芦笋对烟粉虱的抗性品种筛选及抗性机制研究

为了探明芦笋对烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)的抗性机制,为芦笋抗性品种的选育及烟粉虱的综合防治提供理论依据,本研究以收集的16份芦笋品种为材料,于苗期人工释放烟粉虱后测定各品种抗性相关指标叶绿素a、叶绿素b、POD、SOD、可溶性蛋白、可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛、单宁、类黄酮、总酚和表皮蜡质等的含量,利用“隶属函数法”“虫量比值法”和“表型观察法”对其抗虫性进行鉴定并研究其抗性机制。结果表明,释放烟粉虱后不同时间,品种间烟粉虱数量存在显著差异,不同芦笋品种对烟粉虱诱集能力不同;各生化指标在烟粉虱为害下变异程度较大,变异系数变幅在24.46%~47.43%;16个芦笋品种中,‘浙丰1号’‘阿特拉斯’和‘紫色激情’的抗虫能力相对较强。12个生化指标降维为5个主成分,累计贡献率达84.136%;相关分析表明:芦笋抗虫性与单宁、表皮蜡质含量呈极显著正相关,与POD活性、总酚、可溶性糖含量呈显著正相关,与丙二醛含量呈极显著负相关,与其他性状无明显相关性。选育单宁、总酚、表皮蜡质和可溶性糖含量高、POD活性高、丙二醛含量低的品种,可提高芦笋对烟粉虱的抗性。

寄主植物对B型烟粉虱(Bemisia tabaci)和温室粉虱(Trialeurodes vaporariorum)个体发育和种群繁殖的影响

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)和温室粉虱Trialeurodes vaporariorum(Westwood)在我国北方常混合发生,为了解两种粉虱所造成的危害和自身种群的增长变化,制定科学的综合防治措施,在(27±1)℃条件下研究了两种粉虱在棉花Gossypium hirsutum L.(泗棉3号)、黄瓜Cucumis sativas L.(北京202)、茄子Solanum melongena L.(北京七叶茄)和番茄Lycopersicum esculentum Mill.(佳粉十号)上各虫态大小、存活率、发育历期、成虫寿命、平均产卵量等生物学参数。在同一种寄主植物上,温室粉虱的1,2龄若虫的体长和体宽均显著大于烟粉虱,3龄以后两种粉虱的体型则变异较大。两种粉虱从卵到成虫羽化,在棉花上的发育历期无显著差异,在黄瓜、茄子和番茄上,温室粉虱的发育历期(19.7、19.4、20.8d)显著长于烟粉虱(17.3、17.6、18.3d)。在黄瓜和番茄上,烟粉虱的平均寿命(31.2、32.1)显著长于温室粉虱的平均寿命(26、24.9d);在棉花、黄瓜和番茄上,烟粉虱的单雌产卵量(122.2、220.2、266.5粒)显著高于温室粉虱(97.1、186.6、197.1粒)。烟粉虱在棉花、黄瓜、茄子和番茄上的总存活率分别为67.9%、77.8%、67.8%和59.0%,温室粉虱依次为62.2%、67.2%、64.4%和66.1%。综合比较4种寄主植物,烟粉虱比温室粉虱具有个体发育时间短、种群繁殖速度快、生殖竞争能力强等特点。

寄主植物对B型烟粉虱(Bemisia tabaci)几种主要解毒酶活性的影响

研究测定了棉花、一品红、茄子和番茄4个B型烟粉虱(Bemisia tabaci)种群α-NA羧酸酯酶、β-NA羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽S-转移酶活性。结果表明:α-NA羧酸酯酶活性与β-NA羧酸酯酶活性比值均大于1,说明B型烟粉虱水解α-NA的能力高于对β-NA的水解能力;B型烟粉虱不同寄主种群α-NA羧酸酯酶、β-NA羧酸酯酶活性个体分布频率均存在一定差异。B型烟粉虱番茄种群羧酸酯酶活性最高(93.06 mOD/(mg protein.min)),是棉花种群的1.49倍。B型烟粉虱茄子种群乙酰胆碱酯酶活性明显高于其他寄主种群,达极显著差异水平(p<0.01);茄子种群乙酰胆碱酯酶活性分布频率在>4U/mgprotein区间段的分布高达85%,与其他3个寄主种群分布明显不同。B型烟粉虱茄子种群谷胱甘肽S-转移酶活性最高,与其他3个寄主种群间的差异达极显著水平(p<0.01)。上述结果表明,B型烟粉虱主要解毒酶活性在不同的寄主植物上具有一定的生理可塑性。研究有利于揭示该害虫寄主范围广和寄主适应性强的生理生态学基础。

基于地统计学的新疆棉田烟粉虱(Bemisia tabaci(Gennadius))危害动态与时空分布

应用地统计学（GS）的原理与方法研究了外来入侵有害牛物烟粉虱（Bemisia tabaci（Gennadius））为害新疆棉田的时空动态，并与经典统计学进行对比分析。两种方法一致表明，烟粉虱成虫在空间上呈聚集分布的格局，而各时期成虫的聚集程度依据空间变异随机程度所占的比例不同而不同。经频次分布检验，以零频率法参数拟合的负二项分布来表达其空间分布型最为合适。运用Gs的分析方法，进一步得到种群分布面积变化与扩散的趋势，并依此对昆虫种群的扩散模型进行模拟。棉田烟粉虱成虫在田间7-8月份均存在一定的空间相关性，随机程度为19．22％-49．99％；空间相关距离（相关程）在一个月内从32m急速增至6372m，随后在2000-3000m的范围波动。从整个发生过程看出，烟粉虱从越冬场所顺风侵入大田后，迁飞扩散在很大程度上受风向的影响，属于典型的借助风力扩散的昆虫，其在棉田的垂直分布则与吐鲁番地区独特的暖温带大陆性干旱荒漠气候特征有关。顺风扩散时多从棉株上部叶片开始危害，而逆风扩散时从棉株中、下部叶片危害。烟粉虱在棉株上建立稳定种群后，中、下部虫口密度要略高于上部，这是烟粉虱对吐鲁番地区特殊气候的适应。

四氟醚唑对烟草高氏白粉菌的抑制作用及对烟草白粉病的温室防效

为评估四氟醚唑在烟草白粉病上的应用潜力,采用孢子萌发抑制法测定了四氟醚唑对烟草高氏白粉菌的室内毒力,并观察了其对烟草高氏白粉菌形态的影响;通过盆栽试验测定了四氟醚唑对烟草白粉病的温室防治效果。结果表明:四氟醚唑对3株烟草高氏白粉菌菌株分生孢子萌发有强烈的抑制作用,其EC50值分别为0.3422、0.3561和0.4105μg/mL;对芽管伸长的抑制作用明显,其EC50值分别为1.7466、1.3988和1.3229μg/mL。光学显微镜观察结果表明:四氟醚唑对烟草高氏白粉菌分生孢子无致畸作用,但能使其初生菌丝畸形。温室防效试验结果表明:4%四氟醚唑水乳剂在有效成分1.61、3.22和5.36 g/L剂量下,喷施处理烟苗14 d后,保护作用的防效在76.62%~95.67%之间,治疗作用的防效在71.42%~90.91%之间。

烟粉虱(Bemisia tabaci)的寄主选择性

通过田间系统调查、实验室嗅觉测定、笼内和培养皿内自由扩散观察,对烟粉虱的寄主选择性进行了研究。结果表明,在田间,烟粉虱对不同的寄主植物存在明显的寄主选择性,其中对茄子、花椰菜、黄瓜等植物具有较强的嗜性,而对蕹菜、芹菜、苋菜等植物的嗜性较差;烟粉虱对同一植物的不同品种也有明显的选择性。烟粉虱对寄主植物颜色有明显的选择性,选择结果与烟粉虱对这些寄主的嗜性趋势基本一致。烟粉虱对单株寄主植物的嗅觉反应不敏感,但对植物叶片的乙醇抽提物有明显的嗅觉反应,并表现出较强的寄主选择性。在养虫笼内,烟粉虱从虫源皿向寄主植物自由扩散的过程中,在不同寄主植物和同一植物的不同品种上着落的成虫数量不同,并且在一定的时间范围内,着落在寄主叶片上的虫量还会不断的发生变化。

烟粉虱MED隐种14-3-3基因克隆及时空表达谱分析

【目的】真核生物中,14-3-3蛋白是一类可与多种蛋白互作的调节蛋白,能够参与信号转导、免疫反应、生长发育和胁迫响应等。本研究旨在克隆烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种的14-3-3基因的全长cDNA序列,了解该基因编码的蛋白特征和该基因的时空表达模式。【方法】使用RT-PCR技术克隆烟粉虱MED隐种的14-3-3基因全长cDNA序列,通过生物信息学软件和在线网站分析14-3-3基因的生物学特性;使用RT-qPCR测定14-3-3基因在烟粉虱MED隐种不同发育阶段(卵、1-4龄若虫和成虫)、雌雄成虫以及雌成虫头、胸和腹中的表达量。【结果】克隆并鉴定了烟粉虱MED隐种14-3-3基因的两个亚型:Bt14-3-3 epsilon(GenBank登录号:XM_019046102.1)和Bt14-3-3 zeta(GenBank登录号:XM_019057395.1),开放阅读框(ORFs)分别长771和744 bp,分别编码256和247个氨基酸,编码的蛋白是无跨膜螺旋区和信号肽的亲水性蛋白,其二级结构主要由α旋螺旋组成。系统发育树分析表明,Bt14-3-3 epsilon与褐飞虱Nilaparvata lugens、温带臭虫Cimex lectularius和茶翅蝽Halyomorpha halys的14-3-3 epsilon聚为一支,同源性较高;Bt14-3-3 zeta与褐飞虱的14-3-3 zeta的亲缘关系更近。RT-qPCR结果表明,Bt14-3-3 epsilon和Bt14-3-3 zeta在烟粉虱MED隐种的卵、雌成虫和雌成虫腹部中的表达量较高。【结论】明确了烟粉虱MED隐种14-3-3基因的两个亚型的全长序列、编码蛋白特征及时空表达特点,为后续研究14-3-3蛋白的分子功能奠定了基础。

烟草野火病菌Pseudomonas syringae pv.tabaci yuexi-1信号肽预测及分析

利用Signal P 4.0、Lipo P 1.0及TMHMM v2.0对烟草野火病菌Pseudomonas syringae pv.tabaci yuexi-1菌株基因组中信号肽的数量、长度和氨基酸组成进行了预测及分类。结果确定其中432个ORFs（Open reading frame）所编码的N端有信号肽序列,占全部ORFs的8.81%。其中351条分泌型信号肽（SPI）,81条脂蛋白型信号肽（SPII）。在分泌型信号肽中,信号肽的长度为11~42个氨基酸,以长度为22个氨基酸的信号肽最多。同源性分析结果显示,具有相同信号肽序列的不同蛋白序列之间是高度保守的。该研究提供了野火病原菌致病因子的备选基因,提高该病菌致病因子的筛选效率。

广东省番茄白尖曲叶病病原鉴定及其致病性分析

【目的】洋桔梗耳突曲叶病毒(lisianthus enation leaf curl virus,LELCV)是2015年发现的菜豆金色黄花叶病毒属(Begomovirus)病毒新种。论文旨在探究入侵中国内地的首个LELCV分离物Tomato-2022的分子特征、亲缘关系、致病性及有效传播介体,为防控该病毒病提供理论依据。【方法】2022年,在广东省广州市增城区发生一种番茄新病害,病株表现叶小、卷曲、叶尖白化症状,采集两份病样提取总DNA,利用Begomovirus通用引物AV494/CoPR进行PCR检测。选取PCR检测为阳性的样品进行RCA扩增、酶切、克隆及测序,获得分离物Tomato-2022的基因组全长序列。采用BLASTn程序对病毒序列进行相似性检索并下载相似性较高的代表分离物序列,进一步用SDTv1.2的MUSCLE alignment方法进行序列相似性比对;利用软件MEGA7.0对获得的Tomato-2022基因组序列及已报道的相似性较高的代表分离物进行系统发育分析。应用酶切连接法构建Tomato-2022的侵染性克隆pGreenII0229-1.6A,通过农杆菌介导注射接种本氏烟叶片和番茄茎秆,测定其致病性。采取室内人工传毒方法,测定烟粉虱MEAM1隐种对分离物Tomato-2022的传播效率。利用LELCV的PCR特异引物对2021—2023年采集于广东省番茄主产区的135份番茄病样进行检测,明确该病毒在广东省的分布。【结果】PCR检测结果表明,两份表现叶小、卷曲、叶尖白化症状的番茄病样感染了菜豆金色黄花叶病毒属病毒。基因克隆与序列分析显示,该病毒分离物Tomato-2022基因组仅含DNA-A,大小为2757 nt,含有6个ORF。序列相似性比较表明,分离物Tomato-2022基因组序列与已登录GenBank的LELCV各分离物相似性较高,其中与LELCV中国台湾洋桔梗分离物(LC091539、LC091538)相似性最高,为98.33%。系统发育分析显示,Tomato-2022与LELCV的19个分离物聚在一个独立的分支,亲缘关系较近。利用构建的Tomato-2022侵染性克隆pGreenII0229-1.6A,农杆菌介导注射接种本氏烟和番茄,10 dpi,本氏烟上部叶叶缘轻微上卷,1株番茄的新叶轻微卷曲;18 dpi,本氏烟和番茄植株均表现较为明显的卷曲症状;随着接种时间的延长,接种植株的症状越来越明显,30 dpi,本氏烟表现叶脉肿大、叶片严重卷曲,番茄植株的叶片表现卷曲、叶尖白化;PCR检测表明,在接种发病本氏烟和番茄植株中均能检测到LELCV。室内传毒试验证明,烟粉虱MEAM1隐种能高效传播Tomato-2022,当每株番茄接1、5、10头饲毒48 h的烟粉虱时,MEAM1的平均传毒效率分别为26.67%、93.33%、96.67%。PCR检测结果表明,采集的135份番茄病样中,8份样品检测到LELCV,说明LELCV已在广东省定殖。【结论】Tomato-2022是洋桔梗耳突曲叶病毒的一个新分离物,也是在中国内地发现的第一个分离物,其基因组为单链环状DNA,全长为2757 nt,编码6个ORF;该病毒分离物是引起广东省番茄曲叶、叶尖白化病的病原,可被烟粉虱MEAM1隐种高效传播。

番茄两种虫媒传播的重要病毒病研究进展

近年来,番茄黄化曲叶病毒和番茄褪绿病毒对番茄生产造成了巨大的危害,这两种病毒都主要通过烟粉虱传播。本文对番茄黄化曲叶病毒病和番茄褪绿病毒病的扩散趋势、引起这两种病毒病的病原物特性及其发病症状差异、传播这两种病毒的主要媒介昆虫、烟粉虱媒介的危害及其研究概况、烟粉虱生物型的演化及其鉴定方法、烟粉虱和番茄两种病毒的互作以及烟粉虱媒介和番茄两种病毒病的防控等方面进行综述,以期为番茄病虫害的防控提供科学指导。

香葱主要虫害防治药剂的筛选

为了筛选防治香葱蓟马、斑潜蝇、斜纹夜蛾的高效安全药剂,通过田间药效试验测定不同杀虫剂对3种害虫的防治效果。结果表明,60 g/L乙基多杀菌素SC对蓟马的防效较好,防效为88.40%~95.93%;60%噻虫·灭蝇胺WG对斑潜蝇的防效较好,防效为81.02%~87.26%;35%氯虫苯甲酰胺WG对斜纹夜蛾的防效较好,防效为88.01%~92.53%,为香葱主要虫害田间防控提供高效药剂。

洛阳烟田烟粉虱隐种类型和消长动态研究

为明确洛阳烟田烟粉虱的隐种类型及消长动态,于2021—2023年在主要烟区采集烟粉虱成虫,检测线粒体COI基因进行Blast比对鉴定烟粉虱隐种类型,并采用五点取样法及黄板诱集法,对烟粉虱消长动态进行了调查研究.结果表明:洛阳烟田烟粉虱优势隐种为MED隐种(原Q型烟粉虱);烟粉虱成虫始见期大致为6月下旬至7月上旬,盛发期为8月下旬至9月中旬.不同年份因气候变化,其种群峰值出现时间会有差异.烟草团棵期温度高、干旱,种群峰值为8月下旬,反之,种群峰值会推迟至9月上中旬.之后,由于烟叶采收和温度降低,发生量逐渐减少,至10月下旬,田间成虫逐渐消失.调查结果显示,最初世代烟粉虱成虫未在烟田产卵,烟田若虫始见期为8月下旬,盛发期多为9月上中旬.研究结果为洛阳烟田烟粉虱的精准预测预报和有效防控提供科学依据.

烟粉虱细胞色素P450基因CYP6JM1的克隆及其在噻虫嗪抗性中的作用

烟粉虱Bemisia tabaci是全球性农业害虫之一,目前采用的防治手段多为化学防治。噻虫嗪作为一种新烟碱类杀虫剂,现被广泛应用于田间烟粉虱的防治,但烟粉虱已对其产生了抗性。本文通过RT-qPCR对烟粉虱噻虫嗪抗性与敏感种群的细胞色素P450基因CYP6JM1表达水平进行了比较,结果显示,烟粉虱噻虫嗪抗性种群CYP6JM1基因表达水平明显升高。基因克隆和序列分析表明,CYP6JM1基因具备昆虫P450基因的典型特征。RT-qPCR检测结果表明,该基因在烟粉虱1~2龄时期及腹部高水平表达。RNAi结果表明,降低烟粉虱体内CYP6JM1基因的表达量能够显著提高其对噻虫嗪的敏感性,表明CYP6JM1基因可能与烟粉虱对噻虫嗪的抗性有关。

不同致死浓度螺虫乙酯对丽蚜小蜂控害效果的影响

本研究选择防治烟粉虱的常用杀虫剂螺虫乙酯,采用药膜法对丽蚜小蜂进行处理,通过温室笼罩等方法,对不同致死浓度螺虫乙酯影响下丽蚜小蜂的种群动态及其对烟粉虱的寄生情况进行系统调查,旨在明确螺虫乙酯对丽蚜小蜂控害能力的亚致死效应。结果表明:LC50螺虫乙酯处理丽蚜小蜂后,在伸蔓期-开花期,丽蚜小蜂蛹的密度明显降低,仅20.94头/100 cm^(2)叶片;烟粉虱卵和高龄若虫的密度明显升高,分别达161.47和46.32头/100 cm^(2)叶片。LC10螺虫乙酯处理丽蚜小蜂后,其蛹的密度在伸蔓期-开花期明显低于清水处理,仅38.14头/100 cm^(2)叶片;其寄生率在伸蔓期-开花期明显低于清水处理,仅60%左右。丽蚜小蜂与烟粉虱高龄若虫的时间和空间生态位重叠指数均随着螺虫乙酯浓度的升高呈下降趋势,说明丽蚜小蜂对烟粉虱高龄若虫的控制能力随螺虫乙酯浓度的升高而降低。因此,不同致死浓度螺虫乙酯均可明显降低丽蚜小蜂在温室条件下对烟粉虱的控制效果。

烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)对烟草细胞内5种防御酶系统的影响

定期测定了感病品种红花大金元接种烟草野火病菌后叶片内 5种酶活性的动态变化 ,研究结果表明 :烟草接种病菌后 ,SOD活性先上升 ,后在 8d下降 ,低于对照 ;POD活性接种后在 1d略低于对照 ,后上升较快 ,10d达到高峰 ,此后一直高于对照 ;PPO活性在接种后 1d低于对照 15 .8% ,但此后上升 ,16d达到高峰 ,18d下降低于对照 ;CAT活性变化与POD相似 ,接种 1d低于对照 ,但此后一直高于对照 ,并于 6d达到高峰 ,10d虽有所下降 ,但接着升高 ;PAL活性与CAT、POD变化相似 ,接种后 1d活性低于对照 2 8.3% ,其后上升 ,10d达到高峰 ,是对照的 2 .11倍 。

云南烟草野火病病原细菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)鉴定

对云南省各大烟区烟草叶片上引起褪绿晕圈的病原细菌从形态学、培养性状、生理生化反应、抗菌素反应、抗血清反应、遗传性状等方面进行了鉴定。结果表明 :该菌为烟草野火病菌 [Pseudomonassyringaepv .tabaciWolf&Foser (1917)Young ,Dye&Wilkie (1978) ]。

3种瓢虫对西花蓟马和烟粉虱的控制能力研究

本研究旨在探讨多异瓢虫、七星瓢虫和十斑大瓢虫这3种天敌昆虫对西花蓟马和烟粉虱的生物防治潜能。在室内条件下,用田间采集的西花蓟马和烟粉虱若虫对3种瓢虫进行不同益害比的饲喂试验,试验过程中记录各处理西花蓟马虫口密度、烟粉虱若虫有咬痕个数及羽化的成虫比例。结果表明,西花蓟马饲喂处理3 d后,3种瓢虫成虫和幼虫对西花蓟马的控制能力由强到弱为:多异瓢虫成虫>七星瓢虫3龄幼虫>七星瓢虫成虫>十斑大瓢虫3龄幼虫>多异瓢虫3龄幼虫>十斑大瓢虫成虫,其中多异瓢虫成虫对西花蓟马的防治效果最高,达到48.35%。烟粉虱若虫饲喂处理3 d后,十斑大瓢虫幼虫处理组中烟粉虱低龄若虫有咬痕的个数占比为2.61%,显著高于对照组,其余处理间没有显著性差异;各处理组烟粉虱成虫羽化率之间没有显著性差异。研究表明,多异瓢虫成虫对西花蓟马的防治效果较高,十斑大瓢虫幼虫对烟粉虱低龄若虫具有一定取食趋性,但3种瓢虫对烟粉虱高龄若虫均没有取食趋性。

淡色斧瓢虫(Axinoscymnus cardilobus)对烟粉虱(Bemisia tabaci)种群的控制作用

研究了大田笼罩条件下释放淡色斧瓢虫（Axinoscymnus cardilobus）对变叶木上烟粉虱种群的控制作用。每株释放1对淡色斧瓢虫对不同密度烟粉虱种群的控制效果差异显著。瓢虫和烟粉虱以1∶20比例释放对烟粉虱的防治效果较差,以1∶80比例释放对烟粉虱的防治效果不稳定、总体上看对烟粉虱的种群几乎没有控制效果;而以1∶40的比例释放的防治效果较好、较稳定,防效为35%～95%。释放不同数量的淡色斧瓢虫对同一密度烟粉虱种群的防治效果也差异显著。7周内在1∶40、3∶40、5∶40处理区,瓢虫对烟粉虱种群的防治效果分别为35%～95%、46%～90%和50%～98%。从经济学和生态学的角度综合考虑,瓢虫和烟粉虱以3∶40比例释放比较适宜。

烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)诊断试剂盒的制备及应用

本研究通过筛选致病力强的烟草野火病菌株作为抗原 ,制备了烟草野火病菌特异性的抗血清 ,研制出SPA ELISA、间接 ELISA 2种诊断试剂盒 ,使检测真正作到了简便、快速、灵敏、准确。同时 ,应用这 2种诊断试剂盒对从田间及温室中采集的土壤、烟株根围、田间杂草、种子进行检测 ,明确了云南烟草野火病的初侵染源主要为种子和根围。

蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii次生代谢产物对烟粉虱Bemisia tabaci的忌避作用模型

蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii(Z imm.)viegas V l6063菌株在2种不同培养基发酵培养后,经萃取、干燥浓缩得到4种不同的毒素粗提物(次生代谢产物),用均匀设计法设计实验方案研究了4种不同毒素粗提物对4种不同寄主植物上烟粉虱Bem isia tabaci(Gennad ius)成虫的忌避作用,并构建了模型,分析结果表明,忌避作用与毒素粗提物浓度显著相关,忌避率随毒素粗提物浓度增大而增大,1 g/L浓度的毒素粗提物忌避率与烟粉虱的寄主植物相关不显著,毒素的忌避作用与培养基相关不显著,从菌株发酵的菌丝体和发酵液中提取的毒素粗提物的忌避率差异不显著。