外源物质对低盐罗非鱼糜蛋白构象及体外消化特性的影响

以微波超声波辅助制备的低盐罗非鱼糜凝胶为研究对象,分析谷氨酰胺转氨酶(TGase)、羟丙基二淀粉磷酸酯(HDP)、结冷胶和三者的复配物(THG)对其水分分布及蛋白质构象的影响;并通过体外模拟消化实验,探究不同外源物质对微波超声波辅助制备的低盐罗非鱼鱼糕体外消化特性的影响。结果表明:添加THG后,鱼糜结合水和不易流动水较空白组分别增加98.71%和14.75%,自由水含量显著减少(P<0.05);THG促进了α-螺旋向β-折叠、β-转角和无规则卷曲结构转化。与空白组相比,添加0.4%TGase和THG对低盐罗非鱼糕的胃排空速度、蛋白体外消化率及蛋白水解度均有正面作用;其中THG可显著促进蛋白质分解成粒径较小的聚集体(P<0.05),经胃-十二指肠消化结束后的消化产物颜色更加透明清晰,从激光共聚焦显微镜可观察到THG组的红色荧光亮点显著减少,反映其蛋白被消化得较为完全。由此可见,在THG的作用下,鱼糜中水分子与蛋白质结合更紧密,相对于单一的外源物质,THG更加明显地改变了蛋白质的构象,且更有利于疏水蛋白基团的暴露和蛋白间的相互作用,且对鱼糕的消化有促进作用。本研究的结果为罗非鱼糜凝胶特性研究及罗非鱼糕类食品的开发与应用提供理论参考。

鲢鱼糜漂洗液中不同回收方式肌浆蛋白的结构和功能特性

以鲢鱼糜漂洗废液中的肌浆蛋白为对象,对比分析回收方式对肌浆蛋白的结构和功能特性的影响。结果表明:酸偏移和热处理对肌浆蛋白的巯基向二硫键转化程度、表面疏水性、色氨酸内源荧光光谱强度、溶解性、起泡性的影响较大;通过对肌浆蛋白二级结构分析发现,冷冻干燥和热处理法下β-折叠相对含量较大,等电点沉淀法、酸偏移法和酸偏移耦合壳聚糖絮凝法下无规则卷曲相对含量较大,壳聚糖絮凝法下β-转角相对含量较大,所有回收方式下α-螺旋相对含量均较小,总体上肌浆蛋白二级结构由有序向无序不同程度转化;此外,壳聚糖与肌浆蛋白结合,絮凝产生大分子复合物,而酸偏移导致部分蛋白解聚。不同回收方式下肌浆蛋白结构变化进而影响到功能性质,其中酸偏移耦合壳聚糖絮凝法制备的肌浆蛋白在pH值和壳聚糖双重作用下表面疏水性明显增加,促使乳化性降低;而经冷冻干燥、等电点沉淀法和壳聚糖絮凝回收得到肌浆蛋白的乳化性较大,特别是壳聚糖处理能有效改善肌浆蛋白的乳化性。

多糖在鱼糜制品中的应用进展

在鱼糜制品生产加工过程中,不同的工艺步骤对鱼糜制品有不同的影响,其中肌原纤维蛋白(Myofibrillar protein,MP)的凝胶化起到关键性作用,决定着鱼糜制品品质的优劣。由于原料和加工方式的影响,鱼糜制品存在蛋白质变性、凝胶性能减弱、脂质氧化以及微生物引起的腐败变质等问题。多糖作为天然食品添加剂具有良好的生物相容性且来源广泛、价格低廉,在鱼糜制品生产过程中有提高其凝胶特性、延缓氧化反应和增强储藏稳定性的作用。目前多糖改善鱼糜品质的研究并没有得到较为全面的归纳与总结,故本文概括了鱼糜制品的凝胶化机理及其加工工艺,总结了多糖在鱼糜制品中的应用及作用机制,以期为生产营养健康的鱼糜制品提供理论依据。

4种鱼糜加工漂洗液回收蛋白对罗非鱼鱼糜凝胶特性与质构的影响

目的探究4种回收水溶性蛋白对罗非鱼鱼糜凝胶特性及质构的影响。方法分别将等电点沉降法回收蛋白、海藻酸钠单一絮凝剂回收蛋白、壳聚糖单一絮凝剂回收蛋白和海藻酸钠-壳聚糖复合絮凝剂沉降回收蛋白以0%、5%、10%、15%、20%掺入罗非鱼鱼糜制备鱼肠,比较各样品在凝胶强度与全质构分析(texture profile analysis,TPA)参数上的差异,包括硬度、胶着性、咀嚼性、内聚性与弹性。结果4种回收蛋白替代会对凝胶强度产生不利影响,通过等电点沉降法回收的蛋白对凝胶强度的影响最大,凝胶强度持续下降,最低达1708g·mm;以复合絮凝剂回收蛋白的掺入对原凝胶强度的影响最小,通过替代5%鱼糜,凝胶强度降为3833 g·mm。当用壳聚糖单一絮凝剂回收蛋白掺入5%时,与原鱼糜制品的TPA参数最接近,表现为硬度2505 g,胶着性1788 g,咀嚼性192.3 mJ,且内聚性和弹性也没有表现出明显差异。结论这4种回收蛋白均以5%的添加量替代罗非鱼鱼糜时,制品凝胶强度在企业的可接受线性范围内,综合凝胶强度与TPA参数,以壳聚糖单一絮凝剂回收的蛋白替代产生的影响最小,可为回收鱼糜蛋白这一资源的研究与再利用技术开发提供参考依据。

不同原淀粉对金线鱼鱼糜凝胶品质的影响及其分子机制

【目的】以冷冻金线鱼(Nemipterus virgatus)鱼糜为原料,比较不同淀粉对鱼糜凝胶品质的影响,探讨淀粉改善鱼糜凝胶品质的机理。【方法】在金线鱼鱼糜中分别以质量分数15.0%的比例加入木薯淀粉、马铃薯淀粉、玉米淀粉和小麦淀粉,制备鱼糜凝胶,分析鱼糜凝胶的白度值、质构特性、持水性、蒸煮损失率、水分分布状态、分子间作用力,用光学显微镜和扫描电镜观察凝胶的微观结构。【结果】添加4种淀粉均可明显改善鱼糜凝胶的凝胶强度、硬度、弹性、咀嚼性和持水性(P <0.05),且薯类淀粉的添加对质构和持水性的改善效果更为明显。微观结构观察显示,淀粉在鱼糜凝胶网络中主要起填充作用。同时,加热糊化的淀粉促使肌原纤维蛋白分子由α-螺旋向β-折叠和β-转角结构转变,增强分子间的氢键和疏水相互作用,使凝胶网络结构更加致密。相关性分析进一步证实,凝胶强度与氢键、疏水相互作用和β-转角含量呈正相关,与α-螺旋含量呈负相关。与对照组比较,添加木薯淀粉和马铃薯淀粉的鱼糜凝胶蛋白质的α-螺旋结构比例分别降低50.41%和35.39%,维持凝胶三维网络结构的氢键和疏水相互作用明显增强。【结论】支链淀粉含量高的薯类淀粉更适合作为鱼糜制品的淀粉类外源添加物。

不同类型蛋白对白令海狭鳕鱼糜凝胶特性的影响

研究金线鱼(Nemipterus virgatus)、蛋清蛋白、大豆蛋白粉、南美白对虾(Litopenaeus vannamei)和鲢(Hypophthalmichthys molitrix)5种不同类型蛋白的肉类添加对白令海狭鳕(Theragra chalcogramma)鱼糜凝胶性能的影响。在鱼糜中分别添加1%、3%、5%、7%、9%的金线鱼、蛋清蛋白、大豆蛋白粉、南美白对虾和鲢鱼肉以制备鱼糜凝胶制品并测定其白度、持水性、凝胶强度等品质指标。研究结果表明,适量添加金线鱼、乳清蛋白和大豆蛋白粉能有效地改善鱼糜的凝胶强度和持水性,但大豆蛋白粉的添加会降低鱼糜白度。乳清蛋白的添加对鱼糜的凝胶强度和持水性的提高效果最好,添加量为3%时达到最大值,分别为12301.34 g·mm和73.21%,蒸煮损失率仅为12.6%,说明该比例的添加可以最大程度地提高白令海狭鳕鱼糜凝胶的品质。在实际鱼糜制品的生产中,应根据产品的特征选择适合的蛋白种类和合理的添加量,来提高鱼糜制品的品质。该研究为白令海狭鳕鱼糜制品的开发提供理论依据与参考。

鱼源抗冻多肽对鱼糜肌原纤维蛋白的冻融保护作用

【目的】探究鲢鱼鳞抗冻多肽(Silver carp scale antifreeze peptides,ScAFPs)对鱼糜肌原纤维蛋白(Myofibril protein,MP)的冻融变性抑制作用机制,评价ScAFPs对MP冻融保护效果。【方法】通过多光谱(紫外吸收光谱、荧光光谱、拉曼光谱、傅里叶红外光谱)技术及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分析ScAFPs对草鱼(Ctenopharyngodon idella)鱼糜MP结构及氨基酸残基微环境的影响。【结果】紫外吸收光谱、荧光光谱分析表明,ScAFPs可有效降低冻融鱼糜中蛋白质的聚集程度,改善色氨酸和酪氨酸的微环境变化,稳定蛋白质空间构象。其中,质量分数4%~8%ScAFPs对鱼糜蛋白的冻融保护效果优于商业抗冻剂。拉曼光谱分析结果表明,冻融过程中,含质量分数8%ScAFPs的鱼糜中MP的α-螺旋较空白对照组提高72.32%,无规则卷曲含量降低38.47%,有效维持MP结构有序性。傅里叶红外光谱分析显示,添加ScAFPs可提高与羟基相关的氢键键能,且不会导致MP的主要构型发生变化。SDS-PAGE分析表明,冻融处理使MP发生变性聚集现象,ScAFPs与商业抗冻剂有效保护了MP且不会催化肌球蛋白重链交联。【结论】ScAFPs对MP的冻融稳定性及结构有保护作用,可显著改善MP氨基酸残基微环境,且ScAFPs对MP结构的冻融保护效果优于商业抗冻剂。

基于人体必需金属盐替代的低钠盐肌原纤维蛋白凝胶特性和作用机理

为降低肌原纤维蛋白凝胶中钠盐的使用量,研究不同氯盐(CaCl_(2)、MgCl_(2)、KCl)部分替代NaCl对肌原纤维蛋白凝胶性质包括强度、微观结构、持水力和流变学性质的影响,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、内源性荧光光谱、表面疏水性、巯基含量等技术手段阐明其作用机理。结果表明,3种氯盐替代效果排序为KCl>CaCl_(2)>MgCl_(2)。0.5%~1.5%质量分数的盐替代范围内,KCl替代组的凝胶强度优于对照组(3%NaCl),持水力与对照组相比无显著差异(P>0.05);CaCl_(2)替代组的凝胶强度在1.5%替代质量分数时显著下降(P<0.05),持水力呈先下降后上升趋势;MgCl_(2)替代组凝胶强度显著降低(P<0.05),持水力上升。在流变学性质方面,不同质量分数KCl替代组的储能模量明显高于对照组。CaCl_(2)和MgCl_(2)的替代使肌原纤维蛋白表面疏水性增大、巯基含量减少,3种氯盐的替代使内源性荧光光谱均出现蓝移现象。CaCl_(2)、MgCl_(2)和KCl以低质量分数(0.5%)替代时,肌原纤维蛋白凝胶的微观结构与对照组无明显差异。以上结果表明CaCl_(2)、MgCl_(2)和KCl部分替代NaCl可有效降低鱼糜凝胶产品中的钠盐含量。

臭氧漂洗及冷冻贮藏对鲢鱼糜蛋白氧化和风味的影响

为探究臭氧处理对冷冻鱼糜保质期内的蛋白氧化和风味影响,以鲢为原料,采用臭氧漂洗制备新鲜和冷冻的鱼糜,分别测定盐溶性蛋白、水溶性蛋白、活性巯基、游离氨基酸含量,并采用电子鼻、电子舌和气相色谱-离子迁移谱联用仪(GC-IMS)测定挥发性风味成分组成。结果显示,臭氧漂洗新鲜鱼糜的水溶性蛋白含量下降,盐溶性蛋白含量上升;冷冻贮藏后,水溶性、盐溶性蛋白含量均显著下降(P<0.05)。臭氧漂洗新鲜鱼糜活性巯基含量显著下降(P<0.05),冷冻贮藏后,活性巯基含量也有显著下降,但与臭氧漂洗相比,下降幅度较小。臭氧漂洗鱼糜的游离氨基酸含量显著下降,冷冻贮藏后,游离氨基酸含量大幅度下降。电子鼻、电子舌检测结果显示,冷冻鱼糜与新鲜鱼糜的气味、滋味可以有效区分开,但臭氧漂洗鱼糜与清水漂洗鱼糜不能有效区分。GCIMS共鉴定出59种挥发性风味物质,臭氧漂洗鱼糜检测出的不饱和醇类数量明显低于自来水漂洗鱼糜,并且在冷冻后醇类物质减少,醛类物质显著增加。结果表明,臭氧漂洗初步运用到鱼糜及鱼糜制品等水产加工业中,可以改善鱼糜品质及风味,但在鱼糜冷冻贮藏过程中影响较小。

超高压耦合热处理过程对鳙鱼鱼糜凝胶特性及水分迁移的影响

为了阐明超高压耦合热处理过程中鳙鱼鱼糜凝胶特性变化的机制,本文探究了超高压耦合热处理(300 MPa/5 min,40℃/30 min,90℃/20 min)过程中鳙鱼鱼糜凝胶特性、蛋白质结构及水分迁移的变化,并进行聚类热图和Pearson相关性分析。结果表明,超高压耦合热处理能显著改善鳙鱼鱼糜的凝胶特性(P<0.05)。随着超高压,超高压结合一段热处理,超高压结合二段热处理过程的进行,鳙鱼鱼糜凝胶的凝胶强度、质构、白度呈上升趋势,其中,较常压处理样品(0.1P),经超高压耦合热处理(300PSH)的鱼糜凝胶强度和白度分别增加了477.75%、43.38%。在不同处理过程中,鳙鱼鱼糜凝胶蛋白质β-折叠结构比例显著增加(P<0.05),肌球蛋白重链交联聚集,同时,鱼糜凝胶的活性巯基含量和表面疏水性显著降低(P<0.05),蛋白质通过二硫键和疏水相互作用形成更致密、有序的网络结构,导致不易流动水向结合水迁移,最终表现为鱼糜凝胶凝胶强度、质构特性、白度和持水性显著改善。本研究可为超高压耦合热处理技术的应用和淡水鱼鱼糜制品的开发提供理论依据。

花椒水提物对鳜鱼鱼糜凝胶特性的影响

为探索花椒水提物(Zanthoxylum bungeanum aqueous extract,ZBAE)对鳜鱼鱼糜凝胶特性的影响,研究ZBAE添加量为0、0.125%、0.25%、0.5%和1.0%时,该鱼糜凝胶持水性、凝胶强度、质构、白度、二级结构和微观结构的变化。结果表明,随着ZBAE添加量增加,持水性、凝胶强度、硬度和胶着性指标均呈现先增强再减弱的趋势,并且在0.25%时均达到最大值;傅里叶红外光谱检测表明,ZBAE的添加使α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲的相对含量值呈现先上升后下降的趋势,其中,添加量为0.125%和0.25%时,分别对应β-折叠和α-螺旋的最高值;扫描电子显微镜结果显示,ZBAE添加量为0.25%时,该凝胶网络结构更致密,分形维数、孔隙率和孔数量均显著优于未添加组(P<0.05);此外,低添加量(<0.25%)的花椒水提物能够提高鱼糜凝胶的感官品质。因此,ZBAE具有改善鱼蛋白凝胶特性的潜力。

斩拌处理对鱼糜肌原纤维蛋白结构特性的影响及效应分析

为探究斩拌处理对鱼糜肌原纤维蛋白结构特性的影响,本试验以鳕鱼鱼糜为模型,研究机械效应和温度效应对鱼糜蛋白结构特性(溶解度、粒径、总巯基含量、表面疏水性、Ca^(2+)-ATP酶活性、内源荧光强度)的影响,并通过冗余分析探究斩拌条件(斩拌时间、温度、NaCl添加量)与蛋白质变性的相关性。结果表明,随着斩拌时间的延长,肌原纤维蛋白的Ca^(2+)-ATP酶活性逐渐降低,溶解度、总巯基含量和粒径总体呈先上升后下降趋势,其中在斩拌时间为60~120 s时达到最大值;斩拌后期凝胶强度随斩拌时间的延长显著增加,相较于斩拌10 s,180 s下1%、2%、3%NaCl试验组凝胶强度分别上升43.6%、33.6%、26.8%。冗余分析表明,斩拌时间与粒径分布的正相关性最强,与表面疏水性、总巯基含量、溶解度等也呈正相关;温度与疏水性、总巯基含量之间呈正相关,与溶解度呈负相关,且相关性程度均弱于斩拌时间与肌原纤维蛋白结构特性之间的相关性。由此可知,鱼糜斩拌过程主要是通过机械作用导致肌原纤维蛋白氧化变性,而非斩拌过程中产生的局部热效应。本研究结果可为鱼糜斩拌条件优化及其加工品质改善提供一定的理论指导。

未漂洗鱼糜冻藏过程中晚期糖化终末产物形成及机制

为探讨未漂洗鱼糜冻藏过程中晚期糖化终末产物(AGEs)的形成规律,将鱼糜样品在不同温度(-18℃和-60℃)下冻藏,于第0,15,30,45,60天测定其AGEs含量及脂肪氧化指标(TBA值)、蛋白质氧化指标(羰基含量、活性和总巯基含量、Ca2+-ATPase活性),分析其变化规律和相关性。结果表明:鱼糜样品在-18℃冻藏60 d,其Nε-羧甲基赖氨酸(CML)和Nε-羧乙基赖氨酸(CEL)含量分别较第0天增加了71.67%和88.24%,而在-60℃冻藏60 d仅增加了59.62%和62.11%,表明超低温(-60℃)冻藏有利于抑制AGEs形成;加热后,鱼糜样品AGEs(CML和CEL)含量增加了约1.05~1.23倍。冻藏过程中样品的TBA值呈先增后降趋势;蛋白质羰基和活性巯基含量逐渐上升,总巯基含量和Ca2+-ATPase活性逐渐降低,且与AGEs含量显著相关(P<0.05)。相对于-18℃冻藏组,-60℃冻藏抑制上述脂质和蛋白质氧化指标的变化,与抑制AGEs形成的趋势一致。说明冻藏温度和时间均对未漂洗鱼糜AGEs的形成有重要影响,而冻藏过程中脂肪和蛋白质氧化是AGEs形成的重要原因。

变性淀粉协同非肌肉蛋白对鱿鱼鱼糜制品凝胶特性及其蛋白构象的影响

为改善鱿鱼鱼糜制品的凝胶特性,优化玉米变性淀粉(乙酰化二淀粉磷酸酯(acetylated distarch phosphate,ADSP))和非肌肉蛋白(蛋清蛋白(egg white protein,EWP)、大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI))的添加量,并分析玉米变性淀粉协同非肌肉蛋白(ADSP-EWP-SPI,AES)对鱿鱼鱼糜制品的质构、分子间作用力、蛋白质二级结构、微观结构的影响,探究AES改善鱿鱼鱼糜制品凝胶品质的机理。结果表明:ADSP、EWP和SPI添加量分别为10%、7%和6%时,鱿鱼鱼糜制品的凝胶特性最好;与对照组相比,添加玉米变性淀粉和非肌肉蛋白后,鱿鱼鱼糜制品中蛋白质的无规卷曲和α-螺旋相对含量下降,β-折叠和β-转角相对含量增加,添加AES有利于热凝胶过程中β-折叠和β-转角结构的保留,促进蛋白质之间的疏水相互作用,形成更加致密的鱼糜凝胶网络结构,提高鱿鱼鱼糜制品的凝胶强度和持水性。相关性分析显示,鱿鱼鱼糜制品的凝胶强度和持水性、疏水相互作用、β-转角及不易流动水相对含量均呈极显著正相关(P<0.01),与自由水相对含量和无规卷曲相对含量呈极显著负相关(P<0.01)。因此,添加10%ADSP、7%EWP和6%SPI通过影响鱿鱼鱼糜制品中的蛋白质二级结构和水分分布,改善了鱿鱼鱼糜制品的凝胶品质。

鱼糜加工漂洗液蛋白质理化特性分析

为探究鱼糜漂洗液中回收蛋白的再利用加工技术并提供理论分析和指导,对等电点沉降法回收的蛋白、单一褐藻胶絮凝剂沉降回收的蛋白、单一壳聚糖絮凝剂沉降回收的蛋白和褐藻胶-壳聚糖复配絮凝剂沉降回收的蛋白进行理化特性分析,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)测定回收漂洗液中水溶性蛋白质的纯度、溶解度、乳化稳定性(Emulsion Stability,ES)与乳化活性(Emulsification Activity,EA)。SDS-PAGE电泳图显示以褐藻胶为单一絮凝剂絮凝回收的蛋白谱带最为完整齐全,其回收的蛋白种类是漂洗液中水溶性蛋白质的全部,分子量为8.3~120.2 kDa。在控制的实验pH值内溶解度大多在35%以上,当pH>6.0时回收蛋白都表现出较好的溶解性,溶解度均高于60%。乳化稳定性指数(Emulsion Stability Index,ESI)和乳化性指数(Emulsion Activity Index,EAI)随pH值的变化趋势基本一致,呈现出先下降后上升的趋势,在pH值为6.0~7.0的实验范围,蛋白质的EA和ES则表现最差。

豆粕蛋白对白鲢鱼糜凝胶特性的影响

研究豆粕蛋白添加量对白鲢鱼糜凝胶特性的影响,并进一步从化学作用力、蛋白二级结构等角度分析影响原因。向冷冻白鲢鱼糜中分别添加0%、0.5%、1.0%、1.5%和2.0%的豆粕蛋白制备鱼糜凝胶,采用质构仪、傅里叶变换红外光谱仪等测定鱼糜凝胶的持水性、蒸煮损失率、白度值、质构特性、感官品质以及化学作用力、总巯基含量和蛋白质二级结构等指标。结果表明:当豆粕蛋白的添加量占冷冻白鲢鱼糜的1.5%时,鱼糜凝胶的持水性、硬度、弹性、内聚性和咀嚼性分别为87.59%±1.44%、381.70±7.64 g、12.41±0.67 mm、0.89±0.02和38.60±0.14 mJ,且均升至最高,同时蒸煮损失率降至最低,为10.20%±0.52%,感官品质亦达最佳,白度值稍有降低。豆粕蛋白添加量为1.5%时,鱼糜凝胶的疏水相互作用和总巯基含量均达到最大,形成了紧密的凝胶三维网状结构。此外,豆粕蛋白的添加对鱼糜蛋白二级结构的影响较小。综合考虑,当豆粕蛋白添加量为1.5%时,有效地改善了鱼糜制品的凝胶特性。

外源添加物和辅助加工技术对鱼糜凝胶动态流变中温度扫描的影响

综述了不同外源添加物及新型辅助加工技术对鱼糜凝胶过程储能和损耗模量的影响,从动态流变学角度,阐述鱼糜凝胶形成的机制,并展望了辅助加工技术和新型外源添加物在改善鱼糜凝胶性能和低盐鱼糜制品质地等方面的潜力。

外源添加剂及加工方式对鱼糜凝胶特性的影响研究进展

鱼糜是获取稳定的肌原纤维蛋白糊的重要来源。由于其丰富的营养价值及较强的凝胶性能而广受欢迎,而凝胶性能在维持鱼糜的结构及理化性质方面起着至关重要的作用。因此,对鱼糜制品加工的外源添加物及加工方式提出更高要求。文章阐述了鱼糜凝胶的物理化学特性,综述了淀粉类多糖、酶类、膳食纤维多糖等外源添加剂,以及传统水浴二段式加热、微波加热、超声波预处理、高静水压、3D打印、酸碱处理等加工方式对鱼糜凝胶性影响的研究现状,并结合当前鱼糜加工改良效果展望了未来鱼糜的发展趋势。

鱼糜副产物蛋白水解物的抗冻活性及对嗜热链球菌的抗冻效果及机制

研究鱼糜加工副产物蛋白水解物(surimi by-product protein hydrolysate,SBPH)的结构与抗冻活性,并通过测定嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)在冷冻处理后的生长性能、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、相关蛋白酶活力、代谢活性与膜电势等指标探究SBPH对嗜热链球菌的抗冻作用机制。结果表明,SBPH的分子质量范围为260~2 550 Da,共鉴定出78个氨基酸长度为8~18的肽段,部分肽段具有三肽重复序列的特征结构,赋予SBPH较高的抗冻活性(热滞活性为1.76℃)。与其他抗冻剂(蔗糖、脱脂牛乳、甘油)相比,SBPH(质量浓度2 mg/mL)可提升冷冻处理后嗜热链球菌的细胞存活率、生长活性和细胞酸化活性,并且SBPH可减轻低温对细胞造成的氧化应激损伤,显著抑制相关蛋白酶活力的下降(P<0.05),并提升细胞代谢活性,减轻细胞膜的超极化,利于保持细胞膜的完整性和流动性。SBPH可在一定程度上维持磷脂双分子层间的作用力,保护细胞膜的结构。综上所述,SBPH可保护细胞的功能和完整性,在一定程度上降低了细胞的低温损伤。

Ellman's法测定鲜、冻鱼糜的巯基含量

鱼糜在冷藏过程中容易发生变性从而影响其凝胶强度。为探究鲜、冻鱼糜变性程度,本文以鲜、冻鱼糜为原料,以巯基含量作为衡量蛋白变性指标,采用Ellman’s法对鱼糜巯基含量进行测定。通过单因素条件优化试验,得到总巯基最佳测定条件为含EDTA的稀释液,DTNB的添加量为100μL,反应时间为45 min,反应温度为25℃;游离巯基最佳测定条件为含EDTA的稀释液,DTNB的添加量为200μL,反应时间为60 min,反应温度为40℃。使用最优条件对鲜、冻鱼糜进行巯基含量测定,结果显示鲜鱼糜的总巯基和游离巯基的含量均高于冻鱼糜,这也在一定程度上证明了冻藏会导致鱼糜部分蛋白变性。