益气活血方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

目的探讨益气与活血中药含药血清对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖能力的影响。方法全细胞贴壁培养法获取、纯化BMSCs,体外培养,建立大鼠骨髓间充质干细胞的培养体系,采集空白对照大鼠、益气药、活血药、益气活血中药灌胃大鼠含药血清,用10%浓度以上不同含药血清培养第三代BMSCs,置于37℃,5%CO2培养箱中孵育。用流式细胞术鉴定BMSCs。噻唑基四唑比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测细胞活性,绘制生长曲线,观察10%益气、活血、益气活血中药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响。结果采用全骨髓贴壁法获取的BMSCs,经流式细胞术检测,CD44、CD106呈阳性表达,基本不表达CD45、CD34;MTT法检测结果显示,培养第2、4、5天细胞快速增长,均较前一天增长明显(P<0.05),第6天时活血方血清组与益气活血方血清组细胞增长已呈下降趋势,而其它三组在第6天细胞增长达最大,与前一天比较仍有差异(P<0.05),到第7天呈下降趋势。BMSCs去除基线增殖率组间比较,培养第2天时,各组间比较虽无差异,但活血方血清组达最大(71.39±4.98%);第4、6天时,益气活血方组达最大(66.40±1.47%),与其它三组比较P<0.01,活血方血清组次之;培养第6天时,益气方血清组较其它三组大,益气活血方血清组次之,活血方血清组最低。结论全细胞贴壁培养的大鼠骨髓间充质干细胞在细胞形态与表形表达上均具备BMSCs特征;益气活血中药含药血清对培养BMSCs增殖影响最大,活血方含药血清对细胞增殖影响出现最早、益气方含药血清对细胞增殖影响时间最长。

益气活血中药配合西医基础治疗糖尿病足0级疗效观察

目的:观察益气活血中药配合西医基础治疗糖尿病足0级的临床疗效。方法:46例随机分为观察组24例和对照组22例。观察组采用西医基础治疗(控制血糖、改善循环、抗血小板聚集等)加用益气活血中药内服治疗,对照组单用基础治疗。结果:治疗后观察组足背动脉峰值流速明显降低、踝肱指数明显增加。总有效率观察组87.5%、对照组68.2%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血中药配合西药基础治疗糖尿病足0级优于单纯西医治疗。

益气养阴、清利活血法对微小病变肾病大鼠血清和肾组织NO表达的影响

目的探讨益气养阴、清利活血法对肾脏的保护作用和机制。方法用表柔比星尾静脉注射法(6mg/kg)复制微小病变肾病大鼠模型,分别给予不同剂量益气养阴清利活血中药液、强的松混悬液灌胃治疗,连续给药4周。测定大鼠24h尿蛋白定量、血清白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、尿素氮、肌酐、血清及肾组织一氧化氮(NO)的水平,并进行电镜下肾脏组织形态学观察。结果模型组大鼠血清、肾组织NO水平明显高于正常组(P<0.05～0.01)。益气养阴、清利活血法可减少微小病变肾病大鼠尿蛋白的排泄量,改善血清生化指标,降低血清及肾组织NO水平(P<0.05～0.01),修复肾小球上皮细胞足突的结构。结论益气养阴、清利活血法对微小病变肾病大鼠有明显疗效,并能抑制其增高的NO表达,从而减轻肾脏病理损害,缓解肾病。

霍介格教授运用甘味药治疗胃癌经验撷英

[目的]总结霍介格教授运用甘味药治疗胃癌的经验。[方法]通过临证抄方、病案整理,记录霍教授对胃癌病因病机的分析,整理出霍教授治疗胃癌的辨证思路以及临证施治中选用甘味药的理论来源,并具体阐述甘味药的选择及临床用药经验,最后归纳总结霍教授运用甘味药治疗胃癌各个证型的独到见解,并列举案例一例予以佐证。[结果]霍介格教授认为胃癌以"脾胃虚弱"为本,"热毒、血瘀、痰结、气滞"为标。治疗应以健脾养胃、补土和中为基本治法,在此基础上或清泄、或温通、或消散、或渗利,随证出入。甘味药入脾胃经,能补能缓能和,药性较为平和,甘温益气补血、甘凉濡润、酸甘化阴、辛甘扶阳、甘淡渗湿,可应用于胃癌各种证型,临床取得较好的效果。验案中患者胃癌术后,加之化疗药物攻伐,以致脾胃气血两虚,以健脾和胃、益气养血为主要治法,疗效确切。验案辨治精确,充分体现了霍介格教授运用甘味药治疗胃癌的临床经验。[结论]霍介格教授运用甘味药治疗胃癌经验独到,疗效显著,值得学习与临床推广运用。

益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的:探讨益气养阴活血方对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢的影响。方法:12周龄Wistar雄性大鼠60只,随机选取10只为空白组,其余为糖尿病组。糖尿病组经高糖高脂饲料联合小剂量STZ诱导造模成功后随机分为5组,即模型组、丹参滴丸组和中药高、中、低剂量组。中药组和丹参滴丸组分别进行药物干预5wk,空白组和模型组分别给予相应剂量的生理盐水。5wk后检测各组血脂及血糖。结果:中药组T2DM大鼠FBG、2h BG、GSP都降低,且效果优于丹参滴丸组(P<0.05);在改善体重减轻方面各中药组与丹参滴丸组疗效相当(P>0.05);在改善血脂代谢紊乱方面中药组能显著降低TC、TG、LDL,疗效优于丹参滴丸组(P<0.05),且中剂量组疗效更佳,但在升高HDL方面中药组与丹参滴丸组疗效无显著差异(P>0.05)。结论:益气养阴活血方在降糖及调脂方面疗效较丹参滴丸好,且中药中剂量组疗效更佳。

益气活血中药预处理对脂多糖致大鼠急性肺损伤早期炎性因子的影响

目的:观察和探讨益气活血中药预处理对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠早期炎性因子的影响。方法:SD雄性大鼠60只,随机分成正常对照组、模型对照组、地塞米松组、益气活血中药组,每组15只;除正常对照组气管内滴注0.9%氯化钠溶液,其余各组滴注LPS(5mg/kg)制备ALI模型;造模前后各连续用药3d,2次/d,各组分别于造模后8、24、72h各处死5只,ELISA法检测血清炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)的含量,HE染色光镜下观察肺组织病理学改变。结果:肺组织病理形态学观察:模型对照组肺泡结构破坏或消失,肺泡间隔显著增厚,肺间质充血水肿,大量炎性细胞浸润,两用药组肺损伤均有一定程度的改善。大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β含量:模型对照组各时间点均明显高于正常对照组及两用药组(P<0.01);72h时间点中药组TNF-α、IL-1β水平与地塞米松组无明显差异,而IL-10、TGF-β高于地塞米松组(P<0.05)。结论:益气活血中药能够降LPS糖致急性肺损伤血清中炎性因子的含量,调节促炎因子和抗炎因子的平衡,减轻肺组织的病理损伤,起到防治急性肺损伤的作用。

经穴注射骨髓间充质干细胞联合中药对糖尿病大鼠后肢缺血血流的影响

目的:探讨经穴注射骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合中药对糖尿病大鼠后肢缺血血流的影响。方法:80只SD大鼠随机分为8组:正常假手术组、糖尿病(DM)假手术组、DM缺血组、中药组、局部注射组、局部+中药组、穴位注射组、穴位+中药组。注射选穴:三阴交、照海、环跳、阳陵泉、后三里;局部注射取缺血组织与正常组织交界处等距离选取5个点为注射部位。每只大鼠共注射1×107/m L BMSCs 100μL,每处注射20μL,其他对照组注射等量PBS缓冲液。应用Peri Scan PIM型激光多普勒血流成像仪,比较各组大鼠后肢不同时期血流指数(PUI)变化,以及分析中药与注射BMSCs的交互作用。结果:组内PUI比较,穴位注射组、穴位+中药组术后7d与术后2d比略有升高(P<0.05);DM缺血组、中药组、局部+中药组、穴位注射组、穴位+中药组术后14、21d大幅升高(P<0.05),且穴位+中药组PUI术后21d显著升高(P<0.01),差异均有统计学意义。术后7d、14d、21d血流指数差值与术后2d组间比较,穴位+中药组明显较正常假手术组、DM假手术组升高(P<0.05),差异均有统计学意义。中药与注射BMSCs的交互作用不明显。结论:经穴注射BMSCs联合中药或明显改善糖尿病大鼠后肢缺血血流情况,比其他方法对于促进后肢血流量效果好,其次是穴位注射组,然后是局部+中药组、局部注射组、中药组。

应用Abrio偏光影像技术探讨益气活血中药对衰老大鼠胸主动脉纤维结构的干预作用

目的利用Abrio偏光影像技术定量观察大鼠胸主动脉的纤维结构,探讨增龄引起的胸主动脉纤维结构的改变及益气活血中药的干预作用。方法建立自然衰老大鼠模型,将衰老大鼠分为5组:衰老组、益气活血中药人参三七川芎提取物(中药)高[1493.4 mg/(kg·d)]、中[746.7 mg/(kg·d)]、低[373.4mg/(kg·d)]剂量组,氯沙坦阳性对照(氯沙坦)组,另设一青年对照组,每组7只大鼠。中药干预15周后,制作胸主动脉石蜡切片,未染色条件下利用Abrio液晶偏光影像系统对纤维的排列方向进行定性和定量分析。对胸主动脉行苦味酸天狼猩红染色,使胶原纤维独立成像,Abrio下观察胶原纤维,并对胶原纤维双折光的强度进行定性和定量分析。结果与青年组比较,衰老组胸主动脉管壁增厚,伪彩和矢量标注示纤维的排列方向发生紊乱,双折射信号方位角的变异程度增加(P<0.01),光程差增大(P<0.01)。与衰老组比较,中药高、中、低剂量组及氯沙坦组胸主动脉管壁变薄,伪彩和矢量标注示纤维排列方向更整齐。中药高、中、低剂量组纤维双折光信号方位角的变异程度较衰老模型组减小(P<0.01),氯沙坦组纤维双折光信号方位角的变异程度与衰老组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药高、中、低剂量组及氯沙坦组胶原纤维的光程差均较衰老组减小(P<0.01)。结论 Abrio较传统的偏振光技术更适用于血管纤维结构的研究,其能更加客观、清晰地反映血管纤维的形态结构;益气活血中药可以改善增龄引起的胸主动脉管壁重构,抑制胶原纤维增生,减轻纤维排列紊乱的现象,延缓血管的老化。