口腔黏膜拭子法可用于无创检测线粒体tRNA^Thr15927G>A突变

目的探索口腔黏膜拭子法在临床上检测母系遗传性线粒体tRNA^Thr15927G>A(m.15927G>A)突变的可行性。方法对温州医科大学附属第一医院2070例母系遗传性线粒体疾病病例进行测序筛选,获得3例携带m.15927G>A突变病例(突变组)和3例正常志愿者(对照组)的口腔黏膜样本和血液样本。提取样本全基因组DNA后进行DNA浓度和纯度分析,再对其PCR产物进行斑点印迹杂、Southern blot印迹杂交和DNA测序分析,以验证口腔黏膜拭子法检测m.15927G>A突变的可行性。结果突变组和对照组口腔黏膜样本和血液样本提取的DNA浓度无显著差异(P>0.05),而手工法提取的口腔黏膜DNA纯度显著低于试剂盒法提取的血液及口腔黏膜DNA纯度(P<0.05)。斑点印迹杂交和Southern Blot印迹杂交提示对照组均呈阳性结果,而突变组均呈阴性结果。DNA测序结果示突变组中均可检测到m.15927G>A突变。结论口腔黏膜拭子法是一种准确、灵敏的无创检测m.15927G>A突变的方法,具有较高的临床应用价值。