目的:用纳升电喷雾串联质谱(nanoESI-MS/MS)鉴定吗啡依赖相关蛋白。方法:采用吗啡递增给药法建立吗啡依赖模型,用纳洛酮催促后出现典型的戒断症状,以盐水组为对照,对长期接受吗啡处理和纳洛酮催促戒断这2种状态的大鼠纹状体进行了比较...目的:用纳升电喷雾串联质谱(nanoESI-MS/MS)鉴定吗啡依赖相关蛋白。方法:采用吗啡递增给药法建立吗啡依赖模型,用纳洛酮催促后出现典型的戒断症状,以盐水组为对照,对长期接受吗啡处理和纳洛酮催促戒断这2种状态的大鼠纹状体进行了比较蛋白质组研究,确定了33个差异点。其中差异点150和209用电喷雾串联质谱进行了氨基酸序列分析。结果:电喷雾串联质谱分析表明差异点150和209为2个重要的吗啡依赖蛋白质:G 蛋白β1亚基和电压依赖型阴离子通道蛋白1(VDAC-1),并且这2个蛋白质都发生了 N 端乙酰化修饰。结论:纳升电喷雾串联质谱分析是研究蛋白质 N 端乙酰化的好方法。N 端乙酰化对蛋白质生物学功能有重要作用。这2个蛋白质 N 端乙酰化的生物学功能及其与吗啡依赖的关系值得深入研究。展开更多
Tandem-pore-domain potassium channels are a diverse and highly regulated superfamily of channels that are thought to provide baseline regulation of membrane excitability. Of these, TREK are highly expressed in human C...Tandem-pore-domain potassium channels are a diverse and highly regulated superfamily of channels that are thought to provide baseline regulation of membrane excitability. Of these, TREK are highly expressed in human CNS. TREK can be regulated by both physical and chemical factors. Lately, study on knockout animals suggested that TREK-1 might participate in the process of general anesthesia of some anesthetics.展开更多
目的建立非渗透性客体(载玻片)和渗透性客体(滤纸)上血迹斑痕中3种钙离子通道阻滞剂类抗高血压药物的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。方法采用空白外周静脉血加标后在非渗透性客体(载玻片)上制备成血斑,采用棉签提取法提...目的建立非渗透性客体(载玻片)和渗透性客体(滤纸)上血迹斑痕中3种钙离子通道阻滞剂类抗高血压药物的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。方法采用空白外周静脉血加标后在非渗透性客体(载玻片)上制备成血斑,采用棉签提取法提取;空白外周静脉血和空白经血加标后分别在渗透性客体(滤纸)上制成血斑,采用剪取法收集。样品经甲醇沉淀蛋白法提取后,采用UPLC-MS/MS进行检测。在ACQUITY UPLC?HSS T3 (2.1mm×50mm,1.8μm)反相柱上分离,梯度洗脱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,质谱采集为电喷雾正离子多反应检测模式(MRM)。结果三种目标物在5～1000μg/L范围内具有良好的线性关系,决定系数(R2)大于0.9915,检出限在0.1～0.2μg/L之间,添加浓度水平为10、100、500μg/L时,取25μL加标血液制成血斑,方法回收率为68.5%～90.7%,相对标准偏差在2.0%～15.0%之间。结论本方法可用于多种客体上血斑中3种钙离子通道阻滞剂类抗高血压药物的法庭与临床毒物分析,为刑事案件中刻画血斑供体信息提供理论基础。展开更多
文摘目的:用纳升电喷雾串联质谱(nanoESI-MS/MS)鉴定吗啡依赖相关蛋白。方法:采用吗啡递增给药法建立吗啡依赖模型,用纳洛酮催促后出现典型的戒断症状,以盐水组为对照,对长期接受吗啡处理和纳洛酮催促戒断这2种状态的大鼠纹状体进行了比较蛋白质组研究,确定了33个差异点。其中差异点150和209用电喷雾串联质谱进行了氨基酸序列分析。结果:电喷雾串联质谱分析表明差异点150和209为2个重要的吗啡依赖蛋白质:G 蛋白β1亚基和电压依赖型阴离子通道蛋白1(VDAC-1),并且这2个蛋白质都发生了 N 端乙酰化修饰。结论:纳升电喷雾串联质谱分析是研究蛋白质 N 端乙酰化的好方法。N 端乙酰化对蛋白质生物学功能有重要作用。这2个蛋白质 N 端乙酰化的生物学功能及其与吗啡依赖的关系值得深入研究。
文摘Tandem-pore-domain potassium channels are a diverse and highly regulated superfamily of channels that are thought to provide baseline regulation of membrane excitability. Of these, TREK are highly expressed in human CNS. TREK can be regulated by both physical and chemical factors. Lately, study on knockout animals suggested that TREK-1 might participate in the process of general anesthesia of some anesthetics.
文摘目的建立非渗透性客体(载玻片)和渗透性客体(滤纸)上血迹斑痕中3种钙离子通道阻滞剂类抗高血压药物的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。方法采用空白外周静脉血加标后在非渗透性客体(载玻片)上制备成血斑,采用棉签提取法提取;空白外周静脉血和空白经血加标后分别在渗透性客体(滤纸)上制成血斑,采用剪取法收集。样品经甲醇沉淀蛋白法提取后,采用UPLC-MS/MS进行检测。在ACQUITY UPLC?HSS T3 (2.1mm×50mm,1.8μm)反相柱上分离,梯度洗脱,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,质谱采集为电喷雾正离子多反应检测模式(MRM)。结果三种目标物在5～1000μg/L范围内具有良好的线性关系,决定系数(R2)大于0.9915,检出限在0.1～0.2μg/L之间,添加浓度水平为10、100、500μg/L时,取25μL加标血液制成血斑,方法回收率为68.5%～90.7%,相对标准偏差在2.0%～15.0%之间。结论本方法可用于多种客体上血斑中3种钙离子通道阻滞剂类抗高血压药物的法庭与临床毒物分析,为刑事案件中刻画血斑供体信息提供理论基础。
