化肥减量配施有机肥对植烟土壤理化特性和微生物群落结构的影响

探究化肥减量配施有机肥对植烟土壤理化性质和微生物群落结构的影响,为烟草生产上肥料减量和有机肥的合理施用提供理论参考。以常规施肥不配施有机肥为对照(CK),采用Illumina高通量测序技术,结合生物信息学,分析化肥减量10%(T1)、化肥减量10%+芝麻饼肥(T2)、化肥减量10%+腐殖酸肥(T3)、化肥减量10%+芝麻饼肥+腐殖酸肥(T4)等不同处理下土壤理化性质和微生物群落结构的变化特征。结果表明,与CK相比,T1处理的植烟土壤养分含量和土壤酶活性均下降、土壤物理特性略有改善,配施有机肥使土壤养分和物理特性得到进一步改善,容重降低、含水率和孔隙度增加,T2和T4处理的有效磷、速效钾含量显著高于CK和T1处理,所有配施有机肥处理的土壤酶活性均显著增加。配施有机肥增加了植烟土壤中的细菌和真菌门类,其中优势细菌门类均为变形菌门和放线菌门,其次是厚壁菌门、拟杆菌门、绿弯菌门、酸杆菌门,优势真菌门类为子囊菌门、子囊菌门盘菌亚门、被孢霉门、绿藻门、纤毛虫门、担子菌门。Alpha多样性指数表明,化肥减量降低了微生物群落的丰富度,但配施有机肥处理增加了细菌和真菌群落多样性指数,其中细菌群落丰富度提高更明显。RDA分析表明,影响土壤微生物群落结构与多样性的重要土壤理化因子包括有机质、速效钾、碱解氮、有效磷和土壤物理特性等,相对而言土壤理化因子对细菌群落结构的影响更大。综上,化肥减量配施有机肥对土壤养分、物理特性、土壤酶活性及微生物群结构有显著改善效果,尤其以同时配施芝麻饼肥和腐殖酸肥处理的效果更佳。

烟草香气相关基因CRISPR/Cas9编辑突变体库的构建

为探究CRISPR/Cas9基因编辑技术构建烟草突变体库的可行性,该研究以烤烟品种‘红花大金元’为实验材料筛选了100个可能参与烟草香气代谢的基因,设计相应的100个sgRNA并构建了由100个CRISPR/Cas9编辑载体组成的质粒库,获得转基因材料后分析了载体的共转化率、靶向编辑率和脱靶编辑情况。结果表明:(1)通过农杆菌介导100个sgRNA的共转化后,在172个阳性转化株中检测到了其中的77个sgRNA,共转化率为77%。(2)在77个携带sgRNA的转基因后代中,69个sgRNA对目标基因进行了靶向编辑,编辑率为89.6%。(3)脱靶位点测序检测发现,只有1个sgRNA在非目标靶位点产生了脱靶编辑,表明CRISPR/Cas9基因编辑技术在烟草中的脱靶概率非常低。综上所述,利用CRISPR/Cas9载体库共转化对烟草基因进行高通量靶向编辑以构建突变体库的方法切实可行,并且该方法有共转化率高、编辑率高和脱靶编辑概率低等特点。

顺-冷杉醇诱导烟草抗青枯病的效果及作用机制研究

为探究顺-冷杉醇诱导烟草抗青枯病的适宜处理条件和作用机制,采用盆栽接种方法,研究了顺-冷杉醇灌根施用的适宜浓度、时间间隔和次数,测定了顺-冷杉醇处理后烟草根部主要防御酶活性、植保素和植物激素含量的变化,利用高通量测序技术测定了顺-冷杉醇对烟草根系转录水平的影响。结果表明,顺-冷杉醇施用浓度60~80 mg/L对烟草青枯病的防效为54.50%~57.10%,与阳性对照中生菌素相当,其适宜施用时间间隔为3~6 d,连续施用2~3次;顺-冷杉醇处理后1~6 d烟草根部过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性显著提高,1~10 d过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著提高,处理后3~6 d多酚类物质和木质素含量显著增加,1~3 d茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)含量显著增加,引起烟草根部抗性基因NtSIPK、NtMEK2、NtMAPK、NtPAL和NtC4H上调表达,提高烟株对青枯病的抗性。由此可知,顺-冷杉醇可作为诱抗剂有效防控烟草青枯病的发生。

烟用香精的GC-MS指纹图谱

在卷烟生产中,烟用香精对卷烟的风格起着决定作用[1],所以稳定的烟用香精质量对卷烟内在品质的控制非常重要.目前,烟用香精的质量控制以物理指标[2]方法为主,对质量的变化反映不显著,给质量控制带来困难.……

烘烤温湿度对烟叶香气物质的影响

对不同烘烤处理条件下致香物质积累进行研究,结果表明:变黄期低温、低湿有利于香气前提物质生成积累;低温、低湿与高温、高湿相比,烤后烟叶致香物质种类多,许多重要的香气成分也只有在低温低湿下才能形成。温度、湿度对中性香气物质的影响比酸性、碱性更为明显。

Cd、Fe及其复合污染对烟草叶片几项生理指标的影响

本文通过盆栽和大田模拟试验,研究了Cd,Fe,Cd+Fe,Fe+Cd处理下烟草红花大金元(Nicotiana tabacurm L.)叶片的几项生理指标的变化情况。试验表明:烟草叶片叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b含量均随Cd处理浓度的增加而下降,随Fe处理浓度的增加而上升。总烟碱含量随Cd处理浓度的增加(0—100ppm)而下降,Cd 150ppm时略有上升,随Fe处理浓度的增加而上升。蛋白质含量随Cd处理浓度的增加而上升,随Fe处理浓度的增加而下降。烟草的3个生理指标表明,Cd抑制Fe对生理指标的作用,Fe抑制Cd对它们的作用,Cd与Fe相互拮抗。Cd处理的烟草叶片过氧化物酶活性和细胞膜透性的测定结果表明,过氧化物酶活性和细胞膜透性均随Cd处理浓度的增加而上升。

剪叶处理对烤烟漂浮育苗中烟苗生长及生理特性的影响

研究了烤烟漂浮育苗中剪叶处理对烟苗生长及生理特性的影响。结果表明,从第5片真叶开始出现是剪叶,每隔5～6d剪叶一次,剪叶次数为3～4次效果最好。剪叶对烟苗生长及生理特性具有重要作用,剪叶处理比对照烟苗生长量大,根系活力显著提高,叶片叶绿素含量增加,NR酶、INV酶和SOD酶的活性增强,以处理3和处理4效果显著。剪叶对烟苗叶片中矿质元素K、Mg、Ca、Fe的含量有明显的增加作用。

病害烟叶的傅里叶变换红外光谱研究

利用傅里叶变换红外光谱法研究了正常烟叶和四种病害烟叶,结果显示,它们的红外光谱主要由蛋白质、脂类化合物及多糖的振动吸收谱带组成。烟叶光谱整体相似,仅在1800-750 cm^-1范围,正常烟叶和病害烟叶的光谱峰位、峰形及吸收强度比有一定差异。为了提高光谱灵敏度,对光谱进行二阶导数相关性分析,五个样品的二阶导数光谱在1750-1500 cm^-1和1200-950 cm^-1范围内的相关系数差异明显,表明五种烟叶样品所含化学成分或各成分相对含量各不相同,即病害影响烟叶的化学成分。正常烟叶的吸收强度比A1025/A1631大于1（为1.417）,而其他四种病害烟叶对应的吸收强度比均小于1,表明四种病害烟叶中蛋白质所占比例增加,多糖所占比例下降。研究结果表明傅里叶变换红外光谱在鉴别病害烟叶方面具有方便、快速等优点。

烟草对不同来源氮素的吸收、利用、分配的研究

本文根据^(15)N 示踪技术对烟草吸收不同来源氮素后分配利用的研究,分析了烟草氮素营养的特征。分析结果表明:烟草吸收不同来源的氮素后在体内的分布是不均匀的。肥料氮的相对含量在不同叶位间的分布为:上部叶<中部叶<下部叶。这种分布与肥料氮进入烟草体内数量多少无关。建立了非线性回归方程以描述不同叶位氮素含量变化的关系。无论全氮含量还是含氮化合物,它们与其中肥料氮组成比例间的关系都有一致的表现。烟草在生育期内均在吸收各种来源的氮素,各时期吸收不同来源氮素的相对数量与营养条件有关,没有特殊的选择性。

不同成熟度香料烟调制过程中生理化学特性的研究

选河南省合砾石的轻粘质土壤，种植香料烟品种Ｂａｓｍａ和Ｓａｍｓｕｎ，中上部叶采收时分为未熟、适熟和过熟。在同一条件下调制，调制过程中测定了叶片的主要化学变化。结果表明，随调制时间的延长叶片水分持续减少，叶片成熟度越高，叶片水分损失越快。叶绿素和类胡萝卜素含量随调制时间延长持续减少，但其大量的减少是在调制的最初４天，尤以适熟叶叶绿素降解最快。多酚氧化酶活性随调制到第３天达最大值后呈降低趋势。Ｂａｓｍａ品种的多酚氧化酶活性高于Ｓａｍｓｕｎ，不同成熟度间差异较小。还原糖含量在调制初期阶段有所增加，至第３天后逐渐降低。调制结束时，Ｂａｓｍａ的未熟和适熟叶糖含量高于原初含量；Ｓａｍｓｕｎ品种未熟和适熟叶糖含量高于原初含量，过熟叶低于原初含量。烟碱含量随调制时间延长呈增加趋势，而最终含量是稍减。总氮和钾含量在调制过程中都有不同程度增高，不同成熟度间差异较小。

妇女被动吸烟的健康影响

目的探讨被动吸烟对妇女的健康影响。方法于2002—2004年采用病例-对照的研究方法,对妇女被动吸烟与肺癌的关系、孕妇被动吸烟与足月出生小于胎龄儿的关系进行研究。妇女被动吸烟与肺癌的病例-对照研究收集北京、上海和成都指定医院经病理诊断确诊的肺癌新发住院病例157例,以1(肺癌病例)∶2(医院对照+人群对照)配对;孕妇被动吸烟与足月出生小于胎龄儿的病例-对照研究收集北京市足月分娩小于胎龄儿产妇155例,以1∶1配对。结果妇女被动吸烟显著增加发生肺癌的相对危险性(OR=2.95),在24岁以前开始被动吸烟者发生肺癌的相对危险性显著增加(OR=4.12),经常吃动物内脏(OR=1.91)、职业接触有害物(OR=3.16)、职业接触粉尘(OR=3.41)、工作场所通风不良(OR=4.02)为非吸烟女性发生肺癌的危险因素。常吃蔬菜(OR=0.24)、常喝牛奶(OR=0.53)、经常服用维生素(OR=0.53)为非吸烟女性发生肺癌的保护因素。趋势性χ2检验显示,随着被动吸烟指数和被动吸烟年限的增加熏肺癌的发生显著增加(P<0.001)。多因素条件Logistic逐步回归分析显示,被动吸烟指数≥50人·年、经常吃动物内脏、职业接触粉尘、工作场所通风不良是非吸烟女性发生肺癌的主要危险因素;常吃蔬菜、经常服用维生素是非吸烟女性发生肺癌的保护性因素。病例组与对照组在孕期体重增加少、孕期被动吸烟、工作场所通风不良、配偶身高较低和孕期进行胎教等方面的差异均有统计学意义(P<0.01),产妇和配偶文化程度高、产妇孕前体重指数高、家庭总月收入高和孕期进行胎教等可能是足月出生小于胎龄儿的保护因素。多因素条件Logistic回归分析显示,产妇孕前体重低(OR=2.08)、孕期体重增加少(OR=2.83)、被动吸烟(OR=3.42)及孕期饮茶(OR=2.72)、孕期及怀孕之前3个月内进行染发、烫发或焗油(OR=5.67)、配偶身高较低(OR=2.92)等因素均使足月出生小于胎龄儿的相对危险性显著增加,是足月出生小于胎龄儿的主要危险因素;产妇孕前体重指数高使足月出生小于胎龄儿的相对危险性显著降低(OR=0.41),是足月出生小于胎龄儿的保护因素。结论被动吸烟是非吸烟女性发生肺癌的主要危险因素。孕期被动吸烟是足月出生小于胎龄儿的主要危险因素。

4种基因型烟草叶肉原生质体培养的研究

以K326、云85、红大、G-28等普通烟草品种的叶片为起始材料进行原生质体培养的研究。结果表明,基因型对烟草叶肉原生质体的培养有明显影响作用,并对影响烟草叶肉原生质体的分离、培养和再生植株等环节的其它相关因素进行了研究和探索。

不同采收成熟度对红花大金元烟叶品质的影响

以红花大金元为试验材料,研究了烤后烟叶物理特性、常规化学成分以及在烘烤过程中色素和总酚含量在不同成熟度之间的差异。结果表明:1适熟烤后烟叶单叶重平均为13.55 g,填充值最大为3.88 cm3/g,含梗率最低为32.96%,叶长、叶厚适中,叶宽最小,拉力、抗张度适中,而欠熟、过熟烤后烟叶均有指标处于不适宜范围。2烤后烟叶糖含量以欠熟为最高,适熟烟叶较高,适熟烟叶烟碱、总氮含量适中,氯含量较低、钾含量最高,糖碱比最低,钾氯比最高。3欠熟鲜烟叶的色素含量最高,在烘烤过程中降解量较大,不同成熟度烟叶中色素降解率表现为欠熟>适熟>过熟。4欠熟烟叶总酚含量在烘烤进程中规律不明显,适熟烟叶在干筋期之前先升高,而后略有降低,过熟烟叶在48℃之前先升高后降低,到停火时达到最高。

枯草芽孢杆菌纤溶酶基因在转基因烟草组织中的分泌表达

克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)基因及其前导肽序列。通过农杆菌EHA105介导转化,获得转基因烟草植株。其BSFE的表达水平为叶片42.97±28.59U·g-1FW、茎15.14±10.57U·g-1FW和根25.55±14.71U·g-1FW。其内源BSFE信号肽可在转基因烟草中行使蛋白转运功能,使BSFE具有分泌表达特性。这一系统可用于建立利用植物组织分泌表达外源蛋白的系统模型。

烟草烘丝过程的水分控制

讨论了烟草生产中烘丝过程的水分控制问题．根据烘丝过程各阶段不同的工艺要求，提出了包括有开关控制、跟踪控制及预测控制的分段变策略控制方案．针对烘丝过程的非线性、不确定性及存在大滞后的特点，提出了一种基于模糊模型的自校正预测控制算法，并且与前馈控制方法结合，应用于烘丝过程的送料稳定阶段．系统仿真证明的可行性．

被动吸烟对儿童健康的影响

目的探讨被动吸烟对儿童健康影响。方法调查兰州市日托幼儿园1031名4-6岁儿童在2000年3月1日至2001年2月28日期间被动吸烟量和患呼吸系统疾病(感冒、气管炎、肺炎和哮喘)的情况,并测定其中485名儿童唾液中硫氰酸盐、溶菌酶、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)含量。结果儿童1 a中患呼吸系统疾病≥4次和患感冒≥4次的比例随被动吸烟量的增加而增加(前者X2=13.8,后者X2=15.6,P均<0.01)。儿童被动吸烟量与呼吸系统疾病患病次数(r=0.190,P<0.01)和唾液中硫氰酸盐禽量均呈正相关(r=0.570,P<0.01),与唾液溶菌酶含量呈负相关(r=-0.473,P<0.01)。随被动吸烟量的增加,儿童唾液中免疫球蛋自(IgG、IgA、IgM)含量呈下降趋势。结论被动吸烟可增加儿童呼吸系统发病和非特异免疫功能低下。

黄瓜LDC克隆、表达载体的构建及烟草转化研究

赖氨酸脱羧酶(LDC)催化赖氨酸脱羧形成尸胺。该研究采用RT-PCR技术从耐冷黄瓜‘Chipper’中分离到一段c DNA序列,利用DNAMAN6.0软件进行氨基酸序列分析,用BLASTp对蛋白的保守序列进行比对,用双酶切法和T4DNA连接酶构建了植物超表达载体p CAMBIA1304-LDC,通过在烟草不定芽诱导和生长培养基中添加不同浓度的潮霉素(Hyg)以确定不定芽分化和生长的筛选压力浓度,同时优化了菌液浓度、侵染时间和预、共培养时间4个农杆菌侵染条件。结果表明:该序列的CDS全长具有648 bp,编码216个氨基酸,BLASTp结果显示该蛋白具有赖氨酸脱羧酶的保守序列,认为分离到的序列为黄瓜LDC基因,在Gen Bank中的登录号是KC202438;当在叶块不定芽诱导培养基中添加10 mg·L-1的Hyg时,芽诱导率明显降低,为5.41%;当芽生长培养基中的Hyg浓度为20 mg·L-1时,芽苗成活率为33.33%,明显低于对照,因此认为10 mg·L-1和20 mg·L-1的Hyg浓度是抗性芽诱导和生长的筛选浓度;农杆菌侵染时,烟草叶盘不需要预培养,农杆菌OD600值为0.6,侵染5 min、共培养4 d时,侵染效果最好,能获得较高的抗性芽分化率。获得的抗性植株移栽成活后,叶片DNA经过PCR鉴定,获得了29株转化植株,转化率达93.55%。转化植株的获得为下一步基因功能分析提供了材料。

不同采收成熟度对NC 297和NC 102中、上部烤后烟叶产质量的影响

为找出烤烟NC297和NC102中部和上部烟叶适宜的采收成熟度,在相同生产条件下从经济性状、外观质量和化学成分协调性3个方面研究不同采收成熟度对烤烟NC297和NC102的影响。结果表明:(1)经济性状上,NC297和NC102的中部叶以封顶后26 d采收最优,上部叶分别以封顶后54 d和47 d采收最优;(2)外观质量上,NC297和NC102的中部叶和上部叶均分别以封顶后26 d和47 d采收最优;(3)化学成分的协调性上,NC297的中部叶和上部叶分别以封顶后20 d和54 d采收最协调,NC102的中部叶和上部叶分别以封顶后26 d和47 d采收最协调。综合考虑,NC297和NC102的中部叶应在封顶后26 d采收,NC297的上部叶应在封顶后54 d采收,NC102的上部叶应在封顶后47 d采收,有利于两个品种优良品质的形成。

9512-1乳油对部分烟草害虫的毒力测定

95 1 2 1乳油是联华实验室开发的阿维菌素类农用杀虫杀螨剂。室内用浸叶法 ,分别测定了 1 % 95 1 2 1乳油对烟草主要害虫烟青虫、烟蚜的毒力 ,结果表明 1 % 95 1 2 1乳油对供试昆虫有突出的毒杀效果 ,其 2 0 0 0倍液对 2龄和 3龄烟青虫在 72h内死亡率分别达 87.77%、1 0 0 % ;对烟蚜的LC50 值为 0 .33mg/L。田间实验表明 ,1 % 95 1 2 1乳油对烟蚜的防效高于 90 % ,1 5d后可高达 95 .4%

烟草叶肉原生质体分离和纯化研究

实验比较了从烟草K326叶片分离叶肉原生质体的若干影响因素.结果表明,质壁分离的时间、酶液浓度、渗透压及酶解时间是影响原生质体产量和质量的决定性因素.研究结果对建立高效的烟草原生质体再生系统及其遗传操作有参考价值.