不同干燥方式对甘薯叶理化特性和抗氧化能力的影响

目的 探究3种不同干燥方式(微波干燥、热风干燥、冷冻干燥)对甘薯叶理化特性和抗氧化能力的影响。方法 以新鲜甘薯叶为原料,探究3种不同干燥方式对甘薯叶基本成分(水分、蛋白质、总膳食纤维、粗脂肪、可溶性糖、总酚、总黄酮和绿原酸含量)、理化特性(色度、微观结构、胆固醇吸附能力、持水力、持油力和葡萄糖吸附能力)和抗氧化活性{1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) ammonium salt, ABTS]自由基抑制率、总还原力和羟基(hydroxyl, OH)清除能力}以及酚类物质的组成等影响。结果 利用热风干燥的甘薯叶水分含量最高,为7.96 g/100 g;冷冻干燥含水量最低,为7.29 g/100 g,蛋白质含量、粗脂肪、总酚、总黄酮以及绿原酸含量最高,分别为31.39 g/100 g、3.43 g/100 g、50.73 mg CAE/g DW、18.49 mg RE/g DW、7.05%;热风干燥的总纤维含量最高,为28.80 g/100 g。不同干燥方式对甘薯叶理化指标的影响中,利用冷冻干燥的甘薯叶色泽品质明显优于热风干燥和微波干燥;热风干燥的胆固醇吸附能力和持油力最强,分别为0.23 mg/L, 1.54 mL/g;冷冻干燥的持水力和葡萄糖吸附能力最优,分别为7.33 g/g和12.00 mmol/g。抗氧化性上,不同方法测定的抗氧化能力都表现为冷冻干燥>微波干燥>热风干燥。冷冻干燥的总还原力、DPPH·清除能力、·OH清除能力、ABTS+清除率分别高达83.34、41.28、9.17、27.21 mg VC E/g DW。结论 冷冻干燥最适合用来对甘薯叶进行干燥处理。

甘薯叶过氧化物酶的分离纯化及其部分性质研究

经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析,从甘薯叶中得到过氧化物酶(POD)电泳纯制品。该酶比活力为91923.14U/mg,纯化倍数为255.69,回收率为1.59%。该酶分子量约为35kD,最适pH值为5.6,最适温度为60℃。该酶在20～50℃、pH4～8内稳定。以不同浓度H2O2为底物在pH7.2和25℃下测得该酶Km值为0.291mol/L。低浓度草酸、尿素、Li+、Na+、K+、Mg2+等对该酶有激活作用;SDS、KSCN、抗坏血酸(AsA)、Mn2+等对该酶有抑制作用;甲醇、乙醇、乙二醇、异丙醇对POD均有一定抑制作用,其抑制作用强弱顺序为异丙醇>乙醇>甲醇>乙二醇。实验表明,该酶稳定性较强。

红薯叶黄酮分离纯化工艺及抗氧化性研究

本实验以红薯叶为原料,研究了黄酮类化合物分离纯化工艺,并研究了粗提物与纯化产物对羟基自由基、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(OPPH·)的清除作用。结果表明,红薯叶黄酮最佳提取工艺为60%乙醇水溶液90℃回流提取60min,料液比1:40,粗提物中总黄酮含量为101.3mg/g。提取液用HPD500大孔树脂进行纯化效果好,最佳纯化工艺为:吸附条件:上样原料液黄酮含量1.8mg/ml,pH3上样流速为3BV/h;洗脱条件:50%乙醇、流速3BV/h,流量4BV,在此条件下,纯化产品黄酮含量为488.7mg/g;粗提物与纯化产物均具有对自由基的清除作用,是一种有效的天然抗氧化剂新资源。

甘薯叶中抗油脂氧化活性成分的研究

将甘薯叶中的抗氧化活性物质采用甲醇粗提后,再用不同有机溶剂进行梯度提取,并部分纯化,对不同溶剂提取物和纯化物的抗氧化性进行了研究。结果表明:二氯甲烷、无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮提取物及正丁醇的纯化物均具有抗氧化性,0.02%浓度的二氯甲烷、无水乙醇、正丁醇纯化物的抗氧化性优于0.02%BHT。正丁醇纯化物、乙酸乙酯组分B的抗氧化活性物质分别为黄酮和多酚类化合物。

甘薯叶片蔗糖酶的分离纯化及其部分性质

纯化酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白带，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示一条蛋自带，其亚基分子量为３９．８ｋＤ。用ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶过滤测得全酶的分子量为７９．４ｋＤ，该酶由两个相同亚基组成。其表观Ｋｍ为１２ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｖｍａｘ为９９．５ｍｇ还原糖ｍｇ－１ｐｒｏｔｅｉｎｈ－１。

甘薯叶多酚氧化酶的分离纯化和部分性质研究

经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析,从甘薯叶中得到多酚氧化酶（PPO）电泳纯制品.酶比活力为50 075.43 U/mg,纯化倍数为597.99,回收率为0.48%,相对分子质量约为6.44×104,最适pH值为6.5,最适温度为35℃,且在25~55℃内较稳定.有机溶剂甲醇、乙醇、异丙醇对多酚氧化酶均有一定抑制作用,其抑制作用由强到弱顺序为异丙醇、乙醇、甲醇.低浓度的抗坏血酸和亚硫酸钠对多酚氧化酶有强烈的抑制作用,柠檬酸次之,EDTA-2Na的抑制效果较弱.

接骨草蔗糖酶同工酶的分离纯化及其部分性质研究

从接骨草幼叶中提取的蔗糖酶粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶过滤层析纯化,得到3种同工酶．对3种同工酶进行SDS-PAGE和IEF电泳均显示一条蛋白带,其亚基分子量分别为45．8 KD,44．3 KD,43．2 KD;等电点分别为pH 4．0,pH 3．8,pH 3．75．凝胶过滤测得3种同工酶全酶分子量分别为91．2 KD,89．1 KD,87．4 KD,表明3种同工酶均由2个相同亚基组成,其表观Km分别为30 mmol／L, 57．1 mmol／L,65 mmol／L;Vmax分别为98μg／min,48 μg／min,35μg／min．同工酶Ⅰ和同工酶Ⅲ在pH4．4-5．0 时有最大活性,同工酶Ⅱ则在pH3．9-4．2时有最大活性．3种同工酶均在pH3-6范围内比较稳定．同工酶Ⅰ和同工酶Ⅱ在48-52℃有最大活性,同工酶Ⅲ在50-55℃有最大活性．3种同工酶均在50℃以下有较好的稳定性．

甘薯叶酸性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究

以新鲜甘薯老叶为材料,经过匀浆、硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Superdex-200凝胶层析等步骤后,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定获得了电泳纯的酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP),纯化后ACP比活力为251.49 U/mg,纯化了169.07 倍,回收率为3.50%。酶学性质研究结果表明:ACP为单亚基酶,全酶分子质量为42.3 kD,单亚基分子质量为41.2 kD;最适反应温度65 ℃,最适pH 5.2;在40 ℃以下和pH 4.0～6.0范围内酶活性较稳定;以对硝基苯磷酸二钠为底物时,测得其米氏常数Km值为0.258 mmol/L;Ca2+和Mg2+对ACP酶活性有明显激活作用,K+和Li+对ACP酶活性无影响,甲醇、乙二胺四乙酸和草酸对ACP酶活性的抑制作用较大;Hg2+和Ag+对ACP酶活性的抑制作用非常明显。

甘薯多糖提取纯化及理化性质初步研究

通过正交实验,确立实验室小量、快速、高效提取甘薯多糖的最佳操作条件,建立了一种新的提取方法,即中性条件下,溶液与溶质体积比为2,乙醇与浓缩液体积比为3,浸提时间为2 h,浸提温度为65℃,甘薯多糖提取率大于90%.利用这种改进的提取方法,分离纯化得到一种甘薯多糖.经纸层析、Sephadex G-200柱层析、紫外扫描、红外光谱分析,确定该多糖为均一多糖,相对分子质量为4.6×104,单糖组成为β-葡萄糖.

甘薯叶中咖啡酰奎尼酸类物质的分离纯化和高效液相色谱法分析

以甘薯叶为研究材料,通过半制备高效液相色谱(HPLC)分离纯化得到6种咖啡酰奎尼酸类物质产品,并采用核磁共振(NMR)和电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF/MS),对不同甘薯叶多酚的具体组成成分及多酚含量进行检测分析。结果表明,甘薯叶多酚主要为咖啡酰奎尼酸及其衍生物。不同品种的甘薯叶多酚组成基本相同,主要成分为3-CQA、4-CQA、5-CQA、3,4-di CQA、3,5-di CQA和4,5-di CQA,但含量有所差异。本实验采用高效液相色谱法准确、重现性好,并结合对不同品种紫薯叶酚类物质含量进行比较,能够为生产原料选择和工艺提供质量控制依据。

甘薯茎叶多酚分离纯化及降血糖活性研究进展

甘薯茎叶为甘薯地上蔓生部分,一年能多次采收,与甘薯块茎产量相当。甘薯茎叶中的多酚类物质含量丰富,主要为酚酸类和黄酮类物质,具有抗氧化、降血糖、抗菌消炎、抗肿瘤、保护肝脏和免疫调节等作用,且甘薯茎叶多酚类物质的降血糖作用已成为天然产物活性研究领域的热点之一。本文综述了甘薯茎叶多酚类物质的提取和分离纯化方法、酚酸类和黄酮类物质的组分构成及体外、体内降血糖活性作用,并展望了甘薯茎叶多酚类物质降血糖活性的研究方向,旨在为甘薯茎叶多酚类物质在食品和医疗保健领域的开发应用提供理论参考,提高甘薯茎叶多酚类物质的有效开发利用率,进一步促进我国甘薯茎叶加工业的可持续发展。

‘忠薯1’薯皮过氧化物酶分离纯化及其理化性质研究

经表皮组织匀浆抽提,无水乙醇分级沉淀,DEAE-Sepharose离子交换层析,Superdex-200凝胶过滤层析,获得电泳纯度的过氧化物酶.该酶比活力、纯化倍数及回收率分别为571975.93 U/mg,51.72,33.80%.该酶总分子量约为37.2 kDa,且为单聚体.该酶最适温度,pH值分别为65℃,6.2,具有耐酸耐热特性.‘忠薯1’过氧化物酶Km值为52.833 mmol/L,且属于乒乓反应.Mg^2+,Cu^2+,Co^2+,Fe^3+对该酶有较强激活作用;Pb2+是甘薯过氧化物酶的有效抑制剂.

β-淀粉酶的分离纯化及酶学性质研究

以"渝薯17"为实验材料,从淀粉生产废水中分离纯化β-淀粉酶.去皮、1∶10(m/V)匀浆抽提,经过乙醇分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析获得电泳纯β-淀粉酶并对其酶学性质进行了研究.结果表明:该酶的比活力高达333.15U/mg,显著高于市售枯草杆菌来源酶活(50U/mg);纯化倍数9.93倍,回收率66.60%;亚基分子量约为55.12kD,全酶分子量约为223.54kD;最适温度50℃,最适pH值6.2;50℃以下,pH值6~8具较好的稳定性.在最适条件下以可溶性淀粉为底物,测得Km为0.001 36g/mL,V_(max)为0.112mg/mL·min;Mn^(2+),Pb^(2+),Li^+,Zn^(2+),K^+,Cu^(2+),草酸,SDS对该酶有不同程度的抑制作用,Co^(2+)有激活作用,有机物作用不明显.

紫甘薯色素的研究进展

综述了国内外有关紫甘薯花色苷色素的研究进展,包括原料、色素提取和纯化方法、组分、含量测定、理化性质及生理学功能等,为该色素的进一步开发利用提供了参考。

甘薯叶中SOD的分离纯化研究

通过比较几种提取的方法对纯化的倍数和酶活收率的影响,得到了甘薯叶上清液的较优提取纯化方法,即采用热变性,有机物丙酮沉淀及凝胶过滤纯化相结合的方法。热变性最佳时间为15min、温度为60℃,加入丙酮的量为其粗酶液的1.4倍。经凝胶过滤纯化,最终SOD酶活收率为61.5%,蛋白质去除率为97.9%,比活力达到1126.87U/mg,纯化倍数为30.32。