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Preventive Effects of Five Drugs on Mycoplasma Pneumonia of Swine (MPS)
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作者 Zhang Yan Liu Hailong +4 位作者 Lin Zhemin Cao Zongxi Tan Shuyi Chen Xiaojie Xie Yueshan 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2016年第5期278-280,共3页
The paper was to explore the preventive effects of five drugs on mycoplasma pneumonia of swine (MPS) and to provide reference for clinical medication of pig farms in Hainan Province. A total of 444 health piglets we... The paper was to explore the preventive effects of five drugs on mycoplasma pneumonia of swine (MPS) and to provide reference for clinical medication of pig farms in Hainan Province. A total of 444 health piglets were randomly divided into 6 groups, including five medication groups (72 piglets in group A, 74 pig- lets in group B, 72 piglets in group C, 76 piglets in group D, 76 piglets in group E) and one control group (74 piglets). The piglets in experimental groups were treated drugs once a day for successive 5 days at 30, 60, 90, 120 and 150 of age. The piglets in control group were free of medication. At 70 and 140 days of age, 15 piglets of each group were randomly selected to collect their blood sermn. The Mycoplasma hyopneumoniae (M-Hyo) antibodies in serum were measured by en- zyme-linked immunosorbent assay (ELISA). During the experiment, the incidence rates of respiratory disease, lung lesion, feed conversion rate, average daily gain (ADG), and mortality rate of pigs were also observed and recorded. The results showed that the five drugs had significant difference in preventative effects. Group C (Zhiyuanjing group) received the best preventive effect and the highest economic benefits. Compared with control group, the ADG and feed conversion rate in group C were increased by 7.53% and 9.09%, respectively; the incidence rate of respiratory disease was reduced by 13.44% and lung lesion was alleviated by 81.43% ; and the earnings of each pig could rise by 132.70 yuan. The preventative effect and economic benefit of the drugs was sequenced by Chansu Kechuanling and Bingchan Kechuanwang. Wante Feilin and amoxicillin had weaker preventive effects against MPS but greatly influenced growth performance of pigs, so they should be used alternatively with other drugs. 展开更多
关键词 Mycoplasma pneumonia of swine (MPS) Mycoplasma hyopneumoniae (M-Hyo) DRUGS Preventive effect
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Advances in the Detection of Mycoplasma hyopneumoniae by Polymerase Chain Reaction (PCR) Technology
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作者 张旭 武昱孜 +5 位作者 白方方 刘茂军 冯志新 熊祺琰 张映 邵国青 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2013年第2期215-220,261,共7页
Mycoplasma hyopneumoniae is an important pathogen causing Mycoplasmal pneumonia of swine, which generally causes secondary infections and mixed infections, thus seriously threats the development of swine industry and ... Mycoplasma hyopneumoniae is an important pathogen causing Mycoplasmal pneumonia of swine, which generally causes secondary infections and mixed infections, thus seriously threats the development of swine industry and resulting in huge economic losses. Using PCR technology has very important significance to the correct diagnosis of Mycoplasmal pneumonia at the early stage. In this paper, specific target genes of Mycoplasma hyopneumoniae, methods for clinical sample collection, key technical factors of DNA sample processing method, and the research progress, main advantages and disadvantages, and application of general PCR technology, multiple PCR technology, nested-PCR technology, real-time fluorescence quantitative PCR technology, gene chip detection technology and loop-mediated isothermal amplification in detection of Mycoplasma hyopneumoniae were summarized, which provided convenience for the effective diagnosis and prevention of Mycoplasmal pneumonia of swine. 展开更多
关键词 Mycoplasmal pneumonia of swine Mycoplasma hyopneumoniae PCR detection Clinical sample collection
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Standardization of a Real-time PCR System for Quantitative Detection of Mycoplasma hyopneumoniae
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作者 Yuzi WU Qiyan XIONG +6 位作者 Yun BAI Yanna WEI Zhenzhen ZHANG Haiyan WANG Zhixin FENG Hafizah Yousuf CHENIA Guoqing SHAO 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第12期2479-2484,2487,共7页
This study was conducted to develop a method for accurate quantification of Mycoplasma hyopneumoniae during vaccine production or experimental research. Primer and probe concentration that gave the highest ΔRn and th... This study was conducted to develop a method for accurate quantification of Mycoplasma hyopneumoniae during vaccine production or experimental research. Primer and probe concentration that gave the highest ΔRn and the lowest Ct were selected to establish the real-time PCR system for the detection of M. hyopneumoniae. Template DNA of M. hyopneumoniae was extracted by boiling under different conditions and detected by real-time PCR to determine the optimal conditions for DNA extraction. Thereafter, intra-and inter-batch reproducibility tests were carried out using a standard plasmid to evaluate the stability of the PCR system. Subsequently, the effect of medium composition on the quantitative detection was evaluated. Finally, the correlation between real-time PCR and CCU method was explored. The optimal primer and probe concentration for real-time PCR were 0.4 and 0.2 μmol/L, respectively. The intra-and inter-batch coefficients of variation(CV) in Ct value of 10~4-10~9 copies/μl standard plasmid were <5%, indicating good reproducibility of the real-time PCR system. Following incubation in a boiling water bath for 10 min, M. hyopneumoniae samples can be used directly as a template in subsequent real-time PCR assays,and good intra-batch and inter-batch reproducibility was observed. The working concentration of KM2 medium should be less than the 1/10 of the concentration of the stock solution to minimize its influence on the quantitative detection. Spearman's correlation analysis revealed that the log of CCU and the log of DNA copy number had a significant positive relationship(r=0.797,P=0.000). Thus, the two methods can be used in combination in the quantitative detection of M. hyopneumoniae. In summary, a rapid, stable and accurate quantitative PCR system for detecting M. hyopneumoniae culture was established in this study, which provides a technical means for accurate quantification of M. hyopneumoniae in vaccine production and laboratory tests. 展开更多
关键词 Mycoplasma hyopneumoniae Mycoplasma pneumonia in swine Real-time PCR
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猪支原体肺炎灭活疫苗的临床应用对比研究
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作者 卢冰霞 肖婷 +11 位作者 段群棚 梁龙华 覃国喜 秦毅斌 蒋家霞 许艺兰 林昌华 张胜斌 许心婷 周英宁 陈忠伟 何颖 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第23期12-18,共7页
为了评估5种市售的猪支原体肺炎(MPS)灭活疫苗的临床免疫效果,试验将规模猪场300头3日龄体重接近的仔猪随机分为5个免疫接种疫苗组[以猪肺炎支原体(Mhp)J株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗A组,以P-5722-3株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗B... 为了评估5种市售的猪支原体肺炎(MPS)灭活疫苗的临床免疫效果,试验将规模猪场300头3日龄体重接近的仔猪随机分为5个免疫接种疫苗组[以猪肺炎支原体(Mhp)J株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗A组,以P-5722-3株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗B组,以P-5722-3株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗C组,以SY株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗D组,以NJ株为疫苗株的猪支原体肺炎灭活苗E组]和1个对照组,所有猪只于3,30,90,120,150日龄采血,175日龄解剖观察测定肺脏病变情况并进行Mhp抗原检测;测定猪群的体重、平均日增重、Mhp血清抗体水平、肺脏病变评分和肺组织Mhp阳性率,评价5种MPS灭活疫苗的临床免疫效果。结果表明:各疫苗组出栏重和平均日增重均较对照组有提高,其中3~27日龄仔猪阶段,D组平均日增重显著高于对照组(P<0.05);疫苗组较对照组肺脏病变程度减轻,降低幅度为8.3%~38.8%,其中D组降低幅度最大。各疫苗组之间Mhp阳性感染率差异不显著(P>0.05),A、C、D组猪只Mhp阳性感染率低于对照组,D组最低(为68.0%);3日龄开始,各组试验猪Mhp抗体水平呈下降趋势,至120日龄时降至最低。150日龄时,除D组Mhp抗体阳性率为0外,其他各组均出现Mhp抗体转阳的情况。说明5种疫苗对防止猪群感染Mhp或减轻症状具有不同程度的效果,其中D组MPS灭活苗(SY株)免疫效果更好,能显著提高仔猪的生长性能,减轻肺脏损伤。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 灭活疫苗 生长性能 肺脏评分
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规模化猪场猪支原体肺炎控制及净化技术研究 被引量:16
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作者 张道永 林毅 +7 位作者 冯金传 杨晓梅 邓小东 王文贵 李力 张先惠 曾惠 陈登杰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第1期71-72,共2页
在四川蒲江某规模化养猪场,对该场的猪支原体肺炎采用以监测、免疫为主,结合隔离、治疗、淘汰、消毒等综合防制技术,进行控制与净化,对全场有猪支原体肺炎症状的猪及可疑病猪进行隔离治疗,治愈后的猪经与易感猪同居感染不发病,分离猪肺... 在四川蒲江某规模化养猪场,对该场的猪支原体肺炎采用以监测、免疫为主,结合隔离、治疗、淘汰、消毒等综合防制技术,进行控制与净化,对全场有猪支原体肺炎症状的猪及可疑病猪进行隔离治疗,治愈后的猪经与易感猪同居感染不发病,分离猪肺炎支原体为阴性,试验表明治愈后的猪不带菌。对全场种猪和后备健康猪群进行猪支原体肺炎疫苗的免疫接种,经抗体监测和攻毒试验,免疫后240 天猪支原体肺炎的IHA抗体仍可达到110,保护率达90 % 以上。三年来通过综合防制技术在该场的贯彻实施,经临床检查和X线胸透,全场猪只无猪支原体肺炎。种猪后裔的连续2 代仔猪不感染健康猪,X线胸透,剖检肺脏均无眼观病变,猪肺炎支原体分离为阴性。对屠宰的肥育猪进行抽检已未分离到该病原,上述检查表明,该场的猪支原体肺炎( 喘气病) 展开更多
关键词 支原体肺炎 控制 净化 猪场
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猪支原体肺炎研究进展 被引量:32
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作者 李莹莹 何颖 +5 位作者 赵武 李斌 秦毅斌 卢冰霞 梁家幸 陆芹章 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第10期95-100,共6页
猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,严重危害养猪业的健康发展。随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是易... 猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,严重危害养猪业的健康发展。随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是易引发其他病毒或细菌等病原的续发或并发感染,导致猪呼吸道疾病综合征,使得疫情变得更为复杂,增加猪病诊断与防控的难度,造成巨大的经济损失。论文根据猪肺炎支原体的最新研究进展,从病原学、流行病学特点、主要抗原蛋白的研究、诊断、疫苗研制、防控措施等六个方面做一综述,从而为猪肺炎支原体的进一步研究及该病的防控提供新思路。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 病原学 诊断 疫苗
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猪鼻支原体与猪地方性肺炎 被引量:10
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作者 王占伟 熊琪琰 邵国青 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1036-1039,共4页
猪鼻支原体(Mhr)是小猪呼吸道的常在菌,在猪群中的检出率很高,可引起猪发生肺炎、多浆膜炎、关节炎和中耳炎,一定程度上影响了猪的生长和生产性能,并可继发其它病原感染,加重呼吸道症状。Mhr也是细胞培养的常见污染物和多种癌症的诱发... 猪鼻支原体(Mhr)是小猪呼吸道的常在菌,在猪群中的检出率很高,可引起猪发生肺炎、多浆膜炎、关节炎和中耳炎,一定程度上影响了猪的生长和生产性能,并可继发其它病原感染,加重呼吸道症状。Mhr也是细胞培养的常见污染物和多种癌症的诱发因素。Mhr引起猪肺炎的机理除了在病理变化方面有介绍外,其深层次的机制还未见报道,其在呼吸道移行及诱导全身性疾病的机制也不清楚。本文将从猪地方性肺炎(SEP)及主要致病原、可能的致病机理和研究方法方面进行阐述Mhr肺炎,为该病的研究和防治提供新思路与新手段,同时也为Mhr和其它病原共感染的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 猪地方性肺炎 猪肺泡巨噬细胞 体外感染 致病机理
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种猪场猪支原体肺炎(气喘病)控制与净化技术研究 被引量:5
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作者 顾小根 赵国源 俞国乔 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-58,共3页
在一个气喘病流行已有数年的种猪场 ,结合种猪选育 ,实施了以免疫、消毒、隔离、淘汰并加速更换种猪建立新种猪群等为主要技术措施的猪气喘病控制和净化技术后 ,取得了显著效果。气喘病临床病猪已经少见 ,肺部有气喘病病变的猪也从试验... 在一个气喘病流行已有数年的种猪场 ,结合种猪选育 ,实施了以免疫、消毒、隔离、淘汰并加速更换种猪建立新种猪群等为主要技术措施的猪气喘病控制和净化技术后 ,取得了显著效果。气喘病临床病猪已经少见 ,肺部有气喘病病变的猪也从试验初期的 10 .9%下降到后期的 3 %左右 ,仔猪存活率和生长速度显著提高。 展开更多
关键词 种猪 支原体肺炎 控制 净化
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几种佐剂对肌肉注射猪支原体肺炎活疫苗免疫刺激能力的增强作用研究 被引量:12
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作者 熊祺琰 范志鹏 +4 位作者 甘源 孔猛 冯志新 刘茂军 邵国青 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期163-168,共6页
为增强现有猪支原体肺炎活疫苗的免疫刺激能力以实现肌肉注射免疫,向现有活疫苗中添加几种不同佐剂,考察其经肌肉免疫后机体的免疫应答情况。结果表明,免疫刺激复合物基质佐剂和左旋咪唑+壳聚糖混合佐剂能有效激发细胞免疫应答和体液免... 为增强现有猪支原体肺炎活疫苗的免疫刺激能力以实现肌肉注射免疫,向现有活疫苗中添加几种不同佐剂,考察其经肌肉免疫后机体的免疫应答情况。结果表明,免疫刺激复合物基质佐剂和左旋咪唑+壳聚糖混合佐剂能有效激发细胞免疫应答和体液免疫应答;左旋咪唑+黄芪多糖混合佐剂能增强疫苗的细胞免疫刺激能力,而对体液免疫无作用;皂角素佐剂未显示明显的免疫增强效果。本试验结果为肌肉注射猪支原体肺炎活疫苗的开发奠定了数据基础。 展开更多
关键词 佐剂 活疫苗 猪支原体肺炎
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猪肺炎支原体的研究进展 被引量:57
10
作者 沈青春 宁宜宝 覃青松 《中国兽药杂志》 2003年第6期26-30,共5页
 猪支原体肺炎是一直困扰养猪业发展的重要疾病之一。本文综合国内外对其病原—猪肺炎支原体的最新研究情况,从其对猪生长性能的影响、防治动向、检测、主要抗原的研究、基因工程疫苗研制等五个方面进行讨论。
关键词 猪肺炎支原体 猪支原体肺炎 生长性能 防治 检测 抗原 基因工程疫苗
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猪支原体肺炎免疫试验 被引量:5
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作者 张道永 林毅 +6 位作者 邓小东 冯金传 杨晓梅 王文贵 李力 张先惠 曾惠 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2000年第C00期118-120,共3页
用无支原体肺炎病猪场的哺乳仔猪 1 1窝共计 1 0 7头 ,分为 4组 ,1组 2 6头猪 ,按疫苗生产厂的免疫方法 ,于 1 5日龄胸腔注射弱毒疫苗 2头份 ;2组 2 6头猪 ,在 1 5日龄时胸腔注射弱毒疫苗 1头份 ,2周后肌肉注射灭活疫苗 1头份 ;3组2 7头... 用无支原体肺炎病猪场的哺乳仔猪 1 1窝共计 1 0 7头 ,分为 4组 ,1组 2 6头猪 ,按疫苗生产厂的免疫方法 ,于 1 5日龄胸腔注射弱毒疫苗 2头份 ;2组 2 6头猪 ,在 1 5日龄时胸腔注射弱毒疫苗 1头份 ,2周后肌肉注射灭活疫苗 1头份 ;3组2 7头猪 ,按疫苗生产厂免疫方法于 1 5日龄和 30日龄肌肉注射灭活疫苗各 1头份 ;4组 2 8头 ,不注射猪支原体肺炎疫苗以作对照。在接种疫苗后 ,分别于 1 2 0天、1 80天、 2 40天进行同居感染和攻毒试验。经临床检查 ,X线胸透结果表明 ,第 2组在 1 5日龄首免弱毒活苗 ,2周后二免灭活苗的免疫保护率最高 ,2 40天的免疫保护为 91 7% ,比 1组和 3组两种常规免疫法的保护率 (75 %和 6 6 7% )分别提高1 6 7和 2 5个百分点。对猪支原体肺炎IHA抗体的监测结果也同样表明 ,第 2组的免疫效果最好 ,2 40天的IHA抗体阳性检出率为 1 0 0 % ,而 1组和 3组均为71 4%。 展开更多
关键词 免疫方法 疫苗 猪支原体肺炎 胸腔注射
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猪支原体肺炎的诊断与防治 被引量:3
12
作者 程龙 辛蕊华 +5 位作者 罗永江 王贵波 罗超应 谢家声 李锦宇 郑继方 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第10期25-28,共4页
猪支原体肺炎又称猪喘气病、猪地方流行性肺炎,是由猪肺炎支原体引起的一种慢性、接触性、呼吸道传染病,该病对我国养猪业造成了重大的经济损失,严重危害养猪业的发展。文章对猪支原体肺炎的诊断和防治方法的研究进展进行了梳理,旨在为... 猪支原体肺炎又称猪喘气病、猪地方流行性肺炎,是由猪肺炎支原体引起的一种慢性、接触性、呼吸道传染病,该病对我国养猪业造成了重大的经济损失,严重危害养猪业的发展。文章对猪支原体肺炎的诊断和防治方法的研究进展进行了梳理,旨在为以后的研究提供理论和技术参考。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 诊断 防治
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PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展 被引量:17
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作者 张旭 白方方 +5 位作者 武昱孜 刘茂军 冯志新 熊祺琰 张映 邵国青 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期54-60,共7页
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶... 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法与样品DNA处理方法、关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测和环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 PCR检测 临床样品采集
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不同猪支原体肺炎活疫苗菌株P46和P97基因序列差异性分析 被引量:8
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作者 武昱孜 邢宪平 +3 位作者 韦艳娜 熊祺琰 冯志新 邵国青 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2365-2373,共9页
对我国用于生产的3种猪支原体肺炎活疫苗菌株(168株、RM48株、Z株)进行P46和P97R1R2基因序列分析,考察其保守性和差异。提取来源于四家猪支原体肺炎活疫苗生产企业的疫苗株基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增、测序;利用DNAStar序列分析... 对我国用于生产的3种猪支原体肺炎活疫苗菌株(168株、RM48株、Z株)进行P46和P97R1R2基因序列分析,考察其保守性和差异。提取来源于四家猪支原体肺炎活疫苗生产企业的疫苗株基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增、测序;利用DNAStar序列分析软件对测序结果和国际标准株J株、232株、7448株、7422株一起进行比对,分析3种疫苗菌株和4个标准株之间核苷酸及氨基酸差异。结果发现,疫苗株Z株、RM48株、168株的P46基因序列相似性为100%,与J株、232株相似性为99.1%,与7422株、7448株相似性为98.9%。疫苗株RM48株和Z株的P97R1R2基因序列相似性为100%;而与疫苗株168株相似性为97.5%;三个疫苗株与J株、232株、7448株、7422株的P97R1R2基因相似性仅为90.1%~93.6%,差异主要发生在R1区重复序列的次数上。本研究为临床猪支原体肺炎活疫苗菌株的检测及不同菌株之间的差异鉴定研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 疫苗株 P46基因 P97基因
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猪支原体肺炎活疫苗佐剂体内外促进细胞免疫刺激能力的研究 被引量:6
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作者 熊祺琰 董璐 +2 位作者 冯志新 刘茂军 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第6期1354-1360,共7页
为增强猪支原体肺炎活疫苗在肌肉注射免疫时的细胞免疫刺激能力,对7种猪支原体肺炎活疫苗可用佐剂的细胞免疫应答促进作用进行了体外及体内试验评价。7种佐剂中除皂角素外,其余6种对活疫苗活力皆无明显影响。用这6种佐剂体外刺激淋巴细... 为增强猪支原体肺炎活疫苗在肌肉注射免疫时的细胞免疫刺激能力,对7种猪支原体肺炎活疫苗可用佐剂的细胞免疫应答促进作用进行了体外及体内试验评价。7种佐剂中除皂角素外,其余6种对活疫苗活力皆无明显影响。用这6种佐剂体外刺激淋巴细胞,发现左旋咪唑、免疫刺激复合物基质、黄芪多糖和胞壁酰二肽可以在体外单独刺激或协同刀豆蛋白刺激小鼠脾淋巴细胞及猪外周血淋巴细胞增殖,其中免疫刺激复合物基质仅需ng/ml级别浓度即可起效,而壳聚糖和卡波姆不能在体外刺激细胞增殖。选用其中5种佐剂与活疫苗配合肌肉注射免疫小鼠,发现左旋咪唑、免疫刺激复合物基质、黄芪多糖、卡波姆可以显著增加机体针对猪肺炎支原体抗原的细胞免疫应答。结果表明,利用适当佐剂可以实现猪支原体肺炎活疫苗在肌肉注射条件下对机体细胞免疫应答的有效刺激。 展开更多
关键词 佐剂 活疫苗 猪支原体肺炎 细胞免疫
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免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效果评价 被引量:11
16
作者 熊祺琰 王占伟 +4 位作者 甘源 孔猛 冯志新 刘茂军 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期1310-1315,共6页
试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-基质)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察其配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力。首先以Quil A、胆固醇和磷脂为原料,采用透析法制备ISCOM-基质,然后将制备好的ISCOM-... 试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-基质)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察其配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力。首先以Quil A、胆固醇和磷脂为原料,采用透析法制备ISCOM-基质,然后将制备好的ISCOM-基质与活疫苗混合孵育,检验其对活疫苗的毒性。于体外用ISCOM-matrix直接刺激或与刀豆蛋白共同刺激淋巴细胞,观察细胞的增殖应答情况。而后将添加ISCOM-matrix佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫动物,检测血清抗体水平及淋巴细胞增殖应答水平,于免疫后8周攻毒,评价攻毒保护效力。结果表明,所制备的ISCOM-基质不影响活疫苗的活力,并且在体外可直接或协同刀豆蛋白刺激淋巴细胞产生明显的增殖反应,最低起效浓度为0.01 ng/ml;当作为佐剂与活疫苗配合肌肉注射免疫时,可以显著诱导动物对疫苗抗原的细胞免疫应答,体液免疫应答亦有一定程度增强。用肺炎支原体强毒攻毒后25 d剖检,免疫组病变明显较攻毒对照组减轻,显示出较好的攻毒保护效果。 展开更多
关键词 免疫刺激复合物基质 猪支原体肺炎 活疫苗 肌肉注射
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猪肺炎支原体PCR检测方法的建立及初步临床应用 被引量:6
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作者 张红云 梁晶晶 +4 位作者 李回 孟先明 潘艳 冯励 罗廷荣 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第3期256-258,共3页
根据GenBank中猪肺炎支原体(Mhp)J株P36蛋白基因(登录号X67286)的核苷酸序列设计1对引物,建立了快速检测Mhp的PCR方法。该方法能扩增出948bp的Mhp特异性条带,其敏感性达到可检测出0.735ng的Mhp DNA,但对鸡毒支原体、猪伪狂犬病毒、猪圆... 根据GenBank中猪肺炎支原体(Mhp)J株P36蛋白基因(登录号X67286)的核苷酸序列设计1对引物,建立了快速检测Mhp的PCR方法。该方法能扩增出948bp的Mhp特异性条带,其敏感性达到可检测出0.735ng的Mhp DNA,但对鸡毒支原体、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、猪流感病毒、猪呼吸与繁殖综合征病毒均未检测出相应目的条带;将克隆获得的目的片段与GenBank已发表的Mhp J株的P36基因进行比较,同源性达到99.9%。采用所建立的PCR方法对42份疑似猪支原体肺炎(MPS)病料进行临床诊断,发现有13份呈阳性(31.0%)。可见,该PCR方法适合于MPS的临床诊断,可为其防控提供可靠依据。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 PCR 临床应用
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猪肺炎支原体中国分离株热休克蛋白Hsp70(Dnak)的全基因克隆及C末端基因的表达与免疫活性分析 被引量:15
18
作者 李媛 张建华 +2 位作者 王亮 乔祖建 辛九庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期169-173,共5页
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,MHP)是猪气喘病的病原。DnaK又称为热休克蛋白Hsp70,具有分子伴侣和免疫的作用。以MHP中国分离株Yin-1为模板,扩增了DnaK基因的全序列,将该序列克隆到pMD18-T载体上并测序。测序结果Yin-1株DnaK... 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,MHP)是猪气喘病的病原。DnaK又称为热休克蛋白Hsp70,具有分子伴侣和免疫的作用。以MHP中国分离株Yin-1为模板,扩增了DnaK基因的全序列,将该序列克隆到pMD18-T载体上并测序。测序结果Yin-1株DnaK基因即Hsp70基因全长1 803 bp,编码600 aa,第631~633位TGA在支原体编码色氨酸而不是作为终止密码子。将该序列与多种致病支原体DnaK基因进行分析比较,发现Yin-1株与232株、J株、7 448株等MHP菌株的DNA同源性为99.3%~99.4%,氨基酸同源性为99.2%~99.3%,而与非同种支原体的DNA和氨基酸同源性仅为64.5%~74.4%和59.3%~77%。这表明DnaK基因在种内高度保守,种间差异较大。以pET28a为载体构建重组质粒,原核表达DnaK C末端大小为1 kb左右的基因,对表达的蛋白进行纯化后,通过Western blot检测它的免疫活性。原核表达得到大小为41 ku的目的蛋白,经Western blot证实,纯化蛋白可与MHP阳性猪血清反应,具有免疫活性。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 猪喘气病 伴侣蛋白DnaK 热休克蛋白70
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猪气喘病实验猪模型的建立 被引量:22
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作者 邵国青 刘茂军 +4 位作者 孙佩元 王继春 杜改梅 周勇岐 刘冬霞 《微生物与感染》 2007年第4期215-218,共4页
目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15~25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干... 目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15~25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干制成攻毒用组织毒。安检合格,批号为20000324。给15头小梅山二元杂交猪分别气管内注射以KM_2培养基作10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)和10^(-5)稀释的强毒,每头猪5ml,对照组注射培养基。攻毒后25d观察试验猪临诊症状,X线透视,记录病理变化。结果10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)稀释的强毒试验组猪均出现了典型的猪气喘病临床症状和病理变化。结论人工发病试验测得Mhp Js株组织强毒接种气管内注射最小发病剂量为10^(-4)稀释5ml,正式试验人工发病可用100个最小发病剂量即强毒冻干物1:100稀释气管内注射5ml,可确保攻毒成功。 展开更多
关键词 猪气喘病 猪肺炎支原体 实验猪模型
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猪支原体肺炎可疑肺组织PCR检测方法的建立 被引量:11
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作者 刘茂军 张映 +5 位作者 邵国青 姜俊兵 冯志新 王海燕 孙佩元 甘源 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第5期444-447,共4页
建立了病猪肺脏组织的处理方法和DNA提取方法,根据猪肺炎支原体的P36基因设计一对引物,建立猪肺炎支原体PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验,使用建立的方法检测了临床样品。结果表明,建立的检测方法能成功从猪支原体肺炎... 建立了病猪肺脏组织的处理方法和DNA提取方法,根据猪肺炎支原体的P36基因设计一对引物,建立猪肺炎支原体PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验,使用建立的方法检测了临床样品。结果表明,建立的检测方法能成功从猪支原体肺炎可疑肺组织中扩增出目的条带,成功建立了猪支原体肺炎可疑肺组织PCR检测方法,为该病的诊断提供了条件。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 肺组织 PCR 检测
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