猪胆汁酸钠对人早幼粒白血病细胞系HL-60的增殖抑制及分化诱导作用(英文)

猪胆汁酸钠不仅是人工牛黄的主要成分,而且有广泛的临床用途.近年来,文献报道已经在实验大鼠证实口服少量牛磺胆酸可以克服长期摄入维生素A酸(retinoic acid,RA)或其衍生物所引起的副作用.鉴于RA是髓系白血病细胞分化的生理性诱导剂,临床试用表明口服RA对急性早幼粒白血病有较满意疗效,我们设想胆汁酸与RA联合用药可能对早幼粒白血病的治疗是有意义的.本文报道体外试验结果表明,药用猪汁酸钠明显抑制HL-60细胞增殖(IC_(50) 400μg/ml)并诱导HL-60细胞向终末方向分化.诱导后的HL-60细胞具有嗜中性粒细胞和单核/巨噬细胞的某些形态及细胞化学特征,表现出明显的细胞呼吸爆发功能.细胞周期分析表明猪胆汁酸钠阻断细胞从G_0+G_1期进入S期.小鼠急性中毒试验测定其LD_(50)为:腹腔注射LD_(50)462±SD 35 mg/kg,灌胃LD_(50)>1 g/kg。药用猪胆酸钠体外试验对粒系白血病原代细胞的增殖抑制及分化诱导作用以及体内试验对某些小鼠白血病的作用正在进一步观察.我们认为进一步研究猪胆汁酸钠和RA的联合应用是有意义的.

猪胆酸钠对人早幼粒白血病细胞系(HL-60)作用机理的初步探讨

观察了猪胆酸钠和维甲酸对人早幼粒白血病细胞系(HL-60)体外诱导分化过程中细胞膜脂肪酸的组成、细胞蛋白激酶C(PKC)活性及c-myc癌基因表达的变化,初步探讨猪胆酸钠对HL-60细胞作用的分子机理,结果表明,经100～400μg·ml^(-1)猪胆酸钠处理3d的HL-60细胞,其PKC活性和c-myc表达与对照组比较均明显下调;1μmol·L^(-1)维甲酸诱导3 d的细胞,PKC活性未见明显变化,而癌基因c-myc表达则降至对照组的17％;无论是猪胆酸钠(400 μg·L^(-1))还是维甲酸(1μmol·L^(-1))诱导3d的HL-60细胞,其细胞膜脂肪酸组成均无明显改变。

全反式维甲酸联合猪胆酸钠对人卵巢癌细胞生长抑制作用的影响

目的 探讨维甲酸 (ATRA)及猪胆酸钠 (SBANa)联合应用对人卵巢癌细胞生长的抑制作用。方法 实验共分为三组 :单用ATRA组、单用SBANa组及ATRA +SBANa联合用药组。应用MTT比色法、流式细胞仪对COC1、COC2 、CAOV3 三种卵巢癌细胞系在不同浓度的ATRA及SBANa下进行检测。结果 ATRA及SBANa联合应用后 ,能增强抑制卵巢癌细胞生长作用 ,当达到ATRA10 μmol/L +SBANa 10 0 μg/ml浓度时 ,G0 、G1期细胞比例增加 ,G2 M、S期细胞比例下降 ,细胞增殖速度较单独用药组减缓。MTT检测提示在联合用药浓度达到ATRA 10 μmol/L +SBANa 10 0 μg/ml时 ,癌细胞抑制率最佳。结论 ATRA及SBANa联合应用可增强对卵巢癌细胞增殖的抑制作用 ,并在ATRA 30 μmol/L +SBANa 10 0 μg/ml浓度时 ,促进癌细胞凋亡。

猪胆酸钠诱导分化的HL-60细胞的超微结构变化及其呼吸爆发功能

观察药用猪胆酸钠诱导体外培养的人早幼粒白血病细胞系ＨＬ－６０细胞分化过程中超微结构的变化及其细胞呼吸爆发功能特征．猪胆酸钠（４００ｍｇ·Ｌ－１终浓度）诱导ＨＬ－６０细胞分化过程中，细胞超微结构发生明显改变，细胞核浆比例降低，细胞核变小，核仁减少，胞核出现深浅不等的凹陷；多数细胞出现不规则的表面突起，细胞表面伸出不规则大型钝形伪足，细胞浆内可见部分线粒体空泡化及内质网扩张，核内染色质凝聚成块并边集，核扭曲，断裂．同时，用电子自旋共振波谱仪直接检测到猪胆酸钠诱导分化的ＨＬ－６０细胞发生呼吸爆发时产生羟自由基。

活猪胆汁资源开发技术研究

在河南淮阳县、南阳县和新郑县随机选择当地肥猪14头进行胆囊引流手术后,分为圈养,拴养和笼养3组引流胆汁。结果表明活猪引流胆汁手术是可行的,每头猪每天平均引流胆汁210ml,胆红素得率47.92mg％,胆酸307.2mg％。管理方法以笼养为最佳。

猪胆囊造瘘的引流效果和胆盐对其影响作用的初探

本研究探讨了猪胆囊造瘘的新术部确定方法.采用这种方法先后对53头猪成功地进行了胆囊造瘘术,并对胆汁引流特点及胆红素含量进行了观测.胆汁的引流量随猪的不同个体及距手术完成的时间长短而显现差异.引流量的变化趋势是随时间的推移而逐渐下降的,术后1～5天为引流的高峰期.胆汁引流量于每日6、12和18点时出现三次峰值,并都与饲喂时间吻合.引流的肝胆汁中胆红素含量低于胆囊胆汁.引流期中肝胆汁的胆红素含量不随引流时期变化.补饲胆盐的试验组胆汁引流量极明显地高于对照组(P<0.01),并基本呈稳定上升趋势,引流第20～30天达最高峰,而对照组引流量在前5天为最高峰.补饲胆盐可促进食欲,因而增长了体重(P<0.05)和耗料(P<0.05).

猪胆管作为人胆管移植替代材料的生物力学评价

目的:通过对猪与人胆总管生物力学特性的比较研究,探讨其相互间的关系,从生物力学方面评价猪胆总管作为人胆管移植替代材料的可行性。方法:健康2月龄湖北白猪50头,随机分为10组,分别于3~12月龄时用氯胺酮肌肉注射(5 mg/kg)麻醉宰杀5头,测量胆总管在体长度后取出。人胆总管取自无肝胆疾病、年龄在20~40岁意外死亡的5例成年尸体。用计算机e-ruler软件测量胆总管的张开角。用激光共聚焦显微镜检测胆总管壁胶原纤维、平滑肌和弹性纤维的荧光定量表达,计算显微结构成分的含量。结果:3~12月龄猪胆总管的张开角随月龄增加而逐渐增大(P<0.05),7月龄时趋于稳定;7~12月龄猪胆总管的张开角变化不明显,且与成人的相近(P>0.05)。猪与人胆总管组织结构相似,平滑肌和弹性纤维的含量随月龄的增加而增多,胶原纤维的含量和胶原纤维/弹性纤维比值(C/E值)随月龄的增加而减少;7~10月龄猪胆总管的平滑肌、胶原纤维和弹性纤维的含量与成人的比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:猪胆总管的生物力学特性随年龄的变化而变化。7~10月龄猪胆总管的张开角和显微结构成分等生物力学特性与成人的比较匹配。从猪胆总管的年龄和生物力学特性的相关性提示,7~10月龄猪的胆总管作为人异种移植胆管供源是可能的。

猪胆汁酸的药理作用研究(Ⅱ)——猪胆汁酸镇咳作用的初步观察

本文利用提取胆红素后的猪胆汁废液所制备的猪胆汁酸,作对SO_2诱发咳嗽的正常NIH系小白鼠镇咳效果观察。结果表明;猪胆汁中的胆汁酸对SO_2诱发咳嗽的小白鼠具有延长诱发咳嗽潜伏期和减少单位时间内咳嗽次数的效果。当口服15mg/kg时,诱发咳嗽的潜伏时间平均延缓6秒以上,P<0.01,与中成药蛇胆川贝散相一致;单位时间的咳嗽次数减少43％以上,P<0.01,优于蛇胆川贝散的效果。提示猪胆汁酸与贝母、桔梗等配伍时,对延长潜伏期具有协同作用。

猪胆管缺损修复模型两种建立方法的比较

目的采用2种不同的手术方法建立猪胆管缺损修复模型,比较两种建立方法的通用性,筛选最佳建模方法。方法 15～20 kg中国三元杂交猪8只,随机分为两组,每组4只,两组分别采用直接缝合和置入胆道内支架后缝合的手术方法,联合可降解材料补片,修复长度约2 cm,宽度为胆管周径的1/3～1/2的部分胆管壁缺损。比较术中手术方式的差异,评估术后2个月内两组动物的一般情况,监测术前,术后第3天,第1和第4周白细胞计数及谷丙转氨酶,谷酰转肽酶及总胆红素。并于术后第4周末查腹部B超。结果术中比较:置入胆道内支架后缝合的手术方式能显著缩短补片缝合时间(P<0.05);术后比较:直接缝合组,术后1个月均出现渐进性食欲下降,腹泻,体重减低,其中3只猪在术后1周内死亡,1只术后第3周出现活动减少、食欲减低等症状,于术后第27天死亡。死亡前所有动物复查白细胞计数(WBC)和总胆红素(TB)有升高,谷丙转氨酶(ALT)和谷酰转肽酶(GGT)有下降,但与术前相比无统计学意义(P>0.05)。尸检发现死亡原因均为胆漏。胆道内支架组术后全部存活,精神、食欲佳,体重明显增加,活动状况良好,复查WBC及GGT升高,ALT及TB下降,但与术前相比无统计学意义(P>0.05)。B超提示术后第4周末,内支架在位。部分动物胆管均匀扩张。结论与直接缝合相比,置入胆道内支架后缝合的建模方法能较好的维持实验动物的生存,可供长期观察,适合进一步对胆管修复效果的研究。

猪胆管脱细胞基质作为组织工程胆管支架的可行性

目的：探讨制备猪胆管脱细胞基质作为组织工程胆管支架材料的可行方案及其与正常人胆管上皮细胞复合培养的条件和相容性。方法：采用胰蛋白酶脱细胞方法和十二烷基磺酸钠＋曲拉通脱细胞方法对猪胆管进行体外消化，通过形态学观察，H—E染色，VG染色，胆管基质DNA测定和扫描电镜对2种脱细胞方法进行评价。正常人胆管上皮细胞与猪胆管脱细胞基质支架复合培养，观察和检测细胞在支架上的生长和增殖情况。结果：十二烷基磺酸钠＋曲拉通脱细胞方法能彻底脱除猪胆管的细胞成分且能保持基质蛋白结构完好，猪胆管脱细胞基质与正常人胆管上皮细胞具有良好的相容性。结论：应用十二烷基磺酸钠＋曲拉通脱细胞方法制备的猪胆管脱细胞基质，在细胞相容性方面有作为组织工程胆管支架材料的潜在可能。

中国部分地区猪胆汁戊型肝炎病毒基因型和中和抗原位点变异研究

目的调查猪胆汁戊型肝炎病毒(HEV)携带率、基因型和中和抗原位点变异。方法在中国4个地区屠宰场采集成年商品猪的胆汁标本,采用real-time RT-PCR检测HEV RNA;采用巢式RT-PCR扩增HEV ORF2区部分基因片段,进行基因分型和中和抗原位点氨基酸序列分析。结果猪胆汁标本HEV RNA总阳性率为8.6%(46/532),4个地区阳性率在3.0%-12.5%之间。19株HEV基因分型成功,均为基因4型,其中11株HEV基因亚型分型成功,均为4a亚型。在该11株HEV的21个中和抗原位点中,2株HEV在ORF2区分别发生第487位氨基酸突变(Ser487Tyr)和第564位氨基酸突变(Thr564Pro)。结论中国部分地区猪胆汁HEV携带率较高,为中国人群中优势流行的基因4型,且部分中和抗原位点发生突变;应加强猪群HEV的持续监测。

胆汁酸在猪禽营养中的研究进展

胆汁酸作为一种非营养性饲料添加剂,在调节免疫、糖脂代谢、调控肠道发育及消化酶活性、抗菌和促进动物生长等方面发挥关键作用。本文综述了胆汁酸的代谢过程、生物学功能以及在猪禽营养上的应用现状,以期为外源性胆汁酸在畜禽养殖中的应用提供参考。