小有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KAI1/CD82表达与N0期声门上型喉SCC的病理分化类型有关,恶性程度越高的肿瘤KAI1/CD82表达越低;与浸润程度有关,随着T分期的增高,KAI1/CD82的表达随之降低;KAI1/CD82表达降低可能与N0期声门上型喉SCC颈淋巴结隐匿性转移有关。KAI1/CD82在N0期声门上型喉SCC的转移过程中具有一定作用,可作为预测肿瘤转移潜能的指标。

KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的相关性

目的 :探讨肿瘤转移抑制基因KAI1和nm2 3与人黑色素瘤细胞转移潜能的关系。方法 :应用Northernblot杂交检测不同转移潜能人黑色素瘤细胞中KAI1和nm2 3基因的表达。结果 :4种不同转移潜能的人黑色素瘤细胞中 (WM35 ,WM45 1,WM983a,WM134 1b) ,KAI1mRNA和nm2 3mRNA均有表达且表达量基本一致 ,KAI1在 4种细胞中的积分光密度值分别为 0 1798,0 180 0 ,0 15 0 1,0 15 82 ;nm2 3分别为 1 0 42 8,1 0 6 0 7,1 0 141,1 0 75 4。结论 :KAI1基因与nm2 3基因的表达降低与人黑色素瘤的浸润转移无关。

不同转移潜能人前列腺癌细胞中KAI1基因的表达

目的 :探讨人前列腺癌细胞转移潜能与KAI1基因表达的关系。方法 :运用Northern印迹杂交检测KAI1基因在不同转移潜能人前列腺癌细胞中的表达 ,以甲基化分析和聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)研究KAI1低表达的机制。结果 :在转移性人前列腺癌细胞系PC3和PC3M中不论其转移潜能强弱 ,KAI1mRNA表达均降低。甲基化分析未发现KAI1基因 5’ 启动子部位CCm5CGGG甲基化。PCR SSCP分析显示 :KAI1基因第 7外显子在PC3和PC3M均显示异常带 ,PC3M较弱。结论 :KAI1基因表达降低与人前列腺癌的转移有关 ,但其转移潜能的强弱可能不取决于KAI1的调控。KAI1基因的低表达与 5’ 启动子部位CCm5CGGG甲基化无关 ,可能与该基因的突变失活有关。

脂质体介导KAI1基因转染对小细胞肺癌NCI-H446细胞株的抑制作用

目的 探讨新抑癌基因KAI1对小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞株抑制增殖和浸润转移的作用。方法 用脂质体介导的基因转染方法 ,借助真核质粒表达载体 (PCMV NEO XhoI) ,将抑癌基因KAI1转入小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞中 ,经G4 18筛选 ,获得稳定表达的细胞克隆。观察NCI H4 4 6细胞的生长 ,MTT法检测细胞体外增殖能力 ,流式细胞仪进行细胞凋亡分析 ,间接免疫荧光染色结合流式细胞仪检测转染前后细胞CD82蛋白的表达。免疫组化测定Myc及MMP 1(基质金属蛋白酶 1)的表达 ,放射免疫测定LN(层黏蛋白 )表达。结果 脂质体 KAI1基因转染的小细胞肺癌细胞CD82表达增加 ,细胞增殖能力下降 ,凋亡增加 ,癌基因Myc ,MMP 1及LN表达下降。 结论 抑癌基因KAI1抑制小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞株的增殖 ,降低Myc ,MMP 1及LN的表达。

KAI1基因表达和淋巴管生成对非小细胞肺癌淋巴结转移的影响

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)KAI1基因表达下调和淋巴管生成对淋巴结转移是否具有协同作用。方法:应用兔抗人多克隆抗体KAI1和兔抗人抗Podoplanin单克隆抗体(EliVision法)对68例NSCLC组织石蜡切片进行染色,Logistic回归分析判断转移抑制基因KAI1的表达和淋巴管生成与淋巴结转移的关系。结果:NSCLC淋巴结阳性组和淋巴结阴性组KAI1表达阳性率分别为30.3%和88.6%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。肿瘤间质中淋巴结阳性患者淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)为15.73±0.74,明显高于淋巴结阴性患者8.31±0.32(P<0.01)。Logistic回归分析显示,仅LVD对淋巴结转移有影响(P<0.05),其相对危险度(OR)为2.065,95%可信区间(1.202,3.547);而KAI1表达下调无统计学意义(P=0.375),95%可信区间为(0.003,8.714)。NSCLC患者转移抑制基因KAI1的表达下调和肿瘤间质中淋巴管生成对淋巴结转移无明显协同作用(P>0.05)。结论:肿瘤转移抑制基因KAI1表达下调与淋巴管生成对NSCLC淋巴结转移有促进作用,但未见明显协同作用。

肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在顺铂作用下的卵巢癌细胞中表达的变化

目的研究顺铂(cDDP)作用下人卵巢上皮性癌细胞株3AO中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达的变化,初步探讨其作用机制。方法采用倒置显微镜观察cDDP作用后3AO细胞形态学的变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察cDDP对细胞增殖的影响;运用免疫细胞化学方法检测不同浓度cDDP(1、3、9 mg/L3个浓度组)作用的3AO细胞株中KAI1/CD82表达情况,并与细胞对照组(未经药物处理)进行比较。结果cDDP作用后细胞体积缩小、细胞内颗粒增多,细胞核固缩、深染,细胞凋亡;cDDP对3AO细胞的生长抑制作用呈明显的剂量依赖关系;cDDP作用后卵巢癌细胞中KAI1/CD82基因的表达较对照组明显增强。结论cDDP不仅能增加对卵巢癌细胞的生长抑制率,而且能上调卵巢癌细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达,为临床上药物抑制肿瘤转移的深入研究提供了有利的实验依据。