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采用HaCaT细胞培养沙眼衣原体 被引量:1
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作者 王蕊 王敬 +3 位作者 陈立新 李卓然 刘原君 刘全忠 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期355-357,共3页
目的探讨新的培养沙眼衣原体的细胞。方法借鉴McCoy细胞培养沙眼衣原体的方法,将E型标准株和临床标本接种于HaCaT细胞,分别用碘染、单克隆荧光抗体检测、PCR扩增沙眼衣原体内源性质粒的方法检测沙眼衣原体是否可以在体外感染HaCaT细... 目的探讨新的培养沙眼衣原体的细胞。方法借鉴McCoy细胞培养沙眼衣原体的方法,将E型标准株和临床标本接种于HaCaT细胞,分别用碘染、单克隆荧光抗体检测、PCR扩增沙眼衣原体内源性质粒的方法检测沙眼衣原体是否可以在体外感染HaCaT细胞。用HaCaT细胞传代培养沙眼衣原体E型标准株5代,分别计数5次传代的包涵体数,并用SPSSl7软件进行单因素方差分析,以确定沙眼衣原体在HaCaT细胞中是否增殖。结果碘染后可见HaCaT细胞胞质内有典型的包涵体。单克隆荧光抗体检测,在荧光显微镜下可见HaCaT细胞内有黄色荧光颗粒。PCR扩增HaCaT细胞内沙眼衣原体内源性质粒为阳性。沙眼衣原体E型标准株在HaCaT细胞内经传代5次,包涵体数逐渐增加。结论HaCaT细胞在体外培养沙眼衣原体成功,且沙眼衣原体E型标准株在HaCaT细胞中可以增殖。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 t细胞培养 HACAt细胞 荧光抗体检测 单因素方差分析 PCR扩增 细胞传代培养 MCCOY
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急性早幼粒细胞白血病患者中TCR Vβ T细胞体内外克隆性增殖的比较 被引量:6
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作者 杨力建 李扬秋 +4 位作者 陈少华 韩素芳 陈盛亭 张学利 张涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期499-502,共4页
急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增... 急性早幼粒细胞白血病 ;T细胞受体Vβ基因 ;T细胞培养 ;克隆性增殖为了解急性早幼粒细胞白血病 (APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCRVβ亚家族的分布和克隆性增殖特点 ,利用T淋巴细胞液体培养法 ,在rhIL 2和抗CD3单抗条件下诱导扩增APL患者单个核细胞 ,并应用RT PCR分别扩增培养前后患者T细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的互补决定区 3 (CDR3 )片段 ,了解各Vβ亚家族的表达情况 ;对阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。结果发现 ,APL患者T细胞仅表达部分Vβ亚家族 ,但经体外培养后可检测到部分新增TCRVβ亚家族T细胞。全部患者存在某些TCRVβ亚家族的克隆性增殖T细胞。 2例患者均出现相似的Vβ1,Vβ3 ,Vβ7,Vβ16和Vβ2 0T细胞的克隆性增殖情况。结论 :T细胞的体外培养可诱导某些Vβ亚家族的表达。在T细胞培养不同时间中 。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 t细胞受体VΒ基因 t细胞培养 克隆性增殖
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抗CML特异性T细胞的诱导和细胞毒作用分析
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作者 杨力建 李扬秋 +2 位作者 陈少华 张学利 张涛 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第10期644-645,共2页
关键词 慢性粒细胞白血病 t细胞培养 细胞毒作用
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Balb/c 3T3细胞增殖对葡萄糖利用与促细胞生长因子活性试验
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作者 陆祥 何维 《轻工科技》 2019年第6期19-20,共2页
葡萄糖是动物细胞培养过程主要原料,可在细胞内代谢生成核酸及进入三羧酸循环,大部分通过糖酵解生成ATP(Adenosinetriphosphate,三磷酸腺苷)。本文对Balb/c 3T3细胞的增殖培养过程中,培养液中的葡萄糖消耗率与细胞培养周期对应,细胞对... 葡萄糖是动物细胞培养过程主要原料,可在细胞内代谢生成核酸及进入三羧酸循环,大部分通过糖酵解生成ATP(Adenosinetriphosphate,三磷酸腺苷)。本文对Balb/c 3T3细胞的增殖培养过程中,培养液中的葡萄糖消耗率与细胞培养周期对应,细胞对数增长期的葡萄糖消耗率最快,通过添加不同浓度表皮细胞生长因子(EGF)促进细胞增殖,细胞增殖数量与培养液中葡萄糖消耗率在一定范围呈现线性关系,在培养一定时间后,将培养液EGF浓度与葡萄糖消耗率绘制标准曲线,可间接检测表皮生长因子活性。 展开更多
关键词 3t3细胞培养 生长曲线 活性检测
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In vitro Induction of primary antibody responses to particulate and soluble protein antigens in T cell-replaced murine spleen cell cultures
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作者 Lu KunShanghai Institute of Cell Biology, Academia Sinica,Shanghai,200031,China. 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1990年第1期23-33,共11页
Specific antibody responses could be induced in serumfree condition.Specific anti-SRBC or anti-SRBC ghost antibody were induced from anti-Thy treated (T-depleted) murine spleen cells in serum-free culture in the prese... Specific antibody responses could be induced in serumfree condition.Specific anti-SRBC or anti-SRBC ghost antibody were induced from anti-Thy treated (T-depleted) murine spleen cells in serum-free culture in the presence of Con A conditioned medium.This induction system may facilitate the study of lymphokine functions on antigen triggered B cells. In T cell-replaced cultures,the antibody responses of B cells could be successfully induced when soluble SRBC membrane proteins were used as antigens.It thus indicates that antigen together with lymphokines are sufficient to drive B cells to become antibody secreting cells in the absence of T cells.The T cell-replaced system provides a more stable way for in vitro immunization and may be applied to monoclonal antibody production when in vivo immunization is difficult to be carried out. 展开更多
关键词 B cell maturation LYMPHOKINES in vitro immunization.
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2016—42PTEN基因干扰慢病毒载体及其制备方法
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《药物生物技术》 CAS 2016年第2期182-182,共1页
本方法提供一种PTEN基因干扰慢病毒载体及其制备方法,涉及基因工程技术领域,制备了PTEN基因干扰慢病毒载体,分别将4个siRNA干扰片断,通过酶切位点与载体连接后,通过PCR产物凝胶电泳鉴别挑选阳性克隆测序,还与pHelper1.0、pHelper... 本方法提供一种PTEN基因干扰慢病毒载体及其制备方法,涉及基因工程技术领域,制备了PTEN基因干扰慢病毒载体,分别将4个siRNA干扰片断,通过酶切位点与载体连接后,通过PCR产物凝胶电泳鉴别挑选阳性克隆测序,还与pHelper1.0、pHelper2.0两种包装质粒共转染293T细胞培养,获得重组慢病毒载体后,转染目的细胞,再利用Real—timePCR,对4个PTEN基因干扰载体质粒对目的基因干扰效果进行了检测,结果显示,4个靶点对Hela细胞内PTEN基因的表达都有显著下调作用,相对NC组,目的基因的表达水平下调达到85%,为进一步大量扩增提取病毒奠定了基础。 展开更多
关键词 重组慢病毒载体 基因干扰 制备方法 PtEN基因 SIRNA干扰 t细胞培养 基因工程技术 凝胶电泳鉴别
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连接酶链反应检测性病患者沙眼衣原体感染
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作者 郑和义 曹经江 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期279-281,共3页
目的评价连接酶链反应(LCR)诊断性病患者尿道/宫颈中沙眼衣原体(Ct)的意义。方法STD门诊尿道(宫颈)炎患者276例,取尿道/宫颈拭子,以LCR分析法检测Ct。采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,其中56例患... 目的评价连接酶链反应(LCR)诊断性病患者尿道/宫颈中沙眼衣原体(Ct)的意义。方法STD门诊尿道(宫颈)炎患者276例,取尿道/宫颈拭子,以LCR分析法检测Ct。采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,其中56例患者同时进行尿道/宫颈拭子Ct细胞培养。差异性结果由PCR法扩增Ct的主要外膜蛋白基因来进行确认,确定LCR分析法检测Ct的敏感性、特异性。结果LCR分析法检测尿道/宫颈拭子Ct的敏感性、特异性分别为96.7%和100%。采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,与单独用每份标本逐一进行LCR检测比较,结果完全一致,符合率为100%。结论以尿道/宫颈拭子为标本,LCR分析法检测Ct的敏感性、特异性高。适用于诊断泌尿生殖道Ct感染。用标本相混合的方法LCR分析检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,适用于Ct感染的普查。 展开更多
关键词 连接酶链反应 性病患者 沙眼衣原体感染 宫颈拭子标本 尿道(宫颈) 外膜蛋白基因 LCR Ct感染 分析法 StD门诊 t细胞培养 泌尿生殖道 敏感性 特异性 同时进行 PCR法 检测比较 分析检测 差异性 符合率 诊断 适用
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