山地虎耳草质量控制方法研究

目的建立山地虎耳草的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对山地虎耳草中金丝桃苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定山地虎耳草中金丝桃苷和当药醇苷含量。结果金丝桃苷薄层色谱鉴别斑点清晰,特征明显,专属性强,可行性良好,12批样品均显示有金丝桃苷的斑点;高效液相色谱法测定金丝桃苷和当药醇苷2种成分分别在0.1246~1.4946μg(r=0.9999)、0.0453~0.5436μg(r=0.9999)范围内与其峰面积积分值均呈良好的线性关系。结论该文建立的质量控制方法简便、准确、可行,可用于山地虎耳草的质量控制。

11种獐牙菜及近缘植物中有效成分的高效液相色谱测定

建立了獐牙菜中３种苦味甙，即獐牙菜苦甙（ｓｗｅｒｔｉａｍａｒｉｎ）、獐牙菜甙（ｓｗｅｒｏｓｉｄｅ）、龙胆苦甙（ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ）及一种 酮甙──獐牙菜 酮甙（ｓｗｅｒｔｉａｎｏｌｉｎ）的高效液相色谱定量分析方法（μ－ＢｏｎｄｐａｋＣ１８柱，水—甲醇—异丙醇—四氢呋喃＝６５：３０：５：１作流动相）；对１１种獐牙菜及近缘植物椭圆叶花锚、坚龙胆进行了含量测定，并对他们之间的异同进行了比较。

高效液相色谱法测定川东獐牙菜中多种成分的含量

目的:建立测定川东獐牙菜中雏菊叶龙胆苷、苦龙胆酯苷、去甲基雏菊叶龙胆酮和雏菊叶龙胆酮含量的高效液相色谱方法。方法:HYPERSIL BDS C_(18)(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-磷酸二氢钠(0.03mol·L^(-1),pH=3.0),梯度洗脱(CH_3CN%:0 min 10%,15min 20%,30min 35%,50min 55%),流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为250nm,柱温为25℃。结果:雏菊叶龙胆苷,苦龙胆酯苷,去甲基雏菊叶龙胆酮和雏菊叶龙胆酮分别在0.0403-0.3024μg,0.0604-0.4527μg,0.1320-0.9900μg,0.1610-1.2072μg范围内线性良好,相关系数r分别为0.9999,0.9999,0.9999,0.9999,其平均回收率均在98%-103%范围内,RSD均小于1%(n=5)。结论:本方法操作简便,分离效果好,灵敏度高,重现性好,为全面控制川东獐牙菜质量提供一个可靠的方法。

HPLC测定四川及青海地区獐牙菜植物中6种主要成分的含量

目的：建立反相高效液相色谱法同时测定四川及青海地区部分獐牙菜中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、异荭草苷、1,8-二羟基-3-甲氧基咄酮的含量。方法：采用RP-HPLC,使用Kromasil C_(18)(4．6mm×2．50 mm,5μm)柱；流动相甲醇-水(含0．02%磷酸)；梯度洗脱程序为0～50 min,甲醇的体积分数(下同)由20%上升至80%；50-55 min由80%增至100%,55-60 min为100%,流速1 mL·min(-1),检测波长254 nm；柱温35℃。结果：6种成分均达到基线分离,线性良好。结论：该方法快速、准确、重复性好,为该类药材的入药提供了理论依据。

川东獐牙菜化学成分的研究

目的 研究川东獐牙菜的活性成分。方法 采用硅胶、SephadexLH 2 0柱层析和UV ,IR ,1 H NMR ,1 3 C NMR ,MS等光谱分析方法。结果 鉴定 4个化合物 ,分别为苦龙胆酯苷 (amarogentin ,Ⅰ )、雏菊叶龙胆苷 (swertianolin ,Ⅱ )、去甲基雏菊叶龙胆酮(demethylbellidifolin ,Ⅲ )和雏菊叶龙胆酮 (bellidifolin ,Ⅳ )。结论 Ⅱ ,Ⅲ均为首次从本植物中分离得到 ,首次利用 2D

高效液相法同时测定獐牙菜属植物中四种活性成分(英文)

目的:同时测定獐牙菜属植物中四种抗肝炎活性成分的含量。方法:用高效液相色谱法对獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和雏菊叶龙胆酮四种抗肝炎活性成分进行了分析。结果:在选定的色谱条件下四种成分分离良好,在检测浓度范围内线性良好。日内和日间精密度分别小于2%和4.6%,加样回收率为97.94%～99.84%。建立了獐牙菜属植物中四种不同化学结构类型抗肝炎活性成分的含量测定方法。结论:本方法简单、准确,能成功的的运用于同时测定獐牙菜属植物不同部位中獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和雏菊叶龙胆酮四种抗肝炎活性成分的含量以及獐牙菜属植物的鉴定。

HPLC法同时测定尖叶假龙胆中三种山酮类化合物的含量

目的：利用高效液相色谱法同时测定尖叶假龙胆中当药醇苷、雏菊叶龙胆酮、去甲基雏菊叶龙胆酮的含量。方法：取尖叶假龙胆粗粉0.5 g,用甲醇25 m L超声震荡提取30 min,制成供试品溶液。色谱条件：Waters Symmetry C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;流动相：甲醇-磷酸水（p H2.6）;柱温35℃;流速1 m L/min;进样量：10μL;梯度洗脱45 min。结果：尖叶假龙胆中当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮分别在13.6~122.4μg/m L,10~90μg/m L,10.8~97.2μg/m L的范围内线性关系良好（r值分别为0.997 4,0.996 7,0.998 0）;当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮平均回收率（n=6）分别为99.97%,102.02%,98%。结论：尖叶假龙胆中当药醇苷,去甲基雏菊叶龙胆酮和雏菊叶龙胆酮的含量分别为23.94 mg/g,4.49 mg/g,7.92 mg/g。

当药醇甙的伏安行为及其抗氧活性研究

研究了当药醇甙的极谱伏安特性及其清除超氧自由基(O-2·)及羟基自由基(·OH)的作用.在磷酸盐缓冲溶液(pH=8.2)中,当药醇甙有一个不可逆吸附还原波,峰电位为-1.61V(Vs.SCE),有2个电子和2个质子参与了此电极反应.采用经典邻苯三酚自氧化法及Fenton法试验,表明当药醇甙对O-2·及·OH有明显的抑制作用,50%抑制率时当药醇甙的用量分别为12.8和0.22mg·L-1.

当药醇苷对β淀粉样蛋白诱导神经细胞损伤模型GSK-3β及Akt表达的影响

目的研究当药醇苷对阿尔茨海默病(AD)细胞模型糖原合成酶激酶(GSK)-3β及蛋白激酶B(Akt)表达的影响及机制。方法10μmol/L Aβ作用于PC12细胞制作成AD细胞模型。实验分为正常对照组,模型组,当药醇苷低剂量组,当药醇苷高剂量组,LY294002组,LY294002+当药醇苷高剂量组。结果与正常对照组比较,模型组p-Akt蛋白水平明显下降(P<0.05),而p-GSK-3β蛋白显著升高(P<0.05)。与模型组比较,当药醇苷高、低剂量组p-Akt蛋白表达水平明显升高,p-GSK-3β蛋白表达显著下降(P<0.05);当药醇苷高、低剂量组间比较差异不显著(P>0.05);用LY294002处理的两组p-Akt蛋白和p-GSK-3β蛋白表达水平与正常对照组无显著差异(P>0.05),LY294002+当药醇苷高剂量组与当药醇苷高、低剂量组的p-Akt蛋白和p-GSK-3β蛋白表达水平比较有统计学差异(P<0.05)。结论当药醇苷可以拮抗Aβ导致的AD神经损伤,具有神经细胞保护作用,其作用机制可能通过激活PI3K/Akt信号通路,提高p-Akt蛋白表达水平,抑制该通路下游靶分子p-GSK-3β活性而实现。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药黄素的含量

[目的]建立反相高效液相色谱法测定湿生扁蕾中有效成分当药黄素含量的方法。[方法]采用Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm.）色谱柱,52%甲醇/水（含0.04%H3PO4）为流动相,流速0.8 ml/min,检测波长270 nm,柱温30℃。[结果]当药黄素在10 min内与其他组分达均到基线分离,当药黄素的线性范围是0.338-2.025μg（r=0.999 5）,加标回收率为103.3%（RSD=3.2%）。[结论]该方法测定快速,结果准确、可靠。

RP-HPLC法同时测定湿生扁蕾中木犀草素、当药黄素和当药醇苷的含量

目的：用反相高效液相色谱法同时测定湿生扁蕾中木犀草素、当药黄素和当药醇苷的含量。方法：色谱柱：Agilent SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：在0~20 min内,甲醇∶水（含0.04%H3PO4）由40∶60~63∶37线性梯度洗脱,在20~50 min内,甲醇∶水（含0.04%H3PO4）=63∶37等度洗脱;流速：0.8 m L/min;检测波长：254 nm,柱温：30℃。结果：木犀草素在30 min内达到基线分离,回归方程：Y=84 800X＋4540（r=0.999 9）,线性范围0.848 0~4.240μg;当药黄素在15 min内达到基线分离,回归方程：Y=52 300X-32 300（r=0.999 9）,线性范围0.896 0~4.480μg;当药醇苷在20 min内达到基线分离,回归方程：Y=102 000X＋83 400（r=0.999 9）,线性范围为0.832 0~4.160μg。结论：该测定方法快速,测定结果准确可靠。

RP-HPLC法同时测定藏药肋柱花中三种成分的含量

建立了同时测定藏中当药黄素、当药醇苷、苦龙苷含量的方法。采用反相高效液相色谱法（RPHPLC）,以Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,以甲醇（A）-0.04%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱,40%A（0 min）-63%A（20 min）;流速为0.8 m L/min;柱温为30℃,检测波长为254 nm。结果表明,在20 min内完成对3种成分的分析,各成分之间均达到基线分离。当药黄素、当药醇苷、苦龙苷的线性范围分别为：0.675 0~4.050 0μg（R2=0.999 5）、0.005 5~0.330 0μg（R2=0.999 5）、0.027 5~0.165 0μg（R2=0.999 5）,线性关系良好。平均加样回收率（n=9）分别为99.90%、99.15%、99.88%。建立的HPLC分析方法简单、准确,能快速测定藏药肋柱花中有效成分的含量。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药黄素和当药醇苷的含量

[目的]建立反相高效液相色谱法，同时测定湿生扁蕾中有效成分当药黄素、当药醇苷含量。[方法]采用Kromasil-C18（250mm×4．6mm，5um）色谱柱，流动相甲醇和水（含0．04％H3PO4），在0～20min甲醇：水由40：60～63：37线性梯度洗脱，流速0．8ml／min，检测波长254ml，柱温30℃。[结果]当药黄素、当药醇苷2种有效成分都在17min内均达到基线分离，当药黄素、当药醇苷的线性范围分别是0．338～2．025ug（r=0．9995）、0．275～1．650ug（r=0．9995），加标回收率为103．30％（RSD=3．20％）、99．60％（RSD=2．70％）。[结论]该方法快速，结果准确、可靠。

HPLC法同时测定山地虎耳草中5种成分

目的:建立HPLC法同时测定山地虎耳草中獐牙菜苦苷、绿原酸、当药苷、金丝桃苷、当药醇苷含量的方法。方法:采用Waters SunFire C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-水(含0.05%磷酸)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果:獐牙菜苦苷、绿原酸、当药苷、金丝桃苷、当药醇苷进样质量分别在0.0506~0.6072μg(r=0.9999)、0.1134~1.3608μg(r=0.9998)、0.0198~0.2382μg(r=0.9998)、0.1182~1.4184μg(r=0.9999)、0.0450~0.5397μg(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系,加样回收率分别为93.85%,93.10%,97.22%,98.74%,96.55%,RSD分别为1.02%,1.77%,1.60%,0.69%,1.18%(n=6)。结论:建立的高效液相色谱法简便、高效、准确、经济实用,具有良好的重复性和稳定性,为山地虎耳草的质量评价,以及综合利用开发药用资源提供了重要参考依据。

湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与主要成分相关性研究

目的探究湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与其中所含当药黄素、当药醇苷、木犀草素的相关性。方法采用高效液相色谱(HPLC)法同时检测湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量;通过DPPH·清除实验和ABTS+自由基清除实验两种体系,评价各提取物的抗氧化活性;采用Pearson相关性分析和灰色关联分析法,研究湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量与抗氧化活性之间的相关性。结果湿生扁蕾乙酸乙酯提取物中当药黄素含量最高,为68.19 mg·g^-1;95%乙醇提取物中当药醇苷含量最高,为21.03 mg·g^-1;正丁醇提取物中木犀草素含量最高,为19.38 mg·g^-1。95%乙醇提取物对DPPH·清除能力最强,IC 50值为0.124 mg·mL^-1;正丁醇提取物对ABTS^+自由基清除能力最强,IC 50值为0.036 mg·mL^-1。Pearson相关性分析发现,与木犀草素相比,当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS^+清除能力相关性较好,相关系数R 2分别为0.994、0.823;而木犀草素相关系数分别为0.875、0.746。然而,灰色关联分析结果表明木犀草素含量和当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS^+清除能力均有较强的关联度。结论湿生扁蕾提取物中的当药醇苷和木犀草素与其体外抗氧化性有较好的相关性,当药醇苷含量可作为评价湿生扁蕾提取物体外抗氧化性的主要指标性成分。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药醇苷的含量

采用反相高效液相色谱法测定湿生扁蕾中有效成分当药醇苷的含量.色谱条件Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇和水(含0.04%H3PO4)55∶45等度洗脱,流速0.8ml/min,检测波长254nm,柱温30℃.当药醇苷与其它组分达到基线分离,当药醇苷的线性范围为0.275-1.65μg(r=0.9997),加标回收率为99.6%(RSD=2.7%).该方法测定快速,结果准确,可靠.

山地虎耳草的HPLC指纹图谱研究

目的研究山地虎耳草的HPLC指纹图谱,并结合化学计量学分析其药材的质量。方法采用Waters SunFire C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙睛-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,流量1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温30℃。对不同来源和不同批次的山地虎耳草进行指纹图谱测定,并通过化学计量学系统解决方案软件(ChemPattern 2017)对结果进行处理分析。结果10批次山地虎耳草药材与生成对照指纹图谱的相似度为0.882~0.995,具有较好的一致性。标定了15个共有峰,并对其中4个峰进行了指认,分别为獐牙菜苦苷、当药苷、金丝桃苷、当药醇苷等。主成分分析提取了3个主成分进行综合评价,可以反映样品数据中的绝大部分信息。聚类分析将样品分为2类,10批样品中委托采集的8批样品聚为一类,采集于同一小范围地区(青海贵德县拉脊山)的样品S3、S5聚为一类。结论所用方法科学、准确且简便易行,所建指纹图谱法精密度、稳定性和重复性良好,专属性强,可作为山地虎耳草的质量控制方法。

HPLC法同时测定藏茵陈胶囊中7种有效成分

目的建立同时测定藏茵陈胶囊中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、当药醇苷、1-羟基-3,4,5-三甲氧基呫吨酮和齐墩果酸的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。方法采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.02%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃;獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷、当药醇苷和1-羟基-3,4,5-三甲氧基呫吨酮的检测波长为254 nm,齐墩果酸的检测波长为210 nm。结果獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龙胆苦苷、芒果苷、当药醇苷、1-羟基-3,4,5-三甲基呫吨酮和齐墩果酸分别在2.8～56.0、1.2～24.0、0.6～12.0、2.0～40.0、1.2～24.0、0.6～12.0、12.0～240.0μg/mL与色谱峰面积呈良好线性关系;加样回收率分别为98.9%、101.2%、96.5%、98.6%、96.9%、97.8%、99.3%,RSD依次为1.14%、1.72%、1.31%、1.25%、1.37%、1.78%、2.23%。结论该方法简便、准确,重复性好,为藏茵陈胶囊的质量控制提供实验依据。

尖叶假龙胆有效成分的活性追踪分离及对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用研究

目的从尖叶假龙胆不同极性部位中寻找对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有较强保护作用的化合物。方法采用活性追踪分离的方式,通过H_2O_2诱导PC12细胞损伤建立氧化应激损伤模型,利用实时细胞分析技术(real-time cell analysis,RTCA)研究尖叶假龙胆不同极性部位对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用;采用HPLC法测定具有活性的单体化合物的质量分数,并确定其化学结构。结果尖叶假龙胆正丁醇和醋酸乙酯部位对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用。同时,从尖叶假龙胆正丁醇和醋酸乙酯部位中分离得到的化合物1、2、3、5也对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用。其中化合物1和2的保护作用在3.125-50.000μmol/L呈一定剂量依赖性,浓度为50.000μmol/L时,对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用最强;而化合物3和5的保护作用在3.125-50.000μmol/L内不具有剂量依赖性,浓度分别为25.000、3.125μmol/L时,对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用最强。经结构鉴定,化合物1、2、3、5分别为雏菊叶龙胆酮、去甲基雏菊叶龙胆酮、当药醇苷及去甲基当药醇苷。结论化合物1、2、3、5对H_2O_2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用,可能是尖叶假龙胆抗氧化的主要活性成分。