通络止痛胶囊中4种成分测定及HPLC指纹图谱建立

目的测定通络止痛胶囊(虎杖、当归、独活等)中4种成分的含有量,并建立HPLC指纹图谱。方法该药物甲醇提取液的分析采用Waters XSelect C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0.5%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长330 nm。以虎杖苷为内标,计算其他3种成分的相对校正因子,一测多评法测定含有量。结果虎杖苷、阿魏酸、蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯分别在16.61~332.16、1.07~21.42、15.66~313.15、24.91~498.21μg/mL范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率分别为100.01%、99.47%、99.63%、99.06%,RSD分别为0.42%、1.85%、0.54%、0.87%。一测多评法所得结果与外标法接近。10批样品指纹图谱中有21个共有峰,相似度大于0.950。结论该方法简便高效,重复性好,可用于通络止痛胶囊的质量控制。

RP-HPLC法测定活血祛瘀糖浆中阿魏酸的含量

目的采用RP-HPLC法测定活血祛瘀糖浆中阿魏酸的含量,以控制该制剂的质量。方法用十八烷基键合硅胶柱分离阿魏酸,以甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶2)为流动相,检测波长322nm。结果阿魏酸在10～40μg·mL-1浓度范围内呈线性关系(r=0.9997);平均回收率为99.52%,RSD=0.58%(n=5)。结论该法简便、快速,可用于该产品的质量控制。

反相HPLC法测定催乳口服液中阿魏酸的含量

用反相高效液相色谱法测定催乳口服液中阿魏酸的含量。以ＯＤＳ－Ｃ１８柱为固定相，甲醇－水－冰醋酸（２５∶７５∶１．８）为流动相分离效果最佳。平均回收率为９９．８％，ＲＳＤ为１．６３％。本法提取简单，分析快速，精确。

八珍丸HPLC特征指纹图谱研究及多成分定量分析

目的:建立八珍丸HPLC指纹图谱,并进行多成分定量分析,为八珍丸的质量控制提供可靠依据。方法:采用SHIMADZU VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-甲醇-水(60∶38∶2)(A)-0.6%磷酸水溶液(B)作为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,柱温35℃,检测波长230 nm、320 nm、220 nm。结果:利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》进行分析,共确定八珍丸HPLC指纹图谱17个共有峰,通过与混合对照品比较指认其中6个指标成分分别是:芍药苷(4号峰)、毛蕊花糖苷(6号峰)、阿魏酸(8号峰)、甘草苷(9号峰)、白术内酯Ⅰ(13峰)和白术内酯Ⅲ(17号峰)。对12批样品的指纹图谱进行相似度分析,各批样品相似度均在0.9以上。芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、甘草苷、白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ线性范围分别为0.010~0.250μg(r=0.999 7)、0.124~3.100μg(r=0.999 1)、0.058~1.450μg(r=0.999 5)、0.069~1.475μg(r=0.999 0)、0.032~0.800μg(r=0.999 8)和0.027~0.675μg(r=0.999 3)。12批八珍丸中芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、甘草苷、白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量分别为0.099~0.118 mg·g-1、1.383~1.449 mg·g-1、0.300~0.395 mg·g-1、0.504~0.604 mg·g-1、1.013~1.080 mg·g-1和0.205~0.299 mg·g-1。结论:所建立的八珍丸HPLC指纹图谱检测和定量测定分析方法快速、准确、专属性强、灵敏度高,可以用于评价该制剂的质量。

基于HPLC指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定的腰痹通胶囊质量评价研究

目的建立腰痹通胶囊(Yaobitong Capsules,YC)的HPLC指纹图谱及多成分定量测定方法,并结合相关化学计量学评价多批次制剂的质量。方法建立YC的指纹图谱,采用层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)评价多批次制剂质量,同时采用Hotelling’s T^(2)和DMod X方法对不同批次制剂的质量设定控制范围;HPLC法测定多批次YC中绿原酸、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸4种有效成分的含量,并结合聚类热图分析进行质量评价。结果YC指纹图谱方法学考察结果符合测定要求,标记17个共有峰,并对共有峰进行归属,通过对照品比对指认出8个色谱峰,14批样品相似度大于0.90;HCA和PCA中未见异常批次,表明批间一致性较好,Hotelling’s T^(2)和DMod X控制上限为15.077和1.653;14批YC样品中芍药内酯苷、芍药苷、绿原酸、阿魏酸的质量分数分别为1.733~2.853、4.674~8.127、1.128~2.417、0.586~1.232 mg/g,线性关系良好(r≥0.9993);聚类热图分析结果表明,14批样品可聚为3类。结论建立的HPLC指纹图谱方法和多成分含量测定方法准确可靠,可用于YC的质量评价。多批次制剂数据结合化学计量学评价方法,表明YC多批次制剂之间一致性较好。

HPLC法测定不同胁迫条件下川芎根中阿魏酸的含量

目的测定不同胁迫条件下川芎根中阿魏酸的含量。方法 HPLC法,依利特Hypersil ODS2(4.6mm×200mm,5μm),流动相0.1%的磷酸-甲醇(66:34)等度洗脱,流速1m L/min,检测波长为323nm,柱温30℃。结果阿魏酸进样量在0.3~2.0μg时线性关系良好,r=0.9995,平均回收率为98.3%,RSD为2.1%。对不同胁迫条件下川芎根中阿魏酸的含量测定结果表明,川芎盐胁迫组中的阿魏酸含量最高,干旱胁迫组次之,低温胁迫组最少,但均高于空白组。结论盐、干旱、低温三种胁迫方式均能使川芎根中阿魏酸蓄积。

当归标准汤剂HPLC指纹图谱及多指标成分定量研究

目的建立当归标准汤剂HPLC指纹图谱,为当归标准汤剂质量控制提供依据。方法采用HPLC法建立15批当归标准汤剂指纹图谱,采用相似度评价结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)等模式识别技术探讨影响当归标准汤剂质量的主要色谱峰,并同时测定这些主要色谱峰中阿魏酸、洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、藁本内酯及色氨酸的含量。色谱条件为色谱柱Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.2 mL/min,检测波长280 nm,柱温35℃。结果建立的当归标准汤剂HPLC指纹图谱共标定出17个共有峰,15批样品相似度在0.788~0.983;CA、PCA将样品大致分为3类,结合PLS-DA,筛选出7个标志性化合物,其中指认出阿魏酸(8号峰)、藁本内酯(17号峰)、洋川芎内酯I(10号峰)、洋川芎内酯H(12号峰)。定量分析条件通过方法学验证,平均加样回收率为99.43%~104.35%。15批样品中阿魏酸为0.041%~5.596%、洋川芎内酯H为0.026%~1.583%、洋川芎内酯I为0.201%~6.461%、藁本内酯为0.126%~4.942%、色氨酸含为0.481%~2.753%。结论建立的分析方法稳定可靠,重复性好,为当归标准汤剂及其相关制剂的质量评价提供参考。

基于HPLC指纹图谱和化学模式识别的经典名方桃红四物汤制备过程质量评价研究

目的基于中药复方化学成分群整体指纹信息,考察桃红四物汤(TSD)汤剂制备过程中化学成分的变化,并分析其影响质量的波动成分和主要贡献成分,为其质量评控提供参考。方法按照经典名方物质基准制备工艺,制备TSD一次煎煮(A组)、二次煎煮(B组)、冷冻干燥(C组)3个制备过程样品,建立18批药材3组样品的HPLC指纹图谱,采用中药指纹图谱相似度评价系统进行数据处理,SPSS 20.0进行系统聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),SIMCA 14.1软件进行偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),分析3组样品中化学指纹信息的动态变化。结果选取17个色谱峰作为指纹图谱共有峰,3个组别各18批样品相似度分别均大于0.900;共指认出没食子酸、5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、苦杏仁苷、咖啡酸、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、洋川芎内酯A、藁本内酯共10个成分;HCA、PLS-DA将54批样品分为2类,A组样品一类,B、C组样品一类;PLS-DA分析筛选出6个差异性色谱峰;根据PCA综合模型计算,综合评分结果为B组>C组>A组,TSD煎煮2次较为合理,冷冻干燥能较好保留煎液中的成分,色谱峰16(藁本内酯)、1(没食子酸)、13、12(阿魏酸)、7(苦杏仁苷)、15(洋川芎内酯A)是影响样品质量的标志性差异物质。结论通过HPLC指纹图谱和化学模式识别够较好地辨识制备过程中影响TSD质量的标志性成分,为经典名方制备工艺评价和质量标志物辨识思路提供了参考。

HPLC同时测定更年舒丸中的6种成分的含量

目的：建立同时测定更年舒丸中没食子酸、马钱苷、葛根素、阿魏酸、大黄素、大黄素甲醚含量的方法.方法：采用HPLC测定,Agilent C18色谱柱（ZORBAX,SB-AQ,4.6 mm ×250 mm,5μm）,流动相乙腈-0.2％甲酸水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长238 nm（马钱苷）,270 nm（没食子酸、葛根素、大黄素、大黄素甲醚）,320 nm（阿魏酸）.结果：6个成分的方法学考察均合格,阴性均无干扰,平均加样回收率为98.2％ ～ 103.2％,RSD 1.4％ ～ 1.9％.结论：该方法简便、准确、专属性强,为更年舒丸及其类似组方制剂的质量评价提供了研究基础.

HPLC法同时测定款冬花中9个主要成分的含量

目的:建立HPLC-DAD法同时测定生药款冬花和蜜炙款冬花中绿原酸、反式咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、反式阿魏酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、款冬酮和甲基丁酰-3,14-去氢-Z-款冬素酯9个主要成分的含量。方法:采用正交设计优化提取方法,以提取时间、方法、溶剂、溶剂用量为主要影响因素,以9个分析物的总量为评价指标。分析物的色谱分离用Dikma DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)、Dikma Easy Guard C18保护柱(20 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈(A)-0.03%三氟乙酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为240 nm;柱温为25℃。结果:确定最佳提取方法为1.00 g生药样品用20 mL 95%乙醇超声提取1 h。绿原酸、反式咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、反式阿魏酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、2,2-二甲基-6-乙酰基苯并二氢吡喃酮、款冬酮和甲基丁酰-3,14-去氢-Z-款冬素酯9个分析物的线性范围分别为62.5～2000μg.mL-1(r=0.9999),2.5～80μg.mL-1(r=0.9994),15.62～500μg.mL-1(r=0.9995),25～800μg.mL-1(r=0.9995),50～1600μg.mL-1(r=0.9992),37.5～1200μg.mL-1(r=0.9994),0.195～12.5μg.mL-1(r=0.9991),15.62～500μg.mL-1(r=0.9991),125～4000μg.mL-1(r=0.9995);平均加样回收率均在95.42%～105.0%范围内,RSD均在0.45%～4.5%范围内。结论:该方法准确,灵敏度高,重复性好,成本低,可用于款冬花中9个主要有效成分的含量测定。

HPLC-MS/MS测定龙生蛭胶囊在大鼠血浆中7个活性成分的含量及其药代动力学研究

目的:建立龙生蛭胶囊在血浆中活性成分的定量分析方法,并对各成分进行药代动力学研究。方法:采用HPLC-MS/MS分析方法,使用Agilent Rapid Resolution HD C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速0.5 mL·min^(-1);采用电喷雾离子源,分别选择正或负离子模式进行多反应监检测扫描(MRM),分析时间正离子模式下6 min,负离子模式下3 min。结果:经方法学验证,各成分线性关系良好(r>0.9977),提取回收率在85.1%-114.5%范围内,基质效应在85.08%-112.95%范围内,日内精密度RSD<10%,日间精密度RSD<9.6%,稳定性RSD<13%,均符合生物样品分析要求,满足大鼠血浆样品中各成分分析测定的需求。用DAS 3.0软件计算龙生蛭胶囊的7个活性成分在大鼠体内的药代动力学参数。结果表明,苦杏仁苷、阿魏酸、异嗪皮啶、毛蕊异黄酮、洋川芎内酯A、氧化芍药苷、芍药苷的达峰时间(T_(max))分别为(0.36±0.31)h、(0.11±0.05)h、(0.10±0.04)h、(3.36±3.69)h、(1.07±0.80)h、(2.35±3.12)h、(0.60±0.44)h;消除半衰期(t_(1/2))分别为(1.02±0.46)h、(7.95±10.74)h、(32.55±15.57)h、(3.67±2.07)h、(1.19±0.12)h、(2.39±1.92)h、(1.50±0.12)h。结论:该研究为龙生蛭胶囊主要成分的药理活性研究及临床用药提供科学数据。

多波长HPLC法测定加味逍遥丸中多种成分含量及化学计量学分析

目的:建立多指标含量测定结合化学计量学分析法,评价加味逍遥丸质量。方法:样品经甲醇超声提取,采用Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液进行梯度洗脱,234nm和440 nm双波长检测,并使用雷达图分析、聚类热图分析和夹角余弦相似度分析方法对数据进行统计。结果:样品中芍药苷、丹皮酚、阿魏酸、甘草苷、甘草酸、栀子苷、西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的含量分别为1.484~5.508、0.94~3.28、0.014~0.147、0.23~1.79、0.353~2.488、2.40~11.33、0.008 6~0.731 1和0.001 6~0.072 3 mg·g^(-1)。化学计量学分析表明各厂家的样品间存在一定差异,同一厂家的样品较为一致。区分各类样品的强特征峰为栀子苷峰、芍药苷峰、丹皮酚峰、栀子peak 6、甘草苷峰、西红花苷Ⅰ峰和牡丹皮peak2。结论:该法准确、专属,适用于加味逍遥丸整体质量评价。

HPLC法测定不同产地当归处理中7种成分的含量

目的建立HPLC法测定当归根中7种成分含量的方法,对比分析评价12批来自不同产地及同产地不同处理当归的质量。方法采用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以1%冰乙酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10μL。并用聚类、主成分分析对当归不同处理样品质量进行比较研究。结果当归根中7种成分分离度良好,12批不同产地处理的当归根中7种成分含量有较大差异。P值分析、聚类分析及主成分分析结果表明,当归根中7种成分在不同产地以阿魏酸松柏酯、Z-藁本内酯差异大,且聚为3类,能显著分开,当归产地以宕昌八力镇中拉村的质量相对最优。结论所建立的方法简便准确,重复性好,岷县、宕昌等地当归质量优于天祝、榆中等地,但通过施用合理处理能提高当归质量来缩小差异。

合成阿魏酸的高效液相色谱分析

目的 :用高效液相色谱法分析合成阿魏酸的含量。方法 :采用WatersG18Nova -Pak 2 5 0mm× 4 6mm柱 ,流动相MeOHH2 O(1 1) ,在流速 1 0 0ml/min、检测波长 2 5 4nm下进行检测。结果 :在 0 2 4～ 2 0 μg范围 ,进样量与峰面积有很好的线性关系 ,合成当归素的含量达到 99 4 %。结论 :高效液相色谱法分析合成当归素含量简便、快捷、准确 ,是一种较好的分析方法。

基于仿生技术对不同产地当归阿魏酸含量与滋味的关联性研究

目的:比较45个产地当归的滋味及阿魏酸含量差异,探讨滋味与阿魏酸含量的相关性,从而评价不同产地当归品质的优劣。方法:运用电子舌技术测定甘肃省45个县市当归样品的9种滋味,HPLC法测定阿魏酸含量,采用95%可信区间重叠法进行统计分析与比较味觉及阿魏酸差异,并将9种滋味与阿魏酸含量进行相关性研究,为当归药材的品质评价提供参考。结果:GS19(西宁县)阿魏酸含量最高(0.29%),GS37(西当县)甜味值最高,GS38(高台县)苦味值最高,GS14(合水县)鲜味值最高。当归滋味与其品质相关,阿魏酸与鲜味值呈显著正相关(R=0.508,P=0.000,n=45),与苦味、涩味、甜味、咸味、苦味回味、鲜味回味值无显著相关性。结论:不同产地当归的鲜味值差异反映阿魏酸含量的高低,故可用电子舌技术评价及快速鉴别药材的品质。

浓缩当归丸的提取工艺研究

采用索氏提取法提取浓缩当归丸的有效成分阿魏酸,同时用正交分析法对提取溶剂种类、用量及提取时间进行考察,最后以高效液相色谱法(HPLC)测定阿魏酸的含量,从而筛选出最佳提取工艺.结果显示:选用60mLV甲醇∶V甲酸=95∶5的混合液作为提取溶剂,预先浸泡24h,再索氏提取3h,得到浓缩当归丸的有效成分阿魏酸的含量最高.

不同厂家当归配方颗粒与当归饮片的质量分析研究

目的:采用高效液相色谱法测定当归饮片及A、B不同厂家生产的当归配方颗粒中阿魏酸的含量,比较三者阿魏酸含量的差异。方法:以Waters Symmetry Shield RP-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.5%醋酸溶液(20:80)为流动相,流速为1.0 mL/mi n,检测波长为320 nm。测定当归饮片及A、B不同厂家当归配方颗粒中阿魏酸的含量。结果:阿魏酸在0.0138~0.0690 mg/mL(r=0.999,n=6)的范围内浓度与峰积分面积线性关系良好,平均回收率为97.72%,RSD=1.06%。结论:当归饮片中阿魏酸的含量符合药典规定;A、B不同厂家配方颗粒中阿魏酸含量均低于当归饮片中阿魏酸含量,且A、B不同厂家的配方颗粒中阿魏酸含量也存在较大差异。

高效液相色谱法检测三两半药酒中阿魏酸

目的:建立一种高效液相色谱法测定三两半药酒中阿魏酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱,波长316nm、柱温25℃、流速1.0mL/min、进样量20μL;从不同品牌色谱柱、流动相类型及组成比例3个方面筛选阿魏酸检测条件;从线性范围、回收率、精密度、重现性及稳定性等方面进行考察。结果:以EclipseXDB-C18(250mm×4.60mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.1%磷酸(15:85,V/V)为流动相检测效果良好。该方法在1.15～114.70μg/mL内线性关系良好(R2=0.9999),进样精密度(RSD)为0.4%(n=6),进样重现性RSD为1.2%(n=6×2),平均回收率为99.5%,RSD为0.5%(n=6×2),在18h内检测8次,RSD为1.4%。结论:本法简便、准确、专属性强,重现性好,可用于该药酒质量控制。

靖巅饮口服液中阿魏酸的含量测定

以反相高效液相色谱法测定中药靖巅饮口服液中阿魏 酸的含量。色谱柱： Ｓｈｉｍ ｐａｃｋ＿ Ｃ Ｌ Ｃ＿ Ｏ Ｄ Ｓ （６ ×１５０ ｍ ｍ ， ５ μｍ ） ； 流动相： 甲醇 － 二 氯甲 烷 － 水－ 冰 乙 酸 （３７ ．５∶２ ∶６０ ∶０ ．５ ） ； 检 测 波长： ３１３ ｎ ｍ ； 流 速：０ ．５ ｍ Ｌ／ ｍｉｎ ； 柱温 ２５ ℃。阿 魏酸 在 ０ ．０４８４ ～１ ．２１００ μｇ 范 围内 具有 良 好的 线 性关 系， ｒ ＝ ０ ．９９９０ ， 回 收率 为９７ ．４７ ％ ， Ｒ Ｓ Ｄ＝ ３ ．２４ ％ 。

湖北恩施土家族药物豆板还阳中3种成分含量测定研究

目的建立同时测定豆板还阳药材中3种成分含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为岛津InertSustain C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为332 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。采用SPSS 21.0统计学软件对8批不同产地豆板还阳药材进行聚类分析。结果阿魏酸、槲皮素、石吊兰素在各自质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(R2≥0.9997);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.30%;平均加样回收率在101.37%~102.54%范围内,RSD为2.94%~3.27%(n=6);8批药材中阿魏酸、槲皮素、石吊兰素总含量介于0.147%~0.553%。经聚类分析,8批药材可分为三类。结论该方法操作简便,结果准确,重复性和稳定性均好,可用豆板还阳药材中3种成分的含量测定,且3种成分在不同产地的药材中含量差异较大。