冬凌草甲素对人软骨肉瘤SW-1353细胞迁移和侵袭能力的影响

为探究冬凌草甲素对人软骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力的影响,体外培养人软骨肉瘤SW-1353细胞,将试验分别设为对照组(不做干预),1.25、2.50、5.00μmol/L冬凌草甲素组(1.25、2.50、5.00μmol/L冬凌草甲素)和阳性药物组(6μmol/L阿霉素),检测人软骨肉瘤SW-1353细胞的活力、迁移率、侵袭能力、上皮-间质转化(EMT)蛋白表达量。结果显示:与对照组比较,5.00μmol/L冬凌草甲素组和阳性药物组人软骨肉瘤SW-1353细胞活力降低(P<0.05);1.25、2.50、5.00μmol/L冬凌草甲素组和阳性药物组迁移率及侵袭能力降低,且浓度越高变化越显著(P<0.05)。冬凌草甲素能够通过升高E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达、降低波形蛋白(vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量进而抑制EMT进程,且浓度越高变化越显著(P<0.05)。冬凌草甲素可显著抑制人软骨肉瘤SW-1353细胞的迁移和侵袭,或是通过介导EMT实现的,这为人软骨肉瘤细胞的生物学研究提供了理论基础。

SW-硅墨烯外墙保温系统在超低能耗绿色建筑中的应用

目前我国能源和环境问题日益突出,建筑能耗对环境的影响也越来越明显。针对此问题,住房和城乡建设部于2015年发布了《被动式超低能耗建筑技术指导(试行)(居住建筑)》,以鼓励被动式超低能耗绿色建筑的发展与应用。在超低能耗绿色建筑研究中,外墙保温性能是至关重要的技术指标。对此,上海市嘉定区马陆镇理想之地住宅项目选用SW-硅墨烯外墙保温系统作为外墙保温解决方案,对SW-硅墨烯外墙保温系统进行了介绍,以对超低能耗绿色建筑施工提供参考。

姜黄素对人结直肠癌SW-620细胞抗肿瘤效果的研究

目的:研究姜黄素(Cur)对人结直肠癌SW-620细胞生长、迁移的抑制作用。方法:不同浓度Cur(2、5、10μg/mL)处理SW-620细胞后,采用MTT法检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪分别结合Rh123、DCFH-DA、Annexin V-FITC/PI染色检测细胞线粒体膜电位(Δψ_(m))变化、活性氧簇(ROS)生成及细胞凋亡情况,彗星电泳观察细胞DNA损伤情况,荧光显微技术观察细胞凋亡特征,Transwell实验检测细胞迁移能力,扫描电子显微镜观察细胞表面结构变化。结果:与对照组相比,5、10μg/mL Cur处理24、48 h可显著抑制细胞增殖(t=5.28、21.8、18.19、33.19,均P<0.01),半数抑制浓度分别为6.46、3.75μg/mL。药物处理4 h,与对照组相比,2、5、10μg/mL Cur组细胞内ROS生成分别增加至15.8%、30.2%和45%(t=3.64、7.4、13.8,均P<0.05);Δψ_(m)下降的细胞比例分别为22.7%、38.5%和72.7%(t=7.7、11.32、45.26,均P<0.01);药物处理12、24 h,2、5、10μg/mL Cur组凋亡细胞比例分别为6.6%(t=3.79,P=0.11)、32.6%、68.7%(t=21.3、64.39,均P<0.01)和16.9%(t=10.37,P<0.05)、47.2%、78.9%(t=23.46、19.8,均P<0.01);药物处理12 h,2、5、10μg/mL Cur组迁移细胞的数量分别减少至79.66%(t=7.14,P<0.05)、53.36%和39.45%(t=21.91、25.04,均P<0.01)。结论:Cur可抑制人结直肠癌SW-620细胞增殖和迁移。

二甲双胍对人结肠癌细胞株SW-480增殖的影响

目的观察二甲双胍对人结肠癌细胞株SW-480增殖的影响并初步探讨其可能机制。方法不同浓度的二甲双胍干预结肠癌细胞株SW-480,MTT法比较其生长曲线的变化,采用流式细胞术研究二甲双胍对SW-480细胞周期的影响,Westernblotting测定CyclinD1的表达,用TRAP银染法观察其对端粒酶活性的影响。结果 MTT结果示二甲双胍可以抑制人结肠癌细胞的增殖,并呈时间浓度依赖性。PBS对照组与5mmol/L二甲双胍干预组72h后的细胞G0/G1期所占百分比分别为55.81±0.63,63.38±0.99;S期所占百分比分别为31.11±3.05,25.29±1.64;G2/M期所占百分比分别为13.09±3.00,11.33±2.60。Westernblotting示5mmol/L二甲双胍干预组72h后CyclinD1的表达较PBS对照组明显减弱。TRAP银染法检测示5mmol/L二甲双胍干预SW-480细胞72h后可以显著抑制端粒酶活性。结论二甲双胍能抑制人结肠癌细胞的增殖,其主要机制可能与G0/G1期细胞周期阻滞、下调CyclinD1的表达及抑制端粒酶活性有关。

超声激活血卟啉对SW-480癌细胞的杀伤作用

采用1.1MHz,0.9W/cm2低强度超声,结合血卟啉对体外培养的人肿瘤细胞SW-480进行声照处理,通过噻唑蓝(MTT)法、PI,HO双荧光染色等方法,根据癌细胞形态结构和功能的变化,探讨超声激活血卟啉对肿瘤细胞的杀伤作用。结果表明:血卟啉对癌细胞无明显的损伤,超声加血卟啉处理30s是引起SW-480细胞受损的敏感位点,90s为杀伤癌细胞的优选时间段;杀伤作用呈癌细胞显微结构逐步破坏的变化,并随声照时间的延长而加剧;声照时间在30s至90s区间细胞具有明显凋亡特征,提示超声激活血卟啉杀伤癌细胞机制中可能存在诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

蟾蜍灵对结肠癌SW-480细胞polo-like kinase-1表达及细胞凋亡的影响

目的:观察蟾蜍灵对人结肠癌细胞系增殖的抑制作用,并探讨其作用机理。方法:采用不同浓度的蟾蜍灵作用结肠癌SW-480细胞后,采用MTT法检测细胞的恶性增殖,分别采用琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡情况,分别采用Westernblotting、Northernblotting分别检测polo-likekinase-1(PLK1)蛋白、mRNA水平。结果:蟾蜍灵能抑制结肠癌细胞的恶性增殖,且与浓度相关。蟾蜍灵能诱导结肠癌细胞凋亡,且呈浓度依赖性。流式细胞仪检测发现,蟾蜍灵将细胞阻滞在G2/M期。蟾蜍灵能下调结肠癌PLK1蛋白、mRNA水平,且呈药物浓度和作用时间依赖性。结论:蟾蜍灵有效地抑制结肠癌SW-480细胞增殖,其机制可能与其下调PLK1表达,从而诱导凋亡有关。

β-谷甾醇对人自然杀伤细胞杀伤胰腺癌SW-1990细胞的影响

目的研究β-谷甾醇对人自然杀伤(NK)细胞和人胰腺癌细胞株SW-1990增殖率和功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用本室建立的专用培养液培养NK细胞。不同浓度的β-谷甾醇作用于NK细胞及胰腺癌SW-1990细胞,四甲基偶氮唑蓝法测定β-谷甾醇对NK细胞及胰腺癌SW-1990细胞生长的影响;流式细胞仪检测胰腺癌SW-1990细胞生长周期和凋亡情况;乳酸脱氢酶法评价经不同浓度β-谷甾醇干预后,NK细胞对胰腺癌SW-1990细胞杀伤活性的变化。结果浓度为1.25～10.00μg/mL的β-谷甾醇作用48h后,NK细胞生长抑制率呈负数,较对照组明显降低(P<0.05),但浓度增加到40～80μg/mL后,NK细胞生长抑制率较对照组显著增高(P<0.05);浓度为10～80μg/mL的β-谷甾醇对胰腺癌SW-1990细胞生长有明显抑制作用(P<0.05);浓度为10μg/mL的β-谷甾醇作用后胰腺癌SW-1990细胞凋亡率为27.18%,较对照组及低浓度组明显增加(P<0.05);β-谷甾醇使SW-1990细胞周期主要停滞于S期;浓度为1.25及2.5μg/mL的β-谷甾醇作用48h后,NK细胞对胰腺癌SW-1990细胞的杀伤活性显著高于对照组(P<0.05),且在1.25μg/mL时达最高峰(76.3%);当β-谷甾醇浓度大于5μg/mL,NK细胞的杀伤活性随药物浓度的增加逐渐下降。结论β-谷甾醇能够有效提高NK细胞对胰腺癌SW-1990细胞的杀伤能力。

酪酸梭菌诱导结肠癌SW-480细胞凋亡及作用机制

目的探讨酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡的作用及机制。方法采用不同浓度的酪酸梭菌(1.5×103、1.5×104、1.5×105、1.5×106、1.5×107、1.5×108CFU/mL)在不同作用时间(24、48、72、96 h)处理结肠癌SW-480细胞后,CCK8法检测CB对SW-480细胞的增殖抑制。电镜观察CB对SW-480细胞形态的影响。Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡。Caspase试剂盒检测SW-480细胞中Caspase-3和Caspase-9的活性。Western blot法检测SW-480细胞Bax和Bcl-2凋亡蛋白表达的变化。结果酪酸梭菌对SW-480细胞的生长抑制作用呈明显的时间-剂量依赖性;菌液浓度为1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL的酪酸梭菌处理后的SW-480细胞形成典型的凋亡小体;酪酸梭菌(1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL)处理能显著增强SW-480细胞Caspase-3和Caspase-9的活性,促进SW-480细胞凋亡(P<0.01);随着菌液浓度的增加,凋亡蛋白Bax的表达增强,而抑凋亡蛋白Bcl-2的表达减弱。结论酪酸梭菌可诱导SW-480细胞凋亡,其作用机制与凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspase-3、caspase-9的表达有关。

茶多酚对人γδT淋巴细胞和结肠癌细胞株SW-480的影响

目的:观察茶多酚对人γδT细胞杀伤肿瘤细胞活性的影响和诱导人结肠癌细胞株(SW-480)凋亡和死亡的作用。方法:在体外用不同浓度的茶多酚诱导人γδT细胞和SW-480细胞株,然后测定人γδT细胞杀瘤活性和对肿瘤细胞的作用。用不同浓度的茶多酚分别诱导SW-480细胞4 h后,弃含有茶多酚的培养液再继续培养24 h,然后测定其死亡和凋亡数,用γδT细胞作对照组。结果:茶多酚浓度350 mg/L,作用γδT细胞4 h后能明显增强γδT细胞的杀伤肿瘤细胞活性,与未诱导组和其他浓度组相比,P<0.01;γδT细胞对经茶多酚处理后的SW-480细胞杀伤活性也明显高于对照组(P<0.01)。各种浓度的茶多酚分别与γδT和SW-480细胞作用4 h,弃诱导液再继续培养24 h后,均能诱导其死亡和凋亡,在茶多酚浓度350 mg/L、诱导时间4 h时最明显;同一浓度的茶多酚诱导SW-480细胞死亡和凋亡率明显高于γδT细胞组。结论:茶多酚在一定浓度时能明显提高γδT细胞对肿瘤的杀伤活性;经茶多酚处理的SW-480细胞更易被γδT细胞杀伤。茶多酚浓度在350 mg/L时能诱导SW-480细胞凋亡而对人γδT细胞无影响。

光学生物测量仪SW-9000与IOL-Master测量青少年眼球生物学参数的对比

目的比较SW-9000和IOL-Master测量青少年眼轴长度(axial length,AL)、角膜曲率及角膜直径的准确性和一致性。方法选取来我院进行验光配镜的青少年患者101例,分别在自然瞳孔下进行SW-9000和IOL-Master测量,主要分析AL、角膜平坦曲率(flattest keratometry,FK)、角膜陡峭曲率(steepest keratometry,SK)、角膜水平直径(白到白距离;white to white,WTW)等生物学参数指标在两种测量方法之间的一致性和相关性。应用组内相关系数(intraclass correlation coefficient,ICC)和Bland-Altman一致性分析来评估两种检查设备的可靠性和一致性。结果两种测量方法测得的AL、FK、SK、WTW平均差值分别为0.09 mm、-0.08 D、-0.22 D、0.12 mm。两种测量方法测量的95%一致性界限范围,AL为0.56 mm,FK为1.38 D,SK为1.81 D,WTW为3.28 mm;其中WTW的范围最宽。2种仪器所测结果进行ICC分析,结果显示,AL、FK、SK、WTW的相关系数分别为0.997、0.987、0.983和0.179。结论 SW-9000测量AL、角膜曲率与IOL-Master的测量结果具有较高的一致性,SW-9000测量AL略长于IOL-Master,角膜曲率略平坦于IOL-Master;角膜直径的测量两者一致性较差。

过表达上皮膜蛋白1对结直肠癌SW-480细胞生物学行为的影响及其可能的机制

目的:探讨上皮膜蛋白1(epithelial membrane protejn-1,EMP1)在人结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)组织中的表达水平及其过表达对CRC SW-480细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:免疫组织化学、Western blotting方法检测63例CRC组织及31例癌旁组织中EMP1的表达水平,分析EMP1表达与CRC临床病理参数的关系。慢病毒介导将pLenti6-EMP1质粒转染SW-480细胞,建立EMP1过表达细胞,转染plenti6/V5-DEST空白质粒为对照。Real-time PCR及Western blotting检测转染后SW-480细胞株中EMP1的表达,MTT、流式细胞术及Transwell实验分别检测EMP1过表达对SW-480细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果:EMP1蛋白在人CRC组织的表达显著低于癌旁组织(0.257±0.022 vs 0.863±0.086,P<0.05),并且其表达水平在不同T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及组织分级组间表达有显著差异(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤部位无关(P>0.05)。成功构建EMP1过表达的LeEMP1细胞。与LeEmpty细胞相比,LeEMP1细胞的增殖能力显著下降[(60.94±4.04)%vs(100.00±0.00)%,P<0.05],凋亡率显著升高[(12.10±1.30)%vs(3.10±0.60)%,P<0.05]、侵袭转移能力显著降低[穿膜细胞数:(87.00±12.00)vs(178.00±21.00)个,P<0.05]。LeEMP1细胞Caspase-9表达显著高于LeEmpty细胞(0.764±0.073 vs 0.231±0.029,P<0.05),VEGFC表达显著降低(0.185±0.022 vs 0.663±0.065,P<0.05)。结论:人CRC组织中EMP1蛋白表达明显减低,过表达EMP1能够抑制CRC SW-480细胞的恶性生物学行为,其可能通过调控Caspase-9和VEGFC的表达来发挥作用。

绞股蓝总皂苷对人肾上腺皮质癌SW-13细胞增殖及凋亡蛋白Caspase-8表达的影响

目的探讨绞股蓝总皂苷(Gyp)体外干预对人肾上腺皮质癌(ACC)SW-13细胞增殖及其含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8(Caspase-8)表达的影响。方法采用MTT法检测不同浓度的Gyp对SW-13细胞增殖的影响;普通显微镜下观察细胞形态学改变;实时荧光定量PCR检测Gyp干预后Caspase-8表达的变化。结果 Gyp对SW-13细胞增殖产生明显地抑制作用,且呈时间和浓度依赖性;光镜下观察,Gyp干预后SW-13细胞凋亡特征更明显;实时荧光定量PCR结果显示,Gyp干预后SW-13细胞Caspase-8 mRNA表达明显上调(P<0.01)。结论 Gyp可显著抑制人ACC SW-13细胞的增殖,其作用机制可能为通过上调Caspase-8 mRNA的表达来实现。

番茄抗病基因Sw-5和Ty-3a的多重PCR检测体系的建立

以含有斑萎病毒和黄化曲叶病毒抗病基因和感病基因的番茄为试材,采用多重PCR方法,建立番茄抗斑萎病毒Sw?5和抗番茄黄化曲叶病毒的Ty?3a基因同时扩增的体系,以期为番茄分子标记抗病育种提供更省时、省力、经济的方法。结果表明:多重PCR扩增的特异性片段与单引物扩增片段完全一致,与Sw?5基因紧密连锁的SCAR标记,在抗病基因型中可扩增出574bp的条带,感病基因型中扩增出464bp的条带;与Ty?3a基因紧密连锁的SCAR标记,在抗病基因型中可扩增出630bp的条带,感病基因型中扩增出320bp的条带,多重PCR体系可在同一PCR反应体系中对2个抗病基因进行筛选鉴定及苗期早期辅助选育。

晚期糖基化终产物与其受体相互作用对人结肠癌细胞SW-480增殖的影响

目的糖尿病患者结肠癌的发病率显著高于非糖尿病人群,晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)在糖尿病患者体内生成明显增多。文中观察AGEs对人结肠癌细胞SW-480增殖的影响及其机制。方法体外培养人结肠癌细胞SW-480,以终浓度分别为100μg/ml、200μg/ml、500μg/ml的AGE-BSA处理细胞24h,并设正常对照组和BSA对照组进行比较。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测SW-480细胞活力,利用流式细胞术检测细胞周期的改变,实时荧光定量PCR测定晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)mRNA、细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA的表达。结果①MTT结果示100μg/ml、200μg/ml、500μg/mlAGE-BSA作用SW-480细胞24 h后可以显著促进细胞增殖(P<0.05),并呈浓度依赖性。②流式细胞术结果示200μg/mlAGE-BSA干预组24 h后可以减少SW-480细胞G1期百分率,同时增加S期百分率,与正常对照组比较具有统计学差异(P<0.05)。③实时荧光定量PCR结果示与正常对照组相比,200μg/mlAGE-BSA干预后可以上调RAGEmRNA和cyclin D1 mRNA的表达(P<0.05)。结论 AGEs能促进SW-480细胞的增殖,其机制可能与上调RAGEmRNA和cyclin D1 mRNA的表达,加速细胞G1期向S期转换相关。

SW-480裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性

目的 :建立生物学特性稳定的结肠高分化腺癌裸小鼠移植瘤模型。方法 :建立人结肠高分化腺癌细胞株SW 480裸小鼠移植瘤模型 ,并确定移植瘤生长情况、组织学变化及细胞动力学改变等生物学特性。结果 :移植瘤体内传代稳定 ,潜伏期7～8d ;保留了人结肠腺癌的组织学特征 ;细胞动力学检测显示以四倍体细胞为主 ;移植瘤细胞具有分泌CEA的功能。结论 :本移植瘤模型是一个生物学特性较稳定的人结肠高分化腺癌裸小鼠移植瘤模型。

12Cr1 MoV钢SW-CCT曲线的测试

针对12Cr1MoV钢焊缝区金属相变研究这一空白,以温度作为实时检测的变量,实时记录焊接过程中焊缝区的温度变化,提取实际焊接热过程中的峰值温度和实时的冷却速度,作为绘制12Cr1MoV钢焊缝区连续冷却转变(SW-CCT)曲线的热模拟工艺.借助热模拟试验机,辅以实际的焊接冷却速度,得到12Cr1MoV钢的SW-CCT曲线.当t8/3段的平均冷却速度小于1.7℃/s时,12Cr1MoV钢焊缝区金属的室温组织为铁素体(F)+珠光体(P)+贝氏体(B);冷却速度小于4.7℃/s时,室温组织为P+B;冷却速度小于33℃/s时,室温组织为B;冷却速度大于33℃/s时,室温组织为马氏体(M).焊缝区金属热模拟样的室温组织观察结果、维氏硬度测试结果与SW-CCT曲线的测试结果一致.

EPA SW-846方法研究的十一个要素及启示

文章介绍了美国环保局(EPA)固体废物办公室对开展新方法研究工作的程序规定,着重阐述了方法研究所要遵循的十一个要素的内容。对于我国的方法研究工作具有一定的启示作用。

BTL-SW-V1.2操作思维测试系统的开发与检验——摔跤、羽毛球、击剑不同水平运动员操作思维之比较

运动员的思维主要体现为直觉式思维的特点,而传统的"三筹码"研究主要测试的是逻辑思维。重新开发了BTL-SW操作思维测试系统,以期真实反映运动思维的特点,并提高其预测效能。研究选用了开放式运动项目(摔跤、羽毛球和击剑)的运动员为研究对象,对BTL-SW操作思维测试系统进行检验。研究证实,BTL-SW-V1.2操作思维测试系统是一个有效的测试工具,能有效地区分优秀和一般运动员。

华蟾毒精通过Wnt/β-catenin信号通路抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的机制研究

目的探讨华蟾毒精抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。方法使用1.0μmol/L华蟾毒精处理后,检测人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力和迁徙能力。华蟾毒精处理后,通过高通量测序和信号通路富集分析人结直肠癌SW-480细胞中异常的信号通路。通过实时荧光定量PCR、免疫印迹和分子对接分析华蟾毒精改变人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力的潜在分子机制。结果华蟾毒精处理后,人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力在2、3、4 d时显著下降(P<0.05)。同时,人结直肠癌SW-480细胞的迁移能力显著下降。高通量和信号通路富集分析发现华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后Wnt/β-catenin信号通路中的基因被影响最多。华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后,发现Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后,分离细胞的细胞核和细胞浆发现β-catenin在细胞浆中聚集,很少入核。同时,华蟾毒精处理人结直肠癌SW-480细胞后,磷酸化的β-catenin的蛋白增加。通过分子对接发现华蟾毒精与β-catenin的第332位氨基酸T具有潜在的结合能力。通过CRISPR/CAS9技术敲除人结直肠癌SW-480细胞中的β-catenin,并在敲除了β-catenin的SW-480细胞中分别构建野生型β-catenin和突变型β-catenin T332A持续表达的稳转细胞系。华蟾毒精处理具有野生型β-catenin和突变型β-catenin的人结直肠癌SW-480细胞后,发现在野生型β-catenin细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著下降(P<0.05),而在突变型β-catenin细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的mRNA表达水平均显著上升(P<0.05)。同时,使用华蟾毒精处理突变型β-catenin的人结直肠癌SW-480细胞后,人结直肠癌SW-480细胞的细胞活力和细胞迁移能力无显著变化。结论华蟾毒素通过结合β-catenin第332位苏氨酸,增加了β-catenin的磷酸化,抑制了β-catenin进入细胞核的量,降低了Wnt/β-catenin信号通路下游的关键基COX2、BIRC5、CCND1、MYC、AXIN2、EPCAM、WISP1的转录,最终抑制人结直肠癌SW-480细胞活性及迁移能力。