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副猪嗜血杆菌tbpA基因PCR-RFLP分型
被引量:
6
1
作者
李军星
姜平
+4 位作者
王艳
李玉峰
陈闻
王先玮
李鹏
《中国动物传染病学报》
CAS
2009年第1期45-50,共6页
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)是目前影响世界养猪业的重要病原之一。本试验利用针对HPs转铁蛋白基因tbpA的PCR-RFLP分型方法,对2003~2008年分离自江苏、上海、广西、浙江、江西和安徽等6省市的57个HPs分离株及15个参考菌株...
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)是目前影响世界养猪业的重要病原之一。本试验利用针对HPs转铁蛋白基因tbpA的PCR-RFLP分型方法,对2003~2008年分离自江苏、上海、广西、浙江、江西和安徽等6省市的57个HPs分离株及15个参考菌株进行PCR-RFLP分析。结果显示,15个血清型参考菌株分为9种基因型,57个HPs流行分离株分为15种基因型,其中在我国最为流行的基因型分别为DBN(38%),ABN(18%)与DBP(12%)。本研究表明副猪嗜血杆菌在我国猪群中普遍存在,并至少有15个RFLP基因亚型,从而为我国HPs病的防治提供了重要理论依据。
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关键词
副猪嗜血杆菌
tbpa基因
PCR-RFLP
基因
型
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职称材料
陕西省副猪嗜血杆菌的分离及其基于tbpA基因的分型鉴定
被引量:
3
2
作者
刘辉
陈胜利
+5 位作者
杨增岐
刘海金
张淑霞
杜恩岐
王兴龙
党如意
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011年第11期19-24,共6页
【目的】检测副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)在陕西关中地区的感染状况,并对分离菌株进行基因型分析,为该地区副猪嗜血杆菌病的流行病学研究提供依据。【方法】从陕西关中地区14个发生多发性关节炎和浆膜炎的猪场采集30份病料...
【目的】检测副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)在陕西关中地区的感染状况,并对分离菌株进行基因型分析,为该地区副猪嗜血杆菌病的流行病学研究提供依据。【方法】从陕西关中地区14个发生多发性关节炎和浆膜炎的猪场采集30份病料,分离细菌,通过其培养特性和形态观察及生化试验和PCR等方法对分离株进行鉴定,并用Blast软件对分离株的16SrRNA序列进行同源性比对,同时对分离菌株进行了几种常见药物的敏感性检测。通过3种限制性内切酶TaqⅠ、AvaⅠ、AfaⅠ,对已被鉴定为副猪嗜血杆菌菌株的转铁结合蛋白A编码基因(tb-pA)进行PCR-RFLP基因分型。【结果】分离得到了5株疑似副猪嗜血杆菌菌株,经培养特性和形态观察、生化试验、PCR鉴定及序列同源性比对,将其鉴定为副猪嗜血杆菌。PCR-RFLP分型结果表明,从5株副猪嗜血杆菌分离株中共得到了4种基因型,分别为EBC、BBJ、EBJ、EAD。药物敏感性检测结果表明,分离菌株的耐药性均较强,且不同分离株对同一药物敏感性不同。【结论】副猪嗜血杆菌病在陕西关中地区猪群中流行比较严重,其基因型较多且与其他地域的菌株有一定差异。
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关键词
副猪嗜血杆菌
分离鉴定
tbpa基因
PCR-RFLP分型
陕西省
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职称材料
副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析
被引量:
8
3
作者
李建军
胡明明
+4 位作者
朱晓凯
李艳玲
张艳禾
谢芳
王春来
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期238-240,共3页
为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和...
为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约106 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清抗体效价在1∶3 200以上,表明TbpA具有良好的免疫原性。
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关键词
副猪嗜血杆菌
tbpa基因
原核表达
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职称材料
题名
副猪嗜血杆菌tbpA基因PCR-RFLP分型
被引量:
6
1
作者
李军星
姜平
王艳
李玉峰
陈闻
王先玮
李鹏
机构
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
2009年第1期45-50,共6页
基金
浙江省重点科研农业项目(2007C22045)
国家科技支撑计划子项目(2007BAD86B02-3)
文摘
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPs)是目前影响世界养猪业的重要病原之一。本试验利用针对HPs转铁蛋白基因tbpA的PCR-RFLP分型方法,对2003~2008年分离自江苏、上海、广西、浙江、江西和安徽等6省市的57个HPs分离株及15个参考菌株进行PCR-RFLP分析。结果显示,15个血清型参考菌株分为9种基因型,57个HPs流行分离株分为15种基因型,其中在我国最为流行的基因型分别为DBN(38%),ABN(18%)与DBP(12%)。本研究表明副猪嗜血杆菌在我国猪群中普遍存在,并至少有15个RFLP基因亚型,从而为我国HPs病的防治提供了重要理论依据。
关键词
副猪嗜血杆菌
tbpa基因
PCR-RFLP
基因
型
Keywords
Haemophilus parasuis,
tbpa
gene, PCR-RFLP, genotype
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
Q754 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
陕西省副猪嗜血杆菌的分离及其基于tbpA基因的分型鉴定
被引量:
3
2
作者
刘辉
陈胜利
杨增岐
刘海金
张淑霞
杜恩岐
王兴龙
党如意
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011年第11期19-24,共6页
基金
陕西省农业科技创新项目"规模化养猪业爆发新病副猪嗜血杆菌病弱毒疫苗的研究"(2011NXC01-10)
文摘
【目的】检测副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)在陕西关中地区的感染状况,并对分离菌株进行基因型分析,为该地区副猪嗜血杆菌病的流行病学研究提供依据。【方法】从陕西关中地区14个发生多发性关节炎和浆膜炎的猪场采集30份病料,分离细菌,通过其培养特性和形态观察及生化试验和PCR等方法对分离株进行鉴定,并用Blast软件对分离株的16SrRNA序列进行同源性比对,同时对分离菌株进行了几种常见药物的敏感性检测。通过3种限制性内切酶TaqⅠ、AvaⅠ、AfaⅠ,对已被鉴定为副猪嗜血杆菌菌株的转铁结合蛋白A编码基因(tb-pA)进行PCR-RFLP基因分型。【结果】分离得到了5株疑似副猪嗜血杆菌菌株,经培养特性和形态观察、生化试验、PCR鉴定及序列同源性比对,将其鉴定为副猪嗜血杆菌。PCR-RFLP分型结果表明,从5株副猪嗜血杆菌分离株中共得到了4种基因型,分别为EBC、BBJ、EBJ、EAD。药物敏感性检测结果表明,分离菌株的耐药性均较强,且不同分离株对同一药物敏感性不同。【结论】副猪嗜血杆菌病在陕西关中地区猪群中流行比较严重,其基因型较多且与其他地域的菌株有一定差异。
关键词
副猪嗜血杆菌
分离鉴定
tbpa基因
PCR-RFLP分型
陕西省
Keywords
Haemophilus parasuis
isolation and identification
tbpa
gene
PCR-RFLP genotype
Shaanxi Provice
分类号
S855.12 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析
被引量:
8
3
作者
李建军
胡明明
朱晓凯
李艳玲
张艳禾
谢芳
王春来
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/细菌病研究室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期238-240,共3页
基金
兽医生物技术国家重点实验室自主研究课题副猪嗜血杆菌灭活苗的研制(SKLVBP201015)
文摘
为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约106 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清抗体效价在1∶3 200以上,表明TbpA具有良好的免疫原性。
关键词
副猪嗜血杆菌
tbpa基因
原核表达
Keywords
Haemophilus parasuis
tbpa
gene
prokaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
副猪嗜血杆菌tbpA基因PCR-RFLP分型
李军星
姜平
王艳
李玉峰
陈闻
王先玮
李鹏
《中国动物传染病学报》
CAS
2009
6
下载PDF
职称材料
2
陕西省副猪嗜血杆菌的分离及其基于tbpA基因的分型鉴定
刘辉
陈胜利
杨增岐
刘海金
张淑霞
杜恩岐
王兴龙
党如意
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2011
3
下载PDF
职称材料
3
副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析
李建军
胡明明
朱晓凯
李艳玲
张艳禾
谢芳
王春来
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
8
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
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