丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠磷酸化p38MAPK和MMP-9表达及细胞凋亡的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone,TanⅡA)对缺血再灌注(IR)损伤大鼠细胞凋亡和血脑屏障通透性的影响及与p38MAPK通路的关系。方法 60只大鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、TanⅡA低剂量治疗组、TanⅡA高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。TanⅡA高、低剂量组于术前连续灌胃给予高、低剂量TanⅡA 3d,每日1次。各组于脑缺血120min再灌注24h,采用免疫组化法观察大鼠额顶部皮质磷酸化p38MAPK和MMP-9表达;TUNEL法检测神经细胞凋亡,检测伊文斯蓝(EB)含量变化。结果(1)与Sham组相比,IR组磷酸化p38MAPK和MMP-9明显升高(P<0.05);与IR组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组磷酸化p38MAPK和MMP-9表达均降低,且高TanⅡA组明显低于低TanⅡA组(P均<0.05);(2)与Sham组相比,IR组凋亡细胞明显增加;与IR组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组凋亡细胞均减少,且高TanⅡA组明显低于低TanⅡA组(P均<0.05)。(3)与Sham组比较,IR组脑组织EB含量明显升高;与IR组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组脑组织EB含量明显降低(P<0.05),且高TanⅡA组明显低于低TanⅡA组(P均<0.05)。结论 TanⅡA减少脑缺血再灌注后细胞凋亡,抑制MMP-9表达降低血脑屏障通透性,可能与抑制p38MAPK信号通路有关。

RP-HPLC法测定复方丹参片中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA

建立了反相高效液相色谱法测定复方丹参片（丹参、三七、冰片）中的隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA。采用Diamonsil^TM C18（250×4．6mm，5μm）色谱柱，以V（甲醇）：V（水）=75：25为流动相，流速为0．8mL／min，检测波长270nm。隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA分别在1．456～10．19μg／mL、2．160～15．12μg／mL和3．152～22．06μg／mL的范围内呈良好线性关系，平均回收率分别为99．21％（RSD=0．63％）、100．3％（RSD=1．0％）、99．87％（RSD=0．63％）。可用于复方丹参片的质量控制。

超临界CO_2萃取眩晕定方中5味药材的工艺研究

目的优选超临界CO2萃取眩晕定方中5味药材的工艺条件。方法以萃取率、丹参酮ⅡA、阿魏酸、丹皮酚含量为评价指标,高效液相色谱法定量,采用正交设计试验法,探讨超临界CO2萃取眩晕定方中5味药材的萃取温度(A)、萃取压力(B)、夹带剂(C)、萃取时间(D)等最佳工艺参数。结果超临界最佳提取工艺条件为萃取温度40℃、萃取压力25 MPa、夹带剂95%乙醇、萃取时间1.5 h。结论该提取工艺有效成分损失少,生产周期短,工艺稳定可行,适合于药厂加工生产。

HPLC-VWD法同时测定丹参及三七混合物中8种有效成分的含量

目的 建立HPLC—VWD法同时测定丹参、三七混合物中8种有效成分的含量。方法采用Eclipse XDB—C18（150mm×4．6mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈-0．1％磷酸水梯度洗脱；流速：1．0mL·min^-1；柱温：15℃；采用切换波长的方法：在203nm下检测三七皂苷R1、人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rbl；在286nm下检测丹酚酸B；在270nm下检测隐丹参酮、丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、丹酚酸B、人参皂苷Rbx、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA在相应的浓度范围内与峰面积呈现良好的线性关系，相关系数均大于0．9995；平均回收率97，56％～103．0％，RSD均小于3．0％。结论该方法采用波长切换法同时测定不同吸收波长的化合物，方法简便、重复性好。